全 文 ：(SP)、神经原纤维缠结 (N FT ) 及神经元丢失。目前
AD 的确切发病机制尚不清楚, 其病因可能是多源
性的, 包括基因异常、代谢失调、脑血管因素、环境因
素等。近年研究表明, 胆固醇与 Β淀粉样蛋白 (am y2
lo id beta2p ro tein, A Β) 相互作用, 在 AD 的发病机
制中起着重要作用[2 ]。本实验采用长期喂饲高胆固
醇饲料的方法建立了高胆固醇血症大鼠, 发现大鼠
长期喂饲高胆固醇饲料后, 可出现高胆固醇血症和
学习记忆障碍, 表现为在M o rris 水迷宫的定位航行
试验中, 模型组的逃避潜伏期和游出距离较正常组
明显延长, 空间探索试验中, 模型组大鼠在平台象限
游泳路径长度占总路径长度的百分比也较正常组明
显缩短, 血清 TC 和 LDL 2C 升高, 表明高胆固醇血
症可引起动物的学习记忆障碍。
本实验表明, T SG 可明显改善模型大鼠的学习
记忆能力, 降低血清 TC、LDL 2C 水平, 说明 T SG
可改善高胆固醇血症引起的学习记忆障碍, 其作用
机制与降低血清 TC、改善脂质代谢等作用有关。本
研究为 T SG 临床治疗AD 提供了实验依据。
References:
[ 1 ]　M ich ikaw a M 1 T he ro le of cho lestero l in pathogenesis of
A lzheim er’s disease: dualm etabo lic in teraction betw een am y2
lo id beta2p ro tein and cho lestero l [J ]1 M ol N eu robiol, 2003,
27 (1) : 12121
[ 2 ]　Refo lo L M , M alester B, L a F ranco is J , et a l. H yper2
cho lestero lem ia accelerates the A lzheim er’s am ylo id patho lo2
gy in a transgen ic mouse model [J ]1 N eu robiol D is, 2000, 7
(4) : 32123311
[ 3 ]　M o rris R 1 D evelopm ents of a w ater2m aze p rocedure fo r
studying spatial learn ing on the rat [J ]1 J N eu rosciM ethod s,
1984, 11: 472601
染料木素对大鼠生殖毒性的实验研究 (Ë )
围产期毒性
许建宁1, 王全凯1, 崔　涛1, 罗玉姝1, 王四旺2Ξ
(11 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所, 北京　100050; 21 第四军医大学药物研究所, 陕西 西安　710032)
　　染料木素系从豆科植物槐角 S op hora jap on ica
L. 的干燥成熟果实中提取的异黄酮单体成分, 是具
有弱雌激素样作用又非雌激素类化合物, 称之为植
物雌激素。流行病调查、动物实验和临床观察均发
现, 异黄酮通过抑制骨吸收和促进骨形成过程, 维持
骨代谢的动态平衡, 有效地预防骨质疏松[1, 2 ]。鉴于
染料木素是治疗骨质疏松症的有效药物, 为了保证
其安全使用, 本实验对其进行了大鼠的围产期毒性
试验。
1　材料与方法
111　药物: 染料木素由第四军医大学药物研究所提
供, 纯度> 98%。用蒸馏水将其配成混悬液。
112　动物: 三级健康W istar 大鼠, 由中国药品生物
制品检定所实验动物中心提供, 京动许字 (2000) 第
017 号。动物饲养于中国预防医学科学院二级动物
室 (医动字第 0124018 号) , 室内温度为 24～ 26 ℃,
相对湿度为 40%～ 60% ; 喂饲军事医学科学院实验
动物中心提供的清洁级繁殖鼠料[京许字 (2000) 013
号 ]; 动物进入动物室后适应环境 1 周。
113　试验方法[1, 2 ]: 健康W istar 雄、雌性大鼠各 84
只, 体重分别为 280～ 300 g 和 185～ 205 g。大鼠按
1∶1 合笼, 合笼时间不超过 5 d, 以查到阴栓确定为
交配成功, 计为妊娠第 0 天。将孕鼠随机分为 4 组,
溶剂对照组和 3 个给药组, 分别 ig 5 mL ökg 蒸馏水
和 16、160、480 m gökg 染料木素。从妊娠第 15 天至
哺乳第 28 天, 每日 1 次, 连续 ig 给药。仔鼠断乳后,
处死母鼠 (F0 代)。仔鼠 (F1 代) 生长至 28 d 断乳
时, 处死部分动物, 且各组均保留 19 窝, 每窝保留
F1 代雌、雄仔鼠各 2 只 (2 对)。
114　观察指标[1～ 3 ]
11411　观察母鼠每天的饮水、摄食等一般状况, 记
录母鼠妊娠期、哺乳期的体重变化、受孕率、死亡率、
妊娠分娩时间、产仔数、胎仔性别比例、胎仔的外观
畸形等。记录母鼠主要脏器 (心、肺、脾、肝、肾、子
宫)的质量并检查内脏畸形。
11412　观察仔鼠一般生活状况。记录仔鼠出生存活
率、哺乳存活率; 28 d 断乳时部分动物主要脏器
(心、肺、脾、肝、肾、睾丸ö子宫) 的质量并检查内脏
·9721·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004201208
作者简介: 许建宁 (1968—) , 女, 硕士, 副研究员, 硕士生导师, 主要从事化学物致突变、致癌机制和化学物安全性评价方面的研究及检测
工作, 专长为遗传毒理学。T el: (010) 83132918　E2m ail: Xu jiann ing@yahoo. com
畸形。每日上午记录仔鼠生理发育 (耳廓分离、张耳、
出毛、切牙萌出、睁眼、睾丸下降、阴道张开)、反射发
育 (平面翻正、运动状况、负趋地性、悬崖回避、触须
定位、空中翻正、视觉定位) 各项指标出现和达标的
时间, 试验于安静的房间内进行。
11413　对各组每窝的 1 对仔鼠进行行为指标的测
试; 各组每窝的 1 对仔鼠继续饲养至 10 周龄以上检
查生殖功能, 不同窝仔鼠按 1∶1 配对, 交配期限为
5 d, 观察记录其交配率、受孕率、胚胎发育情况等。
115　数据统计: 各项数据用 O ffice 2000 的 Excel
和 SA S 软件进行统计分析, 计数资料用 ς 2检验; 计
量资料用 t 检验。仔鼠断乳前以窝为单位统计, 断乳
后以个体为单位统计。
2　结果
211　动物交配情况: 雌、雄性各 84 只大鼠按 1∶1
配对同笼, 5 d 内均查到阴栓, 确定为交配成功, 交
配率为 100%。
212　染料木素对母鼠 (F0 代) 体重的影响: 母鼠 (F0 代) 在围产期和哺乳期摄食、饮水等状况良好;围产期、妊娠期各给药组孕鼠体重与溶剂对照组比较差异不显著 (P > 0105) ; 哺乳期各给药组动物体重增长低于溶剂对照组, 但差异不显著 (P > 0105)。213　染料木素对母鼠脏器系数的影响: 各组母鼠的心脏系数与溶剂对照组比较存在明显差异 (P <0105) , 并呈剂量2反应关系, 提示受检样品可能对母鼠的心脏有一定的影响。肉眼对主要脏器进行观察,发现 160 m gökg 剂量组有 2 例动物子宫明显增大。结果见表 1。214　染料木素对 F1 代仔鼠存活和生长的影响: F1代仔鼠出生时, 溶剂对照组、160、480 m gökg 染料木素组各有 1 窝中的 1 只 F1 代仔鼠有外观畸形, 分别表现为唇角瘀血、无尾、头部异常; 16 m gökg 剂量组出生胎仔数比溶剂对照组增多。各给药组围产期胎仔存活率、死亡率与溶剂对照组比较差异不显著(P > 0105) , 哺乳期, 480 m gökg 剂量组胎仔死亡率与溶剂对照组比较差异显著 (P < 0105) , 结果见表 2。
表 1　母鼠脏器系数 (x±s, n= 10)
Table 1　Organ coeff ic ien ts of female rats (x±s, n= 10)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) 心 肺 肝 脾 肾 子宫
对照 - 01338±01034 01490±01065 51562±01433 01279±01034 01839±01050 01231±01053
染料木素 16 01367±010103 01533±01044 51275±01626 01274±01028 01877±01069 01259±01046
160 01398±010363 3 01551±01080 51197±01627 01280±01049 01860±01067 01292±010463
480 01408±010903 01531±01056 51202±01400 01263±01040 01860±01048 01274±01106
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
表 2　围产期和哺乳期 F1 代存活情况
Table 2　L iv ing off spr ing of F1 at per inata l and lactation per iod
组　别
剂　量ö(m g·kg- 1) 母鼠数ö只 受孕率ö% 　 　出生仔鼠　 　总数ö只　　x±s 　围产期仔鼠存活　ö% 　活仔数ö总仔数 　围产期仔鼠死亡　ö% 　死仔数ö总仔数 　哺乳期仔鼠存活　ö% 　活仔数ö总仔数 　哺乳期仔鼠死亡　ö% 　死仔数ö总仔数 仔鼠性比(®∶♀)
对照 - 21 　95124 244 1212±117 98136 240ö244 1164 4ö244 99158 239ö240 0142 1ö240 1∶0178 (134∶105)
染料木素 16 21 90148 2563 1315±116 98144 252ö256 1156 4ö256 98141 248ö252 1159 4ö252 1∶0176 (141∶107)
160 21 100 266 1216±118 98150 262ö266 1150 4ö266 99124 260ö262 0176 2ö262 1∶0194 (134∶126)
480 21 100 264 1215±312 98186 261ö264 1114 3ö264 96118 251ö261 31833 10ö261 1∶1102 (128∶130)
　　　与对照组比较: 3 P < 0105
　　　3 P < 0105 vs con tro l group
　　各给药组胎仔平均体重与溶剂对照组比较无明
显差异 (P > 0105) ; 断乳时处死部分仔鼠, 肉眼检查
发现, 溶剂对照组和 16 m gökg 剂量组各有 1 只雄
性仔鼠的肾脏积尿, 这些变化均为低频率, 无剂量相
关性; 各给药组 F1 代雌性动物主要脏器系数与溶
剂对照组比较差异无显著性 (P > 0105) ; F1 代雄性
动物 16 m gökg 剂量组心脏、肺、睾丸系数, 480
m gökg 剂量组肺系数与溶剂对照组比较差异显著
(P < 0105) , 见表 3, 无剂量2反应关系, 考虑到将各 窝体重较大的雄性动物留于检查生殖功能, 而动物体重偏小影响脏器系数, 使之偏大, 因此不能确定是染料木素的影响。　　断乳后前两周各给药组 F1 代体重增长均低于溶剂对照组, 差异显著 (P < 0105) , 见表 4 和 5; 断乳两周后, 各给药组 F1 代体重逐步增长, 至交配前与溶剂对照组比较差异无显著性 (P > 0105) , 见表4 和 5, 但 480 m gökg 剂量组雄性 F1 代体重至交配前仍低于其他各组, 见表 5。
·0821· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
表 3　断乳时雄性 F1 代脏器系数 (x±s)
Table 3　Organ coeff ic ien ts of F1 male rats at wean ing per iod (x±s)
组　别
剂　量ö(m g·kg- 1) 动物ö只 心 肺 肝 脾 肾 睾丸
对照 - 33 01437±01027 01784±01102 51115±01425 01480±01085 11157±01112 01663±01068
染料木素 16 38 01477±010563 3 01915±011593 3 51009±01879 01509±01079 11216±01160 01726±010933
160 29 01452±01051 01807±01131 41857±01669 01446±01064 11209±01133 01692±01074
480 33 01452±01054 01919±012023 3 41866±01581 01516±01144 11156±01152 01681±01081
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
表 4　断乳后雌性 F1 代体重变化 (x±s, n= 38)
Table 4　Change of body we ight of F1 female rats af ter wean ing (x±s, n= 38)
组　别
剂　量ö(m g·kg- 1) 出生天数öd28 35 42 49 56 63
对照 - 68158±5199 104174± 8155 134158±10140 157161±11171 180134±11134 197100±12189
染料木素 16 62199±61873 3 100176± 71783 133161± 9190 159145±10187 178161±12166 198139±14105
160 64196±61953 101100± 71483 138105± 8172 162155± 91453 180139±11119 200174±10144
480 62199±71303 3 99105±101893 134137± 9173 161163± 9162 180100±11132 201192±12111
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
表 5　断乳后雄性 F1 代体重变化 (x±s, n= 38)
Table 5　Change of body we ight in F1 male rats af ter wean ing (x±s, n= 38)
组　别
剂　量ö(m g·kg- 1) 出生天数öd28 35 42 49 56 63
对照 - 73107±6131 115187± 8115 167184±10171 219126±12134 267121±13102 297145±16105
染料木素 16 67151±71273 3 114163± 8181 168182±13130 220108±14147 260166±18120 297176±20106
160 70136±5169 115176± 8108 170161± 8195 225179± 91853 263166±13158 306176±14128
480 66146±91143 110108±141993 163132±16168 214124±191283 3 250137±271543 3 290197±26120
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
215　染料木素对 F1 代仔鼠生理发育、行为和生殖
功能的影响: 480 m gökg 剂量组动物耳廓分离和阴
道张开时间晚于溶剂对照组, 有剂量2反应趋势, 差
异显著 (P < 0105) , 见表 6; 160 m gökg 剂量组动物
出毛时间早于溶剂对照组、动物出牙时间晚于溶剂
对照组, 差异显著 (P < 0105) , 见表 6。
　　给药组断乳前行为发育指标平面翻正、负趋地
性、空中翻正、视觉定位, 与溶剂对照组比较差异显
著 (P < 0105) , 见表 7。
　　对断乳后仔鼠进行光电笼测试和转棒试验, 未
见给药组与溶剂对照组存在差异。
　　F1 代每组各 19 只动物避免同窝交配, 各给药
组孕鼠体重、交配率、受孕率、着床率、活胎数、死胎
数、平均窝重与对照组比较差异不显著 (P > 0105)。
160、480 m gökg 剂量组 F1 代孕鼠的黄体数与溶剂
对照组比较差异显著 (P < 0105) , 见表 8, 存在剂量
反应关系。16、160 m gökg 剂量组 F1 代孕鼠的吸收
胎率与溶剂对照组比较差异显著 (P < 0105) , 见表
8, 但这两个剂量组的吸收胎率均低于溶剂对照组。
解剖时, 肉眼观察未见孕鼠和胎鼠有明显异常。
表 6　F1 代生理发育指标
Table 6　Index of physiolog ica l developmen t of F1 rats
组　别
剂量ö(m g·kg- 1) 动物ö只 耳廓分离öd 出毛öd 出牙öd 张耳öd 睁眼öd 第 25 天睾丸下降 阴道张开öd
对照 - 20 2129±0110 14144±0111 7145±0109 11125±0109 14137±0122 20ö20 35198±0198
染料木素 16 19 2124±0111 14140±0110 7146±0108 11126±0106 14135±0110 19ö19 35187±0196
160 21 2127±0108 14135±01103 3 7153±01113 11127±0108 14132±0109 21ö21 36145±1100
480 21 2157±01113 3 14143±0110 7150±0112 11127±0107 14131±0108 21ö21 36169±01973
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
·1821·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
表 7　F1 代反射发育指标
Table 7　Index of ref lex developmen t of F1 rats
组　别
剂量ö(m g·kg- 1) 动物ö只 平面翻正öd 负趋地性öd 断崖回避öd 第 13 天触须定位 空中翻正öd 视觉定位öd
对照 - 20 2178±0115 9128±0108 8144±0114 20ö20 13184±0110 16120±0108
染料木素 16 19 2163±01163 3 9124±0108 8144±0111 19ö19 13194±01103 16123±0109
160 21 2167±01143 9123±0107 8144±0110 21ö21 13184±0108 16126±01093
480 21 2165±01143 3 9120±01093 3 8144±0110 21ö21 13182±0115 16125±01063
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
表 8　F1 代生殖功能
Table 8　Reproductive abil ity of F1 rats
组　别
剂　量ö(m g·kg- 1) 孕鼠体重ög 　　　交配成功　　　ö% 交配数ö动物总数 　　　受孕　 　　ö% 受孕数ö孕鼠数 黄体数(x±s) 着床数(x±s) 　 　活胎　 　总数　　 (x±s) 　　吸收胎　　总数 　ö% 　　死胎　　总数　ö% 窝均重ög
对照 - 318128±25132 94174 18ö19 100 18ö18 1213±219 1518±119 247 1317±318 29 　10143 2 0172 27125±6185
染料木素 16 326194±17124 84121 16ö19 100 16ö16 1315±215 1611±114 247 1514±116 93 3 3149 2 0178 30118±3106
160 323142±18156 100 19ö19 100 19ö19 1414±2133 1613±118 297 1516±118 123 3 3188 0 0 29158±3180
480 329107±17134 78195 15ö19 100 15ö15 1417±2103 1619±118 228 1512±214 24 9145 2 0179 29126±5100
　　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
3　讨论
　　本实验给药时间在雌性动物围产期和哺乳期,
目的是评价药物对雌性动物生殖功能以及胚胎发育
和子代生长发育、生理功能、行为能力、生殖功能等
的影响和程度。结果表明染料木素各组母鼠的心脏
系数与溶剂对照组比较存在明显差异 (P < 0105) ,
存在剂量2反应关系, 提示围产期、哺乳期给予受检
样品引起动物心脏增大; 受检样品剂量高于 160
m gökg 子宫系数较溶剂对照组增大; 孕鼠在围产期
和哺乳期给予高剂量即 480 m gökg 的受检样品, 引
起子代死亡率明显增高, 生理发育滞后, 但对子代行
为、生殖功能无明显影响。本实验结果表明母鼠围产
期、哺乳期服用染料木素引起心脏增大; 染料木素对
母鼠生殖和子代生长发育的无作用剂量为 160 m gö
kg。此结果为染料木素临床应用提供了依据。
References:
[ 1 ]　Xu J N , W ang Q K, Cui T , et a l. Study on rep roductive
tox icity of gen istein É . General rep rodu tive tox icity [J ]1
Ch in T rad it H erb D rug s (中草药) , 2003, 34 (9) : 83028311
[ 2 ]　Xu J N , W ang Q K, L i Z S, et a l. Study on rep roductive
tox icity of gen istein Ê . T eratogen icity tox icity [J ]1 Ch in
T rad it H erb D rug s (中草药) , 2004, 35 (8) : 91429151
[ 3 ]　V ogel H G, V ogel W H 1 D rug D iscovery and E va lua tion2
P harm acolog ica l A ssay s (药理学实验指南——新药发现和药
理学评价) [M ]1 Beijing: Science P ress, 20011
川芎嗪及冰片对蛙黏膜纤毛转运能力的影响
潘　嘉Ξ
(四川省中药研究所 药理室, 四川 成都　610041)
　　川芎具有活血行气、祛风止痛的功效, 是中医用
于治疗头痛及偏头痛的常用药物, 在中医鼻疗法中
的应用频率极高, 其有效成分川芎嗪能扩张小动脉、
抗血小板聚集、改善微循环、对抗血栓形成等, 主要
用于心、脑血管系统疾病。冰片则是开窍醒神的重要
药物, 且常作为佐使之剂与当归、川芎合用以增强其
疗效。蛙黏膜纤毛转运能力实验常作为研究药物对
黏膜清除作用的实验方法之一, 本实验研究川芎嗪
及冰片对蛙黏膜纤毛转运能力的影响, 探讨黏膜纤
毛转运能力实验方法在中药研究中的运用及药物的
·2821· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004202213
基金项目: 国家中医药管理局资助项目 (02—03ZQ 04)
作者简介: 潘　嘉 (1970—) , 女, 四川达川人, 助理研究员, 硕士, 主要从事中药药理学及毒理学研究。
T el: (028) 85237056　E2m ail: pan jia028@ 163. com