全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·205·
苦参与蛇床子配伍过程中化学成分变化研究
艾 芸，刘建利+，刘竹兰，房敏峰
(西北大学生命科学学院西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室，陕西西安 710069)
摘 要：目的考察苦参与蛇床子对药在配伍过程中化学成分的变化。方法 采用HPLC法测定苦参碱和氧化苦
参碱在单煎与合煎中量的变化，同时比较配伍前后其他成分的变化。结果 在苦参和蛇床子配伍对药共煎液中氧
化苦参碱的量降低30．58％，苦参碱的量增加71．05％，伴随着5个其他成分的消失，也产生了5个新成分。结论
苦参与蛇床子对药在配伍过程中发生了一系列复杂的变化，其化学成分不但有量的变化，也有质的变化。
关键词：苦参；蛇床子；配伍
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)02—0205—03
ChemicalchangeincompatibilityofRadixSophoraeFl vescentiswi hFructusCnidii
AIYun，LIUJian—li，LIUZhu—lan，FANGMin—feng
(KeyLaboratoryofBiologyandModernBiotechnologyinWesternResources，MinistryofEducation，
SchoolofLifeScience，NorthwestUniver ity，Xi’an710069，China)
Keywords：RadixSophoraeFl vescentis；FructusCnidii；compatibility
复方是中医临床用药的主要形式，是中药特色
的集中体现。中药通过配伍组成复方可以提高疗效、
减少不良反应、产生新的治疗作用、不产生抗药性
等。复方的作用区别于其组成的单味药材正是由于
复方在煎煮的过程中所含的化学成分相互作用，发
生了一系列质和量的变化，这些变化后的成分才形
成了复方具有独特疗效的物质基础[1~3]。对药是最
小的复方形式，可以单独使用，也可与其他药组成更
大的复方。由于中药复方化学成分非常复杂，从对药
开始研究可能会容易切入。苦参为豆科槐属植物苦
参SophoraflavesensAit．的干燥根，味苦，性寒，具
有清热利尿、燥湿杀虫的作用。蛇床子为伞形科植物
蛇床CnidiummonnieriL．Cuss．的干燥成熟果实，
味辛、苦，性温，有散寒、祛风、燥湿、杀虫、止痒功能。
两者在临床上经常配伍使用，对病毒性疱疹、接触性
湿疹、顽固性外阴瘙痒症、足癣湿疹、生殖器疱疹及
各种阴道炎、阴部湿疹有很好的疗效[4~7]。本实验对
苦参和蛇床子对药进行定性、定量的分析单味药煎
液的成分和组成复方后成分的变化，为进一步阐明
复方物质基础和制定质量标准提供依据。
1仪器与材料
岛津LC一10A高效液相色谱仪，配二级管阵
列检测器，YCQ一300超声波清洗器(上海凯波超
声设备有限公司)。甲醇为色谱纯，水为二次蒸馏水。
苦参、蛇床子购自西安市藻露堂药店，经西安市
药品检验所谢志民研究员鉴定分别为苦参S．
flavesensAit．干燥根和蛇床C．monnieriL．Cuss．
的干燥成熟果实；苦参碱和氧化苦参碱对照品均购
自中国药品生物制品检定所。
2方法与结果
2．1 苦参碱和氧化苦参碱的HPLC法测定
2．1．1色谱条件：色谱柱为PhenomenexC18(250
mm×4．6mm，5肛m)；流动相：甲醇一0．02三乙胺溶
液(35：65)；体积流量：1mL／min；检测波长：220
nm；柱温：35℃。
2．1．2对照品溶液的制备：分别精确称定苦参碱、
氧化苦参碱对照品适量，用甲醇溶解并配成含苦参
碱0．106mg／mL、氧化苦参碱0．1mg／mL的溶液，
作为对照品溶液。
2．1．3供试品溶液的制备：精密称定苦参药材粉末
1 g，加水80mL，煎煮30rain，残渣再加水50mI．，
煎煮20rain，合并两次煎煮液，滤过，定容至50mL
量瓶中，吸取其中5mI。过0．45弘m滤膜滤过，作为
供试品溶液。
2．1．4线性关系考察：分别精密吸取对照品溶液
3、5、10、15、20肛L注入色谱仪，按以上色谱条件进
样测定。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标
准曲线，得回归方程。苦参碱：Y一988244X一
收稿日期：2006—04—23
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30070905，39070965)；陕西省重点实验室基金资助
*通讯作者刘建利Tel：(029)88302411Email：jlliu@nwu．edu．cn
万方数据
·206· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
15450，r一0．9997，结果表明苦参碱在进样量为
0．318～2．12pg与峰面积具有良好的线性关系。氧
化苦参碱：y一732735x一11749，r一0．9999。结果
表明氧化苦参碱在0．30～2．0弘g与峰面积具有良
好的线性关系。
2．1．5精密度试验：取同一供试品溶液，重复进样
5次，每次10肚L，测定峰面积，结果苦参碱的RSD
为1．28％，氧化苦参碱的RSD为0．97％。
2．1．6重现性试验：精密称取苦参药材5份，制备
供试品溶液，进样测定，计算质量浓度。结果苦参碱
的RSD为1．76％，氧化苦参碱的RSD为0．38％。
2．1．7稳定性考察：取苦参供试品溶液，每隔1h
进样一次，进样量10肛L，进样3次，在3h内苦参碱
峰面积的RSD为1．53％，氧化苦参碱峰面积的
RSD为0．98％。
2．1．8加样回收率试验：精密称取苦参药材5份，
每份1g，分别精密加入0．055mg苦参碱和0．065
mg氧化苦参碱对照品，制备供试品溶液，进行测
定。结果苦参碱平均回收率为97．5％，RSD为
1．29％；氧化苦参碱平均回收率为98．4％，RSD
为1．12％。
2．1．9苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的测定：精
密吸取苦参药材供试品溶液10肛L注入液相色谱
仪，测定峰面积，计算，测得实验用苦参药材中苦参
L八．，／L
碱与氧化苦参碱的质量分数分别为0．098％、
1．125％，RSD分别为1．9％、2．5％(咒一3)。
2．2苦参与蛇床子配伍过程中化学成分的变化
2．2．1供试品溶液的制备：精密称定苦参、蛇床子
药材粉末各1g，加水80mL，煎煮30min，残渣再加
水50mL，煎煮20min，合并煎提液，滤过，滤液定容
至50mL量瓶中，吸取其中5mL溶液过0．45肛m
滤膜，作为苦参与蛇床子合煎供试品溶液。
分别精密称定苦参、蛇床子药材粉末1g，分别
加水50mL，煎煮30min，残渣再加水40mL，煎煮
20min，分别滤过后合并煎提液，滤液定容至50mL
量瓶中，吸取其中5mL溶液过0．45pm滤膜，作为
苦参与蛇床子分煎后混合供试品溶液。分别取苦参、
蛇床子各1g同法制备单煎供试品溶液。
2．2．2色谱图的比较：分别精密吸取合煎供试品溶
液、单煎后混合供试品溶液和蛇床子、苦参单煎液
20弘L，注入液相色谱仪，色谱见图1。
2．2．3苦参碱和氧化苦参碱的变化：根据苦参碱
和氧化苦参碱的峰面积计算，在苦参和蛇床子合煎
液中氧化苦参碱由苦参单煎液中的0．445mg／mL
下降到0．3089mg／mL，降低30．58％；苦参碱由苦
参单煎液中0．019mg／mL上升到0．0325mg／mL，
增加71．05％。在苦参与蛇床子分煎后混合液中氧
化苦参碱和苦参碱的量变化不明显。
D
垫垒一．一。
5 10 15 20
图1氧化苦参碱对照品(A)、苦参碱对照品(B)、苦参单煎液(c)、蛇床子单煎(D)、苦参与蛇床子
合煎液(E)和苦参与蛇床子分煎后混合液(F)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsofoxy atrinereferencesubstance(A)，matrinereferencesubstance(B)，single
decoctionofRadixSophoraeFlavescenti(C)，singledecoctionofFructusCnidii(D)，complexdecoction
ofRadixSophoraeFlavescentiswithFructusCnidii(E)，andmixtureoftwosingled coctions(F)
2．2．4其他化学成分的变化：对比单煎液与合煎液
色谱图，并结合紫外吸收光谱分析，发现伴随着苦参
碱和氧化苦参碱量的变化，在苦参与蛇床子合煎液
和分煎后混合液中还有一些其他化学成分的改变。
在苦参与蛇床子合煎液中tn5．405min(紫外
吸收为203、307、283、660nm)的色谱峰是新产生
的，虽然蛇床子单煎液￡n5．615rain(紫外吸收为
258、431、583rim)的保留时问相近但紫外吸收截然
不同。合煎液中产生的峰在苦参与蛇床子单煎后混
合液中也未检出。在苦参与蛇床子合煎液和单煎后
混合液中都产生了t。5．009rain(紫外吸收为201、
478、552、574nm)和4．972rain(紫外吸收为201、
479、551、570nm)的新色谱峰，虽然保留时间有微
小差异，但紫外吸收相同，所以应为同一成分。在苦
参与蛇床子合煎液中tR10．663rain(紫外吸收为
201、365、282、639nm)的色谱峰也是新产生的。单
煎后混合液中的昧10．262rain(紫外吸收为204、
281、675nm)色谱峰也应该是新生成的，它与合煎
L一
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·207·
液中相应色谱峰的保留时间及紫外吸收有一定差
别，但有可能是同一物质。
按照上述相同的方法比较保留时间及紫外吸收
可发现，苦参单煎液中tR3．754、10．032、7．501min
的色谱峰在苦参与蛇床子合煎液中均未检出，而在
苦参与蛇床子分煎后混合液中仍然存在。苦参单煎
液中tR21．932min峰和蛇床子单煎液中tR23．801
min峰在合煎液和分煎后混合液中均未检出。
3讨论
3．1实验条件的优化：以反相柱进行分析，首选甲
醇一水系统，加大流动相中水的比例可使杂质峰达到
基线分离。在生物碱的测定中通常加入少量的三乙
胺，可减少待测峰的拖尾，改善峰形，有利于准确定
量[8]。在实验中考察多种流动相的组成，最后选择甲
醇一0．02三乙胺溶液(35：65)为流动相可获得较好
的峰形，且在一定时间内相对稳定。应用二极管阵列
检测器考察了多波长检测条件下色谱图的变化，结
合紫外光谱吸收图，确定220nm作为检测波长时
供试品色谱图较好，能够反映出不同样品化学成分
之间的差异。
3．2 中药成分非常复杂，同一成分在不同时间测定
的色谱保留时间可能会有误差，仅通过比较色谱保
留时间来判别色谱峰的异同有可能产生误判，若同
时使用色谱峰保留时间及相应的紫外吸收光谱则可
提高判断的准确性。
3．3氧化苦参碱是苦参中的主要生物碱类成分，具
有氮氧化物结构。它的还原产物苦参碱同时也存在
于苦参中。具有氮氧化物结构的化合物具有氧化作
用[9]。以往的研究也发现苦参与其他中药配伍在煎
煮过程中，氧化苦参碱的量减少，苦参碱的量增
加[I”¨]，但并未看到其他成分变化的报道。氧化苦
参碱作为氧化剂参加反应，必然有还原剂被氧化，这
样才能构成完整的氧化还原反应。从本研究的结果
可以看出在煎煮过程中有些成分消失了、也有新成
分生成，应该是发生了氧化还原反应。
3．4 由于在合煎液中同时存在氧化还原平衡和溶解
平衡，氧化还原反应使氧化苦参碱的量减少，打破了溶
解平衡，使其溶解度也大大增加，所以使得苦参碱的量
升高70．58％，远超出氧化苦参碱量降低的30．58％。
3．5 通过上述研究结果可以证明以前对复方化学
成分的猜想D4’1引，即复方化学成分不是各单味药的
简单加和，而是发生了变化。这种变化不仅有成分量
的增减，也有化学成分种类的生成与消失。
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万方数据
苦参与蛇床子配伍过程中化学成分变化研究
作者： 艾芸， 刘建利， 刘竹兰， 房敏峰， AI Yun， LIU Jian-li， LIU Zhu-lan， FANG Min-
feng
作者单位： 西北大学生命科学学院,西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室,陕西,西安,710069
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(2)
被引用次数： 6次

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