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HPLC法测定葛根素葡萄糖注射液中葛根素及3′-甲氧基葛根素含量



全 文 :物 ∀此外 o实验中尚观察到 o肉桂油 Β2≤⁄包合物中
的桂皮醛有逐渐变为桂皮酸的趋势 o其变化速度远
较混合物为慢 ∀可见 o肉桂油被 Β2≤⁄包合后 o对
光 !热和湿的稳定性显著提高 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qt||x qttu q
≈u  中国医学科学院药用植物资源开发研究所 q中药志k第五册l q
北京 }人民卫生出版社 ot||w qv{{ q
≈v  ²¶¨© °¬·«¤ × µ¨∏«¬®² ‹²¶¬±²q∞©©¨ ¦·¶²© ∞·«¤±²¯ ²± ƒ²µ°¤·¬²± ²©
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·¨µ²±¨ ²µº¬·«  ·¨«¼¯ ’µ¤±ª¨ qŒ±·¨µ°«¤µ° ot||u o{s }uwv q
≈w  谢茹嘉 q一阶导数光谱法测定解热 ´号口服液中桂皮醛含量 q
中国药科大学学报 ot||w ouxkxl }vtv q
≈x  杨国红 q高效液相色谱法测定两种中药中桂皮醛的含量 q现代
应用药学 ot||w ottkxl }vy q
≈y  富志军 o张 泓 q肉桂油与 Β2环糊精包合物的制备 q中成药 o
t||w otyktul }y q
≈责任编缉 李 禾 
‹°≤ 法测定葛根素葡萄糖注射液中
葛根素及 vχ2甲氧基葛根素含量
赵晓莉 o崔小兵 o狄留庆
k南京中医药大学 海洋药物研究开发中心 o江苏 南京 utssu|l
≈摘要  目的 }建立葛根素葡萄糖注射液中葛根素及 vχ2甲氧基葛根素含量测定的方法 ∀方法 }采用 ‘²√¤2°¤®
≤t{柱 o以甲醇2t1x h冰醋酸2氯仿kutΒz{Βtl为流动相 o二极管阵列检测器 o测定波长为 uxs ±° ∀结果 }平均加样回
收率 }葛根素为 tss1x h oΡΣ∆ s1{{ h ~vχ2甲氧基葛根素为 tss1u h oΡΣ∆ t1tw h ∀结论 }操作方便 o结果可靠 o可作
为该产品质量控制的方法 ∀
≈关键词  葛根素 ~vχ2甲氧基葛根素 ~葛根素葡萄糖注射液 ~高效液相色谱法
≈中图分类号  • u{y qs ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussslsz2swtv2sv
葛根素葡萄糖注射液是以葛根总黄酮为主要原
料配制而成的注射液 o临床上用以治疗冠心病 !心肌
梗塞 !视网膜中央动脉阻塞 o疗效显著 ∀其中主要活
性成分为葛根素 o并含有 vχ2甲氧基葛根素 ∀后者能
够增加葛根素在水中的溶解性 o因此在测定其中葛
根素的含量的同时 o测定 vχ2甲氧基葛根素的含量尤
为必要 ∀有关葛根黄酮的含量测定方法有紫外分光
光度法≈t  !薄层色谱法≈u  !高效液相色谱法≈v  ∀本
文应用反相高效液相色谱法同时测定其中葛根素及
vχ2甲氧基葛根素的含量 o方法简便 o结果可靠 o可作
为该产品质量控制的方法 ∀
1 仪器 !药品与试剂
• ¤·¨µ¶uy|s型高效液相色谱仪 o||y型二极管
阵列检测器 ouy|s自动进样器 o¬¯¯ ±¨±¬∏° vu色谱
管理系统 o≥«¬°¤§½∏uwst型紫外2可见分光光度计 o
≈收稿日期  t|||2sw2tz
≥¤µ·²µ¬∏¶…° utt⁄型电子天平 ∀
葛根素k中国药品生物制品检定所 o供含量测定
用l ~vχ2甲氧基葛根素k中国科学院附属协和药厂 o
含量 |{1x h l葛根素葡萄糖注射液 k市售 o批号
|{s{s| o|{s{tt o|{s{tul ∀
甲醇为 ‹°≤ 级 o冰醋酸 !氯仿为 Š• 级 o水为
u次重蒸水 ∀
2 实验方法与结果
211 色谱分析条件
色谱柱 }‘²√¤2°¤® ≤t{柱 kv1| °° ¬§ ≅ txs
°° ots Λ°l o流动相甲醇2t1x h冰醋酸2氯仿kutΒz{
Βtl ~流速 t1s °¯ #°¬±p t ~检测波长 uxs ±° ~灵敏度
s1t„ ˜ƒ≥ ~柱温 vs ε o理论塔板数按葛根素计算不
低于 v sss ∀结果见图 t ∀
212 标准曲线的制备
21211 对照品贮备液的制备 精密称取葛根素对
照品 u1s °ªo置 ts °¯ 容量瓶中 o加水溶解并稀释至
#vtw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
刻度 ~另精密称取 vχ2甲氧基葛根素对照品 u1s °ªo
置 ts °¯ 容量瓶中 o加水溶解并稀释至刻度 o得对照
品贮备液 ∀
21212 标准曲线的制备 分别精密吸取葛根素标
准贮备液 t1s °¯ ovχ2甲氧基葛根素标准贮备液 s1t
°¯ 置 ts °¯ 容量瓶中 o加水溶解并稀释至刻度 o混
匀 o得混合对照品溶液 ∀分别精密吸取混合对照品
溶液 s1ux os1x ot1s ot1x ou1s °¯ 于 ts °¯ 容量瓶
中 o加水稀释至刻度 o摇匀 o分别进样 v次各 ts Λ¯ o
测定 ∀以对照品浓度对峰面积平均值作图 o结果经
回归分析 o得葛根素进样量在 s1ssx ∗ s1sw Λª有良
好的线性关系 o回归方程为 Ψ € t1|v ≅ tsz Ξ p x1|u
≅ tsw , ρ € s1|||x ~vχ2甲氧基葛根素进样量在
s1sssx ∗ s1ssw Λª有良好的线性关系 o回归方程为
Ψ € t1zy ≅ tsz Ξ p x1zu ≅ tsv , ρ€ s1|||t ∀
213 精密度与稳定性试验
取样品 |{s{tt 连续进样 y 次 o葛根素 ΡΣ∆
t1u h ~vχ2甲氧基葛根素 ΡΣ∆ t1w h o每隔 u «进
样 o样品在 uw «内稳定 o其葛根素 ΡΣ∆ t1|% ,vχ2
甲氧基葛根素 ΡΣ∆ u1t%( ν € tul ∀
214 样品含量测定
精密吸取葛根素葡萄糖注射液 v1s °¯ 于 tss
°¯ 容量瓶中 o加水稀释至刻度 o摇匀 o分别进样 v次
各 ts Λ¯ o以二极管阵列检测器对峰 t !峰 u进行纯度
检测 o其纯度角均大于纯度域值 o表明两峰分离纯度
良好 ~以外标法计算含量 o结果见图 t及表 t ∀
2 q5 回收率试验
精密称取葛根素 !vχ2甲氧基葛根素对照品各适
τr°¬± τr°¬±
„ …
图 t 葛根素葡萄糖注射液样品及对照品的
高效液相色谱图
„ q对照品 …1 样品
t q葛根素 u qvχ2甲氧基葛根素
表 t 葛根素葡萄糖注射液分析结果
样品批号
葛根素
含量r
°ª# °¯ p t
ΡΣ∆r
h
vχ2甲氧基葛根素
含量r
°ª# °¯ p t
ΡΣ∆r
h
|{s{s| s1{{z s1yu s1uyu s1{u
|{s{tt s1{|v s1zt s1uxy s1zy
|{s{tu s1{|z s1x{ s1uxt s1|v
注 }ν € v
量 o加水溶解并稀释成葛根素ks1tvu °ª# °¯ p tl
vχ2甲氧基葛根素ks1sv|w °ª# °¯ p t的标准液备用 ∀
精密吸取样品k|{s{s|lts1s °¯ 置 tss °¯ 容量瓶
中 o以水稀释并定容后 o分别精密吸取 t1x °¯ 上述
样品稀释液 ts份 o其中 x份各加入葛根素标准液
t1s °¯ ~另 x份各加入 vχ2甲氧基葛根素标准液 t1s
°¯ o分别置 ts °¯ 容量瓶中 o以水定容 o按含量测定
项下操作 o计算回收率 o结果见表 u ∀
3 讨论
表 u 葛根素 !vχ2甲氧基葛根素加样回收率试验结果
葛根素
测得量r
Λª# °¯ p t
回收率r
h
平均回收率r
h
ΡΣ∆r
h
vχ2甲氧基葛根素
测得量r
Λª# °¯ p t
回收率r
h
平均回收率r
h
ΡΣ∆r
h
uy1y tss1{ z1{y ||1z
uy1z tst1x z1{{ tss1v
uy1x tss1s tss1x s1{{ z1|v tst1x tss1u t1tw
uy1y tss1{ z1{t |{1x
uy1w ||1u z1|s tss1{
注 }加入对照品量 o葛根素为 tvu Λªovχ2甲氧基葛根素为 v|1w Λª
311 方法的比较
采用紫外分光光度法测定 o仅测出以葛根素计
的葛根总黄酮 o无法反映其中 vχ2甲氧基葛根素的含
量 ∀在本文色谱条件下 o• °2‹°≤ 法能很好地将总
黄酮中的葛根素 !vχ2甲氧基葛根素与其他杂质分离
后定量 o正确地反映了葛根素注射液中葛根素的含
量 ∀
312 检测波长与流动相的选择
#wtw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
精密称取葛根素 !vχ2甲氧基葛根素对照品各适
量 o加水溶解并稀释 o在 uss ∗ wss ±° 进行波长扫
描 o测得二者最大吸收波长为 uxs ±° ∀葛根素与 vχ2
甲氧基葛根素都属于异黄酮类化合物 o母核相同 o性
质基本相似 o为准确地测定它们各自的含量 o我们试
用了甲醇2水 !甲醇2酸水等多种流动相体系 o醇从高
往低进行试验 o在甲醇2t1x h冰醋酸2氯仿比例 utΒ
z{Βt o各成分能得到基线分离 o且保留时间适中 ∀
≈参考文献 
≈t  卫生部药品标准k试行l q• ≥2uxzk÷2uszl2|u q
≈u  苏 健 o王宝 q薄层色谱法对镇脑宁胶囊中葛根素含量的测
定 q中国中医药科技 ot||y ovkwl }u| q
≈v  陈发奎 q常用中草药有效成分含量测定 q北京 }人民卫生出版
社 ot||z qzus q
≈责任编缉 李 禾 
反相高效液相色谱法测定脉络宁注射液中
肉桂酸的含量
余明艳 o汪水娟 o汪 勤 o夏仲豪 o陈 颢
kt1 南京大学 生物科学与技术系 o江苏 南京 utss|v ~
u1 金陵药业股份有限公司技术中心 o江苏 南京 utsstyl
≈摘要  目的 }建立反相高效液相色谱测定脉络宁注射液中肉桂酸含量的方法 ∀方法 }• °2‹°≤ ∀ ‹¼³¨µ¶¬¯
…⁄≥ ≤{色谱柱分离测定 o流动相为甲醇2水2vy h醋酸kwsΒx|Βtl o流速 t °¯ #°¬±p t o检测波长 uz{ ±° ∀结果 }肉桂酸
对照品线性范围 s1yx ∗ y1xs Λª# °¯ p t oρ€ s1||||x o平均回收率 tss1w h oΡΣ∆ t1x h ∀结论 }用高效液相色谱法测
定脉络宁注射液中肉桂酸的含量 o操作简便 o结果准确 o可供本品质量控制 ∀
≈关键词  • °2‹°≤ ~脉络宁 ~肉桂酸
≈中图分类号  • u{y qs ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussslsz2swtx2su
脉络宁注射液由怀牛膝 !玄参 !金银花 !石斛等
药材加工制成 o属于国家中药保护品种 ∀具有清热
养阴 !活血化瘀的功能 ~用于血栓塞性脉管炎 o动脉
硬化性闭塞症 !脑血栓形成及后遗症 !静脉血栓形成
等 o临床效果较好≈t  ∀肉桂酸是玄参中重要成分 o
为脉络宁注射液有效成分之一 o具有抗菌 !消炎作用
和抑制黄嘌呤氧化酶的活性≈u  ∀ 5中国药典6t||x
年版未收载玄参的含量测定项 ∀曾有文献报道用
‹°≤法测定玄参和某些中成药中肉桂酸的含量
k≤ „ tux }uxzvtu∏otuy }vuttvv°l o但脉络宁注射液
中肉桂酸的含量测定还未见报道 ∀本文以肉桂酸为
指标 o采用高效液相色谱法测定其含量 o为该制剂的
质量控制提供了快速 !准确的测定方法 ∀
1 仪器 !药材与试剂
• ¤·¨µ¶yss∞高效液相色谱仪 o||y型二极管阵
列检测器 o¬¯¯ ±¨±¬∏°色谱工作站 ∀
≈收稿日期  t|||2ts2tx
肉桂酸对照品购于中国药品生物制品检定所
k纯度 ||1u h l ∀脉络宁注射液由南京市金陵药业
股份有限公司生产 ∀
甲醇为色谱用试剂 o水为重蒸馏水 o其他试剂均
为分析纯 ∀
2 方法和结果
211 供试品溶液的制备 精密量取本品 u1x °¯ o
置 tss °¯ 量瓶中 o加水稀释至刻度 o摇匀 o再精密量
取 t1s °¯ o置 ts °¯ 量瓶中 o加水定容 o摇匀 o即得 ∀
212 对照品溶液的制备 精密称取对照品 y1xs
°ªo置 ts °¯ 量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o取
t qs °¯ 置 tss °¯ 量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o摇匀 o
制成浓度为 y1xs Λª# °¯ p t的对照品溶液 ∀
213 色谱条件 大连依利特公司 ‹¼³¨µ¶¬¯ …⁄≥ ≤{
分析柱kw1y °° ¬§≅ txs °° ox Λ°l o柱温为室温 ~
流动相甲醇2水2vy h 醋酸kwsΒx|Βtl o流速 t °¯ #
°¬±p t ~检测波长 uz{ ±° o进样体积 us Λ¯ ∀
214 空白对照试验 精密量取对照品溶液 !供试品
#xtw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss