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Determination of Quercetin in the Herba Euphorbiae Humifusae

高效液相色谱法测定地锦草中槲皮素的含量



全 文 :图 u 茯苓三萜酸 ∞≥Œk n l  ≥ ׌≤ 指纹图谱
k色谱条件见 2 q3 项l
≈参考文献 
≈t  国家中医药管理局5中华本草6编委会 q中华本草 q上册 q上海 }
上海科学技术出版社 ot||| qxxw q
≈u  仲兆金 o刘 浚 q茯苓有效成分三萜的研究进展 q中成药 ousst }
uvktl }x{ q
≈v  仲兆金 o许先栋 q茯苓三萜化学成分及其光谱特征研究进展 q中
国药物化学杂志 ot||z ozktl }zt q
≈w  王慕邹 o陈毓亨 o相乐和彦 o等 q常用中草药高效液相色谱分
析 q北京 }科学出版社 ot||| quwx q
≈x  פ¬× o „®¤«²µ¬„ q „±¤¯¼·¬¦¤¯ ≥·∏§¬¨¶²± Πορια χοχοσ k ´ l ׫¨
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Μετηοδ : • °2‹°≤ o¯¬±¨ ¤µªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯·¬²± ¤±§≤r  ≥ o ·¨¦qº µ¨¨ ∏¶¨§·²²³·¬°¬½¨ ·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ° ·¨«²§o¤±§¬§¨ ±2
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[ Κεψ ωορδσ] Πορια χοχοσ~·µ¬·¨µ³¨ ±¨ ¤¦¬§¶~ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·
≈责任编辑 李 禾 
高效液相色谱法测定地锦草中槲皮素的含量
邢俊波 o水彩虹 o刘 云
k总后勤部卫生部药品仪器检验所中药室 o北京 tsssztl
≈摘要  目的 }建立地锦草中槲皮素高效液相色谱测定方法 ∀方法 }色谱柱 Žµ²°¤¶¬¯2≤t{kw qy °° ≅ uxs °° ox
Λ°l o流动相为乙腈2s qw h磷酸kwsΒysl o检测波长 vzs ±° o流速 t qs °# °¬±p t ∀结果 }槲皮素在 s qsvyw ∗ s qtuzw
Λª线性关系良好kρ € s q||||l o回收率 tss qz h o• ≥⁄ u qx h ∀结论 }为地锦草及其制剂提供了分析方法 o该法简
便 o结果可靠 ∀
≈关键词  地锦草 ~槲皮素 ~含量测定 ~高效液相色谱法
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussults2szx{2sv
≈收稿日期  ussu2sw2sv
≈通讯作者  电话 }kstslyy|w|s{t ∞2°¤¬¯}­∏±¥²¬¬±ªƒ ¶²«∏q¦²°
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第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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地锦草为大戟科植物地锦草 Ευπηορβια ηυ µι2
φυσα Ωιλλδ的干燥全草 ,具有清热解毒 !凉血止血的
功效 ,常用于治疗痢疾 !肠炎 !咳血 !便血 !崩漏 !疮疥
痈肿等≈t ou  ∀药理研究证实槲皮素等黄酮类化合物
是地锦草抗菌 !止血 !抗氧化的主要有效成分≈v ow  ∀
文献报道采用紫外分光光度法测定其总黄酮的含
量≈w  ∀为了更有效地对其进行质量控制 o本文建立
了地锦草中槲皮素的高效液相色谱测定方法 ∀
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 }惠普 ‹°tsxs 四元液相色谱
仪 o二极管阵列检测器k⁄„⁄l o‹° „ qsy qst色谱工
作站 ∀
槲皮素对照品kss{t2|vsw o供含量测定用l购自
中国药品生物制品检定所 o经 ‹°≤ 检测 o纯度为
tss h ~地锦草药材由第二军医大学提供 o经本室鉴
定为 Ε . ηυ µιφυσα的干燥全草 ~乙腈为色谱纯 o水为
重蒸馏水 o其余试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 色谱柱 Žµ²°¤¶¬¯2≤t{kw qy °° ≅
uxs °° ox Λ°l o柱温 ws ε ~流动相乙腈2s qw h磷酸
kwsΒysl o流速 t qs °#°¬±p t o检测波长 vzs ±° ∀
2 q2 样品测定 取本品粉末约 t qx ªo精密称定 o置
xs °磨口平底烧瓶中 o精密加入 |x h乙醇 ux °o
称定重量 ∀水浴回流 v «o放冷 o再称定重量 o用 |x h
乙醇补足减失的重量 o滤过 o取续滤液 o待测 ∀
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 ts
ˏo注入高效液相色谱仪 o按上述色谱条件 o以外标
法计算含量 ∀色谱图见图 t ∀
图 t 对照品及样品的 ‹°≤
„ q对照品 …q样品 t q槲皮素
样品测定结果 ov批地锦草药材槲皮素含量分别
为 }s qs|t| os qs|ts os qs|uw °ª#ªp t ∀
3 方法学考察
3 q1 对照品溶液制备 精密称定槲皮素对照品适
量 o加甲醇溶解 o制成每毫升 s qs|t °ª的对照品贮
备液 ∀精密吸取 t °对照品溶液 o置 ts °容量
瓶中 o加甲醇定容至刻度 o即为对照品溶液 ∀
3 q2 线性范围 将对照品溶液分别进样 w oy o{ ots o
tu otw ˏo测定峰面积 o以峰面积积分值为纵坐标 o
槲皮素进样量为横坐标绘制标准曲线 o回归方程
为 }Ψ € wstw .tv Ξ p w .yu , ρ € s q|||| ∀槲皮素在
s qsvyw ∗ s qtuzw Λª具有良好的线性关系 o采用外
标法定量 ∀
3 q3 精密度实验 对照品溶液重复进样 y次 o槲皮
素峰面积的 • ≥⁄为 s q{ h ∀
3 q4 稳定性试验 将样品溶液在室温下贮存 o于 s o
s qx ou qs ow qs oz qs otu qs ouw qs «测定 o结果样品溶液
在 uw «内基本稳定 o• ≥⁄为 t qv h ∀
3 q5 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品
共 x份 o分别加入槲皮素对照品 o测定含量 o结果见
表 t ∀
表 t 槲皮素加样回收率试验结果
药材量

样品量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
• ≥⁄
r h
s qzxss s qsy{| s qtyts tst qu
s qzxus s qsy|t s qtytx tst qx
s qzxts s qsy|s s qtx{| |{ q{ tst qu w qv
s qzxss s qsy{| s qtyzv ts{ qt
s qzxws s qsy|v s qtxzu |y qy
注 }加入量均为 s qs|t °ª
3 q6 重复性试验 同一批样品分别称取 x份 o测定
含量 o• ≥⁄为 s qz h ∀
4 讨论
4 q1 色谱条件的确定 本实验用乙腈2s qw h磷酸
kwsΒysl可将槲皮素与其他峰很好地分离 o且流动相
配比简单 ∀在实验中考察了乙腈2s qw h磷酸不同比
例kxxΒwx oxsΒxs owxΒxx owsΒysl对槲皮素峰的影响 o
结果表明流动相比例除对保留时间有一定影响外 o
对槲皮素峰的分离和峰纯度无影响 ∀
4 q2 提取条件的选择 我们比较了冷浸 !冷浸后再
超声 !热回流提取等提取方法 o结果表明热回流提取
最好 o因此选用热回流提取方法 ~然后考察了提取时
间的影响 o结果回流 v «提取率较高 o因此选用热回
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中 国 中 药 杂 志
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流提取 v «∀
4 q3 地锦草的质量控制 地锦草因疗效独特而广
泛应用于临床 o然而其质量评价方法报道极少 o因而
本试验为地锦草及其制剂的质量控制提供了分析方
法 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qusss q|y q
≈u  江苏新医学院 q中药大辞典 q上册 q上海 }上海科技出版社 o
t|zz q{uz q
≈v  刘湘新 o孙志良 o冯崎华 o等 q地锦草有效成分鉴定及其抑菌试
验 q中国兽医杂志 ot||y ouykzl }vs q
≈w  李宝山 o巴根那 o张昕原 o等 q地锦草总黄酮抗氧化作用的研究 q
时珍国医国药 ot||{ o|kwl }vu{ q
∆ετερµινατιον οφ Θυερχετιν ιν τηε Ηερβα Ευπηορβιαε Ηυµιφυσαε
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≈责任编辑 李 禾 
苓桂术甘汤配伍机制研究
宋宗华t o戴舒佳t o黎辉琴t o毕开顺t o冯 东u
kt q沈阳药科大学 药学院 o辽宁 沈阳 ttssty ~
u q北京中顺制药厂 o北京 tstvssl
≈摘要  目的 }研究5伤寒论6名方苓桂术甘汤的配伍机制 o确定方中各药味的君臣佐使关系 ∀方法 }采用正交试
验设计对方中组成药味进行药味与药量同时加减拆方 o选择小鼠常压耐缺氧 !对抗氯仿所致小鼠心律失常和利尿 v项
药理指标 o对所得 ty个处方进行药理实验 ~采用方差分析 !逐步回归分析k≥• ∞Šl与典型相关分析k≤≤ ’ • l将所得药
理数据和组方药味及药量相关联 o探讨复方苓桂术甘汤的配伍机制 ∀结果 }确定了方中以茯苓为君 o以桂枝为臣 o佐以
白术 o使以甘草的配伍关系 o与对该复方中药的传统诠释相一致 ∀结论 }本研究为探讨复方中药的配伍机制提供了有
意义的尝试 ∀
≈关键词  苓桂术甘汤 ~配伍机制 ~正交试验设计
≈中图分类号  • u{| ~• u{x qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussults2szys2sv
君臣佐使法则 o是方剂配伍的基本理论 o是在中
医药学理论指导下派生而来的用以解释传统方剂结
构关系和作用机制 !创立和研制新方的重要原则 ∀
据其遣药组方 o才能使创立和研制的新方结构
≈收稿日期  usst2tt2vs
通讯作者  电话 }ksuwluv{wvztt2vvyvt
严谨有序 !配伍精当贴切 !机理明晰周全 !疗效确实
可靠 o较好地体现中医药学特色≈t  ∀
方剂是诸味药的有机结合 o全方作用优于其组
成药味 o方中诸药味间有协同 !拮抗 o药味和药量的
增减会影响方剂的功效 ∀全方研究有助于药效学的
研究 o并说明药效与临床治疗作用之间的相关性 o但
在揭示复方中药的组方规律方面存在不足 ~拆方研
#syz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
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