全 文 ：4. 2　葛根素为异黄酮类化合物 ,经聚酰胺色谱柱分
离 ,去除了多数干扰成分 ,但醇洗脱液中的小檗碱仍
干扰葛根素薄层色谱分析 ,加入盐酸溶液 ,使小檗碱
形成盐酸盐 ,用醋酸乙酯将葛根素提出 ,制成供试品
液。进行薄层色谱分离 ,色谱斑点圆整、清晰 ,分离效
果理想。
4. 3　淫羊藿苷的含量测定中 ,本品若以 70%乙醇
提取后直接进行 HPLC含量测定 ,则供试品液对液
相色谱柱污染严重。本实验中对供试液采用聚酰胺
柱预处理 ,水洗液中未检出淫羊藿苷 ;再用 90%乙
醇洗脱 ,对醇洗脱液进行 HPLC测定 ,以乙腈 -水
( 24∶ 76)为流动相 ,淫羊藿苷能与其他干扰成分实
现基线分离。
References:
[1 ]　Ch P (中国药典 ) [S ]. 2000 ed. VolⅠ .
[2 ]　 Lǜ W Q, Long X H. Id enti f i cation of Trad it ional Chinese
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Ch romatog raphy (中成药中的药材薄层色谱鉴别 ) [M ]. Bei-
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痛经平胶囊的质量标准研究
李　彤 1 ,赵志军 2 ,丁里玉 3 ,杨彩琴 3 ,王　静 3 ,姚子华 1
( 1. 河北大学化学与环境科学学院 ,河北 保定　 071002; 2. 河北省药品检验所 ,河北 石家庄　 050011; 3. 河北医科大学 ,河
北 石家庄　 050017)
　　痛经平胶囊由当归、赤芍、元胡等 8味中药经提
取加工而制成 ,具有止痛化瘀之功效 ,主治痛经、月
经不调等症。为了控制该制剂的质量 ,本实验采用薄
层色谱法对制剂中当归、赤芍、元胡进行了定性鉴
别 ,并采用 HPLC法对该制剂中的主要成分阿魏酸
进行了含量测定 ,结果满意。
1　仪器与试剂
LC-480高效液相色谱仪 (美国 PE公司 ) ;阿魏
酸、芍药苷、延胡索乙素对照品 (中国药品生物制品
检定所 ) ;甲醇为色谱纯 ,水为重蒸水 ,其余试剂均为
分析纯 ;痛经平胶囊 (河北医科大学药学院提供 )。
2　定性鉴别
2. 1　赤芍的鉴别 [1 ]: 取本品内容物 4 g,加乙醚 70
m L,索氏提取器回流 1 h,弃去乙醚液 ,药渣挥干溶
剂 ,加甲醇 100 m L,回流提取 1. 5 h ,提取液回收至
干。残渣加水 10 mL溶解 ,过滤 ,滤液以 2 mL /min
的流速通过已处理好的 D-101大孔树脂柱 ,用水
500 mL洗涤 ,继以用 70%乙醇洗脱。弃去初滤液 10
m L,收集续滤液 100 mL置水浴上蒸干 ,残渣加甲
醇 ,定容于 5 mL量瓶中 ,摇匀 ,作为供试品溶液。另
取缺味配制的模拟制剂 ,同法制备 ,得阴性对照溶
液。取芍药苷对照品 ,加甲醇制成 1 mg /mL的对照
品溶液。吸取上述溶液各 5μL分别点于同一以羟甲
基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -
醋酸乙酯-甲醇 -异丙醇 -甲酸 ( 30∶ 15∶ 10∶ 2∶
0. 2)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷以 5%香草醛硫
酸溶液 ,热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中在与
对照品色谱相应的位置上显相同的蓝紫色斑点 ,阴
性对照无此特征斑点 (图 1-A)。
2. 2　元胡的鉴别 [ 2]:取本品内容物 1 g ,加浓氨水湿
润 ,加乙醚 20 mL密闭 ,室温避光冷浸 24 h。吸取上
清液 10 mL用 10%醋酸萃取 3次 ,每次 8 mL,合并
酸萃取液 ,用浓氨水调 pH 10～ 11。再用氯仿萃取 3
次 ,每次 15 mL,合并氯仿液 ,水洗至中性 ,用无水硫
酸钠脱水后水浴蒸去溶剂 ,室温放冷 ,置干燥器中敞
口放置 12 h,精确加入 0. 5 mL甲醇溶解 ,制得供试
品溶液。 另取缺味配制的模拟制剂 ,同法制备 ,得阴
性对照溶液。取延胡索乙素对照品及中性硫酸盐适
量 ,加甲醇制成 1 mg /m L延胡索乙素的溶液作为对
照品溶液。吸取上述溶液各 5μL分别点于同一以羧
甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板上 ,以石油
醚 -醋酸乙酯 ( 2∶ 1. 7)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,
喷以改良碘化铋钾溶液 ,供试液色谱中在与对照品
色谱相应的位置上显相同的橙红色斑点 ,阴性对照
无此特征斑点 (图 1-B)。
2. 3　当归的鉴别 [3 ]: 取本品内容物 2 g于索氏提取
器中 ,加 100 mL乙酸乙酯 -甲醇混合液 ( 9. 5∶ 0. 5)
连续提取 4 h,提取液回收至干 ,加适量甲醇溶解。
过滤 ,定容于 10 mL容量瓶中 ,制得供试品溶液。另
取缺味配制的模拟制剂 ,同法制备 ,得阴性对照溶
·328· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月
收稿日期: 2002-06-14
液。取阿魏酸对照品 ,加甲醇制成 1 mg /mL的溶液
作为对照品溶液。 吸取上述溶液各 5μL,分别点于
同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板
上 ,以苯-醋酸乙酯 -甲酸 ( 5∶ 3∶ 0. 5)为展开剂 ,展
开 ,取出 ,晾干 ,喷以显色剂 1% FeCl3和 1% K3 [ Fe
( CN ) 6 ]等量混合溶液。供试液色谱中在与对照品色
谱相应的位置上显相同的蓝色斑点 ,阴性对照无此
特征斑点 (图 1-C)。
1-阴性对照　 2-对照品　 3-供试品
1-negative reference subs tance 2-reference subs tance 3-sample
图 1　赤芍 (A)、元胡 (B)和当归 (C)的 TLC图谱
Fig. 1　 TLC chromatograms of Rad ix Paeoniae
Rubra (A) , Rhizoma Corydalis (B)
and Rad ix Angel icae S inensis ( C)
3　阿魏酸含量测定 [ 3]
3. 1　高效液相色谱条件:色谱柱 Kromasil-100 C18
柱 ( 150 mm× 4. 6 mm , 5μm) ,流动相为甲醇 -5%醋
酸 ( 25∶ 75) ,流速为 1. 0 mL /min,检测波长为 320
nm ,柱温为 25℃。
3. 2　溶液的制备: 取本品胶囊 10粒去壳后 ,研匀 ,
精密称定细粉 2 g ,置索氏提取器中 ,加 100 mL乙
酸乙酯 -甲醇液 ( 9. 5∶ 0. 5)连续提取 4 h,回收溶剂 ,
蒸干。 残渣加适量甲醇溶解 ,并全部转移到 10 mL
容量瓶中 ,用甲醇定容 ,摇匀。过 0. 45μm滤膜 ,弃
去初滤液 ,取续滤液作为供试品溶液。精密称取阿魏
酸对照品 5. 33 mg置 50 mL容量瓶中 ,以甲醇定
容 ,得对照品溶液。
3. 3　标准曲线的建立:精密吸取对照品溶液 2, 4,
6, 8 m L,分别置 10 m L容量瓶中 ,以甲醇定容 ,分别
取系列对照溶液各 10μL进样。每个浓度重复 5次 ,
以峰面积平均值为纵坐标 ,以对照品溶液浓度为横
坐标进行回归 ,计算得回归方程 A= - 0. 188+
0. 054 97C , r= 0. 999 9,阿魏酸在 0. 213 1～ 1. 066
μg线性关系良好。
3. 4　精密度试验:取阿魏酸对照品溶液 10μL进
样 ,重复 5次 ,峰面积 RSD= 1. 37% 。
3. 5　重现性试验:取同一批痛经平样品胶囊 5份 ,
制备供试液 ,进样 ,计算 ,结果得峰面积 RSD=
2. 17%。
3. 6　回收率考察:取同一批号的样品胶囊 5份 ,每
份约精称 1 g ,精密加入阿魏酸对照品适量 ,按 3. 2
项下方法制备 ,按 3. 7项下测定 ,计算回收率。阿魏
酸平均回收率为 99. 77% , RSD= 1. 07%。
3. 7　样品含量测定:取供试品溶液 10μL进样 ,重
复 5次 ,以阿魏酸峰面积代入回归方程 ,计算样品中
阿魏酸的含量 ,结果见表 1。
表 1　痛经平胶囊中阿魏酸含量的测定结果 (n= 5)
Table 1　Results for determination of f erulic acid
in Tongjingping Capsule (n= 5)
批　号 阿魏酸含量 / ( mg· g- 1)
20006121 0. 348 9
20006122 0. 190 8
20006131 0. 354 7
20006132 0. 316 4
4　讨论
4. 1　在赤芍的鉴别中 ,由于组分多 ,干扰严重 ,故采
用 D-101大孔树脂处理分离出芍药苷 ,达到明显的
效果。
4. 2　在元胡的鉴别中 ,由于延胡索乙素的热不稳定
性 ,水浴温度不应超过 70℃。
4. 3　在阿魏酸含量测定条件的选择时 ,阿魏酸对照
品溶液 UV光谱图中在 240, 320 nm处分别有吸收
峰 ,而后者有强吸收 ,故选 320 nm作为检测波长。
以甲醇 -5%醋酸不同比例作流动相 ,发现以甲醇-
5%醋酸 ( 25∶ 75)作为流动相时阿魏酸分离效果最
佳 ,且保留时间较短 ,故选此比例溶剂为流动相。
References:
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Tra dit Pat Med (中成药 ) , 1997, 19( 8): 16-17.
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保　护　环　境　　保　护　植　被
·329·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 4期 2003年 4月