全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1171·
益母草注射液的毛细管电泳指纹图谱研究
苗文娟1，杨 蕾2，吴大蓉3，张鹏4，陈聪1，叶利明1
(1．四川大学华西药学院，四川成都610041；2．四川省食品药品检验所，四川I成都610036；3．成都市时代
药物制剂研究所有限公司，四川成都610031；4．Beckman公司上海办事处，上海200021)
摘 要：目的 建立益母草注射液的毛细管电泳指纹图谱。方法 以水苏碱峰为参照物峰，采用毛细管区带电泳法
建立益母革注射液指纹图谱。结果标示出益母草注射液中12个主要共有峰。结论所建立方法具有良好的重现
性与分离度，可为益母草注射液的质量控制提供依据。
关键词：益母草注射液；毛细管电泳；水苏碱；指纹图谱
中图分类号：R286．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)08—1171一04
FingerprintsofLeonurusheterophyllusInjectionw thcapillaryelectrophoresis
MIAOWen—juanl，YANGLei2，WUDa—ron93，ZHANGPen94，CHENon91，YELi—min91
(1．WestChinaSchoolofPharmacy，SichuanUniversity，Chengdu610041，China；2．SichuanProvinci lInstitute
forFoodandDrugControl，Chengdu610036，China；3．ChengduInstituteofTimesPharmaceuticalResearch，
Chengdu610031，China；4．StationofBeckman—CoulterompanyinShanghai，Shanghai200021，China)
Abstract：ObjectiveToestablishthefingerprintsmethodofcapillaryelectrophoresisf Leonurus
heterophyllusInjection．Methodsethodfcapillaryzoneelectrophoresiswasdevelopedtoestablishthe
fingerprintsofLeonurusheterophyllusInjectionw ththepeakofstachydrineasreference．ResultsFinger—
printsofLeonurusheterophyllusInjectionobtainedcontained12majorcommonpeaks．ConclusionThe
methodhasgoodreproducibilityandresolutionwhichanbeusedforthequalitycontrolofLeonurushetero-
phyllusInjection．
Keywords：LeonurusheterophyllusInjection；capillaryelectrophoresis；stachydrine；fingerprint
益母草为唇形科植物益母草Leonurushetero-
phyllusHoutt．的全草，是治疗妇科症之要药。益母
草注射液为益母草中有效成分制成的灭菌水溶液，
具有活血、调经的作用。指纹图谱质控技术是保证中
成药功效，实现中药现代化的一个重要方面。本实验
采用高效毛细管电泳法(HPCE)对益母草注射液指
纹图谱进行了研究，以期更科学地对其质量进行控
制。
1仪器与试剂
P／ACEMDQ毛细管电泳仪(Beckman—Coul—
ter公司)；旋转蒸发仪(de海申顺生物科技有限公
司)；干分之一电子天平(北京赛多利斯仪器系统有
限公司)，PHS一25型pH计(上海精密科学仪器有
限公司)。
益母草注射液由成都制药一厂提供；水苏碱对
照品由四川省药品检验所提供；硼砂、硼酸、异丙醇
等试剂均为分析纯(成都化学试剂厂)；乙腈、甲醇为
色谱纯，实验用水为去
0．45tLm微孑L滤膜滤过。
2方法与结果
离子水；所用试剂均通过
2．1 溶液的制备：精密称取水苏碱对照品10．0
mg，置于50mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得对
照品溶液。益母草注射液作为供试品溶液采取直接
进样。
2．2 色谱条件：Beckman—Coulter公司未涂层石英
毛细管(57cm×75肛m，有效长度为50cm)；检测波
长：207nm；运行电压：20kV；柱温：24℃；以50
mmol／L硼砂～50mmol／L硼酸(1：1，1mol／L
NaOH调pH值至9．5)一0．5mmol／LSDS为背景电
解质；进样：2．0kPa，2S。
2．3参照物峰的确定：将水苏碱对照品溶液和益母
草注射液在毛细管电泳仪上分别进样，对比迁移时
间可知2号峰为水苏碱。在供试品溶液中加入水苏
碱对照品溶液，进样分析，结果水苏碱的电泳峰增
收稿日期：2006—11一03
作者简介：苗文娟(1983一)，女，河北人，在读硕士，药物分析专业，主要研究方向为仪器及药物分析。
Tel：(028)8550230sE—mail：miaojuan2004@sohu．corfl
万方数据
·1172· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月
益。水苏碱峰与相邻峰分离良好，且在207nm波长
处有较大吸收，故选作参照物峰。
益母草注射液的毛细管电泳分离图谱见图1，
共确认了12个主要共有峰，在35rain内完成分离。
12
．——』!，一一5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 602一水苏碱2-stachydrine
图1益母草注射液的毛细管电泳图谱
Fig．1CapillaryelectrophorogramofLeonurus
heterophyllusInjection
2．4方法学考察
2．4．1稳定性试验：取批号040805的益母草注射
液供试品溶液分别于0、2、4、8、24h进样测定，计
算，结果主要共有峰迁移时间RSD均小于0．76％，
峰面积RSD均小于3．87％。
2．4．2精密度试验：取批号040806的益母草注射
液供试品溶液连续进样5次，进样测定，计算，结果
各峰迁移时间RSD均小于0．37％，峰面积RSD均
小于4．15％。
2．4．3重现性试验：取批号040810的益母草注射
各峰迁移时间RSD均小于0．87％，峰面积RSD均
小于4．45％。
2．5样品测定：取12批益母草注射液，分别按上述
电泳条件测定，以水苏碱峰为参照峰，规定其相对迁
移时间和相对峰面积为1．000，指纹图谱中12个主
要共有峰见图2，相对迁移时间和相对峰面积分别
见表1，2。因此制定了益母草注射液标准指纹图谱
的技术参数，共有峰的峰号(相对迁移时间)：1
(O．489)、2(1．oo)、3(1．664)、4(1．780)、5(1．969)、7
(2．343)、8(2．687)、9(2．809)、10(2．866)、11
(3．307)、12(4．542)。
0．00 070 17-3926．09 34．78 43．48 52．17 60．87
t／min
图2益母草注射液的指纹图谱的比较
液，分别在本实验室和四川省药品检验所分析测试 Fig．2FingerprintscomparisonofLeonu旭s
室进行检测，各重复进样5次，结果10次进样所得heterophyllusInjection
表1益母草注射液指纹图谱中共有峰的相对迁移时间
Table1 RelativemigrationmeofcommonpeaksforLeonurusheterophyllusInjectioninfingerprint
3讨论
为获得良好的重现性，经常更换背景电解质和
充分清洗毛细管柱至关重要。因此每运行5次试验
之后更换新的缓冲液；背景电解质中含表面活性剂
SDS，故清洗步骤中不需用0．1mol／LNaOH，但
SDS容易吸附在毛细管壁上，因此每次运行时，依
次用去离子水、甲醇、去离子水、相应缓冲液各冲洗
2rain。
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1173·
考虑到供试品溶液与背景电解质的离子强度有
差异可能会对分离有影响，因此考察了以益母草注
射液直接进样、益母草注射液用背景电解质稀释一
倍进样以及益母草注射液蒸千后用背景电解质溶解
稀释进样的重现性，结果供试品溶液与背景电解质
的离子强度差异不会对分离有显著影响，故选择直
接进样。这可能是因为进样量与毛细管中所充缓冲
液体积相比所占比例很小。
背景电解质的种类、pH值、浓度对分离的影
响：磷酸盐由于制备工艺的影响，含金属离子较多，
且分离所需时间长，往往分离效果远不如硼酸盐缓
冲液。缓冲液pH值对迁移时间影响的总趋势是pH
升高，迁移时间缩短，这主要是由于在高pH值溶液
中，毛细管壁的硅醇基离鳃加强，电荷数增加，Zeta
电势增加，从而使电渗速度加快，但pH值过高，迁
移速度过快，会导致分离度降低。随着缓冲液浓度的
增加，离子强度增加，降低双电层厚度，从而导致
Zeta电势下降，电渗速度降低，使分离度增加。但缓
冲液浓度太高，则电流大，产生焦耳热过多，反而导
致分离度明显下降。
分离电压、柱温和进样量对分离的影响：通常在
不产生过多焦耳热的前提下，使用尽可能高的分离
电压，以实现最大分离度和最短分析时间。实验证
明，20kV分离效果最好。温度每改变1℃，将改变
黏度2％～3％，因此影响电渗。考察后发现以24℃
分离效果最好。增大进样量会导致区带扩散，使柱效
下降，分离度降低。本实验证明，适当减小进样量可
以大大改善分离效果。
背景电解质中添加剂对分离的影响：添加有机
改性剂会改变Zeta电势和电渗，但其造成的影响很
复杂。实验证明，加入有机添加剂不会改善分离。背
景电解质中加入阴离子表面活性剂SDS可能增加
电渗，使总的分离时间缩短，考察后发现加入0．5
mmol／LSDS分离效果大大改善。
12号峰拖尾较严重，一直未能解决，其可能原
因是硼酸离子与益母草中所含某些成分形成配合物
所致，拟对其详细原因进一步研究。
电泳条件的选择：采用PDA检测器进行波长
扫描，在207rim波长处出峰数目最多，且水苏碱对
照品在此波长下有较大吸收，因此确定检测波长为
207nm。比较了75、50弘m毛细管，发现75弘m内径
的分离效果远远好于50肛m内径的毛细管。在选择
背景电解质种类时，首先比较磷酸缓冲液和硼砂盐，
结果以硼砂盐为背景的电解质的重现性好。又比较
了硼砂盐和硼砂一硼酸混合液，结果后者的分离效果
好；再加入适量的十二烷基磺酸钠(SDS)，分离度变
好，故选择添加0．5mmol／LSDS的硼砂一硼酸缓冲
液为背景电解质。比较pH为8．5、9．0、9．5、10．0、
10．5、11．0的背景电解质，结果以pH9．5分离效果
最好。分别配制30mmol／L硼酸一30mmol／L硼砂、
40mmol／L硼酸一40mmol／L硼砂、50mmol／L硼
酸一50mmol／L硼砂、80mmol／L硼酸一20mmol／L
硼砂、60mmot／L硼酸一60mmol／L的背景电解质，
结果以40mmol／L硼酸一40mmol／L硼砂时分离效
果最好。对12～25kV电压进行考察，分离结果以
20kV分离效果最好。对18～30℃柱温进行考察，
以24℃分离效果最好。分别选择进样为3．4kPa，5
S；3．4kPa，4S；2．7kPa，3S；2．1kPa，2S；2．1kPa，
3S，结果以进样为2．1kPa，2S时分离效果最好。
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怀菊花挥发性成分的GC指纹图谱研究
刘 伟1，邢志霞2，陈志红1，王东1
(1．河南中医学院分析测试中心，河南郑州450008；2．漯河医学高等专科学校，河南漯河462002)
摘 要：目的建立怀菊花挥发性成分的GC指纹图谱分析方法。方法采用GC法。色谱柱：HP一5(5％)一二苯基
聚硅氧烷共聚物，毛细管柱(30．0m×320p．m，0．25um)；检测器：氢焰离子化检测器(FID)；检测器温度：180℃；
载气：氮气；载气流量：2．3mL／min；空气流量：300mL／min；氢气流量：30mL／min；程序升温。建立怀菊花的GC指
纹图谱。结果 确定了怀菊花的GC指纹图谱中27个共有峰，各怀菊花样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在
0。9以上。结论此方法简单、准确、重现性好，为怀菊花的质量控制标准提供了有效的方法。
关键词：怀菊花；挥发性成分；气相色谱法；指纹图谱
中图分类号：R286．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)08—1174—04
GCFingerprintanalysisofvolatileoilinHuaiChrysanthemummorifoliuminHenanProvince
LIUWeil，XINGZhi—xia2，CHENZhi—hon91，WANGDon91
(1．CenterofAnalysisandMeasurement，HenanColl geofTraditionalChineseMedicine，Zhengzhou450008，China；
2．LuoheMedicineCollege，Luohe462002，China)
Abstract：ObjectiveToestablisha methodoffingerprintanalysisonHuaiChrysanthemummori—
foliuminHenanProvincebvGC．MethodsTheGCmethodwasappliedwitha fibercolumn(30m×
320btm，0。25um)coatedwithHP一5(5％)一diphenypolysiloxane．ThedetectorwasFIDdetector；Thetem—
peratureofthedetectorwas180℃；Nitrogenwasusedasthecarriergaswithitsflowrate2．3mL／rain；
Theflowrateofatmospherewas300mL／min，andtheflowrateofhydrogenwas30mL／minntempera—
tureprogrammer．ThefingerprintofHuaiC．morifoliuminHenanProvincewasstablished．Results
Twenty—sevencommonpeakswerefoundinGCfingerprintofHuaiC．morifoliuminHenanProvinceand
goodsimilaritieswithcorrelationcoefficientsover0．9werefoundinthefingerprintscomparedbetweenthe
fingerprintofHuaiC．morifoliuminHenanProvincefromdifferentsourcesandstandardfingerprint．
ConclusionThemethodiSaccuate，simple，andcanbeuseforthequalitycontr01ofHuaiC．morifoli—
uminHenanProvince．
Keywords：HuaiChrysanthemummorifoliumRomat．inHe anProvince；volatileoil；GC；fingerprint
菊花为菊科植物菊花Chrysanthemummorifo—
liumRomat．的干燥头状花序，味甘、微苦，微寒，无
毒，入肝、肺经，质轻气清，甘凉益阴，苦凉泄热‘1|，具
有清肝明目、清热解毒、疏风降压等功效。菊花中含
有多种挥发性成分和黄酮类、绿原酸、木犀草素、水
苏碱等非挥发性成分。菊花以河南古怀庆府，今温
县、武陟等地所产怀菊花品质优良，自古形成道地药
材。本实验采用气相色谱法建立了怀菊花挥发性成
分的指纹图谱分析方法，操作性强，重复性好，可为
控制怀菊花的质量提供参考。
收稿日期：2006—10—12
基金项目：河南省教育厅科学研究项目(2003350178)
作者简介：刘伟(1955一)，男，教授，硕士生导师，主要从事中药和药物分析的教学、科研工作。
万方数据
益母草注射液的毛细管电泳指纹图谱研究
作者： 苗文娟， 杨蕾， 吴大蓉， 张鹏， 陈聪， 叶利明， MIAO Wen-juan， YANG Lei， WU
Da-rong， ZHANG Peng， CHEN Cong， YE Li-ming
作者单位： 苗文娟,陈聪,叶利明,MIAO Wen-juan,CHEN Cong,YE Li-ming(四川大学华西药学院,四川,成
都,610041)， 杨蕾,YANG Lei(四川省食品药品检验所,四川,成都,610036)， 吴大蓉,WU
Da-rong(成都市时代药物制剂研究所有限公司,四川,成都,610031)， 张鹏,ZHANG
Peng(Beckman公司上海办事处,上海,200021)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(8)
被引用次数： 6次

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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200708017.aspx