全 文 ：1. 331。
3. 4　制剂工艺重现性的比较:本实验所研究的片剂
均系上海五洋制药厂生产 ,经比较不同批号片剂指
纹谱 ,发现各批号片剂总色谱峰为 28个 , 3个以上
批号都出现的峰为 23个 ,其重叠率大于 82% ,有些
小峰可能未能检出 ,降低了其重叠率 ,但已说明不同
批次样品的重现性是很好的。
文中研究的口服液系不同厂家生产 ,在工艺操
作中总会有偏差 , 9个样品中 ,以 7个以上样品都出
现的峰为共有峰计 ,则它们之间的重叠率也大于
57. 5% 。
4　讨论
4. 1　本研究采用了 HPLC-PDA技术对双黄连制
剂进行梯度洗脱 ,一次进样即能得到众多的色谱峰 ,
分离分析效率高 ,且其相对保留值相当稳定 ,所建立
的数字化色谱指纹谱更具稳定性和可控性。
4. 2　本实验采用梯度洗脱技术和 PDA检测器 ,对
双黄连制剂提取物进行分离分析 ,通过一次进样 ,即
能使 210～ 400 nm波长范围内有吸收的所有组分都
能被检测出来。通过 PDA技术获得多组分的三维
图谱 (分析时间 t-波长 λ-吸收值 A )信息 ,可找出每
个峰的最大吸收波长 ,使每个色谱峰都有较大的检
测灵敏度。实验借助三维图 ,截割得到不同吸收波长
的 A-t图 ,通过比较各波长下的色谱图 ,最后选择检
测波长 280 nm,在此波长下 ,出峰数多 ,可提供的信
息多 ,灵敏度高 ,基线平直稳定。
参考文献:
[ 1 ]　华菊根 ,胡立君 ,李国枕 .注射用双黄连质量标准的研究 [ J ].
中成药 , 1996, 18( 11): 13-15.
[2 ]　郭淑敏 ,胡丽君 ,张丽敏 ,等 . 高效液相色谱法测定注射用双黄
连中连翘苷的含量 [ J] .中国中医药科技 , 1997, 4( 2): 93-95.
[ 3]　徐凯建 ,陆义诚 ,孙孝祥 ,等 . HPLC法测定双黄连注射液中绿
原酸、黄芩苷的含量 [ J ]. 中草药 , 1991, 22( 2): 53-55.
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色谱 -相对保留值的指纹分析 [ J] . 药学学报 , 1998, 23 ( 11):
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[5 ]　王新宏 ,范广平 ,安　睿 ,等 . 地榆属几种植物的 HPLC-FPS
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加味脑乐静合剂稳定性的跟踪分析
赵绪元 ,李焕德* ,向大雄 ,王秀良 ,唐晓峦* * ,陈卫林* * ⒇
(中南大学湘雅二医院 药剂科 ,湖南 长沙　 410011)
摘　要: 目的　对加味脑乐静合剂的稳定性进行研究 ,探讨 p H值的变化与微量沉淀形成的关系 ,确保本品安全有
效使用。方法　样品室温下存放 ,对其 p H、沉淀形成及化学成分进行为期 2年的跟踪检测。化学成分的定性用 TLC
和 HPLC法 ,葛根素含量测定采用 HPLC法 ,外标法定量 ( mg /m L)。结果　获得了沉淀和液体部分各自的 TLC和
HPLC特征图谱。 在薄层上可以清楚地检识出甘草和葛根的斑点 ,在 HPLC谱中可以清楚地检识出葛根素的特征
峰 ;随着贮存时间的延长 ,沉淀的量稍有增加 ,而 p H值略有下降。 结论　该液体制剂在贮存期间基本稳定 ,所获实
验数据可为本品的进一步研究提供参考。
关键词: 稳定性 ;加味脑乐静合剂 ; HPLC; TLC
中图分类号: R286. 01; R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 02 0118 03
Studies on stability of JIAWEI NAOLEJING ORAL LIQUOR
*
ZHAO Xu-yuan, LI Huan-de, X IANG Da-xiong , W ANG Xiu-liang , TAN G Xiao-luan, CHEN Wei-lin
( Depar tment of Pha rmacy , Second Xiangya Hospital of Centr al South Unive rsity , Changsha Hu nan 410011, China)
Abstract: Object　 To study the stabili ty o f JIAWEI N AO LEJING ORAL LIQUOR and to find the
rela tionship betw een pH and sedimentation in the O RAL LIQUOR, so a s to ensure i ts safety and ef ficacy.
Methods　 The chemical costi tuents of the O RAL LIQUOR which have been stored fo r 24 months a t room
tempera ture w ere quali ta tiv ely determined by TLC and HPLC, the puerarin was quantitativ ely determined
by HPLC w ith ex ternal standard and expressed in mg /mL. Results　 Cha racteristic T LC and HPLC
spect rum of the sediment and the liquid w as obtained. Spo ts of Radix glycyrrhizae and Radix Puerariae
were clearly distinguished on the plate. HPLC peaks o f puera rin w ere clearly exhibi ted. The content of
sediment in the O RAL LIQUOR increased slowly accompanying time prolonging , but the pH value
·118· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
⒇ 收稿日期: 2001-07-10基金项目:卫生部科技计划 ,湖南省科委重点项目 ( 98ss y1002)
* 通讯联系人 ,教授 ,国家新药评委 , Tel: 0731-5550252　　* * 湖南中医学院 96级实习生
reduced slow ly. Qualitativ e analysis proved that the sediment contained no activ e ing redients, such as
puera rin and glycy rrhizin. Puera rin hadn t reduced during sto rag e fo r 24 months at room temperature.
Conclusion　 This ORAL LIQUOR is stable during sto rage fo r 24 months. These data obtained from the
experiment may be useful for further studies on the ORAL LIQUOR.
Key words: stability; JIAWEI N AO LE JING ORAL LIQ UOR; HPLC; TLC
　　* JIAWEI N AOLEJIN G ORAL LIQUOR is a Chinese herbal preparation used in the t reatment of
neuro sism and menopausal syndrome.
　　中药合剂 (口服液 )的质量稳定性是一个比较普
遍的问题 [1 ] ,尤其是在外观、微量沉淀形成、含量变
化等方面比较突出 [2 ]。 本文以加味脑乐静合剂为研
究对象 ,试图探讨稳定性的一般规律。 该制剂是以
《金匮要略》中甘麦大枣汤为基础 ,配伍葛根等药材 ,
用于神经衰弱、更年期综合征等。通过对本品上市后
两年的跟踪观察 ,发现其疗效稳定可靠。对所跟踪的
3个批号的制剂进行物理、化学、生物学等因素分
析 ,结果显示本品在 pH值、澄清度等方面具有中药
口服液 (合剂 )的某些共性 [1 ] ;以葛根素为代表的主
要活性成分的变化表明 ,该制剂在市售期内基本
稳定。
1　仪器、材料与试剂
LC-6A高效液相色谱仪 (岛津 ) ,配 Supelco si l
LC-8柱 , SPD-6AV紫外检测器 ;江申色谱工作站 ;
KQ-200型超声波清洗仪 ; QC-20A高速冷冻离心
机 ;硅胶 G薄层板 (瑞士 Camage机制 )。
加味脑乐静合剂:批号 980401(湘雅二医院制
剂室 ) ;批号 980701、 990701(岳阳制药一厂天星分
厂 ) ,规格均为每支 10 mL,同一厂家棕色易拉瓶装 ,
自然条件阴凉贮存。
葛根药材对照物为同批同种 (野葛 )药材 ;生产
用原料为同种 (野葛 )不同批药材 ,经含量限度控制。
葛根素对照品、甘草酸铵对照品、甘草对照药材
(中国药品生物制品检定所 ) ;甲醇为色谱纯 ,其他试
剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　 pH值考察:中药合剂常出现的质量问题是酸
败、异臭、产气等变质现象 ,因此对 pH值监控具有
重要意义 ,结果如图 1。
2. 2　澄清度考察: 3个批号的样品在初期观察中均
未见沉淀析出 ,随着贮存时间延长 ,逐渐出现少量沉
淀。采用高速离心 ,分离沉淀、干燥等方法 ,计算液体
中沉淀百分率 (g /mL) ,积累数据如图 2。
2. 3　主要成分的定性考察:对经不同贮存时期的制
剂进行 T LC分析 ,其中两种主要成分葛根、甘草的
鉴别特征始终明显。
图 1　贮存期间 pH值变化
图 2　贮存期间沉淀形成
葛根的鉴别: 取本品 10 mL,加 20 mL正丁醇萃
取 2次 ,合并萃取液 ,水浴蒸干 ,以无水乙醇溶解 ,定
容至 5 mL,为供试品溶液 ;制剂中沉淀经离心分离 ,
用适量水溶散后同法操作 ,为沉淀供试品液。另取葛
根素对照品 ,加乙醇制成每 1毫升含 0. 4 mg的对照
品溶液。吸取上述溶液各 1～ 2μL,分别点于同一硅
胶 G薄层板上 ,以氯仿 -甲醇 -水 ( 98∶ 35∶ 10)下层
液为展开剂 ,展开后 ,置 254 nm灯下检视。结果见图
3-A。
甘草的鉴别: 取本品 20 mL,加乙醚 20 mL,萃
取 2次 ,弃去乙醚层。 水相加 20 mL正丁醇萃取 2
次 ,合并正丁醇液 ,挥干 ,残渣加乙醇 1 mL溶解 ,作
为供试品溶液 ;制剂中沉淀经离心分离 ,用适量水溶
散后同样操作 ,为沉淀供试品溶液。另取甘草对照药
材及甘草酸铵对照品 ,照文献 [3 ]方法制成对照溶液。
取上述 4种溶液各 5μL,点于同一硅胶 G薄层板
上 ,以醋酸乙酯 -甲酸-冰醋酸 -水 ( 15∶ 1∶ 1∶ 2)为
展开剂 ,展开 ,用 10%硫酸 -乙醇溶液喷雾显色 ( 105
·119·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
1-沉淀　 2-制剂　　　　 1-沉淀　 2-制剂
3-葛根素对照品　　　　 3-甘草对　 4-甘草酸铵
A-葛根　　　　　　　　 B-甘草
图 3　贮存 24个月后制剂及其中沉淀的 TLC谱
℃ , 5～ 8 min) ,结果见图 3-B。
2. 4　贮存过程中葛根素的 HPLC分析: 色谱条
件 [4 ]: 以甲醇 -水 ( 1∶ 3)为流动相 ,流速 0. 8 mL /
min,检测波长 250 nm,灵敏度 0. 02 AUFS。
对照品溶液的制备: 精密称取葛根素对照品
25 mg,于 50 mL量瓶中 ,用流动相溶解并定容至
刻度。
样品溶液的制备: 精密量取制剂 0. 5 mL于
50 m L量瓶中 ,用流动相稀释至刻度。
方法学考察: 以葛根素峰面积为纵坐标 Y ,葛根
素浓度为横坐标 X ,绘制标准曲线 ,得回归方程为
Y= 236 085X+ 16 010, r= 0. 999 9;加样回收率为
100. 3% , RSD为 2. 1% (n= 6) ;精密度实验及重现
性实验结果满意。
缺葛根空白制剂无干扰 ;样品在即时 ( 0月 )与
贮存了 24个月后的色谱图基本一致 ,见图 4, 5。制
剂的沉淀经 HPLC分析未出现典型的葛根素特
征峰。
3批样品中不同贮存期葛根素含量如表 1。
表 1　 3批制剂中葛根素含量 (mg /mL,n= 3)
批 号 0月 1月 2月 3月 6月 12月 18月 24月
980401 7. 86 7. 82 7. 86 7. 79 7. 82 7. 78 7. 88 7. 81
980701 8. 32 8. 25 8. 26 8. 37 8. 18 8. 24 8. 43 8. 40
990701 7. 78 7. 82 7. 77 7. 83 7. 69 7. 23 7. 81 7. 72
3　讨论
3. 1　中药合剂 (口服液 )的质量稳定问题有待进一
步研究 [5 ] ,中国药典规定其外观也可以“有少许轻摇
易散的沉淀” ,市售药品说明书中也经常出现“本品
有少许沉淀 ,摇匀服用 ,不影响疗效”的情况 ,但对沉
淀的成因、形成规律及对疗效的影响等 ,文献少有探
* 葛根素　
图 4　贮存初期 ( 0月 )制剂的 HPLC谱
* 葛根素
图 5　贮存 24个月的制剂的 HPLC谱
讨。本研究发现 ,该种液体制剂贮存过程中 pH值略
有下降 ,其中在 3～ 6个月中幅度最明显 , 6个月后
趋于稳定 ;贮存过程中有少量沉淀形成 ,其中在 6～
12个月中沉淀形成最快 , pH值变化与沉淀形成可
能存在一定关联性 ,有待进一步探讨。
3. 2　通过对制剂的纯液体部分和沉淀部分的 T LC
及 HPLC分析提示 ,甘草、葛根中的特征成分在沉
淀中均不明显 ,可以考虑沉淀与鞣质、树脂、淀粉、果
胶、粘液质、色素等有一定关系 ,因处方中的药材富
含这些大分子物质 ,这类大分子物质有可能降解或
缩合 ,从而影响成品的外观 ,这一结果为进一步优化
制备工艺提供了参考。
3. 3　本文中成分的含量经两年考察 ,变化很小 ,可
能与葛根素分子结构有关 ,其 C-苷键属于很稳定的
化学结构。若是对其他成分进行含量跟踪 ,有可能得
出不一致的结论。
3. 4　所考察制剂采用了灭菌工艺 ,故未对生物学指
标进行详细跟踪。
参考文献:
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[ 5 ]　李十中 ,吴丽莉 ,陈　炜 . 中药口服液生产新工艺及其设备
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·120· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期