全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月·1019·
测定，计算得样品中欧前胡素和异欧前胡素的平均
质量分数为0．27、0．34mg／g，其RSD分别为
0．20％、0．42％。
2．7稳定性试验：取供试品溶液每隔2h进样1
次，每次进样10肛L，共进样6次，测定峰面积积分
值，计算得欧前胡素峰面积的RSD为0．31％，异欧
前胡素峰面积的RSD为1．18％，表明10h内供试，
品溶液的稳定性良好。
2．8 回收率试验：采用加样回收法。取批号030906
元胡止痛片2．000g，共6份，分别加入0．4mg／mL
欧前胡素和异欧前胡素对照品溶液1mL，制备供试
品溶液，进样10弘L，测定，计算回收率。结果欧前胡
素的平均回收率为99．5％，RSD为1．79％，异欧前
胡素的平均回收率为99．9％，RSD为1．77％。
2．9样品测定：取元胡止痛片，每批次各3份，制备
供试品溶液，进样10肛L，测定欧前胡素和异欧前胡
素的峰面积，采用外标法计算样品中两者的质量分
数，结果见表1。
裹I元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素的测定结果
Table1 Determinationofimperatorinandtsoimperatorin
inYuanhuZhitongTablets
3讨论
经日立U一3310分光光度计紫外区域内扫描，
发现欧前胡素和异欧前胡素在300nm波长处有最
大吸收，故本实验选用的检测波长为300nm。
由于白芷的有效成分欧前胡素和异欧前胡素的
极性较小，采用正相高效液相色谱法，流动相选用非
极性溶剂时，对高压泵垫的腐蚀较大，且条件苛刻，
因此本实验采用反相色谱法，以甲醇一水(70：30)为
流动相，能有效克服以上缺点，且操作更简便，灵敏
度也高。
在优化色谱条件过程中，甲醇与水的配比分别
采用75：25、70：30、68：32，结果发现75：25时
氧化前胡素峰与欧前胡素峰部分重叠口]，68：32时
目标峰的保留时间过长，只有当70：30时，欧前胡
素色谱峰与异欧前胡素的色谱峰保留时间恰当，峰
形也好。
供试品溶液的配制中超声处理时，进行了20、
30、40、50min提取，结果发现提取40min时有效成
分的量最高。
实验中发现欧前胡素对照品的HPLC色谱峰
不是单一峰，而是氧化前胡素和欧前胡素的混和物。
对欧前胡素的定量只能通过两者峰面积积分值之比
计算出所称对照品中欧前胡素所占的质量比，以此进
行计算，或需采用制备高效液相色谱重新制备欧前胡
素对照品，分得单一峰，按例行方法计算。不过需新鲜
配制，现用现配。本实验选用前一种方法计算。
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高效液相色谱法测定骨仙片中柚皮苷
李玉仿，林月英
(天津市大港区药品检验所，天津300270)
骨仙片是由骨碎补、熟地黄、黑豆、女贞子等9味
药材制成的中药制剂，收载于《中华人民共和国卫生
部药品标准》中药成方制剂第4册。但原标准仅有一
般鉴别和检查项，缺乏定量检测方法。骨仙片具有填
精益髓、壮腰健肾、强壮筋骨、舒筋活络、养血止痛的
收稿日期：2006—10一16
功效，其君药为骨碎补。结合骨仙片制备工艺主要是
水提取，骨碎补主要是以柚皮苷为主的水溶性成分，
本研究建立了骨仙片中柚皮苷的HPLC测定方法。
1仪器与试药
岛津LC--2010AHT高效液相色谱仪，LC—
万方数据
·1020· 中草|骞ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月
Solution色谱仪工作站。柚皮苷对照品(中国药品生
物制品检定所，批号110722—200309)，甲醇、冰醋酸
均为色谱纯，水为纯化水。骨仙片为自制。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：DiamonsilC18(250mm×
4．6mm，5弘m)；流动相：甲醇一冰醋酸一水(34：4：
66)；检测波长：283nm；体积流量：1．0mL／min；进
样量：10扯L。
2．2溶液的制备
2．2．1对照品溶液的制备：精密称取在110℃干燥
至恒重的柚皮苷对照品9．4mg，置50mL量瓶中，加
甲醇至刻度，摇匀，作为对照品贮备液(188弘g／mL)。
精密量取贮备液3mL，置10mL量瓶中，加甲醇至
刻度，摇匀，即得(含柚皮苷56．4弘g／mL)。
2．2．2供试品溶液的制备：取本品20片，研细，精
密称取约3．60g，加甲醇30mL，加热回流3h，放
冷，滤过，滤液置50mL量瓶中，用少量甲醇分数次
洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀，即得。
2．2．3空白对照溶液的制备：按处方比例及制备工
艺制成不含骨碎补药材的空白样品，按供试品溶液
的制备方法制成空白对照溶液。
2．3干扰性考察：分别吸取对照品溶液、供试品溶
液和空白对照溶液，按上述色谱条件进样测定，结果
空白对照溶液在柚皮苷峰位置上没有干扰。见图1。
A · u B I C
4 ‰： ’‰
0 10 20 30 10 20 30U 10 20 30
t／min
*一柚皮苷
*一naringin
图1柚皮苷对照品(A)、骨仙片(B)和阴性对照(c)的
HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfnaringinreference
substance(A)，GuxianTablets(B)，and
negativesample(C)
2．4线性关系的考察：取188弘g／mL柚皮苷对照
品贮备液，分别精密吸取1、2、3、4、5、10mL，置lo
mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。进样测定，记
录峰面积。以柚皮苷的质量浓度为横坐标，峰面积为
纵坐标，得回归方程：Y一2593．7X+18866．3，r一
0．999。结果表明柚皮苷在18．8～188pg／mL与峰
面积的线性关系良好。
2．5精密度试验：取供试品溶液，重复进样5次，测
定柚皮苷峰面积，计算，结果其RSD为0．6％。
2．6重现性试验：取批号H01004样品6份，制备
供试品溶液，进样测定，计算柚皮苷的质量分数，结
果柚皮苷的平均质量分数为0．353mg／g，RSD为
0．9％。
2．7稳定性试验：取批号H01004样品制备供试品
溶液，分别于0、2、4、6、8h测定柚皮苷峰面积，计算
得其RSD为0．7％。结果表明供试品溶液在8h内
是稳定的。
2．8 回收率试验：精密称取批号H01004样品约
1．80g，共6份，分别精密加入0．2102mg／mL柚皮
苷对照品溶液3mL，制备供试品溶液，测定，计算得
柚皮苷的平均回收率为100．8％，RSD为1．4％。
2．9样品测定：分别精密吸取柚皮苷对照品溶液和
骨仙片供试品溶液各10弘L，注入液相色谱仪，测定
峰面积，计算柚皮苷的质量分数，结果见表1。
表1骨仙片中柚皮苷的测定结果(糟=3)
Table1 Determinationofnari gininGuxianT blets
(一一3)
批号 柚皮苷／(mg·g-1)
05023202
H01002
H01004
3讨论
将样品放人50mL量瓶中加甲醇适量，超声处
理60rain，放冷，加甲醇至刻度，滤过，即得供试品
溶液。将样品加入30mL甲醇，加热回流3h，放冷，
滤过，滤液置50mL量瓶中，用少量甲醇分数次洗
涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，
即得供试品溶液。对2种提取方法进行比较后发现
超声提取方法虽然简单，但色谱图的基线不如加热
回流方法的好，导致重现性不太好，故采用加热回流
法提取样品较好。
骨仙片为临床常用药，现行质量标准只规定了
一般鉴别和检查项，没有定量的控制，本实验采用高
效液相色谱法测定该药组方中的主药骨碎补的成分
柚皮苷的量，达到有效控制该药的质量。该方法具有
灵敏准确、重现性好的特点，适于该药的质量控制。
万方数据
高效液相色谱法测定骨仙片中柚皮苷
作者： 李玉仿， 林月英
作者单位： 天津市大港区药品检验所,天津,300270
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(7)
被引用次数： 5次

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引证文献(5条)
1.朱克.吴立成.周玲娜 HPLC法测定抗骨增生片中柚皮苷[期刊论文]-中草药 2010(6)
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4.唐红英.谭浩军.刘灿辉 感冒止咳颗粒质量标准研究[期刊论文]-临床合理用药杂志 2011(14)
5.高颖.房德敏.周永梅.潘雪梅 骨碎补在中药复方制剂中应用情况的综合分析[期刊论文]-天津药学 2009(1)


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