全 文 ：表 3　不同作者定量检测黄连对金葡菌抑菌活性报道情况
作者 报道年代 所用培养基 菌株数 菌株来源 MIC　　　
刘国声 [3] 1950 肉膏汤 1 实验室保存 1∶ 160
中国医科院药 1960 肉膏汤 1 实验室保存 1∶ 128
物研究所 [5]
陈杏科等 [14] 1987 双料基础培养基 1 实验室保存 1∶ 640
魏长志等 [9] 1994 营养琼脂 1 实验室保存 1∶ 320
本试验 2000 M-H琼脂 112 临床菌株　 1∶ 1 280*
　　　　* M IC众数值
0. 08 mg /mL,因此 ,要想对一种中药客观地反映其
抑菌效果 ,就必须采用大样本 ,至少同一菌种的抑菌
实验应在 30株以上 ,否则很难有代表性和重复性。
关于接种细菌方法 ,过去接种菌株 ,一般采用手
工方法 ,由于取菌量不一 ,往往会出现误差 ,而且手
工接种每次只能接种 1株细菌 ,不仅费时、费力 ,同
时准确性差 ,建议今后琼脂稀释法应采用多点接种
仪接种细菌 ,不仅易于操作 ,每次可接种至少 28株
细菌 ,同时由于取菌量一致 ,从而保证了结果的准
确性。
总之 ,中药抑菌实验宜采用 M-H琼脂 ,淘汰使
用营养琼脂 ,采用大样本以多点接种仪进行实验 ,可
促进中药抑菌实验逐步走向标准化 ,为中药尽快走
向世界创造条件 ,发挥中药为全人类服务的重要
作用。
参考文献:
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大承气汤对大鼠肠平滑肌细胞内磷酸二酯酶的影响
谢文利 1 ,林秀珍 2 ,马德禄 2 ,李宏捷 2
( 1. 武警医学院 药理教研室 ,天津　 300162;　 2. 天津医科大学 ,天津　 300070)
摘　要: 目的　探讨大承气汤的“通里功下”作用与肌醇脂质信号系统的关系 ,进一步阐明大承气汤的作用机制。方
法　采用反相高效液相色谱法分别测定了手术对照组、肠梗阻模型组、不同剂量大承气汤组的大鼠肠平滑肌细胞
内磷酸二酯酶 ( PDE)的含量。结果　体内实验发现: 50% , 100% , 250% 大承气汤可使肠梗阻大鼠肠平滑肌细胞内
PDE含量明显升高 (P < 0. 05)。体外实验发现: 50% , 100% , 250%大承气汤可使肠便阻大鼠肠平滑肌细胞内 PDE
含量明显升高 (P < 0. 05)。 结论　大承气汤可使大鼠肠平滑肌细胞内钙调蛋白 ( CaM )活性提高 ,由此推断 ,大承
气汤的通里攻下作用很可能是通过激活肌醇脂质 ( IP3 )信号转导系统使胃肠道平滑肌细胞内 Ca2+ 释放增加 ,再通
过 CaM间接地激活一系列的蛋白激酶而实现。
关键词: 大承气汤 ; IP3; CaM ; PDE;肠道平滑肌
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 04 0339 03
·339·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 4期
收稿日期: 2000-07-08作者简介:谢文利 ( 1968-) ,男 ,湖南 ,讲师 ,硕士学位。 本科毕业于中国药科大学 ,硕士毕业于天津医科大学。 研究方向为生化药理。
Tel: 24372788-78457
Effect of DACHENGQITANG
*
on phosphodiesterase in enteral smooth muscle cell in rats
XIE Wen-li1 , LIN Xiu-zhen2 , M A De-lu2 , L I Hong-jie2
　　 ( 1. Depa rtment of Pha rmaco log y , Medical Co llege o f Chinese People s Armed Police Fo rces, Tianjin 300162, China; 2.
Tianjin Univ ersity o f Medica l Sciences, Tianjin 300070, China)
Key words: DACHENGQIT ANG; IP3; CaM; PDE; enterial smoo th muscles
* DACHENGQITANG is a ready-made recipe of TCM.
　　大承气汤是《伤寒论》中重要方剂之一 ,由大黄、
枳实、厚朴、芒硝 4味中药组成。以往的实验及临床
均证明大承气汤能增强胃肠道推进功能 ,从而产生
泻下作用 [1 ] ,近年来 ,发现肌醇脂质在细胞跨膜信号
传递中起着重要作用 ,其中的 IP3促进肌收缩的作
用机制也已阐明 [2 ]。由此可见 , IP3是参与调节消化
道平滑肌活动的重要物质。 本实验选用大鼠不完全
肠梗阻模型 ,采用了酶学分析法测定了大承气汤作
用下肠道平滑肌细胞内磷酸二酯酶 ( PDE) 的变
化 ,以探讨大承气汤的“通里攻下”作用是否与肌醇
脂质信号系统的作用有关 ,从而为进一步阐明大承
气汤泻下作用的机制提供理论依据。
1　材料
1. 1　试剂和药品: 大承气汤 ,浓度为 100% (相当
于 1 g生药 /m L)天津市南开医院制剂室提供 (实
验所用 50% 大承气汤由 100% 大承气汤加双蒸水
稀释 1倍制成 , 250% 大承气汤由 100% 大承气汤
加热浓缩 2. 5倍制成 ) ;环磷酸腺苷 ,腺苷 ,标准牛
血清蛋白 ,二硫苏糖醇 , Sigma公司出品 ;苯甲基磺
酰氟 ,中预卫科生物工程部出品。
1. 2　仪器: GL-20G-Ⅱ型高速冷冻离心机 ,上海安
亭科学仪器厂 ; 722型光栅分光光度计 ,上海第三分
析仪器厂 ;高效液相色谱仪: 美国光谱物理公司
( SP8800三元梯度泵 ;检测器 UV-200) ;选用 254
nm作为检测波长 ;色谱柱: 150 nm× 7. 8 mm;内装
RB ODS C18 , 5μm; SP4400积分仪。
1. 3　动物: Wistar大鼠 ,雌雄兼用 ,体重 190～ 250
g ,天津药物研究院动物室提供。
2　方法与结果
2. 1　体内实验:取大鼠随机分为 5组。肠梗阻模型
组:取大鼠在乙醚麻醉下 ,沿腹中线耻骨联合上 2～
3 cm处打开腹腔 ,以回盲部为界 ,在其向头端 2 cm
处穿线结扎 1 /2回肠 ,造成不完全性肠梗阻模型。
手术后立即用生理盐水 ig,剂量 1 mL /100 g,肠管
梗阻 24 h后再用相同剂量生理盐水 ig 1次 , 1 h后
处死动物。手术对照组:手术方法同肠梗阻模型组 ,
只是用粗线穿过 1 /2回肠 ,但不结扎肠管 ,没有造
成实验性肠梗阻。 并在前述实验条件下给予生理盐
水。 50% , 100% , 250% 大承气汤治疗组: 分别用
50% , 100% , 250% 大承气汤代生理盐水 ig ,剂量为
1 mL /100 g (分别相当于 5 , 10, 25 g生药 /kg ) ,其
余同肠梗阻模型组。 制备大鼠肠平滑肌 PDE样
品 [3 ]:大鼠断头处死 ,立即从原切口处打开腹腔 ,自
结扎部位向上剪取梗阻肠管或相应对照组肠管一
段。用冷的 Gaddum生理溶液将肠管冲洗干净。在
上述充 O2生理溶液中 ,将肠平滑肌的环行肌煎成重
50～ 100 mg的小块。用滤纸吸干水分后加 10倍容
积的 20mmol /L磷酸缓冲液 ( p H6. 6)。用玻璃匀浆
器制成匀浆 , 4℃ , 14 650× g离心 30 min,取上清
液即为 PDE样品 , - 30℃冰箱快速冰冻备用。PDE
测定采用周汉良等建立的方法进行 [4 ] ,结果见表 1。
模型组肠平滑肌细胞内 PDE活性明显低于手术对
照组 ( P < 0. 05) ,而 50% , 100% , 250% 大承气汤
治疗组肠平滑肌细胞内 PDE活性明显高于模型组
( P < 0. 05) ,且与大承气汤浓度呈正相关 ,从而反映
出 CaM活性也高于模型组。
表 1　大承气汤体内对 PDE活性的影响 (x± s)
组别 例数 PDE活性 ( nmol /g. protein· min )
手术对照 7 37. 16± 5. 44*
模型 7 14. 54± 3. 09
50% 大承气汤 7 36. 30± 5. 54*
100%大承气汤 7 48. 02± 9. 31*
250%大承气汤 7 59. 63± 10. 74*
　　与模型组比较: * P < 0. 05
2. 2　体外实验:取大鼠按文献方法 [ 5]略加改动制备
肠平滑肌细胞悬液: 断头处死大鼠 ,以回盲部为界。
在其向头端 2 cm以上取出一段回肠。 用 Gaddum
液将肠管冲洗干净 ,除去大网膜 ,小心剥去浆膜和粘
膜 ,纵行肌 ,将环行肌剪成小块。放入 MEM培养液
中 ( pH 7. 4) ,加入 0. 1% 胶原酶 ,在振荡式水浴中
温育 15 min, 250× g 离心 5 min,同法再温育 15
min。分散的平滑肌细胞用 50μm尼龙网过筛 ,重新
悬浮于 M EM液中。取 4支试管 ,加入肠平滑肌细
胞悬液 ,使细胞浓度 5× 105 /mL,总体积 2 mL。前 3
管分别加入 50% , 100% , 250% 大承气汤各 100μL
(分别相当于生药 0. 05, 0. 1, 0. 25 g ) ,第 4管加入
双蒸水 100μL作为空白对照。 摇匀各管 , 37℃ 水
·340· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 4期
浴温育 15 min,迅速液氮冷冻终止反应。 250× g离
心 5 min。弃去上层液。用 Gaddum液洗 2次 ,重新
悬浮试管内沉淀的细胞。然后用与体内实验相同的
方法提取 PDE,测定 PDE含量 ,结果见表 2。 50% ,
100% 和 250% 大承气汤组 PDE活性均高于正常
对照组 ( P < 0. 05) ,且与大承气汤浓度呈正相关 ,从
而反映出以上 3组的 CaM 活性也高于正常对
照组。
表 2　大承气汤体外对 PDE活性的影响 ( x± s )
组别 例数 PDE活性 (nmol /g. protein· min)
正常对照 6 37. 59± 5. 16
50% 大承气汤 6 53. 59± 11. 07*
100%大承气汤 6 59. 02± 11. 31*
250%大承气汤 6 67. 63± 10. 74*
　　与正常对照组比较: * P < 0. 05
3　讨论
大承气汤具有通里攻下 ,泻热除满等作用。动物
实验证明大承气汤有明显的胃肠推进及增加肠容积
的效应。同时 ,人体研究也证明 ,可兴奋小肠肠管的
运动功能 ,导泻的成功与否常是大承气汤取得疗效
的关键 [6 ]。消化道平滑肌活动主要由两个信号转导
系统调节。其中环核苷酸系统 ( cAMP、 cGMP)介导
舒张、肌醇脂质信号系统介导收缩的机制已经阐明。
本实验采用酶学分析法测定 CaM。体内外实验
结果显示: 大承气汤可使正常和肠梗阻大鼠肠道平
滑肌细胞内 CaM活性提高 ,作者以往的实验已经
证实大承气汤的“通里攻下”的机制是通过作用于肌
醇脂质信导系统 ,使 IP3介导的 Ca2+ 通道开放 ,将
Ca2+ 从内质网中释放出来 ,使细胞内 Ca2+ 浓度升
高。直接或通过 CaM间接地激活一些蛋白激酶 ,调
节蛋白的磷酸化 ,使平滑肌收缩。
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风湿 1号颗粒的抗痛风作用
多月英 ,王宇伟 ,申秀萍 ,张道莹 ,梅学仁
(天津药物研究院 ,天津　 300193)
摘　要:目的　研究风湿 1号颗粒的抗痛风作用。方法　风湿 1号颗粒 ig给药 ,并用消炎痛和秋水仙碱作对照。结
果　在 5, 10, 20 g生药剂量下 ,具有非常显著的抗痛风性关节炎的作用。其中对尿酸钠诱导的小鼠足肿、大鼠足肿
和家兔急性痛风性关节炎的抑制作用较强 ,在以上几种实验性痛风性关节炎模型上 ,该药的抗痛风作用强于阳性
对照药消炎痛和秋水仙碱。 结论　风湿 1号颗粒在临床上能够治疗痛风性关节炎。
关键词: 风湿 1号 ;痛风性关节炎 ;抗通风
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253-2670( 2001) 04 0341 03
Anti-gout effect of No. 1 FENGSHI GRANULES
DUO Yue-ying , W ANG Yu-wei, SHEN Xiu-ping , ZHANG Dao-ying , M EI Xue-ren
　　 ( Tianjin Institute of Pharmaceutical Resear ch , Tianjin 300193, China)
Key word: No. 1 FEN GSHI GRANULES* ; g outy arthri tis; anti-gout
* No. 1 FENGSHI GRANULES is a recipe of TCM used in the tr eatment o f g outy ar thritis
·341·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 4期
收稿日期: 2000-10-16作者简介:多月英 ( 1961-) ,女 ,内蒙人 ,鄂温克族 ,副主任药师。1983年毕业于佳木斯医学院 ,先在黑龙江省大兴安岭卫校任基础部主任 ,后在黑龙江省大兴安岭制药厂任技术厂长 ,现任山东省威海迪沙药业有限公司副总经理和总工程师 ,主要从事新药研究开发工作。 电话: 0631-5927805
* 山东威海迪沙药业有限公司　邮编 264205