全 文 ：松 果 有 效 成 分 的 研 究
1
.油松果多糖的含量测定
沈阳药学院药物分析教研室 (11 01 05 )李好枝 .吕永俊 白 钢 曹 征“
摘要 用苯酚一硫酸法进行了油松果多糖的含量测定 , 并考察了苯酚与浓硫酸的用 量 及反应温度
等因素对显色反应的影响 , 最大吸收波长 4 9 o n m , 测得多糖在 10 一 7 0协g / m l的浓度 范 围 内与吸
收度呈线性关系 ( r = 0 . 9 9 9 9 n = 6 ) , 平均回收率为 9 9 . 9 % , 变异系数为1 . 2% , 最 低检测浓度
为 0 . 5件g / m l 。
关键词 油松果多糖 苯酚一硫酸法
油松果多糖为近年新发现的具有抗癌 、 抗艾滋病等生理活性的植物提取物 , 其药理作用
引人注目 , 而油松果多糖的含量测定方法未见报道 。 植物多糖含量测定方法有葱酮法〔1〕、 苯酚
一硫酸法〔 2一 4 〕、 硫酸一咔哇比色法〔的及提取重量法〔 6〕 、 G C 〔 7 〕法等 。 本文采用苯酚一硫酸法测
定含量并对影响显色反 应的各因素进行了考察 , 同时测定了几批样品 , 方法灵敏度 高 , 试剂
来源广泛 。
1 实验部分
1
.
1 仪器 与试药 : w F Z 一韵 o D Z型紫外可见分光光度计 , x w 一 80 旋涡混合 器 , 日本 岛 津
U V 一 2 6 0紫外可见分光光度计 。
葡萄糖 ( A . R ) , 油松果多糖 自制 , 苯酚 、 浓硫酸均为分析纯 。
试剂配制 : 5 %苯酚溶液的配制 : 取苯酚适量 , 沙浴蒸馏 , 收集 1助一 182 ℃ 的 馏分 , 称
取此馏分 1 2 . 59 , 置 2 50 m l容量瓶中 , 用水稀释至刻度 , 摇匀 , 避光 , 冷藏 。
标准溶液的配制 : 精密称取 105 ℃干燥恒重的葡萄糖 9 . 92 m g , 置 1 0 m l容量瓶中 , 用水
稀释至刻度 , 摇匀 , 成 9 . 2卜g / m l的标准溶液 。
1
.
2 最大吸收波长的选择 : 精密称取 1 05 ℃干燥恒重的葡萄糖 3 m g , 置 1 0 m l容量瓶中 , 用
水稀释至刻度 , 摇匀 , 使成 3 0卜g / m l的溶液 。 精密吸取该溶液 l m l , 加入5 %苯酚溶液 l m l ,
浓硫酸 5m l , 室温放置 10 m i n , 然后置 1 0 ℃恒温水浴加热 15 m i n ,取 出后立 即放入冷水中冷
却 15m i n 。 以 l m l水 、 l m l s %苯酚溶液 、 s m l浓硫酸混合液做空白 , 用岛津 U V 一 2 6 0紫 外可
见分光光度计在 2 0 一 6 o o n m范围内扫描 , 确定最大吸收波长为 4 9 0 n m 。
1
.
3 实验条件的选择 : 对吸收度有影响的因素有 : 苯酚的用量 ,浓 硫酸的用量 , 加 酸后的放
置时间 , 水浴温度及水浴中的放置时间 。
1
.
3
.
1 5 %苯酚用量考察 : 量取 3 0协g / m l葡萄糖溶液 l m l , 浓硫酸用量 6m l , 加酸 后放置 10
m i n
, 水浴温度 2 5 oC , 水浴内恒温 一s m i n ,
测得吸收度数据如表 1 。 从表 1可以看出 :
5%苯酚溶液的用量为 0 . 1一 3 m l ( 即 5一 1 5 o m g )
当加入苯酚 l . 6 m l时吸收度最大 。
1
.
3
.
2 浓硫酸用量考察 : 加入 5 %苯酚溶液 1 . 6m l , 其他条件同 1 . 3 . 1项下 , 浓硫 酸用量为
5~ 7 m l
, 结果见表2 。
1
.
3
.
3 加酸后放置时间的考察 : 5 %苯酚溶液 1 . 6 m l , 浓硫酸 7m l ,其他条件同 1 . 3 . 1项 下 ,
测得吸收度数据表明 , 放置 10 m in 吸收值趋于稳定 。
.
A d d r e s s
,
L i H
a o z h i
,
D
e P a r t m e n t o f Ph a r m a c e u t i c a l A n a l y s i s
.
S h e n g y a n g C o l l e g e P h a
r m a c y -
S h e n g y a n g
, . 本院“ 期 日语药学班学生
《 中草药 》 1 9 9 4年第 25 卷第 4期 · 18 5 .
表 1 不同月母的笨酌测得吸收度
苯酚用量 ( m ) l 0。 1 0。 2 0。 3 0。 4 0。 5 0。 7 0。 8 0。 9
吸 收 度 08 8 0 0。 1 5 3 0。 7 2 0 0。 4 2 5 0。 2 5 5 0 3 0 6 0. 321 0。 2 3 6
苯酚用母 ( n l l)
吸 收 度
1
。 0
0
。
7 2 3
1
。
2
0
。
3 3 9
1
。
4 1
.
6
0
。
35 90
。
37 0
2
。
02
。 5 3
。
0
0
.
3 37 0
。
3 3 3 0
。
27 90。 2 3 9
1
.
3
.
4 水浴温度的考察 : 加入 5%苯酚溶液 1 . 6m l, 浓硫酸 7 m l , 加酸后放 置 10 m i n , 水 浴
恒温 巧 m i n , 测得吸收度数据如表 3 。 室温时吸收度最大 。
表 2 不同用且浓硫酸测得吸收度— 表 3 不同水浴温度测得的吸收度浓硫酸用量( m l ) 5。 0 5 . 5 6。 0 6。 5 7 。 0 7 。 5吸 收 度 0 . 2 1 4 0 . 2 9 0 0 . 3 4 4 0 . 3 81 0 . 4 0 8 0 。 3 8 4 水浴温度 ( 。 C )吸 收 度 室温0 。 4 0 9 4 5 6 5 8 5 10 00 . 3 9 3 0 。 3 5 9 0 。 3 3 1 0 。 2 9 5因此 , 最佳反应条件为 : 5 %苯酚溶液 1 . 6 m l , 浓硫酸 7m l , 加酸后放置 10 m i , 水 浴 温压与室温 相同即可 , 水浴恒温 15 m i n 。1 . 4 标准曲线的制备 : 精密量取葡萄枯标准溶掖。 . 1、 0 . 2 、 。 . 3 、 0 . 4 、 0 . 5 、 0 . 6 、 0 . 7m l置10 m l容量瓶中 , 分别加水使成 1m l , 再分别加入 5丸苯酚溶液 1 . 6m l , 于旋涡混合器上充分混合 , 然后加浓硫酸 7m l , 再于旋涡混合器上充分混合 , 放置 oI m i n , 加水至刻度 , 混 匀 , 置25 ℃水浴恒温巧m i n 。 取出放置至室温 , 加水至刻度 , 混匀 。 另取 10 m l容量瓶加水 l m l , 5%攀酚溶液 1 . 6m l , 浓硫酸 7m l , 按土述方法操作制得的溶掖作空白 , 在 4 9 o n m测定吸 收 度 。求得标准曲线的回归方程为 A = o . o 6 s 3 C + 0 . 0 04 5 5 7 ( r = 0 . 9 9 9 9 , n = 6 ) 。1 . 5 回收率实验 : 以标准添加法按标准曲线项下操作 , 测得回收率为 9 . 1% , 变异 系数为
1
.
08 % ( n
= 6 ) ; 重复一次实验为 10 0 . 6% , 变 异 系 数 为 1 . 4% ( n 二 6 ) 。 平 均 回收 率为
9 9
.
9%
, 变异系数为 1 . 2% ( n 二 6 ) 。 表 4 稳定性实验
1
.
6 稳定性实验 : 取样品 P 。 l m l , 按标准曲线 间隔时间
, -
- 一 .一 - - 一 - - , , - - - - - - 一盯门 , J ’ . 、 0 0 . 5 1 2 4 6项下操作 , 放置一定 时间测定吸收度 , 结果见 ( h )
表 4 。 可见在 Z h 内颜色变化较小 , 不影 响测定 。 二进些已翌 生些1燮竺卫些卫燮生竺一
1
.
7 样品含量测定 : 精密和;取样况I T 3 、 p 3 、 T ` 、 p ` 、 T 。 、 P 。 、 T 卜 p 。各 3 . o m g分别置一o o m l容
量瓶中 , 加水溶解并稀释至刻度 , 超声 10 m i n , 过滤 , 分别取滤液 l m l按标准曲线项下操作 ,
测定结果如表 5 :
表 5 含里测定结果
样品 T 。 T: P : 1 P `
N
o
.
1 2 3 1 2 3 1 2 各 i 艺 ·
吸 收 度
含量 (% )
平均含量 (%)
0
。
0 0 7 0 0 0 9 0
。
0 11
1
.
0 4 2
.
0 2 2
.
9 9
2
。
0 2
0
。
0 0 9
1
。
9 9
0
。
0 0 8
1 5 1
1
。
8 3
贯 1 1 :了 0 。 0 2811 。 11
1 1
。
3
1 1 {:
“ 0 。 0 5 6 0。 0 6 1
2 5 。 7 3 2 8
。
2 5
2 7
。
6
2 8义’
续表 5
样品
N o
。
T
。 P , T
。
P
.
吸 收 度 0 。 10 0
含量 (% ) 朽 。 8
平均含量 ( 乡` )
0 9 6
9
0
0
。
0 99 0 。 0 33 0 0 3 4
2
。
9
0 。 0 33
13
。
7
0
。
0 3 5 0
。
0 3 2
霜: 4 5 。 3 1 3 . 7 竹 1 4 。 3 糕
0
.
0 3 5
1 4
.
3
0
。
0 6 4 0
。
0 6 4
2 8
.
6 2 8
。
6
2 8 。 7
0
。
0 6 5
2 9
。
1
一
18 6
.
( 下转第 x 8 9页 )
2
.
2神经 网络的容错能力 :神经网络模型中 , 知识信息采取分布式存储 , 个别单 元 损坏不
会引起错误 , 因此用神经 网络进行预报识别容错能力强 , 可靠性高 。
本研究中 , 将神经 网络最后一个隐节点 ( 隐蔽层第 8个神经元 ) 删去 , 即相 关权 重置为
零 , 得到的神经网络模型记为模型 B , 原来的模型记为模型 A , 对 4个 “ 未知 ” 样本的评价见
表 4 。 可见 , 神经 网络具有较强 的容错 、 抗干扰能力 。
2
.
3 评价速度 : 训练好 的神经 网络在对未知样本进行评价时仅需作少量的加法 和 乘法 , 因
此评 价速度快 。 如果做成专用硬件或用并行机则速度更快 。
表 4 个别神经元损坏对网络性能的影响
神经 网络 A的预测结果 预测级别 神经网络 B的预测结果 预测级别
0
。
9 0 0 5 5 9
0
。
9 0 1 1 6 9
0
.
1 3 3 1 4 3
0
。
2 6 3 6 0 3
0
。
10 4 59 7
0
。
0 8 4 7 3 6
O
。
8 6 7 3 0 4
O
。
7 3 2 7 2 8
0
。
0 97 7 9 0
0
。
1 1 2 1 0 1
0
。
10 0 0 8 2
0
。
0 9 3 1 2 1
0
。
9 6 8 3 8 7
0
。 0 6 8 5 9 5
0
。
3 4 1 8 9 6
0 。 4 4 7 6 7 3
0
。
0 3 6 8 47
0
.
0 2 9 4 2 7
0
。
6 8 1 5 7 8
0
。
67 3 0 8 0
0 3 5 9 7 6 5
0
。
3 9 5 6 0 5
0
。
3 6 5 7 0 9
0
。
3 4 7 40 5
3 结语
神经网络以其高度 的识别能力 , 比较适合于中药质量的评价 。 其评价准确率高 , 容错能
力强 , 速度快 。 如果能结合中药药理指标进行分析 , 则结果更客观 。
可以预料 , 随着神经 网络理论 的进一步发展 , 可望开辟中药质量评价的新途径 。
参 考 文 献
1 苏薇薇 , 等 . 沈阳药学院学报 , 1 9 8 8 , 5 ( 2 ) : 3 尹红凤 , 等 . 人工神经网络原理 , 1 9 90 , 3 ( 1 ) : 1
s , 4 欧兴长 , 等 . 药学通报 , 29 5 4 , 1 9 ( 7 ) : 3 7
2 王 玺 , 等 ·沈阳药学院学报 , , 9 9 0 , 7 ` ( ` ) : 5 ( 1 9 9 3一 0 3一 0 1收稿 )
( 上接 第 18 6 页 )
计算式 : 含量 ( % ) _ C x V 又 D
W
X 1 0 0% 式中W为样品重量
( m g )
,
C为样品葡萄糖浓度 ( 协g / m l ) , V 为采样量 ( m l ) , D 二 1 0 . 0 0
2 讨论与小结
2
.
1 本法的原理为多糖在强酸作用下水解生成单糖 , 并迅速脱水成糠醛 , 糠醛 与酚性物质
如苯酚缩合成有色化合物 。 用分光光度法在适当波长处测定多糖含量 , 本法简便易行 , 灵敏
度高 , 最低检出量为 0 . 5协g /m l 。
2
.
2 本法应特别注意操作中酸的加入方式 。 将酸直接加到溶液表而产生的颜 色较 沿 容量瓶
壁加入产生 的颜色深 , 故笔者用前者加法 。
2
.
3 配制好的 5 %苯酚溶液应冷藏避光保存 , 否则以苯酚一浓硫酸作空 白时颜色变 深 , 影 响
测定 。
2
.
4 应用蕙酮法分别测定样品含量并与本法进行对照 , 其中 P 3含量无法测出 , 故笔 者认为
对于油松果多糖的含量测定 , 苯酚一硫酸法优于蕙酮法 。
参 考 文 献
张永恒 , 等 . 中草药 , 一9 8 7 , 1 5 ( g ) : 1 3
朱立文 , 等 . 中成药研究 , 1 9 8 7 ( 6 ) : 1
冯青然 , 等 . 中药通报 , 一, 5 5 , 1 3 ( 一1 ) : 3 6
李满 飞 , 等 . 中草药 , 1 9 0 0 , 2 2 ( 1 0 ) : 10
李向高 , 等 . 中药通报 , 1 9 5 7 , 1 2 ( 6 ) : ` o
贺正全 , 等 。 中药材 , 1 9 8 7 ( 3 ) : 4 0
李铁林 , 等 . 分析化学 , 1 9 5 2 , 1 0 ( s ) : 2 7 2
( 2 9 9卜 0 6一 02收稿 )
《 中草药 》 1 9 9 4年第 25 卷第 4期 一 1 8 9 -
t h e e o n t n .t o f b ai c al i n i n r h i sP r e P r a at i o n
。
A sr e a su l t o f st ab i l i t yt e t s
,
t五。 容h e l f l i f e a t 2 5 . C
1 5 e s t i m a t e d t o b e l
。
9 7 y e a r s
。
( o r i g i n a l a r t i c l e o n P a g o 1 8 2 )
S t u d i e s o n E f f e e t i v e C o m p o s i t i o n s o f P i n e c o n e 1
.
D e t e r m i n a t i o n
0 f P o l y s a 。 。 h a r id 。 : i n C o n e o f C h i n e s e P i n e ( P i 。 “ 5 t a b u l a e f o r 。 `: )
L i H a o z h i
,
L u Y o n g j
u n , B a i G a
n g
, e t a l
Q u a n t i t a t i v e d e t e r m i n a t i o n o f P o l y s a e e h a r i d e s i n P i n o e o n o s b y P h e n o l
一 s u l f u r i e a e i d m e
。
h o d w a s s t u d i e d
, a n d t h e e f f
e e t s o f c o n c e n t r a t i o n o f P h e n o l
· s u l f
u r i e a c i d a n d r o a c t i o n t e m
-
P e r a t u r e o n e o l o r f o r m a t i o n w e r e i n v e s t i g a t e d
.
I t w a s f o u n d t h a t t h e a b s o r b a n e e 1 5 l i n e a r l y
e o r r e l a t e d t o p o l y s a e e h a r i d e c o n e . n t r a t i o n s b
e t , 。 e n 1 0~ 7a卜 g /m l ( r = 0
.
9 09 9 )
。
T h e a n a l y t i e a l
r e e o v e r y w a s 。 , . 5% , C V % w 。 5 1 。 2% a n d t h e m i n i m a l d e t e c t a b l e e o n c e n t r a t i o n 二 a s s协g / m l 。
( o
r i g i n a l a
r t i c l e o n p a g e 1 8 5 )
A r t i f ; e ia l N e u r a l N e t w o r k M e t h o d f o r Q u a l i t y E s t im a t i o n
o f T r a d i t i o n a ! C h i n e s e M e d i e i n e
C a i Y
u d o n g
,
G
o n g J i a w e n , C h e n g Z h a o n l a n
, e t a l
A
n a r t i f i e i a l n
o u r a l n e t w o r k m e t h o d f o r q u a li t y e s t i m a t i o n o f t r a d i ri o n a l C h i n e s e m e d i c
·
i n e w a s s u g g e s t e d
, a n d q u a l i t y o f H o u
·
P o w a s e s t i m a t e d b y t h e P r o P o s e d m e t h o d i n e o m P a r
·
1 s o n w i t h t h e a n a l y t i e a l r e s u l t s o f g a s
一
l i q u i d e h r o m a t o g r a P h y
。
T h e s u e c e s s f u l r a t e r e a c h e d
10 0%
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e n e u r a l n e t w o r k m e t h o d 1 5 r e l i a b l e
, a n d t h e r e f o r e m a y b。
r e f e r r e d t o a s a n e f f e c t i v e t e e h n i q u e f o r t h o q u a l i t y e s t i m a t i o n o f t r a d i t i o n a l C h i n e s e m e d i
-
C I n e
-
( o r i g i n a l a r t i c l e o n P a g e 1 8 7 )
P r o t e e t ; v e E f f e e t o f P a e o n o l A g a i n s t l s e h e m i a R e Pe r f t一s i o n
D a m a g e I n C a r d i a e M i t o c h o n d r i a M e m b r a n e o f R a t s
Z h
a n g W o i g
u o a n d Z h a n g Z h i s h a n
6 o m g / k g
·
d i p
, o
f p a e o
n o l w e r e g i v e n t o r a t s f o r 1 5 d a y s
.
T h e m y o e a r d i a l i s e h e m i a r e p e
·
r f u s i o n i n j
u r y m o d e l w a s p r o d u c e d b y o c e l u d i n g t h e l e f t c o r o n a r y a r t e r y a n d r e l e a s i n g t h e
o e c l u s i o n i n r a t s
.
T h i s s i g n i f i c a n t l y d e c r o a s . d m y o c a r d i a l C a
+ 十 一
A T P
a s e a e t i v i t i e s a n d C H / PL
r a d i c a l
,
F F A e o
n t e n t , i m P r o v e d m i t o c h o n d r i a l m e m b r a n e f l u i d i t y a n d k e P t t h e m a w a y f r o m
o x y g e n f
r o e r a d i e a l d a m a g
e
.
T h e s e r e s u l t s i n d i c a t e d t h a t P a e o n o l h a s m e m b r a n e P r o t e e t i v e
e
f f o c t o n m y o c a r d i a l i s c h e m i a r e p e r f u s i o n i n j u r y p
r o b a b l y b y i n h i b i t i n g t h e o x y g e n f r o e r a d
-
i e a l s a n d s u b s e q u e n t l i P i d P e r o x i d a t i o n
.
( o
r i g i n a l a r t i e l e o n P a g e 1 9 3 )
A n In q u i r y i n t o P r e Pa r i n g D i a r r h e a M o d e l o f M i e e a n d
A pP l i c a t i o n o f D ia r r h e a In d e x
Z h o u G a n n a
n , H u Z h i h u a
,
W a n g Y
a x i a n
, e t a l
I n o r d e r t o s c r e e n a n t i d i a
r r h e a d r u g s
, t h e s t a n d a r d o P e r a t i o n o f m i
c e d i a r r h e a m o d e l
r e P l i c a t e d w i t h l e a v e o f C a
s s i a a n g u s t i f o l i a v a h l w a s i n t r o d u e e d
.
I n e x P e r i m
e n t s , d i a r r h e a
i n d e x e x p r o s s e d w i t h l o o s e s t o o l i n e i d
e n e e r a t e m u i r i p li e d b y l
o o s e s t o o l g r a d e w a s u s e d a s
m a 互n i n d e x . I t t h o r o u g h l y m i r r o r s i n d i .
《 中草药》 19 9 4年第 25 卷第 4期 · 2 2 3 ·