全 文 ：表 3　方差分析表
Table 3　 Analysis of variance
方差来源 自由度 离均差平方和 方差 F值 P值
A 3 1 234. 25 411. 42 26. 12 P < 0. 05
B 3 40. 33 13. 44 0. 853 4
C 3 127. 92 42. 64 2. 707 3
D 3 68. 35 21. 12 11. 341　 P < 0. 05
E (误差 ) 4 62. 99 15. 75
　　F 0. 05 ( 3, 4)= 9. 12　F0. 01 ( 3, 4)= 28. 7
次 ,每次 0. 5 h,醇沉两次 ,每次使醇沉浓度达到
50% ,再加入 8倍量的水 ,即 A1 B1 C3D4为最佳提取
条件。通过正交试验结果直观分析 ,由 R值可看出 ,
影响因素由大到小依次为 A> C> D> B。由方差分
析结果看出 ,煎煮时间和醇沉浓度对试验指标影响
差异具有显著意义 ,回流时间和加水量影响较小。
2. 5　验证试验:按优选的最佳工艺条件 ,制备 3批
样品 ,测定复方当红注射液中阿魏酸含量 ,结果为
58. 78μg /mL。
3　讨论
　　通过优化试验 ,筛选出最佳提取工艺 ,既节省了
煎煮时间又节约了乙醇的用量 ,降低了成本 ,适合医
院内制备及使用。
References:
[ 1]　 Gu M , Zh ang L, Zhang Z X. Determination of ferulic acid in
Xiaoyao Powd er and Radix Angel icae Sinensis by HPLC [ J].
Chin Tradi t Pat Med (中成药 ) , 2000, 22( 5): 342.
HPLC法测定甘草中甘草素、异甘草素、甘草苷的含量
何三民 1 ,石森林 2
( 1. 金华市中心医院 ,浙江 金华　 321000; 2. 浙江中医学院 ,浙江 杭州　 310053)
　　《中华人民共和国药典》 2000年版一部收载有
甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草 G. in-
f lata Ba t.、光果甘草 G. glabra L. 3个种。为了保证
临床疗效 ,本实验对甘草中甘草素、异甘草素、甘草
苷的含量进行了比较。
1　仪器与材料
Waters高效液相色谱仪 , Lambdal2紫外可见
分光光度计 ( PE) , M etter AE 163电子分析天平。乙
腈、二水醋酸、甲醇均为分析纯 ,水为重蒸水。
甘草购自浙江中医学院实验药厂 ,胀果甘草和
光果苷草均购自浙江省金华市医药站药材公司。甘
草素、异甘草素、甘草苷 (自制 ,均经光谱学鉴定 ,采
用面积归一化法测得其纯度分别为 98. 05% ,
98. 13% , 98. 12% )。
2　方法与结果
2. 1　供试液制备: 取甘草粉末 ( 60目 )约 100 mg ,
精密测定 ,置微型索氏提取器中加甲醇 10 mL回流
2 h,回流液于 70℃水浴回收甲醇 ,浓缩至约 2 mL,
放冷后转移至 5 mL容量瓶中 ,甲醇稀释并定容至
刻度 ,混匀后滤过 ,弃去初滤液 ,即得。
2. 2　对照品溶液制备:分别精密称得甘草苷、甘草
素、异甘草素对照品 2. 00, 0. 80, 0. 25 mg ,置 2 mL
容量瓶中 ,加甲醇溶解 ,并稀释至刻度 ,摇匀后即得。
2. 3　色谱条件: 色谱柱: Zo rdox ODS ( 150 mm×
4. 6 mm ) ( Dupont ) ;柱温: 25℃ ;流速: 1 mL /min;
流动相:乙腈-5%醋酸梯度洗脱 ,安排见表 1。
表 1　色谱条件
Table 1　 Chromatographic conditions
时间
/min
流动相
乙腈 5%醋酸
检测波长
/nm
0. 0～ 12. 0 20 80 310
12. 0～ 15. 0 50 50 365
15. 0～ 25. 0 80 20 365
2. 4　标准曲线制备: 用微量注射器分别吸取 1. 0,
2. 5, 5. 0, 7. 5, 10. 0μL的混合对照品溶液 ,进样测
定。 以进样量为横坐标 ,峰面积为纵坐标作图 ,得回
归方程、相关系数和线性范围。 甘草苷: Y =
83. 45X+ 2. 23, r= 0. 999 3, 0～ 10μg;甘草素: Y=
87. 31X - 0. 25, r= 0. 999 1, 0～ 4. 0μg;异甘草素:
Y= 685. 13X - 0. 21, r= 0. 999 5, 0～ 1. 25μg。
2. 5　精密度试验:精密吸取 3种对照品的混合液 ,
每次 10μL,连续进样 6次 ,测定峰面积 ,计算得甘
草素、异甘草素、甘草苷 RSD 分别为 1. 38% ,
1. 37% , 1. 91% (n= 6)。
2. 6　稳定性试验:分别在样品制备后 1, 2, 4, 8, 16h
·618· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 7期 2003年 7月
收稿日期: 2003-02-18基金项目:国家科技部创新博士基金 ( 96-901-06-75)作者简介:何三民 ( 1963— ) ,浙江义乌人 ,浙江省金华市中心医院药剂科中药师 ,主要从事中药医院制剂研制。 Tel: ( 0579) 2338512-739
吸取供试液 ,测定甘草素、异甘草素、甘草苷含量 ,
RSD分别为 1. 98% , 3. 21% , 2. 31% (n= 3)。
表 2　回收率试验结果
Table 2　Result of recovery test
名　称 加入量
/mg
回收量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
R SD
/%
甘草苷　 1. 060 1. 055 　 99. 5
1. 059 1. 052 99. 3
1. 063 1. 050 98. 8
1. 590 1. 547 97. 3
1. 601 1. 551 96. 9 97. 4 1. 45
1. 595 1. 523 95. 5
2. 385 2. 278 95. 5
2. 374 2. 301 96. 9
2. 401 2. 324 96. 8
甘草素　 0. 820 0. 827 100. 9
0. 813 0. 801 98. 5
0. 821 0. 816 99. 4
1. 230 1. 176 95. 6
1. 226 1. 182 96. 4 98. 6 1. 47
1. 234 1. 203 97. 5
1. 845 1. 862 100. 9
1. 852 1. 831 98. 9
1. 847 1. 840 99. 6
异甘草素 0. 250 0. 252 100. 7
0. 254 0. 243 95. 7
0. 251 0. 246 98. 0
0. 375 0. 373 99. 5
0. 370 0. 361 97. 6 98. 6 1. 46
0. 372 0. 360 96. 8
0. 563 0. 568 100. 8
0. 562 0. 561 99. 8
0. 565 0. 559 98. 9
2. 7　回收率试验:分别取甘草素、异甘草素、甘草苷
对照品适量 ,加入到已知含量的甘草粉末中 ,按 2. 1
项下方法制备供试液 ,计算回收率。结果见表 2。
2. 8　样品测定: 精密吸取样品液 10μL,进样 ,外标
两点法测定 ,计算含量 ,结果见表 3。
表 3　甘草中成分的含量测定 (n= 3) %
Table 3　 Assaying of act ive constituents
in Rad ix Glycyrrhizae (n= 3) %
品　种 批号
甘草苷 甘草素 异甘草素
含量 R SD 含量 RSD 含量 R SD
甘　　草 1 3. 649 1. 15 0. 141 2. 95 0. 125 1. 87
2 3. 214 1. 56 0. 156 2. 14 0. 118 2. 68
3 2. 918 1. 98 0. 163 1. 58 0. 121 2. 32
胀果甘草 1 0. 595 2. 13 0. 034 1. 76 0. 018 2. 38
2 0. 543 2. 91 0. 039 2. 26 0. 014 1. 54
3 0. 556 1. 76 0. 028 1. 96 0. 021 2. 41
光果甘草 1 0. 485 1. 17 0. 021 1. 12 0. 023 2. 36
2 0. 532 1. 84 0. 031 1. 84 0. 026 1. 76
3 0. 451 1. 69 0. 026 2. 25 0. 015 2. 11
3　讨论
3. 1　对甘草中甘草素等黄酮类成分提取:实验比较
了甲醇热回流、乙醇热回流、乙醇冷浸、甲醇冷浸 4
种方法 ,结果提取效率差别较大 ,甲醇热回流对甘草
素等提取率较好 ,故选择该法制备样品液。
3. 2　对流动相的选择:实验比较了甲醇 -水 ,甲醇-
醋酸 -水 ,乙腈 -醋酸 -水的不同比例和梯度洗脱系
统 ,结果发现乙腈-5%醋酸水溶液的效果最好。
红花籽油口服乳剂的制备
严海泓 1 ,杨金荣 2 ,房志仲 2
( 1. 中国医学科学院血液病医院 药剂科 ,天津　 300020; 2. 天津医科大学药学院 ,天津　 300070)
　　红花籽油系菊科植物红花 Carthamus tinctorius
L.的种子提取的油。主要成分为亚油酸 (含量高达
73%～ 85% )、亚麻酸、油酸、磷脂、维生素等。具有降
低胆固醇、稳定血压、增进体质、促进微循环 ,恢复神
经功能 [ 1]。此外 ,不饱和脂肪酸 ,特别是亚油酸、油
酸、亚麻酸和花生四烯酸具有抑制肿瘤生长作用 ,有
良好的食用价值和辅助治疗作用 [2, 3 ]。为开发红花籽
油新剂型和探索新用途 ,本研究将红花籽油制成口
服乳剂 ,对影响因素进行了考察。
1　仪器与材料
JRJ-300-I型剪切乳化搅拌机 (上海标本模型
厂 ) , DS200高速组织捣碎机 (江苏江阴周庄科研仪
器厂 ) , LD50-10型离心机 (北京医用离心机厂 ) ;红
花籽油为天津市云峰营养保健品公司提供 ,吐温
20、吐温 80、司盘 80、卵磷脂均为药用级。
2　方法与结果
2. 1　红花籽油亲水亲油平衡 ( HLB)值的确定
2. 1. 1　乳剂的制备: 根据乳化剂的 HLB值具有加
和性 [4 ] ,以吐温 80与司盘 80不同的比例组合 ,组成
HLB值 8～ 15的一系列复合乳化剂。取乳化剂 1份
·619·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 7期 2003年 7月
收稿日期: 2003-01-22