全 文 ：绞股蓝原植物及愈伤组织总皂试动态分析
江西中医学院 南昌 。。 罗光 明 唐福 圃 刘 贤旺 徐志 杰
摘要 采用比色法和 法对江西省几个具有代表性分布的绞股蓝及所诱导的愈伤组织进行了总
皂贰分析。 结果表明 原植物中总皂试的质与量因产地 、 生育期、 器官的不同有较大差异 绞股
蓝愈伤 组织总皂试的质与量也因无性系的来源不同有所差异 , 为绞股蓝药材的生产、 收购提供了
依据 。
关键词 绞股蓝 总皂试 动态分析
绞股蓝 。 。阴川 户。 。 系葫芦科植物 , 药理和临床显示
其有抗溃疡 , 抗糖皮质激素副作用 , 抗肿瘤、 抗衰老 、 抗脂质代谢 , 促进细胞代谢 , 提高免
疫力等一泛作用〔〕。 近年来 , 绞股蓝的保健 、 治疗产品日渐 增 多〔 〕。 本 文采用 比 色 法和
法对江西省 几个具代表性分布的绞股蓝及由其所诱导的愈伤组织中总皂贰进行 了分析 ,
以期为生产厂家生产 、 收购绞股蓝药材提供理论依据 。
材料和方法
原植物 绞股蓝采 白地 区及代 一号 武功山 野生种 、 甘型 日木引进
种 栽培 种 、 宁 冈 野生种 、 南城 野生种 、 分宜 野生种 、
井 冈山 野生种 、 九连山 野生种 、 乐安万崇林场 野 生 种 。
仪器 岛津 一 紫外 可见分光光度计 目本岛津公司
试剂 人参皂贰 对照品购白中国药 品生物制品检定所 。
方法 绞股蓝总皂贰含量测定采用比色法〔〕。
绞股蓝总皂贰 定性分析 吸附剂 硅胶 一 一 。 展开 剂
一 一 一 , 一 一
层 。 显色齐 一。 硫酸 乙醇液于 ℃加热 显色 。
绞股蓝愈伤组织诱导参照文献〔〕, 培 养 基 为 。 , 一 同
, 继代培养培养基为 。 一 。
结果和讨论
绞股蓝原植物及愈伤组织总皂贰 比较 结果表明 不同产地的绞股蓝原植物中皂贰
所显示的斑点有比较明显 的差异 。 同一产地 的绞股蓝器官不同所显 示的斑点也有些差异 。 绞
股蓝 愈伤组织 与原 植 物 总皂贰 的 ,值及斑点面积有一些差异 , 而且经组织培养所产
生的愈伤组织出现了一些原植物中所没有的斑点 图 、 。
同一产地生育期不 同的绞股蓝原植物总皂贰含量变化 由于绞股蓝栽培种与野 生 品种
生长习性上有些差异 , 因此我们选用了一栽培种 和一野生种 比较其各生育
期总皂贰含量 , 结果见表 、 。 均表明盛 叶期的总皂贰含量明显高于其它各期 , 故绞股蓝的
最适采收期应 以盛叶期为好 。
不同产地不同器官绞股蓝总皂贰含量变化 通过对江西省儿个具代表性地 区所 分 布的
绞股蓝原植物总皂贰含量分析 表 , 发现武功山和宁冈产的绞股蓝总皂贰含量较高 , 其
含量接近甚至高于 甘型 日本引进种 , 因此 , 这两产地的绞股蓝具有开发价值 。 结果表明 ,
即使同种植物 , 产地有差异 , 则其次生代谢产物的含量有明显差异 。 因此 , 在生产上应注意
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二兰立二二二 气立州
图1 不同产地原植物总皂试T L C 图2 绞股蓝原植物与培养物总皂试T L C 比较
( 展开剂: I ) ( 展开剂: I )
1 一 G P 6 S Z 一 G P 6 L 3 一 G P Z S 4 一 G P Z L I 一 G P S S Z 一 G P s L 3 一 G P s C 通一 G P Z L
5 一 G P g S 6
一
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一 入参皂贰R 七一 s 一 G P Z S 6 一 G P Z C 7 · 人参 皂试 R b-
8 一 G P 7 F g 一 G P 7 S 1 0 一 G P 7 L 1 1 一 G P I S 日一 G P 3 L g 一 G P 3 S 1 0 一 G P 3 C
1 2
一
G P I L 1 3
一
G P s L 1 4
一
G P s S ( L
一几卜 2 1一 G P 6 L 1 2 一 G P 6 S r 3 一 G P 6 C ( L 一叶
S 一茎 F · 果实) S 一 茎 C 一 愈伤组织)
这一 “化学品系” 问题 。 值得注意的是: 通过对南城产绞股蓝原植物的总皂贰分析 , 表明其
中不 含有绞股蓝总 皂贰 。
表1 G P Z不同生育期总皂伏含l 变化 ( 夕土 5 0 )
一~_~._甘 、 ~ ~ 一 __ _ _ _ 一_ _ _ _ _ _ _ _ _ 1 _ J _ _ _ _ _ ~ _ _ 一一~曰. . . . . . .. ... 叫. . . . . . . 曰翻生育期器官含量( % ) 苗 明3 。 3 2 士 0 。 0 8 茎1.54 士0 .竺 盛叶期 衰老期一 而一一一 孚 一 叶 茎7 。 7 4 士0 。 1 4 3 。 5 7 士 0 。 1 1 3 . 1 7 士 0 。 1 6 1 。 1 3 士0 。 0 2
表 2 G P 6不 同生育期总皂俄含遥变化 ( 歹士 5 0 )
生育期 苗 期
器 官 叶 茎
含量 (% ) 1.94 士 。。 1 5 1 . 6 4 士 0 . 1 1
盛叶期
}{}-
2 .71 士 0 。 0 4 2
日1
3 5 士 0 。 0 3 2 . 1 0 士 0 。 0 4 1 . 6 1 士 0 。 0 3 1 。 9 3 士0 。 0 8 1 1 士 0 。 0 3
叭 、 户~ 卜 州. . .
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一一., ‘一口口州一 - 司.口曰曰甘 二到.一 ,一.一.‘.由 .内口曰曰 d . . . . .曰 .. . . ‘浏 . .表3 不同产地不同器官绞股蓝总皂伏含量变化 (夕士 S D )
新 建
产地 (G P Z )
武功 一} l
又G P I 、
九连山
(G P g
分 宜
(G P 6)
弓 冈
(G P 3)
乐 安万崇
(G P S)
南 城
(G P S)
井冈山
〔G P 7 )
1 9 9 0 一 0 9
7
.
7 4 士 0 . 1 4
3 。 5 7 士 0 . 1 1
19 9 0 一 0 9
7
.
8 2 士 0 . 1 2
5 。 1 4 士 0 . 1 9
1 9 9 0 一 0 9 1 9 9 0 一 0 9
2
。
7 1 士 0 。 0 4
2
。
3 5 士 0 。 0 3
1 9 9 0
一
0 9
。
8 3 士 0 。 1 7
。
4 7 士 0 .2 8
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1 9 9 0 一 1 0
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1 0 士0 .0 8
.0 8 0 .0 8 士 0 .0 2
1 9 9 0 一 1 0
0
1 9 9 0
一
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1
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1
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2 8 士0 。 0 2
2
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4 2 士0 。 0 3
叶茎续口T声。果
收期量幻剩刚煞(%
2 .4 绞股蓝不同无性系愈伤组织的 尝、 一皂贰 含量变化: 将不同无性系绞股蓝原植物茎 诱导产
生愈伤组织 , 经 7 一 8 代继代适应培养 , 分别测定其总皂贰含量 (见表 4 ) , 可见不同 产地
的绞股蓝均具有合成总皂戒类代谢产物的能力 , 只是在程度上有所差别 。同一产地不同株系绞
股蓝愈伤组织 , 其合成皂试能力也 有差别 。 原植株合成皂贰能力强的愈伤组织 , 仍有较高含
量的总皂贰 。 但总皂贰含量也因愈伤组织生长状态而有差别 , 生长旺盛 。 质地疏松的愈伤组
织其总皂贰含量一般低于生长缓慢 、 质地坚密的愈伤组织 。 若以愈伤组织总皂贰生产量作为
《中草药 》19 9 4年第25 卷第5期 · 2 6 7 .
评价指标 , 则两者和差不大 。 十分有 哑的早: 经原植物草诱导产生的愈伤组织 , 其总皂贰的
含量大多高丁原 怕物茎的皂贰 含早 , 但均 低于原枕物叶的含量 , 说明绞股蓝齐器官均有合成
皂袱的能力 , 只是 由于分配 _仁的差异 , 从而造成了原植物不同器官皂贰含量上的差异 。
表 4 不同产地 、 不 同无性系绞股蓝愈伤组织生长皿和皂试含摄
无性索 G P Z 一 A G P Z 一 B G P 3 一 A G P 3 一 B G P 3 一 C ‘ G P S 一 A G P S 一 B G P S 一 C G P 6
鲜 重增 长
速率(g/ L · d )
皂蔽 合 准
(D W % )
皂 ;挤产是
(m g/ L )
2 ‘ 5 6 9 7 1 4 工9 3 5 。 5 8 8 6 1 5 . 2 4 6 7 1 4 。 3 0 2 9 2 . 9 4 3 9 2 . 6 1 1 1 3 . 1 6 5 6
3
.
2 7 1
。
7 9
1 吐7 。 1 3 5 3 9 9 3 3 8 5
3 6 0
。
7 6 0
。
8 8 1
。
5 2 1
.
8 0 1
.
8 3
7 7
。
4 6 3 1 1 4 6
.
5 3 5 5 1 6 8
.
4 4 9 6 1 3 0
.
2 7 8 9 1 3 1
.
4 0 3 1 1 5 7
.
2 4 8 5 8 2
.
4 8 2 3
3 小结
3 .】 绞股蓝原植物总皂贰的质量和数量因产地 、 生育期和器官的不同有所差异 。
3
.
2 绞股蓝原植物的最适采收时期为盛叶期 , 此期 营、皂贰含量最高。
3
.
3 不同产地的绞股蓝中所含总皂贰的录有较大差异 , 有的门:种甚至根本不含有总 一皂 贰 ,
该种是否存在 “化学宗” , 有待进一_!少研究 。
3
.
4 通过诱 导和培养所获得的绞股茹愈伤组织 , 均具有母水所具有的合成总皂贰 的 能 力 ,
只是在程度上有所差异 。
致谢 : 药材品 种 经 本院徐志杰副教授 鉴 定; 汪 国宝老师协助 含量 刚 定 。
参 考 文 献
周和 平. 药学 通报 , 1 9 5 8 , 2 3 ( 2 2 )
一
] 树利 , 等. 国外医药 一 准物药分册 ,
( 3 )
:
9 9
1 9 9 1
,
6
何心 茫. 中草药 , 1 9 8 7 , 1 8 ( 1 0 ) : 1 5
罗光明 , 等 . 巾药材, 1 9 9 3 , 1 6 ( 7 ) : 5
(
1 9 9 3
一 0 6 一2 2 收稿 )
( 上接 第245 页 )
取5次 , 每次30 m l, 合并氯仿层 , 水浴蒸干 , 残留物用氯仿溶解 , 定容于 10 m l容量瓶中 , 并
用氯仿稀释至刻度 , 作为供试品溶液 。 在薄层板__仁点样4时和对照液2时 , 展开 , 显色 , 扫描
测定 , 以外标一点法定量 , 见表 。
了 加样回 收实验
取 内容物。.8 9 . 精密称定 , 准确加入一
表 样品中粉防己喊含量测定结果
批号 含最(m g / 牟认) R S D % n = 4 )
定量的粉防::碱对照 品 , 按样品测定法测定 一飞3。3。, - 一而 ----一 。. 52 一一计算结果 , 平均 l了几x仪率99.98 9书, C V 二 1 . 8 9 0 3 0 30 2 1 7 3 3 . 06
( “ 二 6 )
。 g赞岑 、 ‘.7 1 ‘.3 6 _ _ _
8 结果
8 .1 本 法测定 比痛软胶囊中粉防己碱含量 , 结果稳定 , 操作方便 , 准确 , 重现 性 好 , 加样
[P1 收率为99 .9 8 9石, C V = 1 . 8 9 % ( n = 6 ) 。
8
.
2 薄层板展开后放置的时间和显色剂的用量均影响测出的面积积分值 , 经试验认 为 薄层
板展开后放置约 10 m in 即显色 , 显色剂以喷湿润为宜 , 上覆盖一块同样大小的玻璃板 , 周围
用胶布封好 。
( 1 9 9 3
一 0 3 一0 9 收稿 )
·
2 6 8
·
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o g o P t o r u s “a n t h f P o s ) D e e o e t io n o n lm m u n e F u n e t io n s
1n Im m u n o s u P P r e s s e d M ie e
G u o G u o h u a , L u Y a o b a n g , J i a n g M a o h e n g , e t a l
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( 0 r ig i n a l a r ti e le o n p a g e 2 6 1 )
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( 上接 第252页 )
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