全 文 ：青蒿琥酯抗肝癌作用的实验研究
王 勤 o吴理茂 o李爱媛 o赵 一 o王乃平
k广西中医学院 中草药研究室 o广西 南宁 xvssstl
≈摘要  目的 }研究青蒿琥酯的抗肝癌作用 ∀方法 }运用小鼠肝癌 ‹uu癌模型 ! × × 法和集落形成法 o观察青
蒿琥酯对荷瘤鼠和人肝癌 ≥   ≤2zzut细胞株的作用 ∀结果 }口服青蒿琥酯 vss°ª#®ªp t#§p t o肿瘤受到明显抑
制 o抑瘤率在 v次实验中分别为 w| qt h ow{ qz h owy qy h ~小鼠生存时间明显延长 ∀青蒿琥酯与 x2氟尿嘧啶有协同
抗肿瘤作用 ∀青蒿琥酯体外对人肝癌细胞有明显细胞毒作用 o其 Œ≤xs为 u qsz Λª# °¯ p t o同时抑制人肝癌 ≥   ≤2
zzut克隆原细胞形成集落 o其 Œ≤xs为 u qw{Λª# °¯ p t ∀结论 }口服青蒿琥酯有抗肝肿瘤作用 ∀
≈关键词  青蒿琥酯 ~ ‹uu肝肿瘤 ~人肝癌 ≥   ≤2zzut细胞株
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlts2szsz2su
青蒿琥酯k¤µ·¨¶∏±¤·¨l o是青蒿素的衍生物 o现为
临床有效的抗疟药 ∀为了扩大其临床用途 o探讨其
口服抗肝癌作用 o我们对其进行了体内外抗肝癌作
用及作用机理的实验研究 o本文报告青蒿琥酯体内
外抗肝癌作用的实验结果 ∀
1 材料
1 q1 药物 注射用青蒿琥酯k桂林第二制药厂产
品 o批号 ssststl o用 x h ‘¤‹≤ ’v溶解后再用生理盐
水配制成所需浓度 ∀x2氟尿嘧啶针剂kx2ƒ∏o上海旭
东海普药业有限公司 o批号 ||tusxl ∀噻唑兰
k  × ×l为上海实生细胞生物技术公司进口分装 o批
号 sststv ∀
1 q2 瘤株 !细胞株 小鼠肝癌 ‹uu瘤株由广西中医
药研究所常规保种瘤株 o参照文献方法≈t 抽取小鼠
肝癌 ‹uu乳白色肿瘤腹水 o稀释成 t ≅ tsz# °¯ p t的肿
瘤细胞悬液供实验用 ∀人肝癌 ≥   ≤2zzut 细胞
株 !人肺癌 ≥°„≤2t细胞株 !人肝细胞 2su细胞株 o
均由中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
生物治疗组传代培养 ∀
1 q3 动物 由广西中医学院实验动物中心提供 o
昆明种小鼠k合格证号 }桂医动字 ttsw号l ∀体重 t{
∗ uu ªoy ∗ {周龄 o雌雄兼用 ∀
2 实验方法和结果
2 q1 青蒿琥酯对小鼠肝癌 ‹uuk实体瘤l的抑制作
用≈t  每鼠注射接种肿瘤细胞悬液 s qu °¯ 于前肢
≈收稿日期  usst2su2sx
≈基金项目  广西医药卫生科研基金资助项目k||utl
腋窝皮下制成实体瘤模型 o随机分为阴性对照组k生
理盐水 us °¯ #®ªp tl !阳性对照组kx2ƒ∏ vs °ª#
®ªp tl和实验组k青蒿琥酯 vss °ª#®ªp t和 t{s °ª#
®ªp t各 t组l ∀每组 ts只 o雌雄各半 ∀于接种后 uw
«开始口服灌胃给药 o每天 t次 o连续 z §∀于停药
后第 u天处死 o称瘤重和体重 o计算抑瘤率 ∀实验结
果表明 o青蒿琥酯以 vss °¯ #®ªp t灌胃时 o抑瘤率为
ws h以上 o抑瘤效果明显k Π s qstl ∀见表 t ∀
表 t 青蒿琥酯对小鼠肝癌 ‹uu实体瘤生长抑制作用
分组
剂量
r°ª#®ªp t
体重变化
rª
瘤重
rª
抑瘤率
r h
对照组 n v qu t qyy ? s qyv
x2ĸ vs p s q| s q{w ? s quw w| qwul
¤µ·¨¶∏±¤·¨ vss n t qs s q{w ? s qty w| qtul
t{s n v qt t quu ? s qu{ uy qx
对照组 n x qs t qx{ ? s qus
x2ĸ vs p u qs s qwx ? s qvy zt qxul
¤µ·¨¶∏±¤·¨ vss n t qy s q{t ? s quz w{ qzul
t{s n w qs t qu| ? s qwx t{ qw
对照组 n w qy t qzw ? s qvy
x2ĸ vs p v qz s q{w ? s quw xu qvul
¤µ·¨¶∏±¤·¨ vss n t qu s q|v ? s qvs wy qyul
t{s n x qu t qvw ? s qvz uv qs
注 }≠ ξ ? σ  ν € ts ≈ 与对照组比较 t) Π s .sx u) Π
s qst k表 u ov同l
2 q2 青蒿琥酯对小鼠肝癌 ‹uuk 腹水瘤l生存天数
的影响≈t  每鼠注射接种肿瘤细胞悬液 s qu °¯ 于
腹腔内制成腹水瘤模型 o分组及给药方法同 2 q1 ∀
停药后观察各组小鼠生存天数 o小鼠的平均生存天
数分别为生理盐水组kt{ qs ? t qxl ox2ƒ∏组kuv qt ?
#zsz#
第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qts
’¦·qousst
u qtl o青蒿琥酯 vss °ª#®ªp t组kuy qt ? v qwl o青蒿
琥酯 t{s °ª#®ªp t组kut q| ? u qul ∀x2ƒ∏组 o青蒿琥
酯 vss °ª#®ªp t组生命延长率分别是u{ qv h o
wx qs h o与对照组比较有显著意义k Π s qstl ∀
2 q3 青蒿琥酯与 x2ƒ∏协同抗肿瘤作用 实验方法
同 2 q1 o给药方式改为腹腔注射 x2ƒ∏o同时口服青蒿
琥酯 ∀实验结果表明口服青蒿琥酯在 tss °ª#®ªp t
时 o与 x2ƒ∏有明显的协同抗肿瘤作用k Π  s qstl ∀
结果见表 u ∀
表 u 青蒿琥酯与 x2ƒ∏的协同抗肿瘤作用
分组
剂量
r°ª#®ªp t
瘤重
rª
抑制率
r h
对照组 t qwv ? s qu|
x2ĸ ts s q|y ? s qvs vu q|ul
x2ƒ∏n ¤µ·¨¶∏±¤·¨ ts n tss s qwz ? s qus yz qtu ovl
ts n xs s q{y ? s qvx v| q|ul
注 } vl与 x2ƒ∏组比较 Π s qst
2 q4  × × 法检测青蒿琥酯对人肝癌 ≥   ≤2zzut
细胞株 !人肺癌 ≥°„≤2t细胞株 !人肝细胞 2su细胞
株的细胞毒作用 参照文献≈u 方法取对数生长期
细胞 o以每孔 t ≅ tsw#uss °¯ p t种植于 |y孔培养板
中 o加入不同浓度青蒿琥酯k每孔 us Λ¯l使其最终浓
度分别为 uss otss oxs oux otu qx oy qux ov qtux ot qxy
Λª# °¯ p t o每浓度设 w个平行孔 ∀以不含药物的 • °2
Œ tyws培养液为阴性对照 o以含羟基喜树碱 x Λª#
°¯ p t的 • ° Œ tyws 培养液为阳性对照 ∀在 vz ε
x h ≤ ’u培养箱培养 ww «o每孔加入 us Λ¯  × × 溶
液kx °ª# °¯ p t °…≥液配制l o继续培养 w «o吸弃上
清液 ∀每孔加入 txs Λ¯ 二甲基亚砜溶液震荡 ts
°¬±o将培养板置 ²§¨ txxs酶标仪k…¬²2• ¤§公司产
品lw|s ±° 测吸收度 o计算抑制率 o绘制剂量2效应
曲线求出 Œ≤xs ∀实验结果表明 o随着药物浓度的增
加 o抑制率愈来愈大 ~青蒿琥酯对体外培养的
≥   ≤2zzut o≥°„≤2t o2su细胞均有杀伤作用 oŒ≤xs
分别为 u qsz Λª# °¯ p t o{u q{y Λª# °¯ p t ozv qst Λª#
°¯ p t o对人肝癌 ≥   ≤2zzut细胞的杀伤作用较强 o
对人肺癌 ≥°„≤2t细胞和正常人肝细胞的杀伤作用
较弱 ∀
2 q5 集落形成法检测青蒿琥酯对人肝癌 ≥   ≤2
zzut克隆原细胞的抑制作用 参照文献≈u ov 方法
取对数生长期 ≥   ≤2zzut 细胞 o制成每毫升 xss
个细胞的细胞悬液 ∀在 xs °°培养皿中加细胞悬
液 u °¯ ov个 t组 ∀分别加入不同浓度青蒿琥酯 us
Λ¯ o在 vz ε ox h ≤ ’u 培养箱培养 z §o甲醇固定 o姬
姆萨染色 ous倍解剖显微镜下直接计数含 xs个细
胞以上的集落 o计算克隆形成率和 Œ≤xs ∀结果青蒿
琥酯对人肝癌 ≥   ≤2zzut克隆形成有明显抑制作
用k表 vl oŒ≤xs为 u qw{ Λª# °¯ p t ∀
表 v 青蒿琥酯对 ≥   ≤2zzut克隆原细胞的抑制作用
分组
剂量
rΛª# °¯ p t
集落
r个数
克隆形成率
r h
对照组 wxx
羟基喜树碱 x tsul u quz
¤µ·¨¶∏±¤·¨ u qx uystl xz qux
x twutl vt qt{
ts xwul tu qss
us {ul t qzy
ws sul s qss
3 讨论
在增殖周期中的细胞又称为集落形成细胞 ∀克
隆原细胞反映了单个细胞的增殖能力 o能较灵敏地
测定抗癌药的活性≈w  o本研究结果提示青蒿琥酯对
人肝癌 ≥   ≤2zzut细胞株有较强地选择性细胞毒
作用 o而且抑制肝癌增殖干细胞的增殖 o经重复实验
证实青蒿琥酯体外抑瘤效果确切 ∀杨小平等人≈x 曾
报道青蒿琥酯静脉注射给药 xs °ª#®ªp t和 tss °ª#
®ªp t可明显抑制小鼠肝癌的生长 o抑瘤率分别为
ut h ∗ vw h和 wt h ∗ w| h ∀本研究结果显示 o青蒿
琥酯口服给药 vss °ª#®ªp t也能明显抑制小鼠肝癌
的生长和延长小鼠生存天数 o抑瘤率为 wy h ∗
w| h ~青蒿琥酯口服给药 tss °ª#®ªp t与 x2ƒ∏有协
同抗肝癌作用 o提示青蒿琥酯口服给药也可达到注
射给药的抗癌效果 o而且给药方便 o值得临床试用 ∀
≈致谢  体外抑瘤实验在中国科学院上海生物化学和
细胞生物学研究所生物治疗组完成 o得到谢弘教授等学者的
帮助和指导 ∀
≈参考文献 
≈t  徐淑云 o卞如濂 o陈 修 q药理实验方法学 q第二版 q北京 }人
民卫生出版社 ot||t qtwuv q
≈u  司徒镇强 o吴军正 q细胞培养 q西安 }世界图书出版社 ot||y q
t{v q
≈v  张均田 q现代药理实验方法学 q北京 }北京医科大学协和医科
大学联合出版社 ot||{ q{ut q
≈w  韩 锐 q抗癌药物研究与实验技术 q北京 }北京医科大学协和
医科大学联合出版社 ot||z qu{v q
≈x  杨小平 o潘启超 o梁永钜 o等 q青蒿酯钠的抗肿瘤作用 q癌症 o
t||z otykvl }t{y q
k下转第 zus页l
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第 uy卷第 ts期
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中的发酵工艺问题 o作一些初浅剖析 o以供参考 ∀
1 工艺条件
1 q1 材料 砂仁 !广藿香 !青皮k制l !槟榔 !诃子肉 !
白曲等 xu味地道中药材 ∀
1 q2 制作 将砂仁等 wy味药材粉碎成粗粉 o混匀 o
加入 { h麸皮 !y h面粉 !vv h水浸发酵小麦及适量
/三味汤0k青蒿叶 !辣蓼 !苍耳草加水煎煮之滤液l o
经捣制 !模印 !蒸煮 !发酵而成≈v  ∀
1 q3 条件 最适生长温度 vz ∗ wx ε o最适 ³‹ x qw
∗ y qx o不需要生长素 o不产生真菌毒素等 ∀
2 发酵路线
蒸煮后湿神曲块 ψ进入发酵室 ψ温 !湿度调节
控制 ψ发酵 !变化 !观察直到适度 ψ低温干燥 ψ烘干
ψ刷霉 ψ储藏 ψ再发酵 ∀
3 发酵菌株
根据厦门大学生物系微生物学教研室黄庆辉 !
黄克服等关于神曲生产工艺改革与质检指标的试验
报告的研究资料表明 o神曲发酵过程中的主导菌株
为犁头霉k Αβσιδια) ,经水浸发酵浆化的小麦粒中的
大 !小菌落分别为芽孢杆菌属( Βαχιλλασ)和假单胞菌
属( Πσευδο µ ονασl ∀
4 小结
该产品含有经发酵转化产生的特殊药效成分 ∀
福建医学院生化教研组曾在 t|yu年通过实验 o证实
泉州神曲含有消化能力的糖化酶其糖化能力甚强 o
按每 t ª曲能使淀粉水解产生的麦芽糖毫克数作为
糖化力来计算 o最高可达 wwx °ªo比北京同仁堂的
神曲为胜≈w  ∀另外还含有维生素 …复合体等多种
有益人体的特殊产物 ∀
为方便用药 o除传统长方形块状神曲外 o近年来
还研制生产了老范志神曲冲剂 !袋泡剂 o并将进一步
开发新剂型产品 o如神曲浓缩丸等 ∀
≈参考文献 
≈t  江苏新医学院 q中药大辞典 q上海 }上海科学技术出版社 o
t||| qtwzw q
≈u  赵学敏 q本草纲目拾遗 q北京 }人民卫生出版社 ot|{v qtzv q
≈v  中华人民共和国卫生部药典委员会 q药品标准 q中药成方制
剂 q第 tz册 qtsv q
≈w  俞慎初 q福建神曲史略 q福州中医 ot|{u oktl }{v q
≈责任编辑 刘  
k上接第 zs{页l
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Μετηοδ : ׫¨ °¬¦¨ ¥¨ ¤µ¬±ª ‹uu ¶²¯¬§¤±§¤¶¦¬·¬¦ ¬¯√ µ¨·∏°²µº µ¨¨ ¤³³¯¬¨§¬± √¬√² ¬¨³¨µ¬° ±¨·¶q ¬¦µ²¦∏¯·∏µ¨ ·¨2
·µ¤½²¯¬∏° ¤¶¶¤¼ ¤±§¦²¯²±¼2©²µ°¬±ª ∏±¬·¤¶¶¤¼ º µ¨¨ ¤³³¯¬¨§·² ·¨¶··«¨ ¦¼·²·²¬¬¦¬·¼ ·² «∏°¤± «¨ ³¤·²¦¤µ¦¬±²°¤
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¬± v ¬¨³¨µ¬° ±¨·¶µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ q „©·¨µ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²© „µ·¨¶∏±¤·¨ o·«¨ ¶∏µ√¬√¤¯ µ¤·¨ ²©·«¨ °¬¦¨ ¥¨ ¤µ¬±ª ‹uu ¤¶2
¦¬·¬¦¯¬√ µ¨·∏°²µº µ¨¨ ¬±¦µ¨¤¶¨§·²wx h q≤²°³¤¬µ¨§ º¬·«·«¨ ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³¶o·«¨ §¬©©¨ µ¨±¦¨ º¤¶¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ ¼¯ ¶¬ª2
±¬©¬¦¤±·k Π s qstl qŒ± ¤§§¬·¬²±¤¯ o„µ·¨¶∏±¤·¨ ¦¤±¶¼±¨ µª¬½¨ ·«¨ ¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼ ²©x2©¯∏²µ²∏µ¤¦¬¯q„µ·¨¶∏±¤·¨
¶«²º §¨ √¨¬§¨ ±·¦¼·²·²¬¬¦¬·¼·²«∏°¤± «¨ ³¤·²¦¤µ¦¬±²°¤≥   ≤2zzut ¦¨¯¯¶o·«¨ Œ≤xs ²© „µ·¨¶∏±¤·¨ ¥¨¬±ªu qsz Λª
# °¯ p t ¬±  × × ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤±§u qw{ Λª# °¯ p t ¬± ¦²¯²±¼2©²µ°¬±ª∏±¬· ¬¨³¨µ¬° ±¨·q Χονχλυσιον : „µ·¨¶∏±¤·¨ «¤¶
°¤µ®¨ §¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼¬± √¬·µ²¤±§¬± √¬√²q
[ Κεψ ωορδσ] ¤µ·¨¶∏±¤·¨ ~ ‹uu ¬¯√ µ¨¦¤±¦¨µ~«∏°¤± «¨ ³¤·²¦¤µ¦¬±²°¤≥   ≤2zzut ¦¨¯¯ ¬¯±¨
≈责任编辑 方文贤 
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