全 文 ：·552· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
药理与临床
苦参碱对压力超负荷大鼠心室重构的影响
韩向东，彭秀文，徐珊琚，郭 娟，顾伟梁，陈长勋+
(上海中医药大学中药学院，上海201203)
摘要：目的探讨苦参碱抗压力超负荷大鼠心室重构的作用及其作用机制。方法用腹主动脉缩窄方法复制大
鼠压力超负荷心室重构模型。设假手术组，模型组，苦参碱大、中、小剂量(63、31．5、15．75mg／kg)组及阳性药(美
托洛尔36mg／kg、卡托普利13．5mg／kg)组。给药3．5个月后测量一fi,率(HR)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压
(DBP)、平均动脉压(MAP)、左心室内压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)、左室内压上升下降最大速率(±
dp／dt。。；计算左心室质量／体重(LVW／BW)、右心室质量／体重(RVW／BW)、全心室质量／体重(HW／BW)；用放
射免疫方法测定左心室心肌肾素活性(RA)及血管紧张素I(AngI)的量；用免疫组织化学方法测定左心室心
肌I和Ⅲ型胶原蛋白的量；用逆转录一聚合酶链反应法(RT—PCR)测定左心室心肌心房利钠肽(ANP)mRNA、转
化生长因子一61(TGF一61)mRNA的表达。结果苦参碱能显著降低压力超负荷致心室重构大鼠的LVw／Bw、
Hw／BW，改善血流动力学参数，降低左心室心肌RA及AngI的量，降低左心室心肌I和Ⅲ型胶原蛋白的表达，
降低左心室心肌ANPmRNA、TGF一61mRNA的表达。结论苦参碱具有抑制实验性心室重构的作用，其机制与抑
制心肌肾素一血管紧张紊一醛固酮系统(RAAS)激活，降低左心室心肌ANPmR A及TGF一61mRNA的表达有关。
关键词：苦参碱；心室重构；肾素一血管紧张素一醛固酮系统(RAAs)；胶原蛋白；基因表达
中圈分类号：R286．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)04—0552—07
Effectofmatrineo v ntricularremodelinginpress—overloadrats
HANXiang—dong，PENGXiu—wen，XUShan—jun，GUoJuan，GUWei—liang，CHENChang—xun
(CollegeofChineseMateriaMedica，ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai201203，China)
Abstract：ObjectiveToinvestigatetheffectandmechanismsofmatrineo ventricularremodeling
inpress—overloadratsinvivo．MethodsThepress—overloadventricularremodelingwasinducedby
abdominalaorticbandingrats．Ventricularemodelingmodelratswererandomlydividedintothe
followinggroups：Shamgroup，press-overloadm d lgroup，Metoprololgroup(36mg／kg)，Captopril
group(13．5mg／kg)andmatrinegroupswithvariousdosages63，31．5，and15．75mg／kg)．After
administrationofthetesteddrugsfor3．5months，HR，SBP，DBP，MAP，LVSP，LVEDP，and±d痧／
d￡。；wereecorded．Theleftventricularreninctivity(RA)andthecontentofAngⅡweremeasured
usingradioimmunityassay．ThecontentoftypeI andⅢcollageninleftve tricleweredeterminedusing
immunohistochemicalanalysis．TheratiosofLVW／BW，RVW／BW，andH ／BWwerecalculated．The
mRNAexpressionlevelsofANPandTGF一81inleftventricleweredeterminedbyRT—PCR．ResultsThe
experimentaldatademonstratedth matrinecouldsignificantlydecreasetheratiosofLVW／BWandHW／
BW，reduceRAandtheAngⅡcontentinl ftventricularm scle，decreasetheprot inxpressionoftype
I andⅢcollagen，lessenthemRNAexpressionlevelsofANPandTGF一61inleftventricle．Conclusion
Matrinecouldsignificantlyattenuatethexperimentalve ricularremodeling．Themechanismisrelated
withitsabilitytOinhibittheactivationofrenin—angiontensin—aldosteronesystem(RAAS)andalso
associatedwiththereductionofthemRNAexpressionlevelsofANPandTGF一81intheleftventricle．
Keywords：matrine；ventricularremodeling；renin—angiotensin—aldosteronesystem(RAAS)；
collagen；geneexpression
苦参碱(matrine，MT)是苦参Sophora
fZa口escensAit．的重要成分，苦参碱具有较为广泛
的心血管药理作用，其中对抗心律失常、调血脂及正
性肌力作用的研究较为深入。体外研究发现苦参碱
牧藕日期：2006—11—03
基金项目；国家自然科学基金资助项目(30572379)；国家中医药管理局基金资助项耳(04DSZP30)
作者简介：韩向东(1970一)，男，中药药理博士，上海中医药大学方剂室讲师，研究方向为中药心血管药理及方剂配伍规律研究。
Tel：(021)51322186E—mail：hanxd555@163．corn
*通讯作者陈长勋Tel：(021)51322200E—mail：cxchen6@126．tom
万方数据
中草115ChineseTraditionalandHerbDrugs第38卷第4期2007年4月·553·
能抑制醛固酮、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的离体
心肌成纤维细胞的增殖[1’2]。为进一步了解苦参碱的
作用，本实验对苦参碱进行了抗压力超负荷诱导的
心室重构的研究，发现苦参碱具有抑制实验性心室
重构的作用。
1材料
1．1药品和试剂：苦参碱，质量分数98．89％，购自
西安飞达生物技术有限公司。美托洛尔片，批号
H32025391，阿斯利康制药有限公司。卡托普利片，
批号H31021353，上海衡山药业有限公司。血管紧
张素I(AngI)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)放射免疫
分析药盒，北京北方生物技术有限公司。考马斯亮蓝
蛋白测定试剂盒，南京建成生物工程研究所。I、m
型胶原蛋白免疫组化试剂盒，武汉博士德生物工程
有限公司。随机引物、溴化乙锭(EB)，博采生物技
术有限公司。Trizol，Giboc公司。TaqDNA聚合
酶，Giboc公司。M—MLV反转录酶、RNasin核酸酶
抑制剂，PROMEGA公司。焦碳酸二乙酯(DEPC)，
博采生物技术有限公司。4种三磷酸脱氧核苷酸
(dNTP)，北京天根生物科技有限公司。二硫苏糖醇
(DDT)，Amersco公司。DNA分子量标准参照物
(Marker)，北京天根生物科技有限公司。心房利钠
肽(ANP)兔抗大鼠多克隆抗体、转化生长因子一盆1
(TGF—t31)免抗大鼠多克隆抗体，SantaCruz公司。
p肌动蛋白(p-actin)小鼠抗大鼠单克隆抗体，武汉
博士德生物工程有限公司。
1．2溶液配制：0．02mol／L磷酸盐缓冲液(PBS)，
氯化钠8．5g、NaHzP042．8g、NaH2P040．4g，加
双蒸水至1000mL，调pH值为7．2～7．6。0．01
mol／L枸橼酸盐缓冲液：枸橼酸三钠(C。H。Na。O，·
2H。O)3g、枸橼酸(C6H。O，·H20)0．4g加双蒸水
至1000mL。上样缓冲液：溴酚蓝0．25％、二甲苯
青0．25％、甘油50％、EDTA·Na21mmol／L，pH
8．0。5×Tris一硼酸(TBE)缓冲液：Tris54g，硼酸
27．5g，并加入0．5mol／LEDTA(pH8．0)20
mL，稀释至1000mL，高温高压消毒。1．6％凝胶：
琼脂糖1．6g、5×TBE20mL加双蒸水至80mL，
煮沸溶解，冷却至60℃左右，加入饱和溴化乙锭
10弘L。DEPC处理水：0．5mLDEPC加于500mL
双蒸水中，室温下摇匀过夜，加热消毒后密封保存。
Z×SDS凝胶加样缓冲液：100mmol／LTris·Cl
(pH6．9)、200mmol／L二硫苏糖醇(DTT)、4％
SDS电泳级、0．2％溴酚蓝、20％甘油。
1．3动物：清洁级雄性SD大鼠，200～220g，上海
斯莱克试验动物有限公司，许可证号：SCXK(沪)
2003—0003。
1．4仪器：RM26000型八道生理记录仪，成都仪器
厂；OlympusBX51正置显微镜，日本Olympus公
司；同位素液闪仪，PerkinElmer公司。752紫外可
见光分光光度计，上海第三分析仪器厂。FR一200
紫外与可见光分析装置，上海复日科技。莱卡Jung
RM2050轮转切片机、莱卡HI--1210D摊片机、莱
卡HI一1210D烘片机，上海莱卡仪器有限公司。
Sigma2—16K冷冻离心机，Sigma公司。Centrifuge
5417R低温高速离心机，德国Eppendorf公司。
2方法
2．1 大鼠压力超负荷心室重构模型制备：按
Doering等口1方法行腹主动脉部分结扎术，造成持续
性血流阻力增加，心脏负荷加重，导致心室重构。取
200～220g的雄性SD大鼠，手术前12h禁食不禁
水，戊巴比妥钠按40mg／kgip麻醉，待角膜反射消
失后固定在手术台上，开腹，于右肾动脉上方用银铗
(银铗内径为0．6ram)不完全结扎腹主动脉，使腹
主动脉外径缩小为0．6mm，缝合腹壁，注射抗生素
防止感染。设假手术组，动物开腹后仅分离右肾动脉
上方腹主动脉，但不用银铗结扎，其余步骤与造模动
物相同。将造模动物随机分为6组，即模型组，苦参
碱大、中、小剂量组及阳性药(美托洛尔、卡托普利)
组。造模后第7天开始，苦参碱大、中、小剂量组分别
ig给予63、31．5、15．75mg／kg苦参碱水溶液，美托
洛尔组ig给予36mg／kg美托洛尔水溶液，卡托普
利组ig给予13．5mg／kg卡托普利水溶液，给药体
积均为5mL／kg，模型对照组ig给予同体积的蒸馏
水；连续给药3．5个月。
2．2测定指标：3．5个月后，禁食12h，分别将各组
大鼠称体重后，戊巴比妥钠按40mg／kgip麻醉，分
离左右颈动脉，分别插入注有50U／mL肝素钠溶
液的PE一50聚乙烯导管，通过压力换能器与
RM26000型八道生理记录仪相连，用RM6280C生
物信号采集处理系统记录心电图及压力变化。测量
心率(HR)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压
(DBP)、平均动脉压(MAP)、左心室内压(LVSP)、
左室舒张末期压(LVEDP)、左室内压上升下降最
大速率(-]-dp／dt。；)。血流动力学参数记录完毕后，
剪取心脏，去除结缔组织及血管，清洁滤纸吸干水分
后分别称取左心室(包括室间隔)、右心室(不包括
室间隔)湿质量。在冰浴环境下将左心室于长轴中
部偏下横断切成两段，将下段(含心尖的部分)放
万方数据
·554· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
入10％福尔马林溶液中固定。将上段左心室心肌
分为4份，每份100mg左右，冻存于液氮中，然后
移入一70℃冰箱内。
2．3苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠心重指数
的影响：计算左心室质量／体重(LVW／BW)、右心
室质量／体重(RVW／BW)和全心室质量／体重
(HW／BW)。
2．4苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠血流动力
学的影响：测量HR、SBP、DBP、MAP、LVSP、
LVEDP、±d多／d￡。；。
2．5苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室心
肌神经内分泌因子的影响：用放射免疫方法测定左
心室心肌肾素活性(RA)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)
的量。用考马斯亮蓝蛋白测定方法进行蛋白定量。
通过分析心肌中血管紧张素I(AngI)的产生
速率，测定心肌肾素活性(RA)。即同一份样品取双
份，一份让其直接与抗体反应，测其AngI的浓度，
称为对照管；另一份则在37℃温浴1h，再让其与
抗体反应，测其AngI的浓度，称作测定管。按下式
计算单位时间内AngI的产生速率，即为RA。
RA=(测定管浓度一对照管浓度)／样品温浴时间
2．6苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室心
肌I和Ⅲ型胶原蛋白的量的影响：用免疫组织化学
方法进行I和Ⅲ型胶原蛋白染色。切片烘烤，脱蜡脱
水。30％H。O。一份加蒸馏水10份混合，室温5～10
min以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。热修复抗原：
将切片浸入0．01mol／L枸橼酸盐缓冲液(pH6．0)
中，微波加热沸腾，间隔5～10min，反复1～2次，
冷却。磷酸盐缓冲液(PBS，pH7．2～7．6)洗涤1～
2次；滴加5％BSA封闭液，室温20min，甩去多余
液体，滴加一抗(I或Ⅲ型胶原蛋白一抗，1：100
稀释)，37℃孵育2h左右；PBS(pH7．2～7．6)洗
涤2min共3次；滴加试剂SABC，20～37℃放20
min；PBS(pH7．2～7．6)洗涤5min，共4次，充分
洗涤；滴加DAB显色液(1mL蒸馏水加显色剂A、
B、C各l滴)，显色5～30min。镜下控制反应时间。
自来水冲洗4次，蒸馏水洗1次，苏木素复染30S，
自来水冲洗即可，90％盐酸(分化胞浆中的苏木
素)冲洗，自来水冲净。然后依次浸入95％乙醇、无
水乙醇、二甲苯中30S，自然干燥后树胶封片。
切片在OlympusBX51型显微镜下观察并摄
片，采用Brilla等艮1描述的方法，用Lamage—
Proplus4．0图像分析系统对图片进行分析，每张标
本随机测量3个视野，测定I、Ⅲ型胶原面积占总面
积的比率，即胶原容积分数(CVF)。
2．7苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室心
肌ANPmRNA、TGF—B1mRNA表达的影响：用逆
转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)测定左心室心肌
ANPmRNA、TGF—B1mRNA的表达。
2．7．1左心室心肌组织RNA抽提：取左心室心
肌，每组取6个心肌标本，每个约100mg，在冰浴环
境中用剪刀剪碎，加入1mLTrizol，用玻璃匀浆器
在冰水中快速匀浆，移入1．5mLEppendorf管中，
22℃水浴中静置5min；加入氯仿0。2mL，颠倒混
匀后，22℃水浴中静置3min；离心(4℃，15000
r／min，15rain)，取上清液0．5mL移入另一1．5
mLEppendorf管中，加入0．5mL异丙醇，混匀，
22℃水浴中静置10min；离心(4℃，15000r／
min，10min)，弃上清，加入1mL4℃的用DEPC
水配制的75％乙醇溶液，离心(4℃，1000r／
min，5min)，弃上清，真空干燥5min，用40弘L
DEPC处理水溶解，4℃冰箱保存。
2．7．2RNA定量：提前30min预热紫外分光光度
计，双蒸水为对照管，调0和100，取上述抽提的样
本RNA各5弘L加入1mL双蒸水，充分混匀，加
入石英比色杯中，读260、280rim吸光度(A)值。当
A：。。。m／A。∞Ⅱm≥1．8时，方可使用。
2．7．3引物合成：引物由上海生工生物技术有限公
司合成。ANP引物：上游5-CAGGAAACGG—
AAAGATTGG一37；下游37一ATGAAGTAATG—
TGGCAGGGTC一57；P R产物长度528bp，退火温
度55℃。TGF一口1引物：上游5-GGCGGTGCT—
CGCTTTGTA一37；下游7一TTCCTCTGCCTTA—
TGTCCCGA一5’；PCR产物长度425bp，退火温度
55℃。p—actin引物：上游5’一CCGTAAAGACCTC—
TATGCCAACA一37；下游 3’一TCGTCCTCATG—
CTACTCAGGC一57；PCR产物长度230bp，退火温
度55℃。
2．7．4反转录(RT)：Eppendorf管中依次加入心
肌组织总RNA3}￡g，10mmol／LdNTP1pL，5×
buffer4弘L，DTT(100mmol／L)1弘L，RNAase抑
制剂(40U／L)1弘L，随机引物(100弘mol／L)1
弘L，加DEPC水至18pL，25℃静置10min，然后
在冰水中加入M—MLV反转录酶(200U／mL)1
弘L；37℃、50min，70℃、15min终止反应，合成的
cDNA4℃保存。
2．7．5聚合酶链式反应：Eppendorf管中依次加人
RT产物(cDNA)2pL，10×PCR缓冲液(含
万方数据
中革1|骞ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月·555·
M92+)4弘L，上下游引物各2弘L，TaqDNA聚合酶
0．4pL，10mmol／LdNTP1肛L，双蒸馏水29弘L。
94℃变性40S，退火60S，72℃延伸1min，ANP
的退火温度为55℃，最适循环数30个循环，TGF—
B。的退火温度为55℃，最适循环数30个循环，肛
actin的退火温度为55℃，最适循环数30个循环。
72℃延伸10min，得PCR产物，4℃保存。
2，7．6取上述PCR产物15弘L上样电泳(每上样
孔同时加入目的基因和看家基因各15肛L)，1．6％
琼脂糖凝胶电泳分离后，扫描仪扫描，储存于电脑中
进行扫描分析，计算目的基因RT—PCR产物荧光强
度与[3-actin产物荧光强度比值，作为目的基因
mRNA的相对量。
2．8统计学处理：所有数据以z土S表示，多个样本
均数间的比较采用单因素方差分析方法，两两比较
采用SNK法；若不符合方差分析条件时，采用
Kruskal—WallisH检验，两两比较采用Wilcoxon秩
和检验(先求出精确P值，与调整后的检验水准进
行比较，判断两组间有无统计差异)。
3 结果
3．1 对压力超负荷心室重构大鼠心重指数的影响：
与假手术组相比，模型组的LVW／BW及HW／BW
明显增高，差异显著(P托洛尔组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的
LVW／BW及HW／BW有明显降低，差异显著
(PRVW／BW没有明显增高(P>o．05)；与模型组相
比，美托洛尔组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量
组的RVW／BW没有显著差异(P>0．05)，见表1。
3．2对压力超负荷心室重构大鼠血流动力学的影
表1苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠心重指数
的影响(；土s，席一10)
Table1 Effectofmatrineo ratiosofLVW／BW，
RVW／BW，andHW／aWinpress—overload
ventricularremodelingrats(；士s，一一10)
与假手术组比较：4。P<0．01，与模型组比较：一P<0．01
44P<0．01wShamgroupi’‘P<0．01口smodelgroup
响：与假手术组相比，模型组的HR明显增高，差异
显著(P<0．05)。与模型组相比，苦参碱大剂量组的
HR明显降低，差异显著(P<0．05)；与模型组相
比，美托洛尔组、卡托普利组、苦参碱中剂量组、苦参
碱小剂量组的HR有所降低，但差异无显著意义
(尸>0．05)，见表2。与假手术组相比，模型组的SBP
明显增高，差异显著(P<0．05)；与模型组相比，美
托洛尔组、卡托普幂j组、苦参碱大剂量组、苦参碱中
剂量组的SBP明显降低，差异显著(P模型组相比，苦参碱小剂量组的SBP有所降低，但
差异无显著意义∽>0．05)，见表2。与假手术组相
比，模型组的DBP有所增高，但差异无显著意义
(P>O．05)；与模型组相比，美托洛尔组、卡托普利
组、苦参碱大剂量组、苦参碱中剂量组、苦参碱小剂
量组的DBP总体上有所降低，但差异无显著意义
(P>0．05)，见表2。与假手术组相比，模型组的
MAP显著增高，差异显著(P比，美托洛尔组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量
组的MAP有所降低，但差异无显著意义(P>
0．05)，见表2。与假手术组相比，模型组的LVSP显
著增高，差异显著(P洛尔组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的
LVSP有所降低，但差异无显著意义(P>0．05)，见
表2。与假手术组相比，模型组的LVEDP明显增
高，差异显著(P组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的LVEDP
有所降低，但差异无显著意义(P>0．05)，见表2。
与假手术组相比，模型组的士dp／dt=。明显降低，差
异显著(P托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的：kdp／dt=,；均明
显增高，差异显著(P相比，模型组的一dp／dt。。明显降低，差异显著
(P组，苦参碱大、中、小剂量组的--dp／dtma：均有所增
高，但差异无显著意义(P>0．’05)，见表2。
3．3对压力超负荷心室重构大鼠左心室心肌神经
内分泌因子的影响：与假手术组相比，模型组的左心
室心肌RA及AngⅡ水平明显增高，差异显著
∽组，苦参碱大、中、小剂量组的心肌RA及AngⅡ明
显降低，，差异显著(P3．4对压力超负荷心窒重构大鼠左心室心肌ANP
mRNA及TGF一母1mRNA表达的影响：与假手术
组相比，模型组的左心室ANPmRNA表达明显增
万方数据
·556· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
表2苦参碱对压力超负荷心塞重构大鼠血流动力学的影响(；土s，撵一8)
Table2 Effectofmatrineo hemodynamicsinpres —overloadventricularremodelingratsQ土s，一一8)
与假手术组比较：4P<0。05；与模型组比较：’P<0。05
4P表3苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室，厶肌
RA和AngⅡ的影响(量土s，n一10)
Table3 EffectofmatrineoRAandAngⅡ
inpressoverlandventricularremo—
delingrats(工土S，n=10)
与假手术组比较：48P44P<0．01vsShamgroupl。。P高，差异显著(P组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的左心室
ANPmRNA表达明显降低，差异显著(P见表4，图1。与假手术组相比，模型组的左心室
TGF—B1mRNA表达明显增高，差异显著(P<
0．01)；与模型组相比，美托洛尔组，卡托普利组，苦
参碱大、中、小剂量组的左心室TGF一81mRNA表
达明显降低，差异显著(P3．5 对压力超负荷心室重构大鼠左心室心肌I和
111型胶原蛋白的量的影响
3．5．1 I型胶原蛋白：①病理形态学观察：免疫组
化染色使心肌闻质的I型胶原纤维均呈现棕红色表
达，苏木素复染使细胞核为淡蓝色，细胞质不着色。
假手术组极少见棕红色I型胶原纤维表达，模型组
可见大量的棕红色的I型胶原纤维表达；美托洛尔
组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的心肌I型
胶原阳性表达较模型组为轻。②I型胶原蛋白半定
量分析：与假手术组相比，模型组的心肌I型胶原蛋
白的量明显增高，差异显著(P比，美托洛尔组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量
表4苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室心肌ANP
mRNA及TGF—plmRNA表达的影响G+s，n一6)
Table4 EffectofmatrineomRNAexpressionlevelsof
ANPandTGF—p1inpress—overloadventricular
remodelingratsG+s，n一6)
与假手术组比较：。。P44P<0．01JShamgroup；’’P<0．01口smodelgroup
卜假手术组 2一模型组 3一美托洛尔组 4一卡托酱利组
5～7一苦参碱(63、31．5、15．75mg／kg)组
1～Shamgroup2-modelgroup3-Metoprololgroup
4-Captoprilgroup5—7一matrine(63，31．5，
and15．75mg／kg)groups
图1苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室心肌
ANPmRNA表达的影响
Fig．1EffectofmatrineoANPmRNAexpression
inleftventricularm scleofpress—overload
remodelingrats
组的心肌I型胶原蛋白的量明显降低，差异显著
(Pd0．01)，见表5。
3．5．2 Ⅲ型胶原蛋白：①病理形态学观察：免疫组
化染色使心肌问质的Ⅲ型胶原纤维均呈现棕红色表
达，苏木素复染使细胞核为淡蓝色，细胞质不着色。
假手术组极少见Ⅲ型胶原纤维表达，模型组可见大
万方数据
中草1|sChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月·557·
1一假手术组 2一模型组 3一美托洛尔组4一卡托普利组
5～7一苦参碱(63、31．5、15．75mg／kg)组
1-Shamgroup2-modelgroup3-Metoprololgroup
4-Captoprilgroup5—7一matrine(63，31．5。
and15．75mg／kg)groups
图2苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左心室
心肌TGF—p1mRNA表达的影响
Fig．2Effectofmatrineo TGF—B1mRNA
expressioninleftventricularm scle
ofpress—overloadremodelingrats
量的棕红色的Ⅲ型胶原纤维表达；美托洛尔组，卡托
普利组，苦参碱大、中、小剂量组的心肌Ⅲ型胶原阳
性表达较模型组为轻。②Ⅲ型胶原蛋白半定量分析：
与假手术组相比，模型组的心肌Ⅲ型胶原蛋白的量
明显增高，差异显著(P托洛尔组，卡托普利组，苦参碱大、中、小剂量组的心
肌Ⅲ型胶原蛋白的量明显降低，差异显著(P<
0．01)，见表5。
表5苦参碱对压力超负荷心室重构大鼠左，厶室心肌I和
Ⅲ型胶原蛋白量的影响(；士s，一一6)
Table5 Effectofmatrineo collagneI andⅢcontents
inleftventricularm scleofpress-overload
ventricularremodelingrats(J土s，n一6)
组别 剂量／(rag·kg。)】型胶原／％ 11型胶原／％
与假手术组比较：44尸与模型组比较：。P44P’P4讨论
苦参始载于《本经》，列为上品，味苦，性寒，无
毒。归心、肺、肾、大肠经。中医古代医籍中有苦参治
疗心脏疾患的一些记载，如《肘后方》卷一中的苦参
汤，方中用苦酒半升煎煮三两苦参，治疗“结胸，卒心
腹痛”。苦参碱是苦参的重要成分，具有较广泛的心
血管药理作用，如抗心律失常、降血脂及正性肌力作
用，近年来体外研究发现，苦参碱能抑制醛固酮、
AngⅡ诱导的离体心肌成纤维细胞(CFb)的增殖。
心脏长期负荷过重及神经内分泌的过度激活是
引起心室重构的主要原因，心室重构发生发展过程
中，始终伴随神经激素系统的激活，其中肾素一血管
紧张素一醛固酮系统(RAAS)的激活对心室重构的
发生发展起着重要的作用，RAAS不但存在于循环
中，也存在于心肌局部，该系统的激活可以引起
AngⅡ分泌增加，AngⅡ的分泌增加可引起心肌胶
原增生、心肌细胞肥大，进而导致心室重构[5卅J。
本研究发现苦参碱能降低压力超负荷心室重构
大鼠左心室心肌中RA及AngⅡ，抑制I、Ⅲ型胶
原蛋白的合成增加，并发现，苦参碱能通过抑制
RAAS的激活而抑制心室重构。 、
ANP是心房、心室肌及血管内皮细胞分泌的一
类具有强烈利尿、利钠、扩血管及降低血压等作用的
多肽激素，在人体中枢和外周的水盐平衡代谢方面
起重要的作用[1⋯。RAAS激活可以引起心房分泌
ANP增加，在本研究中发现RAAS激活时，ANP
同步增高，说明压力超负荷刺激RAAS的激活，使
水钠潴留、血压升高，反射性地引起ANP分泌增
加，但ANP增加所产生的作用还不足以完全抵消
腹主动脉缩窄致心室重构模型所产生的一系列后
果。ANP常作为心室重构时衡量血浆容量和心房压
力的指标，其水平与心力衰竭程度相平行。
TGF—B1和AngⅡ与心室重构有密切关系，体
外研究证实，在培养的大鼠CFb及心肌细胞中加入
AngⅡ，能诱导TGF—p1基因表达，从而促进成纤维
细胞有丝分裂和I、Ⅲ型胶原合成及心肌细胞的原
癌基因表达，而血管紧张素Ⅱ1型受体(AT卜R)拮
抗剂能抑制AngⅡ的上述作用，说明AngⅡ通过
ATl一R调控TGF—p1表达而诱导心肌肥厚及纤维
化[1卜13]。本研究显示，苦参碱可以降低心肌TGF—p1
mRNA的表达，这种作用可能是直接作用于TGF一
口1，也可能是作用于AngⅡ，通过ATl一R介导间接
作用于TGF—p1，从而达以抑制心室重构的作用。
胶原是细胞外基质(ECM)中量最多的成分，
心肌纤维化主要表现为胶原量的显著增加。已证实
循环和心肌局部的RAAS共同参与心肌纤维化应
答[“]。在诸多血管活性物质中，AngⅡ是CFb的一
个重要的生长调节因子，它与CFb上的ATl一R结
合后，可促发多条信号转导途径，引起ECM合成增
加[1副。心脏中的TGF一81主要由心肌细胞和CFb产
生，可促进多种ECM成分合成[1引。AngⅡ可促进
TGF一／31表达，促进I、皿胶原蛋白合成，血管紧张
万方数据
·558· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
素转换酶抑制剂(ACEI)或ATl一R拮抗剂可抑制
这一过程，用TGF一口1的中和抗体可消除AngⅡ刺
激胶原合成增加的作用，因此，也可认为AngⅡ促进
ECM的合成作用是通过TGF—p1介导完成的[17’1引。
本实验结果表明，苦参碱可以抑制I、Ⅲ胶原蛋
白的合成，具有抑制心室重构的作用，其机制可能与
对RAAS、ANP及TGF—p1的调节有关，而确切的
作用机制，还有待于进一步的研究。
另外，本研究结果显示，心室重构模型组大鼠的
HR明显加快、SBP明显升高，说明腹主动脉缩窄导
致心脏后负荷的增加，为心室重构模型成功的主要
原因。心室重构模型组大鼠的LVEDP有一定程度
升高，+dp／dt。。。降低，说明模型组大鼠已经显示有
一定心力衰竭的初期特征，但还不是特别典型。本实
验发现苦参碱能明显降低腹主动脉缩窄致心室重构
大鼠的HR、SBP，同时显著升高+dp／dt。。。，因此，
不能排除苦参碱对血流动力学的改善在一定程度上
对抑制心室重构的发生发展也起到了作用。但结合
本实验的数据分析，苦参碱对神经内分泌因子的影
响可能是抑制心室重构作用更主要的因素。
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不同剂量四君子汤对脾虚证小鼠消化和免疫功能的影响
王 琚1”，高云芳，姚洋1
(1．西北大学生命科学学院，陕西西安710069；2．第四军医大学唐都医院妇产科，陕西西安710038)
摘要：目的探讨四君子汤对脾虚证小鼠消化和免疫功能的影响及治疗用最佳药物剂量。方法大黄煎液制备
小鼠脾虚证模型后，以3种剂量(12．5、25、37．5g／kg)的四君子汤进行治疗，测定小鼠体重、体温、消化道内食糜平
均滞留时间、胃排空速率、胃泌素与胃动素水平、脾脏和胸腺脂数。结果脾虚证小鼠体重增长缓慢，体温降低、消
收稿日期：2006—09—25
基金项目：陕西省自然科学基金资助项目(DH98273)，陕西省教育厅重点科研基金资助项目(00JK009)
作者简介；王瑁(1980一)，女，陕西宝鸡人，硕士研究生，从事药理学研究。
*通讯作者高云芳Tel：(029)88303935E—mail：gaoyunf@nwu．edu．ca
万方数据
苦参碱对压力超负荷大鼠心室重构的影响
作者： 韩向东， 彭秀文， 徐珊珺， 郭娟， 顾伟梁， 陈长勋， HAN Xiang-dong， PENG Xiu-
wen， XU Shan-jun， GUO Juan， GU Wei-liang， CHEN Chang-xun
作者单位： 上海中医药大学中药学院,上海,201203
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(4)
被引用次数： 4次

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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200704029.aspx