全 文 ：均与阴性对照无显著差异 ∀样品 ≠w 为生物
碱反应呈阴性的水液 o无抗癌作用的结果表明 o
草乌抗癌作用与其所含生物碱有关 ∀对草乌的
化学分析表明 o具抑瘤活性的供试样品 o
÷t o÷u o ≠v¤o其 ×≤ 图谱基本接近 o均与乌
头碱 !新乌头碱对照品有相同的清晰色斑 o且酯
型生物碱含量均在 u°ªr°¯ 以上 ~而无明显抑
瘤作用者 o色斑个数明显减少 ∀
在研究中还发现 o草乌抗肝癌有效部位在
水溶液中不稳定 o长期放置后 o其酯型生物碱含
量下降 o疗效亦随之降低 ∀从总体趋势看 o其抗
肝癌活性可能源于易水解的酯型生物碱 ∀
312 草乌抗癌有效部位与毒性和剂量间的关
系
从具有抗癌活性的样品 o÷t可知 o随剂
量增加kxs°ª药材r®ªψ tss°ª药材r®ªl o其
抑瘤率亦增加kxs1s h ψ x{1v h o÷uwx1{ h
ψzy1u h o但动物死亡数也随之增加ks ψ u o
÷tu ψvl ∀由此表明 o草乌的毒性成分可能即
是其抗癌活性成分 ∀
乌头碱对照品的抑瘤实验亦表明 o给药剂
量为 s1sx°ªr®ª时 o抑瘤率为 vs h ~当剂量增
至 s1t°ªr®ªo仅给药 v 次 o动物死亡率即达
vs h o停药 z 天后 o瘤重仍较对照组减少
u|1t h k Π s1sxl o再次说明 o草乌的毒性成分
可能即是其抗癌有效成分 ∀
综上所述 o草乌的抗癌活性可能源于其主
要毒性成分酯型生物碱 ∀此研究结果国外未见
有报道 o而国内有关通过热压处理使草乌酯型
生物碱水解以得到毒性降低且具抗肝癌作用的
样品的报道≈v ∗ x 尚待商榷 ∀以上研究结果亦
表明 o欲充分发挥草乌抗癌作用 o肝器官靶向给
药系统将是其抗癌制剂首选的给药系统 ∀在乌
头碱含量相当的情况下 o有效部位 ≠v¤抑瘤率
及毒性均高于其主要单体有效成分乌头碱 o且
收率仅 t h o适宜于靶向微球的制备 o故将中药
抗癌有效部位制成靶向微球 o具有一定的必要
性及实用性 ∀
4 参考文献
t 中国药典 1 一部 1t||x }utv
u 杨仓良等 1 毒剧中药古今用 1 北京 }中国医药科技出版
社 ot||v }tut
v 黄永融 1 福建中医药 ot||t ~uuktl }xw
w 孙学朴 1 新药与临床 ot|{z ~ykul }zz
x 汤铭新等 1 北京中医杂志 ot|{y ~kvl }uz
y 方起程等 1 药学学报 ot|{y ~tvk{l }xzz
z 顾学裘 1 药物制剂注解 1 北京 }人民卫生出版社 ot|z| }tv
{ 杨华元等 1 华西药学杂志 ot||s ~xkwl }uty
t||y ) tu ) ty收稿
高效液相色谱法测定加味逍遥丸中
栀子甙和芍药甙
狄留庆 郭戎 谢辉 范碧亭
k南京中医药大学 南京 utssu|l
摘要 采用高效液相色谱法 o选用 ≤t{柱和乙腈2s1t h磷酸ktvΒ{zl为流动相分离测定加味逍遥丸
中栀子甙和芍药甙 ∀方法简便 !快速 !准确 o测定组分具有良好的线性关系和分离度 o栀子甙的平均回收
率为 tst1{s h oΡΣ∆u1v{ h o芍药甙的平均回收率为 |{1zy h oΡΣ∆t1|y % ∀
关键词 栀子甙 芍药甙 °≤
#tzy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期
加味逍遥丸始载于5太平惠民和剂局方6 o
具有疏肝解郁 o调和肝脾功用 o临床疗效确切 o
适应范围广 o已收入5中国药典6t||x年版 o但
无定量方法 ∀本文采用高效液相色谱法 o一次
进样分离测定丸剂中栀子甙和芍药甙的含量 o
为质量控制提供了快速 !准确的测定方法 ∀
1 仪器及药品
tss型高效液相色谱仪 o
≠ ×xxs型石英亚
沸高纯提纯器k江苏金坛高教仪器厂l ∀
乙腈色谱纯 ~其他试剂均为分析纯 ∀
栀子甙kª¨ ±¬³²¶¬§¨ l o芍药甙k³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±l
对照品均购自中国药品生物制品检定所 ∀
加味逍遥丸江苏省淮海制药厂产 ∀
2 色谱条件及分离结果
211 色谱条件 ≤t{反相柱ktsΛ°lw1y°° ≅
txs°° o流动相乙腈2s1t h磷酸ktvΒ{zl o流速
t1s °¯ r°¬±oΚ¶ uvs±° o柱 温 vs ε o柱 压
y{ys®°¤o检测灵敏度 s1t ƒ≥ ∀
212 分离结果
见附图 ∀
附图 样品对照品分离图
1 样品分离图
1 对照品分离图
¤1 栀子甙 ¥1 芍药甙
3 含量测定
311 标准溶液制备
分别取干燥至恒重的栀子甙 !芍药甙各约
u°ªo精密称定 o同置 ts °¯ 容量瓶中 o加甲醇溶
解稀释至刻度 o使成含栀子甙 s1t|y°ªr°¯ o芍
药甙 s1t|v°ªr°¯ ∀
312 供试品溶液制备
取丸剂 yªo研细 o精密称取 s1uªo置 ts °¯
具塞试管中 o精密加入甲醇2水ktΒtlts °¯ o超声
振荡 t«o放冷 o离心 ts°¬±kvxssµr°¬±l o取上清
液以 s1wxΛ°滤膜滤过 o作供试液 ∀
313 线性关系考察
分别精密吸取上述标准溶液 s1t os1u o
s1w os1{ ot1y °¯ 置于 u °¯ 容量瓶中 o加甲醇至
刻度 o分别进样 tsΛ¯ o按上述色谱条件分离测
定 o以标准品的量kΛªl为横坐标 o栀子甙及芍药
甙的峰面积为纵坐标 o得回归方程 !相关系数及
线性范围分别为 }栀子甙 Ψ tu1sz| Ξ n
s1sut , ρ s1|||{ ,线性范围 s1ts ∗ t1xzΛª~芍
药甙 Ψ |1uxw Ξ p s1uuu , ρ s1|||| ,线性范
围 s1ts ∗ t1xwΛª∀
314 精密度试验
取标准溶液 s1w °¯ o加甲醇稀释至 u1s °¯ o
进样 tsΛ¯ o分离测定栀子甙 !芍药甙的峰面积
值 o重复进样测定 o结果栀子甙 ΡΣ∆ s1wx%
( ν x) ,芍药甙 ΡΣ∆ u1st%( ν x) ∀
315 稳定性试验
精密称取丸剂 s1uªo按供试液制备方法制
得供试液 o每 t«进样 tsΛ¯ o分离测定栀子甙及
芍药甙的峰面积 o结果z«内栀子甙 ΡΣ∆
u .xs%( ν {) ,芍药甙 ΡΣ∆ w .u{%( ν
{) ∀表明栀子甙 !芍药甙在 z«内测定结果稳
定 ∀
316 加样回收率试验
精密称取干燥至恒重的丸剂 k批号
|xtssvl粉末 s1sxªo准确加入标准溶液 s1x °¯
k含栀子甙 s1ty°ªo芍药甙 s1tz°ªl o按供试品
溶液的制备方法制备样品液 x °¯ o进样 tsΛ¯ o测
定 o外标法计算含量 o结果见表 t !表 u ∀
表 t 栀子甙加样回收率试验
样品号
样品含量
°ª
实测量
°ª
回收率
h
ξ
%
ΡΣ∆
h
t s1uv s1v| |{1u{
u s1uw s1ws tss1wv
v s1uu s1v| tsv1tv tst1{s u1v{
w s1uu s1v| tsu1{{
x s1uu s1v| tsw1u|
注 }加入栀子甙量均为 s1ty°ª
#uzy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期
表 u 芍药甙加样回收率试验
样品号
样品含量
°ª
实测量
°ª
回收率
h
ξ
%
ΡΣ∆
h
t s1ux s1wt |z1y{
u s1uy s1wu |y1tv
v s1uw s1wt tss1xw |{1zy t1|y
w s1uv s1ws tss1zt
x s1u| s1wx |{1zx
注 }加入芍药甙量均为 s1tz°ª
317 样品含量测定
取不同批号的丸剂 s1uªo精密称定 o按上
述供试液制备方法制备供试液 o同法制备栀子 !
白芍药材提取液 o分别进样 tsΛ¯ o分离测定 o外
标法计算含量 o结果见表 v ∀
4 小结与讨论
411 采用 °≤ 法 o一次进样分离测定加味
逍遥丸中栀子甙 !芍药甙的含量 o方法简便 !快
速 o结果可靠 ∀
412 经多种流动相选择 o比较 u组分的保留时
间及分离度 o认为乙腈2s1t h磷酸ktvΒ{zl及甲
醇2t1s h冰醋酸kvsΒzsl分离效果较好 ∀稳定
性试验表明 o乙腈2s1t h磷酸ktvΒ{zl更佳 ∀
表 v 加味逍遥丸及栀子 !白芍中栀子甙 !芍药甙含量测定
样品
栀子甙
ξ
°ªrª
ΡΣ∆
h
芍药甙
ξ
°ªrª
ΡΣ∆
h
栀子k姜炙l wx1xs t1u{
白芍 uz1xv v1tt
成药k|utssul t1|s u1s| v1xz w1vy
成药k|vs|syl u1wz u1{v w1ut u1{z
成药k|xtssvl w1wv u1xy w1|| v1uv
注 }ν y
413 样品提取条件考察时 o采用甲醇 !甲醇2水
ktΒtl及水 v种溶剂分别经不同的超声提取次
数及时间比较 u测定组分的含量 o结果表明最
佳的提取条件为 }甲醇2水ktΒtl超声提取 t«∀
414 不同批号加味逍遥丸样品测定结果表明 o
可能随着丸剂贮存时间延长 ou组分均出现不
同程度的含量下降 o其原因有待进一步探讨 ∀
t||z ) st ) tw收稿
高效液相色谱法测定乙肝宁片中花锚素的含量
高笑范 张起龙 k青海省药品检验所 西宁 {tssssl
邢玉珍 k青海省三普中药厂 西宁 {tssszl
乙肝宁片系采用青藏高原特有的龙胆科花
锚属植物椭圆叶花锚 Ηαλενια ελλιπλιχα ⁄q⁄²±
干燥全草的乙醇提取物制成 ∀具有清热利湿 !
平肝利胆的功能 ∀目前对乙肝宁片中花锚素含
量的测定采用比色法 ∀该法操作繁琐 o误差较
大 ∀本文采用高效液相色谱法测定其有效成分
花锚素的含量 o能更好地控制该制剂质量 o提高
检测的准确性与灵敏度 ∀
1 仪器及试剂
• ¤·¨µ¶高效液相色谱仪 ~美国光谱物理公
司 ≥°tss 型紫外2可见检测器 ~西德沙多利斯
uss2⁄电子天平 ∀花锚素对照品k青海三普中
药厂提供 o含量为 |x1s h l ~乙肝宁片k青海三
普中药厂l ∀试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 色谱条件
≤t{柱kw1y°° ≅ vss°° otsΛ°l ~流动相甲
醇2水k{sΒusl ~流速 t1s °¯ r°¬±~柱温室温 ~检
测波长 uwv±° ~量程 t1sss ƒ≥ ~记录纸速
s1x¦°r°¬±∀
212 标准曲线制备
精密称取干燥至恒重的花锚素对照品 o用
甲醇溶解成 s1s{°ªr°¯ 的标准溶液 o取 u ow oy o
{ otsΛ¯ 分别进样 v次 o取平均值 o以峰面积为纵
#vzy# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 tt期