全 文 ：12121 mg(相当于丹参素 10198 mg) ,置 100 mL 量瓶
中 ,加 015 %冰醋酸溶液溶解并加至刻度 ,摇匀。分别
精密吸取 4、8、12、16、20μL 注入高效液相色谱仪 ,按
上述色谱条件测定峰面积。以峰面积为纵坐标 ,进样
量为横坐标 ,得出回归方程 Y = 324 4471155 3 X +
109 2461084 8 , r = 01999 8 ,表明丹参素在01439 2～
21196 0μg 与峰面积的线性关系良好。
217 　阴性干扰试验考察 :取对照品溶液、供试品溶
液和阴性对照溶液分别在选定的色谱条件下进样分
析 ,结果阴性样品在样品相应位置上无干扰 ,说明消
栓通络软胶囊中其他药味对丹参素的测定无干扰。
218 　精密度试验 :精密吸取供试品溶液 ,按照上述
色谱条件进样 20μL ,连续进样 5 次 ,计算得丹参素
钠峰面积的 RSD 值为 1166 %。
219 　稳定性试验 :精密吸取供试品溶液 ,于 0、2、4、
6、10 h 按上述色谱条件分别进样 20μL ,按丹参素
钠峰面积计算 ,结果丹参素钠峰面积积分值的 RSD
值为 01629 % ,表明供试品溶液在 10 h 内均稳定。
2110 　重复性试验 : 取同一批供试品 (批号为
20040630) ,共 5 份 ,分别制备供试品溶液 ,按上述色
谱条件进样 20μL 进行测定 ,结果样品中丹参素的平
均质量分数为 11263 mg/ 粒 ,RSD 为 01760 %( n = 5) 。
2111 　回收率试验 : 取同一批样品 ( 批号为
20040630 ,含丹参素 11263 mg / 粒) 6 份 ,精密称定 ,
分别精密加入 01708 0、01826 0、01944 0 mg 丹参素
钠对照品 ,制备成供试品溶液 ,按上述色谱条件测
定 ,记录色谱图并计算回收率 ,结果平均回收率为
98130 % ,RSD 为 1102 % ( n = 6) 。
2112 　样品的测定 :取 3 批消栓通络软胶囊样品 ,每批
测定 3 份 ,制备供试品溶液 ,按上述色谱条件分别进样
20μL ,按外标法计算丹参素的质量分数 ,结果见表 1。
表 1 　消栓通络软胶囊中丹参素的测定结果
Table 1 　Determination of danshensu in Xiaoshuan
Tongluo Soft Capsula
批　号 丹参素/ (mg ·粒 - 1)
20040825 11263
20040827 11212
20040829 11284
3 　讨论
311 　供试品溶液制备方法的考察 :在预试验中考察
提取溶媒 (水、甲醇、乙醇) 、提取方法 (超声法、加热
法)以及提取时间 (10、20、30 min)的影响 ;结果选用
水为溶媒超声提取 20 min 制备供试品溶液 ,丹参素
的量较高 ,主峰分离理想。
312 　色谱柱的选择 :选用 Agilent C18柱 (150 mm ×
416 mm ,5μm) 和 Kromteck C18 柱 (150 mm ×416
mm ,5μm)两种色谱柱做对比研究 ,结果 Kromteck
C18柱 (150 mm ×416 mm ,5μm) 柱虽也能达到基线
分离 ,但柱效稍低 ;因此选用 Agilent C18柱 (150 mm ×
416 mm ,5μm) 。
313 　流动相的选择 :考虑到丹参素的柱效和分离情
况 ,曾选择甲醇2水2015 %三氯乙酸 (8 ∶90 ∶2) 为流
动相、甲醇2水2乙腈2冰醋酸 (8 ∶92 ∶015 ∶1) 、甲醇2
[水2二甲基甲酰胺2冰醋酸 (93 ∶2 ∶1) ] (1117 ∶
8813) 、甲醇2015 %冰醋酸溶液 (10 ∶90) 为流动相 ;
结果甲醇2015 %冰醋酸溶液 (10 ∶90) 为流动相分离
效果满意 ,丹参素峰已达基线分离 ,峰形对称 ;缺丹
参阴性对照样品无干扰。最终确定甲醇2015 %冰醋
酸溶液 (10 ∶90)为流动相。
高效液相色谱法测定生脉分散片中五味子醇甲
金 　福1 ,石森林2 3 ,朱雨晴2
(11 临海市第二人民医院 ,浙江 临海 　317016 ;21 浙江中医药大学药学院 ,浙江 杭州 　310053)
摘 　要 :目的 　定量分析生脉分散片中的五味子醇甲。方法 　采用高效液相色谱法。Kromasil C18柱 (250 mm ×
416 mm ,5μm) ;以甲醇2水 (60 ∶40)为流动相 ;体积流量为 1 mL/ min ;检测波长为 250 nm ;柱温 :35 ℃;进样量为
20μL 。结果 　五味子醇甲在 01260 4～11302 0μg 呈现良好的线性关系 ,平均回收率 9917 % ,RSD 为 1122 %( n =
9) ;每片中含五味子醇甲为 0125～0134 mg。结论 　本法操作简便、准确、专属性好 ,可作为生脉分散片中五味子的
质量控制方法。
·219· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
3 收稿日期 :2008212226　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :金　福 (1962 —) ,男 ,浙江省临海市人 ,主管药师 ,大专 ,1985 年至今在临海市第二人民医院药剂科工作 ,主要从事中西药物
药理研究。Tel :13357692935 　E2mail :yjkjf2001 @163. com3 通讯作者　石森林
关键词 :生脉分散片 ;五味子醇甲 ;高效液相色谱
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0620912203
　　生脉片收载于《中华人民共和国卫生部药品标
准》中药成方制剂第十二册 ,由人参、麦冬、五味子 3
味中药组成 ,具有益气复脉、养阴生津的功效 ,用于
治疗气阴两亏、心悸气短、脉微自汗等病症。为了改
善有效成分的溶出 ,提高药效 ,笔者剂型改造为生脉
分散片。人参为该制剂处方君药 ,但若选择其中人参
皂苷苷元控制其质量 ,往往缺乏专属性 ,而选择皂苷
特征性成分则种类多样 ;麦冬中主要含有皂苷类成
分 ,紫外吸收较弱 ,测定相对困难 ;而五味子为提取物
(浸膏)入药 ,是生脉分散片中的主要药味 ,其所含五
味子醇甲是主要有效成分之一 ,因此选定五味子醇甲
作为质量控制指标[1 ] 。本实验采用高效液相色谱法
对生脉分散片中五味子醇甲进行了定量分析。
1 　仪器和试药
　　Agilent1100 液相色谱仪 ,浙江大学 N2000 色
谱工作站 ; TU —9501 紫外分光光度计 ; Sartorius
BP 211D 电子天平 ;U SC —502 超声波清洗器。
　　色谱用甲醇为色谱纯 (美国 Fisher 化学试剂公
司) ,色谱用水为纯净水过 0145 μm 微孔滤膜 (自
制) ,其余试剂均为分析纯。五味子醇甲对照品 (中
国药品生物制品检定 ,批号 : 8572200102) 。生脉分
散片和阴性样品 (自制 ,片重 0145 g) 。
2 　方法与结果
211 　色谱条件及系统适应性试验 : Kromasil C18柱
(250 mm ×416 mm ,5μm) ;以甲醇2水 (60 ∶40) 为
流动相 ;体积流量为 1 mL/ min ;检测波长为 250
nm ;柱温 :35 ℃;进样量为 20μL 。理论板数按五味
子醇甲峰计算应不低于 3 000。
212 　对照品溶液的制备 :精密称取五味子醇甲对照
品适量 ,加甲醇溶解制成 30μg/ mL 溶液 ,即得。
213 　供试品溶液的制备 :取生脉分散片样品 10 片 ,
研细 ,称取约 110 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精
密加入甲醇 25 mL ,称定质量 ,超声处理 30 min ,取
出放冷 ,称定质量 ,用甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,静
置 ,取上清液微孔滤膜 (0145μm) 滤过 ,取续滤液 ,
即得。
214 　阴性对照溶液的制备 :取缺五味子的生脉分散
片阴性样品 ,研细 ,取约 110 g ,同供试品溶液的制备
项下方法操作 ,即得。
215 　阴性干扰试验 :取五味子醇甲对照品溶液、生
脉分散片供试品溶液和阴性对照溶液各 20μL 进
样 ,依法测定。结果表明本方中的人参、麦冬不含五
味子醇甲成分 ,阴性样品对样品测定无干扰。
216 　标准曲线的制备 :精密称取五味子醇甲对照品
适量 ,加甲醇溶解制成 6511μg/ mL 溶液。分别精
密吸取 4、8、12、16、20μL 注入高效液相色谱仪 ,测
定峰面积。以峰面积对五味子醇甲进样质量进行回
归 ,其回归方程为 Y = 9106 ×105 X + 20 140 , r =
01999 3。结果表明 ,五味子醇甲在 01260 4～11302 0
μg 呈现良好的线性关系。
217 　精密度试验 :取批号 20031201 样品 ,制备项供
试品溶液 ,重复进样测定 5 次 ,结果五味子醇甲峰面
积的 RSD 为 0165 %。
218 　稳定性试验 :取批号 20031201 样品 ,制备项供
试品溶液 ,在 0、2、4、8、12 h 依法测定 ,结果五味子
醇甲峰面积的 RSD 为 1142 % ,表明供试品溶液在
制样 12 h 内基本稳定。
219 　重现性试验 :取批号 20031201 生脉分散片样
品 ,进行 5 次平行测定 ,结果五味子醇甲平均质量分
数为 0174 mg/ g ,RSD 为 110 %。
2110 　回收率试验 :取批号 20031201 样品 015 g ,精
密称定 ,平行 9 份 ,分别精密加入 3815μg/ mL 五味
子醇甲对照品溶液 8、10、12 mL ,各 3 份 ,制备供试
品溶液 ,测定 ,计算 ,结果平均回收率为 9917 % ,
RSD 为 1122 %。
2111 　样品测定 :10 批样品 ,每批平行取样 2 份 ,制
备供试品溶液。取五味子醇甲对照品溶液和生脉分
散片供试品溶液 ,进样测定 ,计算 ,结果见表 1。每
片含五味子以五味子醇甲计为 0125～0134 mg ,考
虑到本品随原料量有一定波动及大生产实际情况 ,
暂定本品以五味子醇甲计不得少于 0122 mg/ 片为
合格品。
表 1 　生脉分散片中五味子醇甲的测定结果
Table 1 　Determination of schisandrin
in Shengmai Disperse Tablets
批　号
五味子醇甲/
(mg ·片 - 1)
批　号
五味子醇甲/
(mg ·片 - 1)
20031201 0134 20040903 01 28
20031202 0133 20040904 01 27
20031203 0134 20050701 01 26
20040901 0134 20050702 01 25
20040902 0133 20050703 01 27
3 　讨论
　　实验选用 KromasilC18 柱 (250 mm ×416 mm ,
·319·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
5μm)和 Aichrom C18柱(250 mm×416 mm ,5μm)做相
关考察 ,均可基本达到基线分离。综合考虑分析时间、
峰形对称度及美观度等因素 ,用 KromasilC18 柱 (250
mm×416 mm ,5μm)为本实验的分析用色谱柱。
　　取五味子醇甲对照品用流动相甲醇2水 (60 ∶
40)溶解 ,对五味子醇甲进行紫外扫描 (190～400
nm) ,结果五味子醇甲在 251 nm 波长处有最大吸
收 ,因此确定测定波长为 250 nm。
　　五味子醇甲的提取溶液一般有甲醇、乙醇等。
本实验分别采用甲醇、乙醇、50 %甲醇作为提取溶
剂 ,以其中五味子醇甲的质量分数作为衡量指标 ,结
果 3 种提取溶剂得出的五味子醇甲的质量分数分别
是 0172、0171、0169 mg/ g ,所以当提取溶剂为甲醇 时 ,五味子醇甲的提取效率最高 ,本实验予以选用。　　实验对样品提取方法进行了筛选考察 ,对超声处理、回流提取两种方法进行了对比 ,以五味子醇甲的质量分数作为衡量指标 ,结果五味子醇甲分别为0172、0171 mg/ g ,没有明显区别 ,而且超声方法相对简单 ,故选定。分别超声处理 15、30、45 min ,结果五味子醇甲的质量分数分别为 0167、0172、0172mg/ g ,由上可见 ,超声处理 30 min 可基本将样品中五味子醇甲提取完全 ,而且时间相对较短 ,故选择超声处理时间为 30 min。参考文献 :[ 1 ] 　王怡君 ,郭兰建 ,周文生 ,等1 HPLC 法测定中风康丸中五味子醇甲的含量[J ]1 中草药 ,1990 ,30 (7) :5111
HPLC法测定黄连明目丸中盐酸小檗碱
苏 　亚1 ,卢 　敏2 3
(11 台州市黄岩区红十字医院 ,浙江 台州 318020 ;21 浙江永宁药业股份有限公司 ,浙江 台州 318020)
　　黄连明目丸由黄连、决明子、五味子等组成 ,具
有滋肾明目、平肝熄风功效 ,用于肝肾亏虚 ,视力模
糊 ,畏光流泪等。黄连为该方君药 ,盐酸小檗碱为其
主要活性成分 ,具清热解毒作用。本实验拟测定制
剂中盐酸小檗碱以控制产品质量。
1 　仪器与试药
　　Agilent1100 液相色谱仪 , Agilent 1100 DAD
检测器 ;岛津 UV —260 紫外分光光度计。
　　盐酸小檗碱 (批号 1107132200805) 由中国药品
生物制品检定所提供。乙腈为色谱纯 ,其余为分析
纯。黄连明目丸样品由实验室自制 (批号 :080801、
080802、080803) 。
2 　方法及结果
211 　色谱条件[1 ] :色谱柱 Discovery C218 (250 mm ×
416 mm , 5 μm) ;乙腈 - 0105 mol/ L 磷酸二氢钾
(10 %氢氧化钾试液调节 p H 510) (30 ∶70) 为流动
相 ;检测波长为 350 nm ;体积流量 :1 mL/ min ;进样
量为 5μL 。
212 　对照品溶液的制备 :精密称取以五氧化二磷为
干燥剂减压干燥 24 h 的盐酸小檗碱对照品适量 ,加
甲醇制成 20μg/ mL 的溶液 ,即得。
213 　供试品溶液的制备 :取黄连明目丸适量研细 ,取
约 015 g ,精密称定 ,置 25 mL 量瓶中 ,加入盐酸2甲醇
(1 ∶100)适量 ,浸渍 30 min 后超声处理 30 min ,放冷 ,加
溶剂至刻度 ,摇匀 ,用微孔滤膜(0145μm)滤过 ,即得。
214 　空白试验 :取缺黄连样品按供试品制备法制
备 ,并取适量注入液相色谱仪 ,结果显示在盐酸小檗
碱相同保留时间处无吸收峰。见图 1。
215 　线性关系考察 :精密量取 21132μg/ mL 盐酸
小檗碱对照品溶液 1、2、4、6、8、10、12μL 注入液相
色谱仪 ,测定峰面积。以峰面积为纵坐标 ,进样量为
横坐标 , 得回归方程 Y = 01287 X + 01929 , r =
01999 5。显示盐酸小檗碱进样量在 21132 ～
255184 ng 有良好的线性关系。
216 　精密度试验 :取盐酸小檗碱对照品溶液 ,按以上色
谱条件重复进样 6次 ,测定 ,峰面积的 RSD为 117 %。
217 　稳定性试验 :取黄连明目丸供试品溶液 ,按以
上色谱条件 ,分别在 0、8、12、24、33 h 进样 ,测定盐
酸小檗碱峰面积 ,结果 RSD 为 111 % ( n = 5) ,显示
供试品溶液至少在 33 h 内稳定。
21 8 　重现性试验 :取批号080801黄连明目丸样品
(下转第 967 页)
·419· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
3 收稿日期 :2009202220
作者简介 :苏　亚 (1967 —) ,女 ,浙江黄岩人 ,主管中药师 ,毕业于北京中医药大学。Tel : 13575809997 　E2mail : 420068841 @qq. com