全 文 ：谱图见图 1。
* -白藜芦醇
* -res veratr ol
图 1　白藜芦醇对照品(A)和好利康( B)的 HPLC图谱
Fig. 1　HPLC chromatograms of resveratrol ref erence
substance (A) and Haolikang (B)
表 1　好利康中白藜芦醇的含量测定结果( n= 5)
Table 1　Content of resveratrol in Haolikang ( n= 5)
批号 白藜芦醇含量/ ( mg·g- 1) RSD / %
210612 7. 504 4 1. 7
210620 7. 486 2 1. 9
210623 7. 519 8 1. 6
3　讨论
　　白藜芦醇丰富的自然资源和优良的活性越来越
被人们所认识, 因此控制其含量非常重要。本方法简
便、快捷、准确。适用于测定药品、食品、饮料中的白
藜芦醇的含量。
References:
[1]　Zhao X, Lu Y, Chen Z N. Pr og res s on ch emical s tu dy and
ph arm acological effect s of resver at rol [ J ] . Chin Trad it H er b
Dr ugs (中草药) , 1998, 29( 12) : 837-839.
[2]　Han J , Cai G M. Determinat ion of resverat rol in C om pound
Hu zhang Pill b y RP-HPLC [ J] . Chin P harm J (中国药学杂
志) , 1996, 31( 12) : 754.
HPLC法测定紫草及其制剂紫金油中左旋紫草素的含量
孟宪生, 沙　明,曹爱民,张东方

(辽宁中医学院 中药系,辽宁 沈阳　110032)
　　紫草为紫草科植物新疆紫草 A rnebia euchr oma
( Roy le) Johnst .、紫草 L ithosp ermum ery throrhi z on
Sieb. et Zucc. 的根。该药具有凉血活血、解毒透疹
之功, 用于血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿
疹、水火烫伤[ 11]。紫草类中药的主要化学成分为萘
醌类色素[ 2]。《中华人民共和国药典》2000年版一部
采用分光光度法测定紫草总色素的含量, 由于缺乏
专属性,有待于进一步改进。本实验采用 HPLC 法
对紫草及其成药紫金油中左旋紫草素进行含量检
测,经多种流动相系统筛选,最终确定本实验规定的
色谱条件,左旋紫草素与其他萘酚类成分色谱峰得
以完全分离, 方法简单、快速、准确,为控制紫草的内
在质量提供了可靠的方法。
1　仪器与试药
　　LC-6A 高效液相色谱仪 (日本岛津) , SPD-
6AV 可见紫外检测器, C-R3A 色谱数据处理机,
SOL-6A 自动进样品。
　　左旋紫草素对照品由中国药品生物制品检定所
提供。甲醇为色谱纯。紫草药材于 1998年购于沈阳
市药材市场, 经辽宁中医学院中药系鉴定教研室徐
连城教授鉴定为新疆紫草的根。紫金油由大连蛇毒
开发企业集团提供。
2　方法结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Shim-pack CLC-ODS 柱
( 6. 0 mm×150 mm) ;流动相:甲醇-0. 025 mo l/ L 磷
酸( 85∶15) ; 柱温: 25 ℃; 流速: 1. 0 mL/ min, 测定
15 min 后改为 1. 5 mL/ min;测定波长: 515 nm; 纸
速: 0. 3 cm/ m in[ 2]。色谱图见图 1。
图 1　左旋紫草素对照品 (A)、紫金油 ( B)
和紫草药材 (C) 的 HPLC 图谱
Fig. 1　HPLC chromatograms of shikonin ( A) , Zij in
Oil ( B) and A. euchroma crude drug (C)
2. 2　溶液的配制
·615·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 7 期 2003年 7月

收稿日期: 2002-11-25
2. 2. 1　对照品溶液的配制: 取左旋紫草素对照品
11. 20 mg ,精密称定, 置 250 mL 量瓶中, 加甲醇适
量溶解并稀释至刻度,摇匀, 制成 0. 040 mg / mL 对
照品溶液。
2. 2. 2　紫草药材供试品溶液的制备:将紫草药材干
燥并粉碎过 100目筛, 取粉末 3 g ,精密称定。置 100
mL 具塞三角瓶中, 加乙醇 50 mL, 超声处理 30
min, 放冷, 滤过,残渣加乙醇 40 mL, 超声提取 20
min, 放冷滤过, 合并滤液, 残渣经乙醇洗涤并入蒸
发皿中, 水浴蒸干, 加乙醇溶解至 100 mL 量瓶中,
加乙醇至刻度, 摇匀, 进样前经 0. 45
m 微孔滤膜
过滤。
2. 2. 3　紫金油供试品溶液的制备:精密吸取紫金油
10 mL, 置分液漏斗中,加 1% 氢氧化钠溶液提取 3
次,每次 20 mL,合并碱液,加 10% 盐酸调 pH 值至
酸性, 加氯仿提取 4 次 ( 30, 30, 30, 20 mL) , 合并氯
仿液, 水浴蒸干,残渣加甲醇溶解并定量转移至 25
mL 量瓶中,加甲醇至刻度。
2. 3　线性关系考察: 精密吸取 0. 044 8 mg / mL 的
左旋紫草素对照品溶液 2. 0, 4. 0, 6. 0, 8. 0, 10. 0 mL
分别置于 10 mL 的量瓶中,加甲醇稀释至刻度,分
别精密吸取 10
L,注入液相色谱中,测定色谱峰面
积。以进样量为横坐标, 3次测定峰面积的均值为纵
坐标作图,得回归方程 Y= 1 155 793. 5 X - 14 590,
r= 0. 999 9。进样量在 0. 08～0. 4
g 线性关系
良好。
2. 4　精密度考察: 精密吸取药材供试品溶液 10

L, 连续测定 6 次, 结果左旋紫草素峰面积的
RSD= 0. 47% ( n= 6)。
2. 5　稳定性考察: 精密吸取药材供试品溶液 10

L,在 0, 2, 4, 6, 8 h 测定, 结果左旋紫草素峰面积
的 RSD= 2. 1% ( n= 6)。结果表明, 供试品在制备
后 8 h 内测定稳定。
2. 6　回收率的测定:取紫草粉末 3 g 精密称定,置
100 mL 具塞三角瓶中,精密吸取左旋紫草素对照品
溶液 ( 0. 044 8 mg / mL) 25 mL,按 2. 2. 2 项下方法
测定。左旋紫草平均回收率为 97. 7% , RSD= 1. 9%
( n= 5)。
2. 7　紫草中左旋紫草素的含量测定:精密吸取紫草
药材样品溶液 10
L, 注入液色谱谱仪中,测定其中
左旋紫草色谱峰面积, 采用外标法计算其中左旋紫
草素的含量。结果见表 1。
2. 8　紫金油中左旋紫草素的含量测定:精密吸取紫
金油供试品 10
L, 注入液相色谱仪, 测定峰面积,
计算结果见表 2。结果表明, 紫金油每 100 mL 含左
旋紫草素在 2. 0 mg 以上。
表 1　紫草药材中左旋紫草素含量测定 ( n= 6)
Table 1　Content of shikonin in A. euchroma ( n= 6)
批次 左旋紫草素含量/ %
1 0. 042
2 0. 036
3 0. 033
4 0. 041
5 0. 039
6 0. 033
表 2　紫金油中左旋紫草素的含量测定 ( n= 3)
Table 2　Content of shikonin in Zij in Oil ( n= 3)
批次 左旋紫草素含量/ %
1 2. 54
2 3. 60
3 3. 01
3　讨论
　　在分析条件优选中, 根据所测左旋紫草素在
600～200 nm 波长内有两个吸收波长可作为测定波
长的特点,从 780 nm 和 516 nm 中选定 516 nm 作
为测定波长,一方面与药典规定的波长相一致,另一
方面,试验表明, 516 nm 波长下,色谱基线平稳。
考虑到左旋紫草素与其他萘醌化合物之间的分
离度和峰形等因素, 将流动相甲醇与 0. 025 mol/ L
磷酸配比调整到左旋紫草素在 10 m in 左右出峰, 由
于成分之间极性差距较大, 为缩短分析周期,在 10
m in 以后,将流速改为 1. 5 mL/ m in 为好。
　　由于紫金油为油制剂, 考虑到紫草中主要为萘
醌类化合物, 且醌类分子中因具有酚羟基, 故有酸
性, 能溶于碱性溶液, 加酸化后又可析出,利用此性
质可进行提取。采用 1% 氢氧化钠进行提取,加碱
后, 溶液变蓝, 可根据颜色深浅变化, 判定提取是否
完全。加盐酸酸化后, pH 值为 2～3,溶液变红,用氯
仿提取,也可通过颜色判断提取是否完全,经多次实
验考察, 用 1% 氢氧化钠提取时,不宜剧烈振摇, 因
出现乳化后,不利于提取, 而采用氯仿提取时, 应反
复振摇,有利于色素全部进入氯仿层。本方法去除油
性杂质干扰,方法简单,具有可操作性。
References:
[ 1] 　L iu F, Wu W Z, Wang X P. Determinat ion of shikonin in
Bur n Ointment b y T LC scanning [ J] . Pr imary J Chin Mate r
M ed (基层中药杂志) , 2001, 15( 2) : 21-22.
[2] 　Ma Y, Wan g S C, Hu ang M. Determinat ion of shikonin in
Rad ix L i thosp ermi by HPLC [ J ] . Chin P harm J (中国药学杂
志) , 2000, 35( 2) : 98.
·616· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 7 期 2003年 7月