全 文 ：　　透皮给药首先需要克服皮肤屏障, 目前主要采
用加入促渗剂的方法来增加药物的皮肤渗透速率。
冰片是一种有效的透皮促进剂[4 ] , 其促渗的作用部
位可能是在角质层[5 ]。氮酮是目前使用较多的促渗
剂, 常用体积分数 1%～ 10% , 它主要作用于细胞类
脂双分子层, 增加双分子层流动性而促进药物通过
细胞间扩散[6 ]。氮酮为不溶性水的强亲脂性化合物,
水性氮酮是由氮酮与一定的乳化剂配制而成。本实
验观察冰片和水性氮酮对 Β2细辛醚 24 h 累积渗透
量和稳态渗透速率的影响。结果表明 011% 冰片对Β2细辛醚没有促透皮效果; 1%、3%、5% 水性氮酮加
011% 冰片对 Β2细辛醚不仅无促渗作用, 反而明显降
低了 Β2细辛醚的渗透速率, 分别降低了 5618%、
7717%、7816% , 影响十分明显。这两种促渗剂对 Β2
细辛醚都未能产生促透皮效果, 可能与 Β2细辛醚特
殊理化性质有密切关系。
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二苯乙烯苷的稳定性研究
班　翊, 刘其礼, 金　悠, 王嘉陵Ξ
(华中科技大学同济医学院 药理系植物化学室, 湖北 武汉　430030)
摘　要: 目的　考察影响二苯乙烯苷 (TH SG) 溶液稳定性的因素, 并计算室温下其晶体粉末的 t019值。方法　采用
H PL C 法和H PL C2M S 联用法。结果　以L ich ro spher 52C18 (250 mm ×416 mm , 5 Λm )为固定相, 甲醇2水 (4∶6)为
流动相, 检测波长为 310 nm。TH SG 进样量在 0114～ 2180 Λg 与峰面积线性关系良好, 自制 TH SG 纯度高达
99194% , pH 518 时, TH SG 与水分子发生加成反应。强酸促使 TH SG 水解为葡萄糖和苷元, 并进一步降解为酚类
化合物。强碱性条件下, TH SG 氧化为醌类化合物。在中性及弱碱性水溶液中较稳定, 30 d 内含量无明显变化。
TH SG 晶体粉末室温下放置 240 d 含量无明显变化, t019值为 1 098 d。结论　二苯乙烯苷在一定条件下是稳定的。
关键词: 二苯乙烯苷; 稳定性; 高效液相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 11 1235 03
D eterm ina tion of st ilbene-glucoside and investiga tion on its stab il ity
BAN Y i, L IU Q i2li, J IN You, W AN G J ia2ling
(Phytochem istry L abo rto ry, D epartm ent of Pharm aco logy, TongjiM edical Co llege,
H uazhong Scien tific and T echno logical U niversity, W uhan 430030, Ch ina)
Abstract: Object　To study the facto rs w h ich influenced the stab ility of st ilbene gluco sidel ( tet rahy2
droxyst ilbene2gluco side, TH SG) so lu t ion, invest iga te and calcu la te the value of t019 of TH SG crysta l pow 2
der a t room temperatu re1 M ethods　H PL C and H PL C2M S m ethods w ere u sed1 Results　T he best ch ro2
m atograph ic condit ion s w ere to emp loy L ich ro spher 52C 18 (250 mm ×416 mm , 5 Λm ) as the stab le phase,
m ethano l2w ater (4∶6) as mob ile phase, 310 nm as the detect ive w avelength1W ith in the range from 0114
to 2180 Λg, there w as a good linearity1 T he con ten t of self2p repared TH SG w as up to 99194%. Stab ility
test show ed that w hen pH w as 518, an addit ional react ion occu rred betw een TH SG and H 2O 1 Strong acids
p recip ita ted the hydro lyzat ion of TH SG in to gluco se and aglycone, w h ich then degraded in to pheno l com 2
pound1 W hen strong bases ex isted, TH SG w as easily ox id ized in to qu in ine compound1W hereas it w as sta2
·5321·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 20042012073 通讯作者
b le in a neu tra l o r w eak basic condit ion, the con ten t of TH SG had no t changed in 30 d1 So w as the TH SG’s
crysta l pow der sto red at room temperatu re fo r 240 d1 T he value of t019 w as 1 098 d1 Conclusion 　TH SG is
stab le in som e certa in condit ion s1
Key words: st ilbene gluco side (tet rahydroxyst ilbene gluco side TH SG) ; stab ility; H PL C
　　何首乌系蓼科植何首乌 P oly g onum m u ltif lo2
rum T hunb1 的根与根茎, 具有乌须发、悦颜色、补
肝肾、抗衰老之良效[1 ]。现代药理研究表明其水煎液
或醇提取液具有抗氧化、提高免疫力、抑制血小板聚
集、舒张血管等作用, 并推测这些作用与其所含 2,
3, 5, 4′2四羟基二苯乙烯222O 2Β2D 2葡萄糖苷 (二苯乙
烯苷, tet rahydroxyst ilbene gluco side, TH SG ) 有
关。本课题组证实 TH SG 单体有抗氧化、舒张血管
作用, 且优于白藜芦醇, 值得深入研究。本实验的目
的在于考察其稳定性并鉴定化学变化产物, 为
TH SG 单体新药开发奠定基础。
1　材料与仪器
W aters 600 高效液相色谱仪 (包括 600 泵,
PDA 2966 检测器) , 液2质联用仪 (L CQ D eca Xp
p lu s) , 甲醇为色谱纯, 其他试剂均为分析纯, TH SG
对照品购于中国药品生物制品检定所 (批号 08442
200003) ; 何首乌生药购于广东省德庆县中药材收购
站, 经湖北省药品检验所王晓敏副主任药师鉴定。
2　方法与结果
211　TH SG 的提取分离: 何首乌粗粉, 95% 乙醇回
流, 回收乙醇得何首乌流浸膏; 用适量蒸馏水稀释后
以等量乙醚萃取 3 次, 分离出水层; 水层用两倍的醋
酸乙酯热回流 5～ 6 h, 收集醋酸乙酯层, 减压浓缩
至原体积的 1ö10, 室温下静置析晶, 滤过, 得粗品。
粗品于适量热水或热醋酸乙酯中溶解, 趁热滤过, 放
冷析晶, 如此反复结晶, 得精品, 为灰色无定型结晶
粉末, mp 162～ 163 ℃, 易溶于水、甲醇、乙醇、醋酸
乙酯。
212　TH SG 的测定
21211　色谱条件: 色谱柱: L ich ro spher 52C18 (250
mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 甲醇2水 (4∶6, 每
500 mL 加 2～ 3 滴冰醋酸) ; 体积流量: 1 mL öm in;
检测波长: 310 nm ; 柱温: 24 ℃。在此色谱条件下,
TH SG 峰形好, 不受杂质峰干扰, 见图 1。
21212　标准曲线的建立: 精密称取 114 m g TH SG
对照品, 用流动相配制成 01028、0114 m gömL 对照
品溶液。依次取上述两种对照品溶液各 510、1010、
1510、2010 ΛL 进样, 按上述色谱条件测定。以峰面
积值为横坐标, TH SG 的进样量为纵坐标绘制标准
3 2二苯乙烯苷3 2TH SG
图 1　二苯乙烯苷对照品 (A)和自提
二苯乙烯苷 (B)的 HPLC 图谱
F ig1 1　HPLC chromatogram s of THSG reference
substance (A) and self -prepared THSG (B)
曲线, 结果 TH SG 在 0114～ 2180 Λg 与峰面积线性
关系良好, 回归方程为: Y = 2184 × 10- 7 X +
01012 3, r= 01999 5。
21213　自制样品的测定: 分别称取 TH SG 精品
4120、4118、4121 m g, 粗品 510、511、511 m g 于 100
mL 量瓶中, 以流动相溶解并稀释至刻度。分别取各
溶液 20 ΛL 进样, 记录峰面积。将样品峰面积值带入
回归方程, 计算 TH SG 晶体粉末的纯度, 结果粗品
为 68174% , 精品为 99194% , 故可认为精品达到单
体的质量要求。
3　THSG 的稳定性研究
311　pH 值对 TH SG 溶液稳定性的影响: 精密称取
TH SG 样 品, 分 别 用 1% 醋 酸、4% 硫 酸、1%
N a2H PO 4 和 4% N aOH 溶液配制成 011 m gömL
TH SG 溶液, pH 值依次为 518、< 1、718、> 14, 依次
编号为É、Ê、Ë、Ì , 密闭, 室温下不避光放置。É、Ë、Ì 于第 1、3、5、7 天, Ê 于第 5、12、24 小时取 10ΛL 溶液进行H PL C 或H PL C2M S 测定。
　　另取Ê 2 份, 2 mL ö份, 1 份蒸干后加 2 mL 甲
醇, 取上清液 1 mL 再加 1 mL 浓硫酸, 再沿管壁徐
徐加入 10% Α2萘酚溶液数滴 (M o lish 反应)。第二
份加 1% 溴水 1 mL。取Ì 2 mL 加苯肼试剂数滴。
31111　弱酸性条件下 (pH 518) , 1 d 内在 TH SG 峰
( tR = 10162 m in ) 前出现一个新的单峰 ( tR = 6123
m in) , 此峰最大吸收波长为 284 nm , 与 TH SG 的吸
·6321· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
收波长 (308 nm ) 相比发生蓝移, 且随时间推移,
TH SG 峰峰面积减小, 新单峰峰面积增加 (图 2)。
H PL C2M S 结果表明, 两峰相对分子质量分别为 424
和 406。提示 TH SG 在弱酸性条件下不稳定, 分子中
的乙烯双键与水分子发生加成反应。实验中还观察
到避光条件下加成反应明显减慢, 故光可催化此反
应。此外, 质谱图中还发现一相对分子质量为 830 的
分子离子峰, 推测此物可能是由一分子加成后
TH SG 与一分子未加成的 TH SG 发生聚合, 生成的
二聚体二苯乙烯苷。
图 2　弱酸性条件下 THSG 在第 1 天 (A)
和第 7 天 (B)的 HPLC 图谱
F ig12　HPLC chromatogram s of THSG in f irst day
(A) and seven th day (B) in weak ac id condition
31112　强酸性条件下 (pH < 1) , TH SG 极不稳定, 5
h 后其质量分数降至 3916% , 24 h 后已检测不到此
物质。24 h 后的酸解物不能使溴水退色, 甲醇上清
液的M o lish 反应为阴性, 但与 FeC l3 显色。提示强
酸性条件下 TH SG 的苷键迅速水解, 且苷元中的乙
烯双键可能与硫酸发生加成反应, 再进一步降解为
酚类化合物。
31113　弱碱性条件下 (pH 718) , TH SG 较稳定, 7 d
后, 质量分数为 98112%。
31114　强碱性条件下 (pH > 14) , TH SG 水溶液颜
色逐渐加深, 48 h 后已检测不到 TH SG 峰, 且此溶
液与苯肼反应生成棕色沉淀, 提示在强碱性条件下,
TH SG 易氧化为醌类化合物。
312　TH SG 在不同溶剂中的稳定性: 精密称取
TH SG 样品, 分别用双蒸水或甲醇配制成 011 m gö
mL 溶液, 密闭, 室温下非避光放置。TH SG 水溶液
于第 1、5、10、20、30 天, 甲醇溶液于第 1、2、3、4、5
天 , 取10ΛL , 进行测定。结果表明: TH SG水溶液稳
定, 室温 (15～ 20 ℃) 下放置 30 d, 质量分数仍高达
9718%。而 TH SG 甲醇溶液不稳定, 24 h 后质量分
数逐渐下降, 第 7 天时, 质量分数降至 3012%。
313　TH SG 粉末稳定性: TH SG 单体无定型粉末
置于棕色瓶中, 密闭, 室温下放置。于第 10、30、60、
120、240 天, 进样测定。结果表明: 室温下密闭避光
放置的 TH SG 粉末含量变化很小, 结果见表 1。经推
算其 t019为 1 098 d, 提示 TH SG 结晶性粉末较稳定。
表 1　二苯乙烯苷粉末的稳定性 (n= 3)
Table 1　Stabil ity of THSG powder (n= 3)
批号 10 d 30 d 60 d 120 d 240 d
20020903 99191 99154 99150 99101 98119
20021109 99193 99165 99155 98191 98109
20021211 99195 99187 99171 99110 98149
4　讨论
411　本实验采用毒性小, 价格低的甲醇2水作流动
相, 优于文献[2～ 4 ]中所采用流动相乙腈2水。在流动
相中加入冰醋酸 (2～ 3 滴ö500 mL ) , 抑制 TH SG 中
酚羟基的解离, 可获得峰形好、无拖尾现象的谱形,
其分离效果不亚于乙腈2水。
412　结果证明酸性、强碱性和光线或甲醇等是促使
TH SG 发生化学变化的因素, 所以 TH SG 溶液制备
与储存过程中应避免与这些影响因素接触。另还证
实 TH SG 的中性或弱碱性水溶液稳定, 提示在剂型
选择上可考虑注射液, 但应注意其最稳定pH 值。
413　报道用酸解法获取何首乌有效成分的苷元[5 ] ,
本实验证实酸可促 TH SG 发生加成、聚合、降解等
反应, 因此酸解法获得 TH SG 苷元是不可行的。
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