全 文 ：RP-HPLC法测定多烯紫杉醇及注射浓缩液的含量及有关物质
李晓锋 ,石炳兴 ,元英进⒇
(天津大学 制药工程系 ,天津　 300072)
摘　要: 目的　建立一种用 RP-HPLC法测定多烯紫杉醇及注射浓缩液有关物质的方法。 方法　采用 ODS柱
( 250 mm× 4. 6 mm, 5μm) ,乙腈 -水 ( 47∶ 53)为流动相 ,检测波长为 230 nm。结果　多烯紫杉醇的浓度在 0. 02～
1. 0 mg /mL内 ,线性关系良好 ( r= 0. 999 9)。结论　为多烯紫杉醇制剂的质量分析提供了可靠的检测方法。
关键词: RP-HPLC法 ;多烯紫杉醇 ;有关物质
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 0991 02
Assay of related substances of docetaxel and its injection by HPLC
LI Xiao-feng , SHI Bing-xing, YU AN Ying-jin
( Depa rtment o f Pharmaceutical Engineering of Tianjin Univ er sity , Tianjin 300072, China)
Key words: RP-HPLC; docetaxel; rela ted substances
　　多烯紫杉醇 ( do cetax el)是近年开发的新一代紫
杉烷类抗肿瘤药物 ,其结构式如图 1所示。多烯紫杉
醇的作用机制与紫杉醇类似 ,抗肿瘤活性是紫杉醇
的 1. 3～ 12倍 ,对乳腺癌、非小细胞肺癌等癌症均有
明显疗效。本实验室开发了多烯紫杉醇新制剂 ,但到
目前为止 ,有关其定量分析及质量检测标准尚未见
文献报道 ,为此我们用 RP-HPLC测定多烯紫杉醇
的含量及有关物质 ,方法简便、快速、准确。
图 1　多烯紫杉醇结构式
1　仪器、药品及试剂
美国 Spectra-phy sics高效液相色谱仪 , Spec-
tra-system UV 1000紫外检测器。 多烯紫杉醇对照
品由本实验室自制 (含量为 99. 9% ) ,多烯紫杉醇原
料药及注射浓缩液由本实验室提供 ,乙腈为色谱纯。
2　实验方法
2. 1　色谱条件与系统适用性试验:色谱性: 十八烷
基硅烷键合硅胶为填充剂 ( 250 mm× 4. 6 mm ,
5μm) ; 流 动 相 为 乙 腈 -水 ( 47∶ 53 ) ; 流 速:
1. 0 mL /min;检测波长: 230 nm;柱温: 室温。 理论
板数按多烯紫杉醇计算应不低于 5 000。
2. 2　溶液的配制
2. 2. 1　对照品溶液: 取多烯紫杉醇对照品适量 ,精
密称定 ,加流动相溶解并定量稀释成 0. 4 mg /mL的
溶液。
2. 2. 2　原料药供试品溶液:取多烯紫杉醇原料 ,照
“ 3. 1”项操作 ,即得。
2. 2. 3　注射浓缩液供试品溶液:精密量取本品适量
(约相当于多烯紫杉醇 20 mg ) ,置于 50 mL量瓶中 ,
加流动相稀释至刻度 ,摇匀。
2. 3　线性范围:取多烯紫杉醇对照品适量 ,精密称
定 ,加流动相溶解并定量稀释成 1. 25 mg /mL的溶
液。分别精密量取 0. 4, 1, 2, 8, 10, 20 mL置 25 mL量
瓶中 ,用流动相稀释至刻度 ,摇匀。 进样 10μL,记录
色谱图 ,以多烯紫杉醇的峰面积 (Y )为纵坐标 ,浓度
( X )为横坐标 ,进行线性回归。结果表明 ,多烯紫杉
醇在 0. 02～ 1. 0 mg /mL范围内 ,线性关系良好。 回
归方程: Y = 8 338. 2+ 8 170. 5X , r= 0. 999 9( n=
6) ,多烯紫杉醇的检出限为 0. 5μg /mL( S /N= 3)。
2. 4　精密度试验:分别取多烯紫杉醇原料药及注射
浓缩液供试品溶液 ,各进样 10μL,各重复进样 6次 ,
以色谱峰面积计算 ,多烯紫杉醇原料及注射浓缩液
的 RSD分别为 2. 0%和 1. 6% 。
2. 5　回收率试验:精密量取多烯紫杉醇注射浓缩液
适量 (相当于多烯紫杉醇 40 mg) ,置于 50 mL量瓶
·991·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
⒇收稿日期: 2000-03-21
中 ,用流动相稀释至刻度。 精密量取此溶液适量 ,用
流动相稀释并制成 0. 40 mg /m L的溶液 ,加入精密
称量的多烯紫杉醇原料药适量 ,振荡充分溶解 ,进样
10μL,记录色谱图 ,重复进样 3次 ,用外标法以峰面
积计算多烯紫杉醇的回收率。同法分别配制 0. 32和
0. 48 mg /mL的多烯紫杉醇溶液 ,加入多烯紫杉醇
原料药适量 ,同法测定 ,结果见表 1。
表 1　多烯紫杉醇回收率实验结果 ( n= 3)
浓度 ( mg /m L) 平均回收率 (% ) R SD (% )
0. 32 100. 5 4. 3
0. 40 101. 2 3. 6
0. 48 100. 7 2. 1
2. 6　多烯紫杉醇及注射浓缩液含量测定: 分别取各
供试品溶液及对照溶液 ,各进样 10μL,记录色谱图
(图 1) ,按外标法以峰面积计算 ,即得。
图 2　多烯紫杉醇含量测定 ( A)及有关物
质检查 (B)的色谱图
2. 7　多烯紫杉醇及注射浓缩液有关物质测定
2. 7. 1　原料药:取多烯紫杉醇适量 ,精密称定 ,加流
动相制成 1. 0 mg /m L的溶液 ,作为供试品溶液 ;取
适量 ,加流动相制成 0. 02 mg /mL的溶液 ,作为对照
溶液。取对照溶液 10μL注入液相色谱仪 ,调节检测
灵敏度 ,使主成分色谱峰的峰高为满量程的 10% ;
再取供试品溶液 10μL注入液相色谱仪 ,记录色谱图
至主成分保留时间的 2倍。
表 2　含量及有关物质测定结果 (% )
批号 剂型 含量 有关物质
TD991203 原料药 98. 83 < 2
TD991214 原料药 98. 65 < 2
TD991225 原料药 98. 76 < 2
TD00311 注射剂 101. 34 < 3
TD00318 注射剂 102. 05 < 3
TD00326 注射剂 101. 32 < 3
2. 7. 2　注射浓缩液: 取本品作为供试品溶液。 照
2. 7. 1项下的方法测定。
3　讨论
3. 1　波长的选择:用流动相溶解样品 ,在紫外 200～
400 nm之间测定吸光度 ,多烯紫杉醇在 230 nm波长
处有最大吸收 ,故选择 230 nm作为测定波长。
3. 2　溶液稳定性:对照品溶液及供试品溶液在室温
保存 24 h后测定 ,结果不变。
参考文献:
[ 1 ]　 Ringel I, Horw it z S B. Studies wi th RP 56976( Taxo tere): a
s emi-synthetic analog of taxol [ J ]. J Natl Cancer Ins t, 1991,
83: 288.
[2 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 ,二部附录 VD.
牙敏宁喷雾剂黄芩苷含量测定的研究
王鑫波 1 ,竹剑平 2⒇
( 1. 浙江省临安市中医院 ,浙江 临安　 311300;　 2. 浙江省中医药研究院 ,浙江 杭州　 310007)
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 11 0992 02
　　牙敏宁喷雾剂是由著名老中医朱古亭教授的经
验方改剂而成 ,主要由黄芩、延胡索、丁香、牡丹皮等
7味中药组成 ,具有散风清热 ,凉血止痛功能 ,用于
缓解牙周病及牙本质过敏引起的疼痛。黄芩为君药 ,
黄芩苷为黄芩的主要有效成分 ,具有抗菌、抗病毒、
抗过敏作用 ,因此采用 HPLC法测定样品中黄芩苷
的含量 ,以控制样品质量。
1　仪器和试药
仪器: SP8810高效液相色谱仪 (美国 ) , N 2000
色谱数据处理软件 ;
试药: 甲醇 (色谱纯 ) ,水为重蒸水 ,其它试剂均
为分析纯。黄芩苷对照品 ,供含量测定用 ,由中国药
·992· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 11期
⒇收稿日期: 2001-03-21