全 文 ：件上下功夫。
另一方面 ,本实验中菌株的产孢情况及长速情
况在几种培养基上并没有显著的差异 ,提示我们要
改善菌丝生长力和产孢力以达到一个较大的飞跃 ,
可能要跳出常规培养寻求特殊培养条件才行。 本实
验中 CY-8202所显示的巨量产孢和良好传代繁殖
能力 ,仍有可能成为虫害生物防治的一个潜在优势
菌株。
3. 2　对于虫草类真菌所产生的抗生素 ,一直以来研
究并不多 ,主要有虫草素 (co rdycepin) [ 6]、环孢菌素
( cyclosporin)
[7 ]、蛇形虫草素 ( ophiocordin) [8 ]及另
外的三两个腺苷类抗菌素 [9 ]。 其主要抗细菌的是分
离自蛹虫草 Cordyceps mili taris , 成分为 3’ -脱氧腺
苷的虫草素 (六七十年代亦报道过虫草素的抗癌作
用 )。虫草素以抑制枯草杆菌、鸟结核杆菌和牛型结
核杆菌为特点 ,但不能抑制金黄色葡萄球菌、 藤黄
八叠球菌、 大肠杆菌、 魏氏芽孢杆菌、变形芽孢杆
菌、溶血链球菌、粪链球菌或败血巴斯德氏菌 等细
菌的生长 [6 ]。在冬虫夏草 [10, 11 ]及其培养菌丝 [ 12]的醇
提物中已分离到腺嘌呤和腺苷 ,但至今未有得到虫
草素的报道 [13 ]。本实验菌株除具备对枯草杆菌的抗
菌活性外 ,还对多个革兰氏阳性和阴性的细菌菌株
有强力抗性 ,具有相对广泛的抗菌谱 ,而且抗菌物为
分泌型。初步表明 ,这株冬虫夏草分离菌除了可能具
有产虫草菌素的活性以外 ,还具有分泌产出其它更
广谱抗生素的能力。
关于 CY-8202菌株的活性广谱抗细菌机制 ,
及其抗菌有效成分与虫草素的异同 ,正在深入研究
之中。
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良种银杏幼苗叶质量分析 (Ⅱ )
杨义芳 ,夏野鹰 ,王　晖 ,陈优生
(江西省药物研究所 ,江西 南昌　 330029)
摘　要:目的　进行良种银杏幼苗叶质量分析。方法　采用 RP-HPLC-ELSD法测定良种银杏幼苗叶内酯含量。结
果　总内酯含量 , 6月份高于 8月份 , 11月份含量明显下降 ;嫁接苗高于实生苗 ,雄性高于雌性。结论　活性成分含
量与生长季节、树龄、培育方式、生长环境、立地条件等诸因素有关。由主要活性成分 BB与 GB综合评价:江西良种
银杏幼苗叶优于文献报道的银杏叶的质量。
关键词: 良种银杏幼苗叶 ;银杏内酯 ; RP-HPLC-ELSD;质量分析
中图分类号: R282. 6　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0068 05
·68· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2000-04-09作者简介:杨义芳 ( 1949-) ,男 ,江西省兴国县人 ,江西省药物研究所研究员 ,主要从事新药研究工作 ,主持国家级新药研究项目多项 ,在省级以上刊物发表论文 30余篇。 Tel: 079-8106314。
* 江西中医学院药学系 94药学实习生
Quality analysis of seedling leaves of Ginkgo bilobaⅡ
YANG Yi-fang , X IA Ye-ying , WANG Hui , CHEN You-sheng
　　 ( Jiangxi Institute o f Materia Medica, Nanchang Jiangxi 330029, China)
Abstract: Object　 To stuay the quali ty of seedling leaves cultured f rom improved variety o f Ginkgo
biloba L. . Methods　 The content of terpene lactones in seedling leaves of G. biloba were determined by
RP-HPLC-ELSD. Results　 The content of total terpene lactone producted in Jun. w as more than tha t in
Aug. , and i t w as obviously low er in Nov. . The content o f terpene lactone in g raf ting w as more than that
in seedling. The content of terpene lactone in male t rees w as mo re than tha t in female t rees. Conclusion　
The content o f the active components w as related to the season of g row th, ag e of t ree, raising modes, en-
vironment o f g row th , g eographic conditions and o thers. The evaluation of the content o f the main activ e
components BB and GB show ed that the quali ty o f seedling leaves cultured f rom improved va riety of G.
biloba in Jinagxi is better than that reported by li tera ture.
Key words: seedling leaves from improved variety of Ginkgo biloba L. ; terpene lactones; RP-HPLC-
ELSE; quality analy sis
　　银杏叶 Ginkgo biloba L. 产品风靡全球 ,为了
缓解银杏叶紧缺 ,全国各地纷纷进行大面积速生丰
产银杏种植 ,但其银杏叶质量分析未见报道 ,本文就
江西 3个县 8地银杏良种壮苗基地及采穗圃银杏
叶活性成分银杏萜内酯含量 ,采用反相高效液相色
谱蒸发光散射检测器 ( RP-HPLC-ELSD)进行测定
与分析 ,以便评价不同银杏育苗地立地条件类型、不
同生长期和雌雄银杏幼苗叶的质量。现报道如下:　
1　材料与方法
1. 1　仪器: 岛津 LC-10AT、 C-R 6A记录器 ; ALL-
T ECH 500ELSD检测器。
1. 2　试药:四氢呋喃为进口分装 ,甲醇为色谱试剂 ,
其它均为分析纯试剂 ;聚酰胺: 柱层析用 ( 30～ 60
目 )。银杏叶分别于 1997年 6, 8, 11月采集于江西农
大、安义、靖安、奉新等 3县 9个不同良种基地或采
穗圃 (种源均系同一批从山东郯城调入 ,定株 2年 )
及南昌一公园 (树龄约 50年 )。采集方式: 每丘面积
约为 10 m2 ,在同丘典型采集生长量最大、居中、最
小的苗木 ,从样株不同方位和部位均匀采取各约
200 g叶 ,经 60℃ 烘干 ,粉碎 ,过 60目筛 ,备用。
对照品:银杏内酯 A, B, C ( GA, GB, GC) 及白
果内酯 ( BB)等 4个对照品 ,系我们从银杏叶中分
离 ,鉴定 , HPLC分析 ,含量均> 98% 。
1. 3　色谱条件: 色谱柱: phenomenex , luna C18 ( 2)
4. 6 mm× 150 mm 5μm; 流动相:水 -甲醇-四氢呋
喃 ( 75∶ 20∶ 10) ;流速为 1. 0 mL /min; 蒸发光散
射检测器 ,漂移管温度: 105℃ ,载气高纯氮气流速
为 3. 1 1 L /min;纸速为 0. 5 cm / min ;进样量 2 0
μL;外标二点法。 HPLC色谱分离见图 1。
图 1　银杏萜内酯 HPLC图谱
2　结果与分析
2. 1　线性关系: 取配制的对照品溶液 ( GC: 1. 56
mg /mL; BB: 2. 88 mg /mL; G A: 1. 52 mg /mL; GB:
1. 64 mg /mL) 2, 1, 0. 5, 0. 375, 0. 25, 0. 195 mL释
稀至 2 mL,以峰面积的自然对数为横坐标 ,以浓度
的自然对数为纵坐标作图 ,回归方程见表 1。
2. 2　样品预处理探讨: 提取溶剂的选择比较了
60% 丙酮 , 50%、 60% 、 70%、 80% 乙醇 , 20% 、
80% 、 90% 甲醇及无水甲醇 ,结果说明最佳溶剂为
70% 乙醇。超声时间的比较 ,选 30 min。水洗脱量
的选择:样品溶液上聚酰胺柱后水洗脱量为 60 mL,
以 10 mL为 1份收集 ,结果表明洗脱量为 50 mL
即可。萃取次数选择 ,结果表明醋酸乙酯萃取 4次
即已完全。
2. 3　对照品精密度: RSD (% ,n= 5)分别为 BB:
0. 70; GA: 1. 78; GB: 2. 0; GC: 1. 28。
2. 4　样品精密度: RSD (% , n = 5) 分别为 BB:
1. 0; GA: 0. 70; GB: 1. 67; GC: 1. 46; 总内酯:
1. 78。
2. 5　稳定性试验: 取银杏叶供试品溶液进行稳定性试
验 ,测定结果表明在 48 h之内内酯含量无明显改变。
2. 6　样品测定:取银杏叶干燥粉末 3 g , 精密称定 ,
·69·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
置三角烧瓶中 ,精密加 70% 乙醇水溶液 50 mL, 超 声处理 30 min, 滤过 ,量取续滤液 15 m L, 蒸去乙
表 1　银杏萜内酯回归方程
内　酯 回归方程 r 线性范围 (_ g )
银杏内酯 A Y= 0. 59X - 8. 31 0. 998 7 1. 9～ 15. 2
银杏内酯 B Y= 0. 65X - 8. 95 0. 999 8 2. 05～ 16. 4
银杏内酯 C Y= 0. 63X - 8. 81 0. 999 6 1. 96～ 15. 6
白果内酯 Y= 0. 67X - 9. 24 0. 998 8 3. 6～ 28. 8
醇 ,加水 15, 10, 10 mL转置 2 g聚酰胺柱 (柱直径
1. 5 cm )上 ,用水洗脱 ,收集洗脱液 50 mL, 用醋酸
乙酯萃取 4次 ,用量分别为 30, 20, 15, 15 m L。合并
萃取液于圆底烧瓶中 ,用旋转真空蒸发器蒸干后 ,用
无水甲醇将瓶中残留物转移至 5 mL容量瓶中 ,并
稀释至刻度 ,摇匀 ,测定。
2. 6. 1　实生苗银杏叶内酯含量测定:见表 2。
2. 6. 2　嫁接苗银杏叶内酯含量测定:见表 3。
2. 6. 3银杏叶内酯比较: 见图 2～ 4。
　　 1-嫁接苗　 2-实生苗　　　　　　　 1-实生苗　 2-嫁接苗
　　 3-50年树龄 3-50年树龄
图 2　实生苗与嫁接苗及 50年树龄不同采收期总内酯
含量的比较
图 3　 6月份与 11月份采取的实生苗银杏内酯含量比较
3　讨论
3. 1　银杏良种壮苗基地定植 2年银杏叶总内酯含
量高出公园生长约 50年银杏树 3倍余。郁青等 [ 1]
曾对来自江苏等 7个省 45份银杏叶样品进行内酯
含量测定 ,树龄为 2～ 500年 ,含量最高为 0. 58% ,
低的几乎测不出 ,但含量高的各省都有 ,多为 1～ 5
年内的苗叶 ,本文报道含量高达 1. 066% (嫁接苗 ,
雄性 )。六月份的平均含量亦在 0. 6% 以上 ,由此可
见 ,经过良种优选的品种 ,定植 2年即可获得高含
量活性成分的银杏叶。 实生苗 6月份略高于 8月
份 , 11月份明显下降。生长量比较似乎说明生长旺
盛苗木的叶含量偏低。尽管来源同一种源 ,但不同生
长地总内酯含量不尽相同。
图 4　 6月份采取雌雄不同性别嫁接苗银杏内酯比较
3. 2　嫁接苗总内酯含量明显高于实生苗 , 6月份高
于 8月份 ,雄性高于雌性。
3. 3　实生苗: 6月份内酯含量排序 (占总内酯百分
数 ): BB ( 44. 99% ) > GA ( 26. 19% ) > GB
( 14. 76% )> GC ( 13. 37% ) , 8月份与上述相似 ,但
11月份 BB明显下降 ( 30. 10% )。
　　嫁接苗: 雌雄性别内酯含量有明显不同 , 雌性
内酯 GA含量高于 BB, 尤其 6月份 , GA /BB为
1. 39; 雄性恰相反 , 8月份 BB /GA为 1. 37, BB占
总内酯 41. 41% , 嫁接苗 6月份内酯含量排序 (占
总内酯百分数 ): GA ( 36. 48% ) > BB ( 34. 47% ) >
GC ( 15. 00% ) > GB ( 13. 91 )。 8 月 份: BB
( 38. 18% ) > GA ( 32. 26% )。国外许多厂商对银杏
叶提取物中内酯 BB有含量要求 , 甚至要求占总内
酯的 50% 以上。我国文献报道 [1 ] 6个省 22份样品
内酯均 值 排序 (占 总 内 酯 的百 分 数 ): BB
( 38. 5% ) > GA ( 32. 0% ) > GC ( 20.% ) > GB
( 15. 4% )。 国外文献 [2 ]银杏叶总内酯含量为
0. 156% , BB ( 41. 03% ) > GC ( 20. 51% ) > GA
( 16. 67% ) > GB ( 16. 03)。综上所述 , 以活性成分
较强 BB与 GB综合评价: 宜采集 6月份的实生苗
和雄性嫁接苗银杏叶。良种壮苗基地银杏幼苗叶的
质量明显优于文献报道的银杏叶及公园种植的 50
年树龄的银杏。
·70· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
　　　　　　　　　　　　　　表 2　实生苗银杏幼苗叶萜内酯含量测定结果 (% )
编号 产　　地 采集期: 6-14
BB GA GB GC 总内酯
采集期 8-15
BB GA GB GC 总内酯
采集期 11-15*
BB GA GB GC 总内酯
1 安义县太平 (大 ) 0. 358 0. 229 0. 044 0. 080 0. 711 0. 193 0. 174 0. 075 0. 109 0. 551
2 安义县太平 (中 ) 0. 246 0. 165 0. 088 0. 090 0. 589 0. 363 0. 267 0. 121 0. 148 0. 899
3 安义县太平 (小 ) 0. 408 0. 169 0. 061 0. 059 0. 697 0. 329 0. 178 0. 069 0. 172 0. 748
( 1～ 3)平均值 0. 337 0. 188 0. 064 0. 076 0. 665 0. 295 0. 206 0. 088 0. 143 0. 733
4 安义县桃花 (大 ) 0. 240 0. 099 0. 038 0. 083 0. 460 0. 257 0. 134 0. 096 0. 123 0. 610
5 安义县桃花 (中 ) 0. 211 0. 149 0. 116 0. 083 0. 559
6 安义县桃花 (小 ) 0. 225 0. 111 0. 045 0. 081 0. 462
( 4～ 6)平均值 0. 225 0. 120 0. 066 0. 082 0. 494
7 安义县桃花 (大 ) 0. 206 0. 131 0. 087 0. 081 0. 505
8 安义县桃花 (中 ) 0. 217 0. 151 0. 085 0. 113 0. 566
9 安义县桃花 (小 ) 0. 208 0. 139 0. 079 0. 067 0. 493 0. 187 0. 173 0. 092 0. 100 0. 552
( 7～ 9)平均值 0. 207 0. 135 0. 083 0. 074 0. 499 0. 202 0. 162 0. 088 0. 106 0. 558 0. 294 0. 185 0. 109 0. 114 0. 702
10 靖安县乡田 (大 ) 0. 191 0. 069 0. 032 0. 073 0. 365 0. 252 0. 118 0. 071 0. 111 0. 552
11 靖安县乡田 (中 ) 0. 328 0. 208 0. 086 0. 082 0. 704 0. 249 0. 117 0. 072 0. 074 0. 512
12 靖安县乡田 (小 ) 0. 231 0. 188 0. 121 0. 091 0. 631 1. 144 0. 124 0. 074 0. 076 0. 418
( 10～ 12)平均值 0. 250 0. 155 0. 079 0. 082 0. 566 0. 215 0. 120 0. 072 0. 087 0. 494 0. 154 0. 065 0. 037 0. 072 0. 328
14 靖安县园艺场 (中 ) 0. 131 0. 115 0. 060 0. 074 0. 380 0. 163 0. 135 0. 080 0. 091 0. 469
15 靖安县园艺场 (小 ) 0. 357 0. 189 0. 090 0. 108 0. 744 0. 232 0. 104 0. 067 0. 085 0. 488
( 14～ 15)平均值 0. 244 0. 152 0. 075 0. 091 0. 562 0. 197 0. 120 0. 073 0. 088 0. 478 0. 156 0. 223 0. 158 0. 185 0. 722
20 奉新山东 (大 ) 0. 309 0. 109 0. 157 0. 090 0. 665 0. 179 0. 137 0. 065 0. 073 0. 454
21 奉新山东 (中 ) 0. 336 0. 234 0. 198 0. 080 0. 848 0. 223 0. 102 0. 076 0. 094 0. 495
22 奉新山东 (小 ) 0. 247 0. 148 0. 070 0. 070 0. 535 0. 357 0. 141 0. 073 0. 108 0. 679
( 20～ 22)平均值 0. 297 0. 164 0. 142 0. 080 0. 683 0. 253 0. 127 0. 071 0. 092 0. 543 0. 140 0. 081 0. 038 0. 061 0. 320
23 奉新坪上 (大 ) 0. 211 0. 207 0. 123 0. 070 0. 611 0. 178 0. 178 0. 073 0. 116 0. 545
24 奉新坪上 (中 ) 0. 265 0. 147 0. 070 0. 060 0. 524
25 奉新坪上 (小 ) 0. 309 0. 188 0. 065 0. 090 0. 652 0. 307 0. 217 0. 107 0. 173 0. 804
( 23～ 25)平均值 0. 262 0. 181 0. 086 0. 073 0. 602 0. 242 0. 197 0. 090 0. 144 0. 674 0. 091 0. 179 0. 115 0. 157 0. 542
26 奉新港下 (大 ) 2. 210 0. 077 0. 074 0. 057 0. 418 0. 243 0. 122 0. 089 0. 096 0. 550
27 奉新港下 (中 ) 0. 076 0. 180 0. 084 0. 102 0. 442
28 奉新港下 (小 ) 0. 155 0. 100 0. 071 0. 043 0. 369 0. 175 0. 064 0. 042 0. 069 0. 350
( 26～ 28)平均值 0. 183 0. 088 0. 073 0. 050 0. 394 0. 165 0. 122 0. 072 0. 089 0. 448 0. 038 0. 127 0. 066 0. 064 0. 259
总内酯均值± SD (大 ) 0. 534± 0. 131 0. 467± 0. 211
总内酯均值± SD (中 ) 0. 604± 0. 159 0. 483± 0. 263
总内酯均值± SD (小 ) 0. 560± 0. 113 0. 577± 0. 172
总平均值± SD 0. 256± 0. 069
0. 151
±0. 048
0. 085
± 0. 040
0. 077
±0. 014
0. 569
± 0. 134
0. 228
± 0. 074
0. 148
± 0. 046
0. 079
± 0. 017
0. 110
± 0. 032
0. 563
±0. 137
0. 15±
0. 086
0. 14±
0. 063
0. 09±
0. 048
0. 11±
0. 053
0. 49±
0. 197
公园种植 (树龄约 50年 ) 0. 174 0. 055 0. 072 0. 031 0. 030 0. 187
　　* 未分生长量大、中、小的苗木采集。 注:表中的结果系二次测定的平均值 (以下表均同 )
　　　　　　　　　　　　　　　表 3　嫁接苗银杏幼苗叶萜内酯含量测定结果 (% )
编号 嫁接地 来源性别 采收期 6-14
BB GA GB GC 总内酯
采收期 8-15
BB GA GB GC 总内酯
16 靖安县园艺场 波阳 雌 0. 152 0. 284 0. 098 0. 080 0. 614 0. 199 0. 119 0. 059 0. 056 0. 433
19 靖安县园艺场 万载 雄 0. 296 0. 179 0. 082 0. 144 0. 701 / / / / /
平　均　值 0. 224 0. 232 0. 090 0. 112 0. 658 / / / / /
29 江西农大 南康 雌 0. 156 0. 177 0. 076 0. 089 0. 498 0. 181 0. 222 0. 110 0. 092 0. 605
32 江西农大 南康 雄 0. 083 0. 160 0. 080 0. 062 0. 385 0. 187 0. 239 0. 065 0. 089 0. 580
30 江西农大 信丰 雌 0. 218 0. 242 0. 126 0. 132 0. 718 0. 178 0. 224 0. 102 0. 105 0. 609
31 江西农大 信丰 雄 0. 490 0. 382 0. 090 0. 104 1. 066 0. 426 0. 114 0. 086 0. 111 0. 737
33 江西农大 铅山 雄 0. 167 0. 228 0. 081 0. 069 0. 545 0. 183 0. 227 0. 087 0. 090 0. 587
平　均　值 0. 223 0. 238 0. 091 0. 091 0. 643 0. 231 0. 205 0. 090 0. 097 0. 624
均值± SD
雌
雄
0. 175±
0. 037
0. 259±
0. 177
0. 234±
0. 054
0. 237±
0. 101
0. 100±
0. 025
0. 083±
0. 004
0. 100±
0. 028
0. 095±
0. 038
0. 610±
0. 110
0. 674±
0. 291
0. 186±
0. 011
0. 265±
0. 139
0. 188±
0. 060
0. 193±
0. 069
0. 090±
0. 027
0. 079±
0. 012
0. 088±
0. 019
0. 097±
0. 011
0. 549±
0. 100
0. 640±
0. 074
总平均值± SD 0. 223±
0. 135
0. 236±
0. 078
0. 090±
0. 017
0. 097±
0. 031
0. 647±
0. 218
0. 226±
0. 098
0. 191±
0. 058
0. 085±
0. 020
0. 091±
0. 018
0. 592±
0. 097
·71·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
参考文献:
[1 ]　郁　青 ,沈兆邦 ,陈　祥 ,等 .’ 97中国银杏开发研讨会文集汇编
[C ]. 上海:国家科委中国农村技术开发中心 , 1996.
[2 ]　 Camponov o F F, Wolfender J L, Mail lard M P, et al . Evapora-
tive ligh t scattering and thermosp ray mass spect rom et ry: tw o al-
ternativ e metod s for detection and quan ti tation liquid ch ro-
matog raphic d etermination of ginkgolid es and bi lobalide in
Ginkgo biloba leaf ext ract s and ph ytoph armaceu ticals [ J] . Ph y-
tochem Anal , 1995, 6 (3) : 141-148.
阳春砂的 ITS序列分析
周　联 ,王培训 ,黄　丰 ,曹柳英 ,梁瑞燕
(广州中医药大学临床药理研究所 ,广东 广州　 510405)
摘　要: 　目的　用 ITS全序列鉴别各地产阳春砂及常见伪品。 方法　从各地产阳春砂及常见伪品绿壳砂和海南
砂中提取总 DN A,以核基因组通用引物 ITS为引物进行扩增 ,扩增产物经纯化后 ,用 PCR产物直接法进行测序。
结果　各样品的 ITS序列总长度均为 626 bp,其中 ITS-1序列长度为 248 bp, 5. 8 S序列长度为 155 bp, ITS-2序
列长度为 223 bp; 6个阳春砂和绿壳砂的 ITS-2序列完全一致 ,各样品的 5. 8 S序列完全一致 ,在 ITS-1中各样品
却有不同的碱基位点。结论　 ITS-1序列可对阳春砂的道地性作出鉴别 ,明显区分其伪品。
关键词: ITS序列 ;测序 ;阳春砂 ;中药鉴别
中图分类号: R282. 710. 3　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0072 04
ITS sequence analys is of Amomum villosum
ZHOU Lian, W ANG Pei-xun, HU ANG Feng , CAO Liu-ying , LIAN G Rui-yan
　　 ( Institute of Clinical Pharmaco log y, Guang zhou Univ ersity o f TCM , Guang zhou Gaungdong　 510405, China)
Abstract: Object　 To identi ty Amomum v illosum Lour. f rom dif ferent producing area by IT S se-
quence analy sis.Methods　 Firstly, to tal DN A of A. vil losum f rom di fferent producing area w as ex tracted
and i t s succedaneum or fake w as ex tracted. Secondly, the IT S sequence w as ampli fied by PCR with uni-
versal primer o f IT S and sequencing ITS on PCR product w as directly sequenced af ter purification. Results
　 The to tal length of I TS sequence is 626 bp in the dif ferent samples. The ITS sequence can be divided in-
to th ree f ragments: the leng th o f I TS-1 is 248 bp, 5. 8 S is 155 bp and ITS-2 is 223 bp respectiv ely. In all
the samples, 5. 8 S has the same sequence. Six A. villosum from dif ferent producing area and Luqiao amo-
mum have the same ITS-2 sequence. But ITS-1 fragment has big ger div ersi ty in ba se sequence among the
va rious specimens. Conclusion　 ITS-1 sequence can be used to confi rm producing a rea o f A. vil losum , a nd
find out i ts fake.
Key words: ITS sequence; analy sis o f ITS sequence; Amomum vi llosum Lour. ; Chinese materia medi-
ca identification
　　 PCR直接测序法是 90年代迅速发展起来的测
序技术 ,具有快速、灵敏、准确率高等特点。 近几年 ,
该技术在中药材的鉴别中得到一定的应用 ,由于目
前绝大多数中药材的基因序列尚不知晓 ,所以现阶
段的中药材测序主要是采用通用引物 ,对样品进行
PCR扩增 ,然后进行小片段的测序。常见的引物有
rbcL (叶绿体基因组 )、 IT S等 (植物类核基因组 )、
cty-b (动物类线粒体基因组 )等。其中 , ITS-1序列
变异较快 ,可用于解决属下不同种的系统发育和分
类问题 [1 ]。
阳春砂为四大南药之一 ,是常见的芳香化湿中
药 ,具有化湿行气 ,温脾止泻、安胎等功效。我们曾用
RAPD (随机扩增多态性 DNA)技术对不同产地的
阳春砂与姜科多种常见伪品进行了鉴别分析 ,结果
·72· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2001-03-14基金项目:国家中医药管理局科研基金 ( 950379) ;广东省自然科学基金 ( 950615)作者简介:周联 ,男 ,广东人 ,硕士 ,广州中医药大学临床药理研究所副研究员 ,长期从事中西医结合基础研究工作 ,分子生物学技术在中药鉴别中的应用是主要研究方向之一 ,主讲《医学分子生物学课程》 ,曾主持或参加国家、部、省级研究项目 15项 ,发表论文
20余篇 ,是国家级继续教育项目教材《分子生物学技术在中药鉴别中的应用》的主编 ,《中药免疫学》的主要编写人员 ,现正在参与主编《中药的分子生物学鉴别》一书。 E-mail: zl@ gzh tcm. edu. cn