全 文 ：染料木素对大鼠生殖毒性的实验研究( Ⅱ)
致畸敏感期毒性
许建宁1 ,王全凯1 ,李忠生1 ,崔 　涛1 ,罗玉姝1 ,王四旺2 ,郑玉新1 Ξ
(11 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所 ,北京 　100050 ; 21 第四军医大学药物研究所 ,陕西 西安 　710032)
　　染料木素系从豆科植物槐角 Sophora japonica
L . 的干燥成熟果实中提取的异黄酮单体成分 ,具有
弱雌激素样作用又非雌激素类化合物 ,称之为植物
雌激素。流行病调查、动物实验和临床观察均发现 ,
异黄酮通过抑制骨吸收和促进骨形成过程 ,维持骨
代谢的动态平衡 ,有效地预防骨质疏松[1～3 ] 。鉴于
染料木素是治疗骨质疏松症的有效药物 ,为了保证
其安全使用 ,了解其有无潜在的致畸作用 ,本实验对
其进行大鼠的致畸敏感期毒性试验研究。
1 　材料与方法
111 　药物 :染料木素由第四军医大学药物研究所提
供 ,纯度 > 98 %。用蒸馏水将其配成不同浓度的混
悬液进行实验。
112 　动物 :三级健康 Wistar 大鼠 ,由中国药品生物
制品检定所实验动物中心提供 ,京动许字 (2000) 第
017 号。动物饲养于中国预防医学科学院二级动物
室 (医动字第 0124018 号) ,室内温度为 24～26 ℃,
相对湿度为 40 %～60 % ,喂食军事医学科学院实验
动物中心提供的清洁级繁殖鼠料[京许字 (2000) 013
号 ] ;动物进入动物室后适应环境 1 周。
113 　实验方法[4 ] :健康 Wistar 雄、雌性大鼠各 104
只 ,体重分别为 260～280 g 和 190～210 g。大鼠按
1∶1 合笼 ,合笼时间不超过 5 d ,以查到阴栓确定为
交配成功 ,计为妊娠第 0 天。将孕鼠随机分为 5 组 ,
溶剂和阳性对照组 ,每组 18 只孕鼠 ,高、中、低 3 个
剂量给药组每组 19 只孕鼠。各组分别 ig 5 mL/ kg
蒸馏水、15 000 U/ kg 维生素 A (VA) 和 480、160、
16 mg/ kg 染料木素。溶剂对照组和 3 个给药组于
妊娠第 7～14 天 ,每天 ig 1 次 ,连续给药 8 d ,阳性
对照组于妊娠第 8～13 天 ,每天 ig 1 次 ,连续给药 6
d。每天观察孕鼠的饮水、摄食、生长等一般状况。
每隔 3 d 称量孕鼠体重 ,妊娠第 20 天处死孕鼠。肉
眼观察孕鼠脏器后 ,取出子宫 ,记录黄体数、着床数、
死胎数 (吸收胎、早期死胎、晚期死胎) 、活胎数、活胎
重、胎仔性别、活胎仔外观异常观察等。各窝 1/ 2
胎仔固定于 Bouin 氏液 ,作内脏检查 ;另 1/ 2 固定于
95 % 酒精作骨骼畸形检查。各项实验数据用 Office
2000 的 Excel 和 SAS 软件进行统计分析 ,以窝为单
位统计。孕鼠的体重、摄食量、饮水量、黄体数、着床
数、活胎仔数、胎仔体重等计量资料 ,用 Office 2000
软件 Excel 进行 t 检验统计分析 ;妊娠率、交配率、
受孕率、活胎率等用χ2检验 ;其他用 Wilcoxon 秩和
检验。
2 　结果
211 　动物一般状况观察 :雌、雄各 104 只大鼠按
1∶1 配对同笼 ,93 只雌鼠于 5 d 内检查到阴栓 ,交配
率为 8914 %。各组孕鼠在试验期内进食饮水和日
常行为未见异常。整个妊娠期内 ,3 个给药组孕鼠
的体重和增重与对照组比较差异无显著性 ( P >
0105) ,见表 1。结果表明染料木素对孕鼠的生长未
表 1 　孕鼠体重变化 ( x ±s)
Table 1 　Body weight change of pregnant rats ( x ±s)
组 　别
剂 　量
/ (mg·kg - 1)
不同妊娠天数的孕鼠体重/ g
0 d 4 d 7 d 10 d 13 d 16 d 20 d
孕鼠增重
/ g
溶剂对照 - 221178 ± 9142 234144 ±11105 240183 ±10153 252144 ±11186 264167 ±12170 292189 ±12151 324156 ±12105 38174 ±7153
阳性对照 VA 15 000 U·kg - 1 227169 ±11115 239175 ±10179 250119 ±9109 3 3 259163 ±12194 263181 ±11198 290163 ±21163 317163 ±21122 29149 ±9183 3 3
染料木素 16 218171 ± 9152 230100 ±16112 240112 ±12122 253100 ±10121 265176 ±11146 294100 ±12116 330100 ±15153 40141 ±7108
160 218181 ±10191 232194 ±12190 242144 ±11115 254119 ±10156 266188 ±13138 295119 ±14135 330188 ±17142 40169 ±6193
480 217141 ±13160 232106 ±11191 240165 ±11175 250118 ±13169 261100 ±11166 291106 ±13197 325141 ±15193 37176 ±5188
　　与溶剂对照组比较 : 3 3 P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs solution control group
·419· 中草药 　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 35 卷第 8 期 2004 年 8 月
收稿日期 :2003211209
作者简介 :许建宁 (1968 —) ,女 ,副研究员 ,硕士生导师 ,主要从事化学物致突变、致癌机制和化学物安全性评价方面的研究及检测工作 ,
专长为遗传毒理学 ,曾获得 1997 年卫生部医药卫生科技进步三等奖 ,1998 年中国预防医学科学院青年科技工作者奖 ,发表学
术论文 30 余篇 ,参与 2 部著作编写。
产生明显的影响。
212 　染料木素对胚胎形成的影响 :各给药组孕鼠的
平均黄体数、着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数与
溶剂对照组比较差异不明显 ( P > 0105) ,见表 2。
213 　染料木素对胎鼠生长发育的影响 :各给药组胎
鼠的平均体重、身长、尾长以及平均胎重、窝重与溶
剂对照组比较差异无显著性 ( P > 0105) ,见表 3。
214 　染料木素对胎鼠外观、内脏和骨骼畸形的影
响 :各给药组胎鼠外观和内脏畸形率与溶剂对照组
比较差异无显著性 ( P > 0105) ,见表 4。由于溶剂
对照组有 13 只胎鼠存在第 4 胸骨缺失现象 ,而各给
药组第 4 胸骨缺失的胎鼠数较少 ,虽然统计分析表
明各给药组胎鼠骨骼畸形率与溶剂对照组比较存在
明显差异 ( P < 0101) ,见表 4 ,但各给药组胎鼠骨骼
畸形率均低于溶剂对照组 ,且不存在随剂量改变而
变化的趋势 ,说明造成胎鼠的第 4 胸骨缺失现象与
药品无关。
3 　讨论
表 2 　染料木素对胚胎形成的影响
Table 2 　Effect of genistein on embryogenesis
组　别
剂　量
/ (mg·kg - 1)
假孕鼠数
/ 只
孕鼠数
/ 只
黄体数
( x ±s)
着床数
( x ±s)
活胎
总数/ 只 x ±s
吸收胎
总数/ 只 / %
死胎
总数/ 只 / %
溶剂对照 - 0 18 1516 ±118 1414 ±114 236 1311 ±113 21 8111 2 0177
染料木素 16 2 17 1710 ±215 1511 ±115 242 1412 ±210 13 5106 3 1117
160 3 16 1616 ±311 1318 ±211 207 1219 ±215 12 5143 2 0190
480 2 17 1712 ±218 1411 ±115 223 1311 ±116 15 6125 2 0183
VA 15 000 U·kg - 1 2 16 1519 ±115 1412 ±213 185 1116 ±217 20 8181 22 9169 3 3
　　　与溶剂对照组比较 : 3 3 P < 0101
　　　3 3 P < 0101 vs solution control group
表 3 　染料木素对胎鼠生长发育的影响 ( x ±s)
Table 3 　Effect of genistein on growth and development of rat fetuses ( x ±s)
组　别 剂　量/ (mg·kg - 1) 胎鼠/ 个 胎鼠均重/ g 身长/ cm 尾长/ cm 胎盘均重/ g 窝均重/ g
溶剂对照 - 236 2197 ±0121 3113 ±0110 1101 ±0103 6125 ±0168 38173 ± 3131
染料木素 16 242 2199 ±0119 3111 ±0111 1102 ±0104 6187 ±1138 42160 ± 6157 3
160 207 3108 ±0124 3108 ±0110 1102 ±0104 7112 ±1175 39163 ± 7136
480 223 3111 ±0120 3108 ±0110 0101 ±0102 6141 ±1108 40160 ± 4143 3 3
VA 15 000 U·kg - 1 185 2176 ±0195 3121 ±0110 1103 ±0104 6157 ±1132 32113 ±13161
　　　与溶剂对照组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105 　3 3 P < 0101 vs solution control group
表 4 　染料木素对胎鼠畸形的影响
Table 4 　Effect of genistein on deformity of rat fetuses
组　别
剂　量
/ (mg·kg - 1)
活胎数
/ 只
外观畸形率
畸形数/ 检查数 / %
内脏畸形率
畸形数/ 检查数 / %
骨骼畸形率
畸形数/ 检查数 / %
溶剂对照 - 236 0/ 236 　0 2/ 118 　1169 13/ 118 　11102
染料木素 16 242 0/ 242 0 0/ 121 0 10/ 121 8126
160 207 0/ 207 0 0/ 103 0 1/ 104 0196 3 3
480 223 0/ 223 0 0/ 111 0 1/ 112 0189 3 3
VA 15 000 U·kg - 1 185 58/ 185 31135 3 3 0/ 111 0 41/ 93 44109 3 3
　　　与溶剂对照组比较 : 3 3 P < 0101
　　　3 3 P < 0101 vs solution control group
　　本实验溶剂对照组 (蒸馏水) 对孕鼠和胎鼠的
各项毒效应观察指标均无影响 ,而阳性对照组不但
对孕鼠有母体毒性 ,而且对胎鼠也有明显的致畸性
效应 ,表明本实验系统是可靠的。本实验给药时间
覆盖了整个致畸敏感期 ,结果表明染料木素不影响
受精卵着床和着床后胚胎存活和发育 ,对胎鼠也无
致畸性。因此 ,在本实验条件下 ,染料木素对孕鼠无
母体毒性、对胎鼠无胚胎毒性及致畸作用。
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·519·中草药 　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 35 卷第 8 期 2004 年 8 月