全 文 :Μετηοδ : × «¨ ¤±·¬¥¤¦·¨µ¬¤¯ ·¨¶·¶ιν ϖιτρο ¤±§ ιν ϖιϖο º µ¨¨ ³¨µ©²µ° §¨¥¼ ¤ª¤µ§¬¯∏·¬²± ° ·¨«²§¤±§¯¨·«¤¯ ³µ²·¨¦·¬²± ²©¤±¬°¤¯ µ¨¶³¨ ¦2
·¬√¨¯¼ q Ρεσυλτ : ∏¤±ª´¬±2פ±ª¤±§¬·¶° ·¨¤¥²¯¬·¨¶«¤§¤±·¬¥¤¦·¨µ¬¤¯ ¤¦·¬²± ²± ¥¤¦·¨µ¬¤ ιν ϖιτρο o«²º √¨ µ¨·«¨ ¤±·¬¥¤¦·¨µ¬¤¯ ¤¦·¬√¬·¼ ²©
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©µ²° §¨¤·«o¥∏·∏¤±ª´¬±2פ±ª «¤§±² ¯¨·«¤¯ ³µ²·¨¦·¬²± ¤¦·¬²±q Χονχλυσιον : × «¨ ¤±·¬¥¤¦·¨µ¬¤¯ ©¨©¨ ¦·¶²© ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶²© ∏¤±ª´¬±2
פ±ª ιν ϖιτρο ¤±§ ιν ϖιϖο ¤µ¨ ¶·µ²±ª¨µ·«¤±·«¤·²© ∏¤±ª´¬±2פ±ª o º«¬¦«¶«²º¶·«¤·¬±·¨¶·¬±¤¯ ©¯²µ¤³¯¤¼ ¤√ µ¨¼¬°³²µ·¤±·µ²¯¨¬±
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[ Κεψ ωορδσ] ∏¤±ª´¬±2פ±ª~ ° ·¨¤¥²¯¬·¨¶~¬±·¨¶·¬±¤¯ ©¯²µ¤~¤±·¬¥¤¦·¨µ¬¤¯ ¤¦·¬√¬·¼
≈责任编辑 方文贤
大黄多糖对 ×
≥ 诱导大鼠结肠炎的治疗作用
刘 莉 o梅其炳 o周四元 o韩凤华 o龙 铟 o刘家云 o
李 晨 o孟静茹 o王志鹏
k第四军医大学 药理教研室 o陕西 西安 ztssvul
≈摘要 目的 }探讨大黄多糖k× °l对 u ow oy2三硝基苯磺酸k×
≥l诱导大鼠结肠炎的治疗作用 ∀方法 }采
用大黄多糖组分k× °2tl治疗 ×
≥ 诱导的大鼠结肠炎 o以地塞米松k⁄÷l为阳性药 ∀每天 t 次 o共 x §o给药结束
后 o尾静脉采血行白细胞计数并分类 o在乙醚麻醉下腹主动脉采血 o并处死动物取结肠 o画取结肠的溃疡面积 o结肠
称重 o分离肠黏膜以测定 ≥⁄o ° 活性 ~胸腺 !脾脏称重 ∀结果 }× °2t 能明显降低结肠炎大鼠的死亡率 o减轻
结肠重量 o缩小溃疡面积 o对抗脾脏肿大和胸腺萎缩 ~降低 ° 活性 o升高 ≥⁄水平 o与 ⁄÷ 相比 o其疗效无显著差
异 o也没有 ⁄÷ 的免疫抑制副作用 ∀结论 }× °2t 对 ×
≥ 诱导的大鼠结肠炎呈现出良好的治疗效果 o其机制可能
与抗炎和免疫调节有关 ~× ° 可能是大黄治疗溃疡性结肠炎的有效成分之一 ∀
≈关键词 u ow oy 三硝基苯磺酸 ~结肠炎 ~唐古特大黄多糖 ~地塞米松
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlsv2suwy2sw
溃疡性结肠炎k≤l是一组与免疫系统有关的
自身免疫性疾病 o由于其发病机制未阐明 o目前尚无
特异性的治疗方法 ∀临床常用糖皮质激素和 x2氨基
水杨酸类药物治疗溃疡性结肠炎 o但因其副作用较
多 o限制了长期使用 ∀据报道 o中医中药治疗 ≤ 具
有较好的疗效 o以中药大黄为主药的复方治疗 ≤
有效率可达 |w q{ h ≈t ∀大黄多糖是中药大黄的水
溶性主要成分之一 o本实验室研究发现 o大黄多糖具
有对抗化学性肝损伤以及抗氧化损伤的作用≈u ov o
是否也具有 ≤ 治疗作用 o尚未见报道 ∀本实验将
× °2t 用于 ×
≥ 诱导的大鼠实验性结肠炎的治
≈收稿日期 ussu2su2uz
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目k批准号 vstssvu|l
≈通讯作者 刘 莉 ר¯ }ksu|lvvzwxxx ƒ¤¬}ksu|lvvzwxxu
∞2°¤¬¯}° ¬¨¬¤¬¤ tyv q±¨ ·
疗 o以期探讨大黄治疗 ≤ 的有效成分和作用机理 ∀
1 材料和方法
1 q1 药品和动物 二级 ≥⁄雄性大鼠 o体重 uus ∗
uxs ªo由本校实验动物中心提供 ∀× °2t 由本实验
室自行提取 o经硫酸2苯酚法测得糖含量为 |z qw h o
硫酸2咔唑法测糖醛酸含量为 uz qx h o分子量范围为
y ≅ tsx ∗ { ≅ tsx ~⁄÷ 购于天津药业公司 ~ ×
≥ 购
于 ≥¬ª°¤~十六烷基三甲基溴化胺 !邻联二茴香胺购
于 ƒ ∏¯®¤~≥⁄试剂盒购于南京建成 ∀
1 q2 模型复制及动物分组 大鼠 zu只 o随机分为 y
组 o每组 tu 只 o即正常对照组 o模型组 o× °2t tss o
uss owss °ª#®ªp t和 ⁄÷ 组 ∀大鼠禁食 uw «o乙醚
麻醉 o除生理盐水组外 o用 ×
≥和 ws h 乙醇灌肠 o
复制实验性结肠炎模型≈w o造模 y «后 o分别给予生
理盐水 o× °2t 和 ⁄÷ ∀给药第 x 天 o尾静脉取血行
#ywu#
第 u{卷第 v期
ussv年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qv
¤µqoussv
白细胞计数并分类 ~第 y 天 o在乙醚麻醉下打开腹
腔 o腹主动脉取血并处死动物 o从肛门向上截取 {
¦° 结肠 o在冰浴中沿肠系膜缘剪开肠腔 o漂洗内容
物 o用透明薄膜画出溃疡面积 o结肠称重后刮取结肠
黏膜 o液氮速冻后转入 p {s ε 保存 o留待测髓过氧
化物酶k °l和超氧化物歧化酶k≥⁄l活性 ∀同时
取脾脏 !胸腺称重 ∀
1 q3 ≥⁄和 ° 酶活性的测定 全血低温离心 o
分离血清测定 ≥⁄活性 ~取结肠黏膜 tss °ª在
°
≥ 中采用高速分散器匀浆 ott sss µ# °¬±p t离心
ts °¬±o取上清液kxs Λl用专用试剂盒测定 ≥⁄
活性 ∀ ° 活性的测定 o将结肠黏膜 xs °ª在
×
缓冲液中匀浆 ott sss µ#°¬±p t离心 tx °¬±o
取 tss Λ上清液应用 µ²º¬¶½ 法测定 ° 活
性≈x ∀
2 结果
2 q1 × °2t 对 ×
≥r乙醇诱导的大鼠结肠炎的治
疗作用 用 ×
≥ 复制大鼠结肠炎模型 o可引起大
鼠腹泻且有死亡发生 ~肉眼可见肠壁出现大片坏死
并形成大的溃疡 o残存的肠黏膜充血 o水肿 o肠壁增
厚 ~病理可见黏膜及黏膜下大量淋巴细胞浸润 ∀
× °2t uss owss °ª#®ªp t能降低结肠炎大鼠稀便发
生率和死亡率 ~对于存活大鼠可减轻炎症反应 o减轻
结肠重量 o缩小溃疡面积k表 t o图 t o图 ul ∀
表 t × °2t对 ×
≥r乙醇诱导的结肠炎大鼠的治疗作用k ξ ? σ, ν tul
药物r°ª#®ªp t 腹泻率r h 死亡率r h 结肠重量rª 结肠指数r°ª#ªp t 溃疡面积r°°u 溃疡比r h
模型组 xrts urts t q{t ? s qux y qx{ ? t qx{ v|{ qzx ? zy q{u vx qzt ? tv qwy
× ° ktssl xrts srts t qwv ? s qwxtl x q{z ? t qzttl vzz qsv ? vx qvu vu qzu ? tz qux
× ° kussl wrts srts t quu ? s qv|uul x quu ? t qwytl vvz qyv ? {z qzs ty qs{ ? tu qsxul
× ° kwssl urts srts t quw ? s quwul w q|{ ? t q{utl t|| q{s ? z| quuul u| qyu ? z qt|
⁄÷ ks qusl xrts srts t quz ? s qxvul x qwz ? s qx|tl ux{ qzx ? zw qwwul uy qtx ? x q|{tl
注 }溃疡百分比为溃疡面积比 {¦° 结肠总面积 与模型组相比 tl Π s .sx u) Π s qst
k正常对照组l
k模型组l
≤k× °2tl
图 t 大鼠结肠照片
q正常大鼠的结肠照片
q用 ×
≥rws h 乙醇造模的结肠炎大鼠照片
≤ q× °2t对结肠炎大鼠的治疗作用
2 q2 × °2t 对 ×
≥r乙醇诱导的结肠炎大鼠生化
指标的影响 表 u 可见 o×
≥ 诱导的结肠炎大鼠 o
外周血 ≥⁄水平 !结肠黏膜 ≥⁄o ° 活性均较正
常对照组有所升高 ∀经 × °2t 治疗后 ouss owss °ª
#®ªp t可明显升高血清 !结肠组织 ≥⁄活性 o同时能
有效地对抗结肠组织 ° 活性升高 ∀ ⁄÷ 对血清
≥⁄活性无明显影响 o对结肠组织 ° 与 ≥⁄活
性与 × °2t 大 !中剂量组作用相似 k表 ul ∀
表 u 大黄多糖对结肠炎大鼠 ≥⁄和 ° 酶活性的影响
k ξ ? σ, ν tul
药物
r°ª#®ªp t
血清 ≥⁄
r±#°p t
结肠组织 ≥⁄
r±#°ªp t
结肠组织 °
r#°ªp t
正常组 wy ? y qz ws q| ? z qz s qs|v ? s qsu
模型组 tsy ? tz qvvl w{ qz ? { qvvl | qzu ? v quvvl
× ° ktssl ttt ? us qw w| qw ? | qw z qtz ? u qty
× ° kussl tuv ? z qytl y| qt ? ty qtul u q|t ? t q|tul
× ° kwssl txx ? tu qvul zt qv ? tv qtul w qys ? t quwul
⁄÷ ks qusl ttv ? tu q| zu qx ? tv qwul w q{u ? t qsuul
注 }与模型组相比 tl Π s .sx u) Π s .st 与正常对照组相
比 v) Π s qst
2 q3 × °2t 对 ×
≥诱导的结肠炎大鼠胸腺和脾
脏重量的影响 ×
≥r乙醇诱导的实验性结肠炎大
鼠胸腺萎缩 o脾脏肿大 ∀用不同剂量 × °2t 治疗
uss owss °ª#®ªp t可部分地对抗胸腺萎缩 o抑制脾脏
增大 o但无统计学意义 ∀ ⁄÷ 组大鼠胸腺与脾脏重量
#zwu#
第 u{卷第 v期
ussv年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qv
¤µqoussv
与模型组相比较 o明显萎缩 o提示 ⁄÷ 具有显著的免
疫抑制作用k表 vl ∀
⁄k正常对照组l
∞k模型组l
ƒk× °2tl
图 u 大鼠结肠病理切片
⁄q正常大鼠的结肠病理切片
∞q×
≥rws h 乙醇复制的结肠炎大鼠结肠病理切片
ƒ q用 × °2t 治疗后的结肠炎大鼠病理切片
2 q4 × °2t 对 ×
≥r乙醇诱导的结肠炎大鼠外周
血白细胞计数和分类的影响 结果可见 o模型组白细
胞计数明显增高 o以中性粒细胞升高为显著 ∀ × °2
t uss owss °ª#®ªp t可以抑制炎症引起的白细胞计
数升高 o使中性粒细胞数目下降 ~⁄÷ 组动物白细胞
计数明显减少 o直到正常值以下 o而由于淋巴细胞的
崩解 o中性粒细胞明显升高k表 v owl o表明 ⁄÷ 具有
明显的免疫抑制作用 ∀
表 v × °2t对 ×
≥r乙醇诱导的结肠炎大鼠胸腺和
脾脏重量的影响k ξ ? σ, ν tul
药物
r°ª#®ªp t
胸腺
rª
胸腺指数
r°ª#ªp t
脾脏
rª
脾脏指数
r°ª#ªp t
正常组 s qxt ? s qsw u qwt ? s qsv s qw| ? s qts u qvv ? s qwy
模型组 s quv ? s qszul s q|t ? s qvvul s q{u ? s qtwul v qt| ? s qwzul
× ° ktssl s quy ? s qts t qts ? s qww s qzs ? s qtw u q|| ? s qxy
× ° kussl s quz ? s qs{ t qtz ? s qxx s qzt ? s quy v qst ? s qwt
× ° kwssl s qu{ ? s qtv t qt| ? s qvx s qzw ? s qtu v qut ? s q|t
⁄÷ ks qusls qtw ? s qsxt ovls qzw ? s quwt ovls qxz ? s qtwt ovlv qsw ? s qyvtl
注 }与模型组相比 tl Π s qst 与正常对照组相比 ul Π
s qst 与 × ° 组相比 vl Π s qst
图 v × °2t对 ×
≥诱导的结肠炎大鼠外周血
白细胞计数的影响k ξ ? σ, ν tul
与模型组相比 tl Π s qsx ul Π s qst
与正常对照组相比 vl Π s qsx wl Π s qst
图 w × °2t对 ×
≥ 诱导的结肠炎大鼠
中性粒细胞数目的影响k ξ ? σ, ν tul
与模型组相比 tl Π s qsx ul Π s qst
与正常对照组相比 vl Π s qsx wl Π s qst
#{wu#
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3 讨论
≤ 是一种自身免疫性疾病 o主要特点是下消化
道的非特异性炎性反应 o近年来我国的发病率呈现
日益增高的趋势 ~由于其发病机制不清 o缺乏有效的
治疗方法 ∀西医治疗溃疡性结肠炎常用的药物为糖
皮质激素≈y o由于病人不能耐受的副作用 o限制了其
临床使用 ∀因此 o发掘新的结肠炎治疗药物具有十
分重要的意义 ∀
大黄作为传统医学中用于胃肠道疾病的良药 o
治疗 ≤ 取得较好的临床效果≈t o我们用水煮醇沉
的方法 o提取大黄水溶性成分大黄多糖 o用于 ≤ 的
治疗 ∀实验结果表明 o大黄多糖对 ×
≥r乙醇诱导
的 ≤ 疗效显著 o呈现出良好的量效2依赖关系 ∀提
示大黄多糖可能是大黄治疗 ≤ 的有效成分之一 ∀
大黄具有泻下攻积 !清热泻火 !活血化瘀之功效≈y ∀
实验表明 o许多清热解毒 !活血化瘀的中药能直接参
与体液免疫 !细胞免疫调节 o影响补体含量和免疫抑
制因子等 o从而改善 ≤ 的症状≈z ∀ × °2t 能部分
地对抗炎症引起的大鼠胸腺萎缩和脾脏肿大 o提示
其作用可能与其免疫调节作用有关 ∀这与 ⁄÷ 引起
大鼠的胸腺萎缩 o引起免疫抑制明显不同 ∀
由于 ×
≥ 诱导的 ≤ 动物模型 o与人类结肠
炎具有相似之处 o常常用于研究人类 ≤ 的机制和
结肠炎药物评价 ∀在本模型中 o ° 一般作为评价
炎症程度的指标 o其活性反映中性粒细胞的浸润≈{ ∀
× °2t 能明显降低结肠重量 o有效改善结肠的水肿
和充血 o抑制炎症引起的白细胞浸润 o从而降低
° 活性 o表明 × °2t 治疗 ≤ 可能与其抗炎作
用有关 ∀≥⁄的活力能间接反映机体清除氧自由基
的能力 o× °2t 使血清和结肠组织 ≥⁄水平升高 o
提示 × °2t 治疗溃疡性结肠炎可能还与其抗氧化
活性有关 ∀
≈参考文献
≈t 郭松河 o李怀军 q复方大黄胶囊治疗慢性溃疡性结肠炎 t|s例 q
陕西中医 ot||v otwktl otv q
≈u 刘 莉 o李宝莉 o梅其炳 o等 q唐古特大黄多糖对小鼠急性肝损
伤的保护作用 q第四军医大学学报 ot||| ouskyl }xw| q
≈v 刘 莉 o梅其炳 o周四元 o等 q唐古特大黄多糖抗氧化损伤的作
用 q第四军医大学学报 ousst ouukyl }xvs q
≈w «®¤º¤o²«¬¶«¬q¶¶¤¼ ©²µ¬³¬§° µ¨²¬¬§¤µ·¬²±¬± ±¬°¤¯ ׬¶¶∏¨
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≈y 冯顺友 q大黄防治胃肠功能衰竭 q中国中西医结合杂志 o
usss otskusl }z|x q
≈z 高亚菲 o朱昭明 q中药灌肠对溃疡性结肠炎免疫调节功能的影
响 q中国肛肠病杂志 ot||{ ot{kzl }| q
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¨ ¦® ° o µ¨µ¬§¨ ≥ o¨·¤¯ q¤³·¨± p¬±§∏¦¨§ ²§2
¨¯ ²© ≤«µ²±¬¦±©¯¤°°¤·¬²± ¤±§ ¦¯¨µ¤·¬²±¬±·«¨ ¤·≤²¯²± q¤¶2
·µ²¨ ±·¨µ²¯²ª¼ ot|{| o|y }z|x q
Εφφεχτσ οφ Τανγυτιχυµ Μαξιµ Πολψσαχχηαριδε ον
Υλχερατιϖε ΧολιτισΙνδυχεδ βψ ΤΝΒΣ ιν Ρατσ
¬o ∞ ±¬2¥¬±ªo ≥¬2¼∏¤± o ƒ ±¨ª2«∏¤o ≠¬± o ¬¤2¼∏± o ≤«¨ ± o ∞ ¬±ª2µ∏o • «¬2³¨ ±ª
k⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© °«¤µ°¤¦²¯²ª¼ ²©·«¨ ƒ²∏µ·« ¬¯¬·¤µ¼ §¨¬¦¤¯ ±¬√ µ¨¶¬·¼ o ÷¬. ¤± ztssvu o≥«¤±¬¬o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ √¨¤¯∏¤·¨·«¨ ©¨©¨ ¦·¶²© פ±ª∏·¬¦∏° ¤¬¬° ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ k× °2tl ²± ×
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Μετηοδ : ¤·¶º¬·« ×
≥r ·¨«¤±²¯2¬±§∏¦¨§¦²¯¬·¬¶º µ¨¨ ∏¶¨§¤±§·µ¨¤·¨§ º¬·« × °2t ¤±§§¨ ¬¤° ·¨«¤¶²±¨ k⁄÷l q≥ √¨ ±¨·¼2·º²µ¤·¶o
¬±¦¯∏§¬±ª¤±¬°¤¯¶º¬·« ×
≥2¬±§∏¦¨§¦²¯¬·¬¶o º µ¨¨ ·µ¨¤·¨§ º¬·«¶¤¯¬±¨ o× °2t ktss ouss owss °ª#®ªp tl¤±§ ⁄÷ q • «¬·¨ ¥¯²²§¦¨¯¯¶
º µ¨¨ ¦²∏±·¨§²±·«¨ ©¬©·«§¤¼ ¤±§·«¨ µ¤·¶º µ¨¨ ®¬¯¯ §¨¥¼ ·¨«¨µ²±·«¨ ¶¬¬·«§¤¼ q≥⁄ ¤¦·¬√¬·¼¬± ¶¨µ∏° o ° ¤±§≥⁄ ¤¦·¬√¬·¼ ²©
¦²¯²±¬¦·¬¶¶∏¨ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§qΡεσυλτ : × «¨ µ¨ °¤µ®¤¥¯¨ ©¨©¨ ¦·¶²© × °2t ¤·§²¶¤ª¨ ²©uss !wss °ª#®ªp t ²± ×
≥2¬±§∏¦¨§¦²¯¬·¬¶º µ¨¨
²¥¶¨µ√ §¨q × «¨ ∏¯¦¨µ¤·¬√¨¤µ¨¤ º¤¶§¬°¬±¬¶«¨ §¤±§ º ¬¨ª«·²©¦²¯²± º¤¶µ¨§∏¦¨§q • «¬·¨ ¥¯²²§¦¨¯¯ ³²³∏¯¤·¬²± º¤¶µ¨§∏¦¨§o≥⁄¤¦·¬√¬2
·¼¬± ¶¨µ∏° ¤±§≥⁄ ¤¦·¬√¬·¼ ²©¦²¯²± ·¬¶¶∏¨ º µ¨¨ µ¨ °¤µ®¤¥¯¼ ¬±¦µ¨¤¶¨§o¤±§o ° ¤¦·¬√¬·¼ ²©¦²¯²±¬¦·¬¶¶∏¨ º¤¶µ¨§∏¦¨§q Χονχλυ2
σιον : × °2t «¤¶¶¬ª±¬©¬¦¤±·¨ ©©¨ ¦·¶²± ×
≥2¬±§∏¦¨§¦²¯¬·¬¶¬±µ¤·¶º¬·« ²¯º µ¨¶¬§¨ ©¨©¨ ¦·¶oº«¬¦«¶∏ªª¨¶·¶·«¨ ©¨©¨ ¦·¬√¨¦²°³²±¨ ±·²©
µ«∏¥¤µ¥²± ¦²¯¬·¬¶³¨µ«¤³¶¬¶× ° q × «¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²©·«¨ ¤¦·¬²±¶²© × ° °¤¼ µ¨ ¤¯·¨ ·²¬·¶¤±·¬©¯¤°°¤·¬²± o¤±·¬²¬¬§¤·¬²± ¤±§¬°2
°∏±²¯²µ¨ª∏¯¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] u ow oy2·µ¬±¬·µ²¥¨ ±½¨ ± ¶∏¯©∏±¬¦¤¦¬§~¦²¯¬·¬¶~ פ±ª∏·¬¦∏° ¤¬¬° ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ k× °2tl ~§¨ ¬¤° ·¨«¤¶²±¨ k⁄÷l
≈责任编辑 方文贤
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