全 文 ：醇提取含量偏低 ,故选用甲醇 -甲酸 ( 95∶ 5)溶液作
为提取溶剂 ,结果较满意。
3. 2　分离度的考察: 高效液相色谱图如图 1,供试
品中阿魏酸分离良好 ,而阴性液无干扰。
供试品溶液　　　　　　　　　　对照品溶液　　　　　　　　　　　阴性液
图 1　高效液相色谱图
3. 3　精密度的考察:结果其 RSD为 0. 6% (n= 6)。
表明仪器精密度良好。
3. 4　稳定性的考察: 结果 8 h内 ,色谱峰面积无明
显改变 ,其 RSD为 1. 7% ,表明稳定性良好。
参 考 文 献
1　中华人民共和国卫生部 . 药品标准 . 中药成方制剂第 8册 .
1993: 194
2　陈汉平 ,刘素香 ,李桂梅 . 中草药 , 1988, 19(10): 15
( 1999-10-08收稿 )
HPLC法测定健骨生胶囊中葛根素和芍药苷含量
中国药品生物制品检定所 (北京 100050)　　郑笑为 　倪　龙　马双成　林瑞超
天津达仁堂制药厂　　　　　　　　　 　　张　捷
摘　要　目的: 测定健骨生胶囊中葛根素、芍药苷的含量。方法: 应用 HPLC法。结果: 胶囊中葛根素含量为 0. 02毫
克 /粒 ,芍药苷含量为 0. 16毫克 /粒。 结论:本法灵敏、快速、专属性及重现性较好。
关键词　健骨生胶囊　葛根素　芍药苷　 HPLC
　　健骨生胶囊是由当归、葛根、白芍、土茯苓、西洋
参等十几味中药组成的复方制剂 ,有很好的强筋壮
骨的作用。 其组分复杂 ,为了控制内在质量 ,采用
HPLC法测定其中葛根素与芍药苷的含量 ,该方法
前处理简单 ,回收率高 ,重现性好 ,可用于工厂常规
分析检验用。
1　仪器、样品与试药
仪器 SP8800高效液相色谱仪 ;日本岛津公司
SGL-6A高效液相色谱仪 ;健骨生胶囊由北京匡达
制药厂提供 ;葛根素、芍药苷对照品由中国药品生物
制品检定所提供 ;试剂为分析纯 ,水为蒸馏水 ,柱层
析用聚酰胺 ( 80～ 120目 )。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 葛根素: C18-ODS色谱柱 ( 250
mm× 4. 6 mm , 6μm);流动相:乙腈 -水 -冰醋酸 ( 8∶
92∶ 0. 5) ;检测波长为 250 nm;柱温 35℃ ;流速 1. 0
mL /min;保留时间 15 min左右。
芍药苷: C18-O DS色谱柱 ( 150 mm× 4. 6 mm , 5
μm) ;流动相乙腈-水 ( 23∶ 77,磷酸调 pH值 3～ 4) ;
检测波长为 232 nm;流速 1. 0 mL /min;保留时间
17 min左右。
在上述条件下 ,这两种成分可与杂质峰分离 ,空
白样品也无干扰 ,见图 1。
2. 2　对照品溶液的制备: 葛根素:精密称取葛根素
对照品适量 ,加甲醇制成每 1 mL含 0. 2 mg的溶
液 ,再精密吸取 1 mL置 10 mL容量瓶中 ,加甲醇至
刻度 ,摇匀 ,即得。
芍药苷:精密称取 80℃干燥至恒重的芍药苷对
照品适量 ,加甲醇制成每毫升含 0. 15 mg的溶液 ,
摇匀 ,即得。
2. 3　供试品溶液的制备: 葛根素: 取本品 ,除去囊
壳 ,精密称取胶囊内容物约 4 g置具塞锥形瓶中 ,加
·744· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 10期
Address: Zh eng Xiaow ei , National Ins ti tu te for th e Cont rol of Pharmaceutical and Biological Products , Bei jing郑笑为　大学学士 ,主管药师 ,主要从事中药质量分析及天然药物化学方面的研究。 完成有对银杏中黄酮类有效成分的提取分离与鉴定 ,中药材珍珠、人工牛黄的 X衍射 Fou rier谱的研究等。
入甲醇 200 mL,轻轻摇匀 ,称重 ,然后超声处理 60
min,放冷 ,再称重 ,用甲醇补足损失的重量 ,摇匀 ,
滤过 ,弃去初滤液 ,精密量取续滤液 100 m L,置水浴
上蒸干 ,用少量甲醇溶解 ,置 10 mL容量瓶中 ,并稀
释至刻度 ,摇匀 ,过 0. 45μm微孔滤膜 ,作为供试品
溶液。
2. 4　标准曲线的制备: 葛根素:精密称取葛根素对
照品 1. 86 mg ,置 10 mL容量瓶中 ,加甲醇稀释至刻
度 ,摇匀。再精密从中吸取 1 mL,置 10 mL容量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。精密吸取上述
　葛根素　　　　　　　供试品　　　　　　　　　空白　　　　　　　　芍药苷　　　　　供试品　　　　　空白
图 1　样品 HPLC图
对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10μL,注入液相色谱仪 ,按上
述色谱条件测定峰面积 ,以峰面积积分值为纵坐标 ,
以葛根素重量 (μg )为横坐标 ,计算得一直线 ,线性
回归方程: Y= 222 978. 49X - 382. 60, r= 0. 999 7,
结果表明在 0. 037～ 0. 186μg范围内葛根素浓度与
峰面积呈良好线性关系。
芍药苷:精密称取 80℃干燥至恒重的芍药苷对
照品 7. 12 mg ,置 50 mL容量瓶中 ,加水溶解并稀释
至刻度 ,摇匀 ,即得对照品溶液。 精密吸取上述对照
品溶液 1, 3, 5, 7, 9μL,注入液相色谱仪 ,按上述色
谱条件测定峰面积 ,以峰面积积分值为纵坐标 ,以芍
药苷重量 (μg )为横坐标 ,计算得一直线 ,线性回归
方程: Y= 1 574 152X - 16 864. 9, r= 0. 999 9,结果
表明在 0. 14～ 1. 28μg范围内芍药苷浓度与峰面积
呈良好线性关系。
2. 5　精密度试验: 精密吸取同一对照品溶液 6μL,
重复进样 5次 ,葛根素峰面积的 RSD为 1. 62% ,芍
药苷峰面积的 RSD为 0. 55% ,说明精密度良好。
2. 6　重现性试验:取同一批号样品 5份 ,分别按样
品测试条件测定 ,葛根素的 RSD为 1. 22% ,芍药苷
的 RSD为 1. 44% ,表明重现性良好。
2. 7　样品测定: 分别精密吸取葛根素对照品 6μL
和供试品 8μL,芍药苷对照品 5μL及供试品 7μL,
注入高效液相色谱仪 ,测定峰面积 ,以外标法计算含
量 ,结果见表 1。
表 1　样品含量测定
批　号 葛根素含量
(毫克 /粒 )
RSD
(% )
芍药苷含量
(毫克 /粒 )
R SD
(% )
971115 0. 022 1. 67 0. 216 0. 37
971009 0. 021 1. 29 0. 203 1. 80
970916 0. 024 1. 51 0. 186 1. 44
2. 8　回收率试验:采用加样回收法 ,按样品制备方
法及测试条件测定 ,结果葛根素平均回收率为
99. 77% , RSD= 1. 05% (n= 5) ;芍药苷平均回收率
为 103. 61% , RSD= 1. 63% (n= 5)。
2. 9　稳定性试验: 精密吸取对照品溶液 6μL,隔 1
h进样一次 ,测定 6 h内峰面积变化 ,计算 RSD ,葛
根素为 1. 62% ,芍药苷为 1. 33% ,证明 6 h内稳定。
3　结论
实验结果表明 ,上述方法效果最佳。曾用大孔树
脂柱去除杂质 ,但对被测样品有吸附 ,故采用直接超
声提取方法处理样品。
3. 2　在芍药苷样品提取过程中 ,为了使待测样品与
杂质能够完全分离 ,将样品通过聚酰胺柱后 ,能够去
除大量杂质 ,得到良好的分离效果。
3. 3　流动相的配制加入少量酸得峰形较为理想。
( 1999-12-22收稿 )
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