全 文 ：胺 ( 13∶ 87∶ 0. 2,磷酸调 pH至 3. 3) , 流速:
0. 8 mL /min,柱温:室温 ,检测波长: 243 nm。
2. 2　线性关系: 精密称取芍药苷对照品适量 ,用
50%甲醇配制成 126μg /mL芍药苷对照品溶液。分
别精密吸取 2. 5, 5. 0, 7. 5, 10. 0和 12. 5μL对照品溶
液注入色谱仪。以峰面积积分值对进样量进行回归 ,
得回归方程: Y= 1. 676 6X- 0. 126 4, r= 0. 999 92。
结果表明: 进样量在 0. 315～ 1. 575μg范围内线性
关系良好。
2. 3　 精 密 度 与 稳 定 性 试 验: 对 照 品 溶 液
( 126μg /mL) 5μL和供试品溶液 10μL连续 5次进
样 , RSD分别为 1. 05%和 0. 87% 。在同一天内不同
时间测定对照品和供试品溶液的浓度与含量 ,结果
表明对照品和供试品溶液在室温条件下放置 24 h,
芍药苷的浓度没有明显改变。在实验中也曾发现对
照品溶液在冰箱中保存一个月 ,其浓度基本不变。
图 1　阴性液 ( A)、对照品 (B)及供试品 ( C)色谱图
2. 4　专属性实验: 按上述方法实验 ,缺赤芍阴性空
白 、对照品、供试品色谱图对比 ,如图 1,表明在芍
药苷峰处基本无干扰 ,故本法具备实验的专属性。
2. 5　回收率试验: 取供试品 (批号: 20001201) 1 g,
精密称定 ,加芍药苷对照品适量 ,按上述色谱条件测
定 ,平均加样回收率为 99. 2% , RSD 为 1. 7%
(n= 6)。
2. 6　样品的测定:按上述色谱条件 ,精密吸取对照
品溶液与供试品溶液各 10μL,分别注入液相色谱仪
测定 ,测定 3批样品 ,按外标法进行测量 ,芍药苷含
量及 RSD 分别为: 1. 07% , 0. 93% ( 20001201) ;
1. 23% , 0. 81% ( 20001202 ) ; 2. 19% , 0. 696%
( 20001203)。
3　讨论
3. 1　由于处方组合相当复杂 ,未找到合适的内标
物 ,芍药苷含量测定按外标法进行计算。
3. 2　其他实验条件不变 ,将乙腈 -0. 1%磷酸溶液
( 15∶ 85)和甲醇-水 -异丙醇 ( 34∶ 66∶ 0. 5)两流动
相与本色谱条件进行比较 ,结果 ,本色谱条件的重现
性好 ,芍药苷峰对称性更好。 采用不同品牌的色谱
柱 ,效果相同。
3. 3　由于供试品为水提浸膏剂制成的颗粒剂 ,考虑
到芍药苷的溶解行为 ,用同一批供试品 (批号:
20001202)分别对提取溶剂和提取时间进行考察 ,芍
药苷含量测定的最佳提取条件为:以 70%甲醇作为
提取试剂 ,超声处理 10～ 30 min。本文采用 10 min。
参考文献:
[1 ]　王宝琴 . 中成药质量标准与标准物质研究 [M ]. 北京:中国医
药科技出版社 , 1994.
[2 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
蒽酮-硫酸法测定亮菌糖浆中多糖的含量
李绍平1 ,黄赵刚1 ,张　平 1 ,屈成明 2
( 1. 安徽医科大学第一附属医院 药剂科 ,安徽 合肥　 230022; 2. 安徽杰明生物制剂有限公司 ,安徽 淮南　 232007)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 03 0233 02
　　亮菌糖浆为白磨科密环菌属假密环菌 Amil l-
ariel la tabescens ( Scop. ex. f r ) Sing经固体发酵 ,
提取浓缩后制成的口服制剂 ,主要用于急、慢性肝炎
及胆道疾病的治疗 [ 1, 2]。多糖为其主要活性成分之
一 ,具有保肝 [3, 4 ]、防辐射 [5 ]和抗肿瘤 [ 6]等作用。为了
控制亮菌糖浆的质量 ,本实验采用蒽酮 -硫酸比色法
对其多糖含量进行了测定。
1　仪器与药品
岛津 UV-2501紫外分光光度计 ,试剂均为 AR
级 ,葡聚糖 (相对分子质量为 188 000)为 Sigma公
司产品。
2　方法和结果
·233·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 3期
收稿日期: 2001-04-28
2. 1　样品溶液的制备: 精密吸取本品 2. 5 mL,振摇
下缓缓加入乙醇 20 mL,放置 10 min,离心 10 min
( 3 000 r /min) ,沉淀用水溶解后 ,定量移入 500 mL
量瓶中 ,加水至刻度 ,摇匀 ,作为供试品溶液。
2. 2　标准溶液的制备:精密称取葡聚糖 50 mg ,用
水溶解并定容至 500. 0 mL,制成每 1 mL含 0. 1 mg
的葡聚糖标准溶液。
2. 3　测定波长的选择:分别吸取样品溶液和葡聚糖
标准溶液各 1 mL于具塞试管中 ,置冰水浴中 ,迅速
加入新配制的 0. 2%蒽酮-硫酸溶液 4. 0 m L,摇匀 ,
在沸水浴中煮沸 10 min,取出 ,用自来水迅速冷却并
放至室温 ,以同样方法处理的水为空白 ,在 400～
800 nm扫描 ,结果见图 1。
图 1　蒽酮-硫酸法测定亮菌多糖
和葡聚糖扫描色谱图
扫描结果表明: 样品溶液最大吸收波长与葡聚
糖标准溶液的最大吸收波长一致 ,均为 586 nm。因
此 ,选择 586 nm作为测定波长。
2. 4　线性关系考察: 准确吸取葡聚糖标准溶液
0. 10, 0. 20, 0. 40, 0. 60, 0. 80和 1. 00 mL,分别置于
10 m L具塞试管中 ,用水补充到 1. 00 mL,置冰水浴
中分别迅速加入新配制的 0. 2%蒽酮 -硫酸溶液
4. 0 mL,各管加完后一起浸于沸水浴中煮沸 10 min
取出 ,用自来水迅速冷却并放至室温 ,以同样方法处
理的水为空白 ,于 586 nm测定吸光度。以吸光度为
纵坐标 ,多糖含量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,回归方
程为 Y= 0. 037X+ 0. 005, r= 0. 999 6。结果表明 ,多
糖含量在 2～ 20μg /mL范围内与吸光度呈良好的
线性关系。
2. 5　稳定性试验:将标准溶液显色后每 20 min测定一
次 ,RSD为 0. 10% (n= 6) ,结果表明 2 h内显色稳定。
2. 6　精密度试验: 取标准溶液 5份 ,测定吸光度 ,
RSD为 1. 69% ( n= 5) ,结果表明: 该测定方法精密
度良好。
2. 7　重现性试验:取批号为 001204样品 5份 ,分别
依法测定 , RSD为 2. 36% (n= 5) ,结果表明: 该测
定方法重现性良好。
2. 8　回收率试验:取批号为 001204的样品 5份 ,每
份 2. 50 mL,加入 50 mg葡聚糖标准品 ,溶解 ,用
10 mL乙醇醇沉 ,沉淀用蒸馏水溶解后 ,定容至
1 000. 0 mL,依法测定 ,结果平均回收率为 98. 4% ,
RSD为 3. 2% (n= 5)。
2. 9　样品测定:对 10批样品进行了含量测定 ,结果
见表 1。 测定结果表明: 亮菌糖浆中多糖的含量为
13. 6～ 17. 4 mg /mL。
表 1　 10批亮菌糖浆多糖含量测定结果 (mg /mL)
批　号 多糖含量 平均含量
001103 16. 0 16. 4 16. 2
001107 14. 6 14. 3 14. 4
001007 16. 8 16. 4 16. 6
001018 15. 2 15. 4 15. 3
001019 16. 4 16. 1 16. 2
001020 17. 6 17. 3 17. 4
001201 14. 1 14. 5 14. 3
001102 14. 4 14. 6 14. 5
001203 13. 6 13. 5 13. 6
001206 16. 4 16. 3 16. 4
3　讨论
3. 1　实验结果表明: 亮菌糖浆以乙醇沉淀获取多
糖 ,然后用蒽酮-硫酸法测定其含量 ,方法简便、准
确 ,精密度好 ,可用于亮菌糖浆的质量控制和生产工
艺研究。
3. 2　亮菌多糖的相对分子质量为 145 000[7 ] ,因此 ,
我们选择相对分子质量为 188 000的葡聚糖作对照
品 ,以校正测定结果。对葡聚糖溶液和样品溶液的紫
外扫描结果表明 ,二者均在 586 nm波长处有最大吸
收 ,虽与文献报道不同 [ 8] ,但多次扫描 ,结果稳定。
参考文献:
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病毒性肝炎的疗效观察 [ J] .江苏医药 , 1976, ( 3): 18-20.
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炎 475例疗效总结 [ J] . 江苏医药 , 1976, ( 1): 25-27.
[ 3 ]　黄炳贺 ,姚冬生 ,陈伟强 ,等 . 假密环菌杂多糖 Y-HW组分在
实验性肝损伤中护肝作用的研究 [ J ]. 实用医学杂志 , 1998, 14
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[4 ]　黄炳贺 ,姚冬生 ,陈伟强 ,等 . 假密环菌活性物对 ConA诱导的
小鼠 TNF-α和 IFN-γ蛋白产物表达的影响 [ J] . 实用医学杂
志 , 1998, 14( 7): 531-532.
[ 5]　许祥裕 ,朱有华 ,邓书增 .亮菌多糖辐射防护和升白作用的实
验研究 [ J ]. 中草药 , 1985, 16( 8): 19-23.
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XXX. An titumor and immunom odulating activi ties of tw o
polysaccharides f rom th e f ruiting bodies of Armil lar iel la
tabescens [ J ]. Ch em Ph arm Bul l, 1992, 40( 8): 2110-2114.
[ 7 ]　方积年 ,叶淳渠 ,吴淑云 ,等 . 亮菌多糖的研究 I. ATM 3组分
的分离纯化及其性质 [ J] . 生物化学与生物物理学报 , 1984, 16
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[8 ]　张惟杰 . 糖复合物生化研究技术 (第 2版 ) [M ]. 杭州:浙江大 学出版社 , 1999.
人参四君子汤与党参四君子汤的鉴别
潘赞红1 ,金　鑫 2
( 1. 天津传染病医院 ,天津　 300192; 2. 天津中医学院 ,天津　 300193)
中图分类号: R286. 01　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 03 0235 01
　　四君子汤出自宋代《太平惠民和剂局方》 ,具有
益气健脾之功效。 方中君药若用人参 ,则取大补元
气、健脾养胃之效 ,若以党参为君药 ,则侧重于生津
养血、补中益气。从价格上分析 ,人参价格比党参高 ,
因此许多药厂为了牟利均以党参代替人参 ,因而患
者服用后效果欠佳。为此 ,我们以人参、党参混用的
四君子汤冲剂为例 ,对二者进行了鉴别。
1　人参与党参四君子冲剂的制备
1. 1　人参四君子冲剂的制备: 先将人参药材用
10%乙醇浸泡 4 h ,过滤得滤液 ;将残渣加适量无水
乙醇回流 2 h ,过滤得滤液 ;再将残渣加 10%乙醇回
流 1 h,过滤得滤液 ,将以上滤液合并 ,浓缩至稠膏
状。水蒸气蒸馏提取挥发油后的白术残渣、人参残
渣、茯苓、甘草混合后水煎煮 2次 ( 10倍量 , 1 h; 8倍
量 , 30 min) ,滤液浓缩成稠膏。合并人参稠膏和混和
物稠膏 ,热测质量体积比 1. 3左右 ,然后与适量淀粉
混合制粒 ,并喷入白术挥发油 ,即得人参四君子冲
剂。在 60℃干燥 ,水分控制在 2%以内。
1. 2　党参四君子冲剂的制备: 将人参换成党参 ,其
余同人参四君子冲剂的制备。
2　供试液的制备
取人参四君子冲剂 1 g ,加氯仿 40 mL,水浴回
流 1 h,取药渣挥干溶剂 ,用水 0. 5 mL湿润 ,加水饱
和正丁醇 10 mL,超声处理至上层液澄清 ,吸取上清
液 5 mL,加 3倍量氨试液摇匀 ,放置使分层 ,取上层
液蒸干 ,残渣加甲醇 1 mL使溶解 ,作为人参四君子
冲剂供试液。
取人参药材 1 g ,按上述方法制得人参药材供试
液。
取党参四君子冲剂 1 g ,加甲醇回流提取至提取
液无色 ,水浴浓缩 ,加适量蒸馏水稀释 ,上 D4020型大
孔树脂柱 ,水洗脱至无色透明 ,再用 50%甲醇洗脱 ,
收集洗脱液 ,水浴蒸干溶剂 ,定量转移至 5 mL容量
瓶中 ,用 50%甲醇稀释至刻度 ,作为党参四君子冲
剂供试液。
3　薄层色谱鉴定
照薄层色谱法试验 ,吸取上述 3种溶液各 2
μL,分别点于两块硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -乙酸乙
酯 -甲醇 -水 ( 15∶ 10∶ 22∶ 10)为展开剂展开 ,取出
晾干 ,喷以 10%硫酸 -乙醇 ,挥尽乙醇后于 105℃下
烘至斑点清晰 ,取出在日光下检视。
4　结果
人参四君子冲剂色谱中在与人参色谱相应的位
置上显相同的红色斑点。 党参四君子冲剂色谱中与
人参色谱中所显示的斑点位置颜色、大小均不相同。
人参色谱中的斑点小且呈紫红色 ,党参四君子冲剂
色谱中的斑点大且呈暗灰色 ,见图 1。
1-人参　 2-人参四君子冲剂　 3-党参四君子冲剂
图 1　薄层色谱图
5　讨论
　　提取过程中 ,对人参进行各步处理所用的乙醇
浓度不同 ,目的在于尽量减少人参有效成分的损失。
用 D4020型大孔树脂除去党参皂苷中的水溶性杂质
效果比较好 ,水洗用量不宜过多 ,以防皂苷损失。
利用本实验的薄层色谱法对两种四君子汤进行
鉴别 ,方法简单易行 ,结果明显 ,有利于用药准确、鉴
定真伪。
·235·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 3期
收稿日期: 2001-04-03