全 文 ：·1670· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第1l期2006年11月
HPLC法测定蒺藜提取物中原薯蓣皂苷
惠玉虎，强妮，寇玉锋，杨建莉
(西安皓天生物工程技术有限责任公司，陕西西安 710075)
蒺藜，别名刺蒺藜、白蒺藜、硬蒺藜，为蒺藜科植
物蒺藜TribulusterrestrisI。．的干燥成熟果实，分布
于全国各地，在长江以北最普遍。蒺藜味苦辛，性温，
有平肝解郁、活血祛风、明目、止痒功能，用于头痛眩
晕，目赤多泪，皮肤瘙痒，胸胁胀闷，经闭瘕瘕口’2]。蒺
藜中含有甾体皂苷。从蒺藜中提取的原薯蓣皂苷
(protodioscin)能增强性欲，提高性功能[3“]。HPI。C—
EI。SD和RP—HPI。C检测蒺藜提取物中原薯蓣皂苷
已有相关报道n“]。本实验采用高效液相色谱梯度洗
脱法对蒺藜提取物中原薯蓣皂苷检测方法进行研
究，为进一步研究原薯蓣皂苷提供方法依据。
l仪器与试药
Waters1525型高效液相色谱仪，Waters2996
二极管阵列检测器，Empower色谱工作站(美国
Waters公司)。KQ一250DE型数控医用超声波清洗
仪(昆山市超声仪器有限公司)，SartoriousBP211D
型电子分析天平(瑞士Sartorious公司)。
原薯蓣皂苷(3z海和杰科技有限公司提供，质量
分数为98％)，蒺藜提取物为西安皓天生物工程技
术有限责任公司生产。乙腈为色谱纯，甲醇为分析
纯，水为二次重蒸水。
2方法与结果
2．1色谱条件与系统适用性：色谱柱：IntersiloDS一
3(150mm×4．6mm，5弘m)；流动相：乙腈一水；梯
度洗脱条件：0min，30％A(70％B)，30min，55％A
(45％B)；运行时间：35rain；柱温：室温；检测波长：
203nm；体积流量：1．0mI。／min；进样量：lO弘I。。在
此条件下，原薯蓣皂苷保留时间约10rain。原薯蓣皂
苷与其他组分达到基线分离，分离度>1．5。理论塔板
数按原薯蓣皂苷计大于3000。色谱图见图1。
2．2对照品溶液配制：精密称取原薯蓣皂苷对照品
5．39mg于25mI。量瓶中，加甲醇溶解并加至亥Ⅱ
度，即得0．2156mg／mI。对照品储备液。
2．3 供试品溶液制备：精密称取蒺藜提取物约50
mg于50mL量瓶中，加甲醇约40mI。，超声20
min，静置至室温后加甲醇至刻度，用0．45肛m微孑L
收稿日期：2006—02—16
0 10 20 30 0 10 20 30
*一原薯预皂苷
*一protodioscin
图1 原薯蓣皂苷对照品(A)和蒺藜提取物(B)的
HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsofp otodioscinreference
substance(A)andT．terrestrisextract(B)
滤膜滤过，即得供试品溶液。
2．4线性关系考察：精密吸取原薯蓣皂苷对照品储
备液，用甲醇分别配制成质量浓度为0．0539、
0．0862、0．1078、0．1617、0．1725、0．1940mg／mI，
对照品溶液，各取20弘I。进样，测定峰面积值。以峰
面积为纵坐标，质量浓度为横坐标进行回归处理，得
到回归方程Y一997205X一14000，r一0．9995，表
明原薯蓣皂苷在0．0539～0．1940mg／mI。与峰面
积线性关系良好。
2．5精密度试验：取0．2156mg／mI。原薯蓣皂苷
对照品储备液，连续进样6次，测定峰面积，计算
RSD为1．03％。
2．6重现性试验：精密称取同一批蒺藜提取物样品
适量，按供试品溶液制备方法制备6份，依法测定。
结果原薯蓣皂苷的平均质量分数为16．43％，RSD
为0．93％。
2．7稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液每隔2
h进样测定原薯蓣皂苷峰面积，计算RSD为
0．65％。结果表明供试品溶液在12h基本稳定。
2．8加样回收率试验：采用加样回收法。精密称取
含原薯蓣皂苷1．40％的蒺藜提取物约0．1g，加
0．2156mg／mL原薯蓣皂苷对照品储备液8mL，制
备供试品溶液，依法测定，计算，结果平均回收率为
99．25％，RSD为0．98％(，z一5)。
2．9样品的测定：精密称取蒺藜提取物5批，按供试
，
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万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1671-
品溶液制备方法制备，测定。每批样品测定3份，按外
标法计算原薯蓣皂苷质量分数，测定结果见表1。
表1蔟藜提取物中原薯蓣皂苷的测定结果(疗=3)
Table1 ProtodioscininT．terrestrisextract(一：=3)
3讨论
3．1 检测波长的选择：将原薯蓣皂苷对照品储备液
在紫外分光光度计上于200～700nm进行波长扫
描，结果原薯蓣皂苷在203nm处有特征吸收，因此
确定203nm为原薯蓣皂苷的检测波长。
3。2洗脱条件的选择：采用高效液相色谱等度洗脱
时，流动相比例为35％乙腈水溶液，由于原薯蓣皂
苷结构式中只含有一个双键，因此，在203nm处吸
收值很小，色谱峰面积也很小，色谱峰分离效果不
好。而采用高效液相色谱梯度洗脱法时，虽然基线有
波动，但色谱峰能够达到很好的分离，并且色谱峰面
积稳定。因此宜采用梯度洗脱法进行测定。
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雷公藤叶提取物高效液相色谱指纹图谱的研究
李 克，王曙东，陈 爽
(南京军区南京总医院检验中心，江苏南京 210002)
雷公藤TripterygiumW?怕一iiHook．F．系卫
矛科雷公藤属植物，主产于浙江、江西、福建、广东、
安徽等地。主要含有二萜、三萜、倍半萜、生物碱及苷
类、糖类、醇类和微量元素等成分。具有抗肿瘤、抗炎
以及免疫抑制等药理活性。雷公藤提取物研制的制
剂用于治疗类风湿性关节炎、白血病、肾病综合症、
肿瘤等取得了较好的疗效并已被广泛认可口“]。雷
公藤含有许多毒性成分，在临床应用上仍会经常发
生不良反应[5矗j。因此，需要对雷公藤药材进行整体
质量的综合控制。研究开发新型、低毒剂型显得十分
必要。指纹图谱分析是近年发展起来的对中药及其
制剂进行综合宏观分析和质量控制的可行手段，现
已成为控制中药质量的有效方法[7’8]。
本实验采用HPI。C法研究了采收于不同季节
的雷公藤叶提取物的色谱指纹图谱，并利用色谱相
对峰面积和相对保留时间作为参数，比对了不同季
节的雷公藤叶之间的异同，为合理开发利用雷公藤
药材提供了参考。
收稿日期；2006—01—18
基金项目；江苏省“六大人才高峰课题”基金资助项目(06一B一028)
1材料
Integral100高效液相色谱仪系统(美国Perkin
Elmer公司)。N一2000色谱数据工作站(浙江大学
智能信息工程研究所)。雷公藤甲素对照品(批号：
1566—200201)购自中国药品生物制品检定所。雷公
藤叶药材购自浙江省永康市，其采收期分别为夏季
(7月)和冬季(12月)，经南京军区南京总医院王玉
玺副主任药师鉴定。D一101大孔吸附树脂购自天津
海光化工有限公司。储备液制备：精确称取雷公藤甲
素对照品5mg，加少许甲醇溶解后，以流动相确定
容至5m1．，摇匀，置4C冰箱保存。
流动相采用色谱纯级乙腈配制。其余试剂均为
分析纯级试剂，试验用水均使用超纯净水。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：LichrospherC，。高效液相
色谱分离柱(250mmX4．6mm，5肛m)(江苏汉邦科
技有限公司)；流动相：乙腈一水(39：61)；检测波长：
210nm；体积流量：0．80m1。／min；定量管体积：20
万方数据
HPLC法测定蒺藜提取物中原薯蓣皂苷
作者： 惠玉虎， 强妮， 寇玉锋， 杨建莉
作者单位： 西安皓天生物工程技术有限责任公司,陕西,西安,710075
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(11)
被引用次数： 1次
参考文献(6条)
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引证文献(1条)
1.张静赟.李炜.杨飞快.朱清风 蒺藜全草中甾体皂苷和总黄酮醇苷量的研究[期刊论文]-中草药 2010(5)
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200611028.aspx