全 文 ：广 西 植 物 Ｇｕｉｈａｉａ ３２（１）：１３４－１３７ ２０１２ 年 １ 月
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０１．０２６
苦玄参苷类成分的积累动态研究
宁德生，方 宏，梁小燕＊，陈海珊
（广西植物功能物质研究与利用重点实验室 （广西植物研究所），广西 桂林５４１００６）
摘 要：利用高效液相色谱技术，对不同生长期的苦玄参样品进行分析，以揭示苦玄参苷类成分的积累动态
规律。在对苦玄参植株生长情况进行观察的基础上，收集不同生长期的苦玄参样品，通过高效液相色谱法仪
测定其中有效成分的含量，并进行色谱图比较及数据分析。结果表明：苦玄参总苷、苷ＩＡ和ＩＢ的含量随着生
长周期的变化基本上呈现一致性，苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ的含量均在７５ｄ达到整个生理期的最高峰，随后缓慢下
降，但在果期前期（即１２０ｄ）两者含量再次出现次高峰，此时的生物量达到最大。由此可以确定苦玄参药材最
佳采收期应在果期前期进行采收。
关键词：苦玄参；苦玄参苷ＩＡ；苦玄参苷ＩＢ；积累动态
中图分类号：Ｑ９４６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－３１４２（２０１２）０１－０１３４－０４
＊ Ｓｔｕｄｙｏｎ ｄｙｎａｍｉｃ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ
ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｉｎ Ｐｉｃｒｉａ ｆｅｌｔｅｒｒａｅ
ＮＩＮＧ Ｄｅ－Ｓｈｅｎｇ，ＦＡＮＧ Ｈｏｎｇ，ＬＩＡＮＧ Ｘｉａｏ－Ｙａｎ＊，ＣＨＥＮ Ｈａｉ－Ｓｈａｎ
（Ｇｕａｎｇｘｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，
Ｇｕａｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ，Ｇｕｉｌｉｎ５４１００６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｏｆ Ｐ．ｆｅｌｔｅｒｒａｅｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｐｅｒｉｏｄ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ ｔｏ ｒｅｖｅａｌ ｉｔｓ
ｄｙｎａｍｉｃ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈｔ ｃｏｍ－
ｐａｒｉｎｇ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ａｎｄ ｐｅａｋ ａｒｅａｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｐｅｒｉｏｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｔｒｅｎｄ ｏｆ
ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ｐｉｃｆｅｌｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＡ ａｎｄ Ｐｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＢ ｗａｓ ｎｅａｒｌｙ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｉｃｆｅｌｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＡ
ａｎｄ Ｐｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＢ ｂｏｔｈ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ ｇｒｅｗ ｕｐ ｔｏ ７５ｄａｙｓ，ｔｈｅｎ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ
ｓｌｏｗｌｙ，ｂｕｔ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｇａｉｎ ｉｎ ｅａｒｌｙ ｆｒｕｉｔ ｓｔａｇｅ（ｎａｍｅｌｙ １２０ｄ）ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｂｉｏｍａｓｓ ｒｅａｃｈｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，
ｉｔ ｗａｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ ｓｔａｇｅ ｆｏｒ Ｐ．ｆｅｌｔｅｒｒａｅ ｗａｓ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ ｆｒｕｉｔ ｓｔａｇｅ（１２０ｄ）．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｉｃｒｉａ ｆｅｌｔｅｒｒａｅ；Ｐｉｃｆｅｌｔａｉｃｆｅｌｒｒａｅｎｉｎ ＩＡ；Ｐｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＢ；ｄｙｎａｍｉｃ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ
苦玄参（Ｐｉｃｒｉａ ｆｅｌｔｅｒｒａｅ）为玄参科（Ｓｃｒｏｐｈｕ－
ｌａｒｉａｃｅａｅ）苦玄参属（Ｐｉｃｒｉａ）干燥全草。秋节采收，
除去杂质，晒干。别名有苦草、落地小金钱、苦胆草
等等，为一年生草本植物，多生于低山、丘陵、疏林下
或潮湿的沟谷，主要分布于我国广西、广东和云南等
地，广西有大面积种植，主产于苍梧、梧州、藤县、岑
溪、龙州、崇左、东兰、桂林等地（国家药典委员会，
２０１０；钟补求等，１９７９）。药理实验表明，苦玄参水煎
液和醇提液对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌
有抗菌作用（黄燕等，２００８）；干浸膏有明显的抗炎、
镇痛及解热作用（周芳等，２００６；李萍等，２００７）；苦玄
参苷ＩＡ和ＩＢ具有镇痛、安定、调节补体等生理活性
（张银娣等，１９９０；广西植物研究所资源化学室等，
１９７８）。
苦玄参作为民间中草药，分别于１９９０年收载于
《广西中药材标准》和２０１０年收载于《中国药典》中。
＊ 收稿日期：２０１１－０６－１６ 修回日期：２０１１－０９－０８
基金项目：广西自然科学基金（桂科基０７３１０４９）［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ（０７３１０４９）］
作者简介：宁德生（１９８２－），男，广西钦州人，助理研究员，从事天然产物开发与利用，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｎｄｓｈｇｘｉｂ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ。
＊通讯作者（Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｏｙａｎｌ１３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ）
目前，已研发出多种以苦玄参为主要原料的中成药，
如妇炎净胶囊、万通炎康片、消炎灵胶囊等等。但近
年来，苦玄参的研究主要集中在化学成分的提取分
离（王力生等，２００４；成桂仁等，１９８４；黄永林等，
２０１０）、药材和中成药中苦玄参苷ＩＡ的含量测定以
及药理作用等方面的研究（胡慧玲等，２００７；方宏等，
２００８），而对于药材质量控制的报导较少（邹节明等，
２００５；梁小燕等，２００７）。因此通过对苦玄参中苷类
成分在不同生长期的研究，揭示该药材中苷类成分
的积累动态规律，为苦玄参的合理采收和规范性栽
培提供科学的理论依据，为合理利用资源和控制原
材料质量及产品质量具有重要意义。
１ 仪器与材料
１．１仪器
Ａｇｉｌｅｎｔ１２００型高效液相色谱仪，包括ＶＷＤ检
测器、四元梯度泵、在线真空脱气机、标准自动进样
器、安捷伦化学工作站（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）；超纯水
仪（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ公司）；Ｔ６型紫外分光光度仪（北京普
析通用仪器有限责任公司）；电子天平（梅特勒 ＡＴ－
２００）；ＨＨ－Ｓ数显恒温水浴锅（郑州长城科工贸有限
公司）。
１．２材料与试剂
选取不同生长期的苦玄参（Ｐ．ｆｅｌｔｅｒｒａｅ）样品
（广西植物研究所试验场地种植，采收时间见表１），
洗净晾干，于烘箱６０℃干燥，粉碎过４０目筛；称取
前对样品粉未进行干燥至恒重。试剂：乙腈（美国
ＴＥＤＩＡ公司）；超纯水为自制；乙醇、香兰素、高氯
酸、冰醋酸均为分析纯（西陇化工厂）。
２ 方法与结果
２．１色谱条件
色谱柱ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２５０ｍｍ×４．６０
ｍｍ，５μｍ）；柱温：３０℃；检测波长：２６４ｎｍ；流动
相：乙腈－５ｍＬ／Ｌ磷酸溶液，梯度洗脱（梯度表见表
２）；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ；进样量：２０μＬ。
２．２样品溶液的制备 （方宏等，２００９）
精密称取１．００００ｇ的苦玄参样品，置于１００
ｍＬ的锥形瓶中，加入２０ｍＬ积量分数７０％的乙醇
溶液，于８０℃水浴回流提取两次，提取用时第一次
３ｈ，第二次１ｈ，合并提取液，滤过至５０ｍＬ的容量
瓶，７０％的乙醇溶液定量，摇匀，过０．４５μｍ滤膜，
滤液作为供试品溶液。
表１ 不同生长期的苦玄参样品
Ｔａｂｌｅ １ Ｐ．ｆｅｌｔｅｒｒａｅｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅｓ
编号
Ｎｏ．
采集时间
Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
采样间隔
Ｓａｍｐｌｉｎｇ
ｉｎｔｅｒｖａｌ
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ
ｓｔａｔｕｓ
ｓ１ ２００８－０６－０５ 第一份样（０ｄ）幼苗期（长出１～３对真叶）
ｓ２ ２００８－０６－２４ ２０天（２０ｄ） 幼苗后期（长出５～６对真叶）
ｓ３ ２００８－０７－１５ ２０天（４０ｄ） 采样后开始移栽，开始分枝
ｓ４ ２００８－０８－０４ ２０天（６０ｄ） 普遍分枝
ｓ５ ２００８－０８－１９ １５天（７５ｄ）
ｓ６ ２００８－０９－０３ １５天（９０ｄ）
ｓ７ ２００８－０９－１３ １０天（１００ｄ） 部分植株开始开花
ｓ８ ２００８－０９－２３ １０天（１１０ｄ） 花期
ｓ９ ２００８－１０－０３ １０天（１２０ｄ） 部分植株开始结果
ｓ１０ ２００８－１０－１３ １０天（１３０ｄ） 果期
ｓ１１ ２００８－１０－２３ １０天（１４０ｄ）
ｓ１２ ２００８－１１－０２ １０天（１５０ｄ） 枯萎期
注：以幼苗期作为０天开始计算。
Ｎｏｔｅ：ｔｈｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｓｔａｇｅ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ａｓ ０ｄａｙ．
表２ 洗脱梯度表
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ
时间
Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）
乙腈（％）
Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ
５ｍＬ／Ｌ磷酸溶液 （％）
Ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ
０ １０ ９０
５ １５ ８５
３９ ２５ ７５
４９ ３５ ６５
７１ ４０ ６０
７９ ９０ １０
８３ ９０ １０
２．３方法学考察
２．３．１精密度试验 在“２．１”项色谱条件下，吸取苦
玄参样品供试液，连续进样５次，测得苦玄参苷ＩＡ
和ＩＢ峰面积的ＲＳＤ分别为０．３３％和０．３２％，结果
表明，仪器的性能良好。
２．３．２重复性试验 称取苦玄参样品粉末５份，每
份１．００００ｇ，按“２．２”项的制备方法制备供试品溶
液，分别进样２０μＬ，测得苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ的峰面
积的ＲＳＤ值分别为２．９１％和１．９６％。结果表明方
法的重现性良好。
２．３．３稳定性试验 在“２．１”项的色谱条件下，取苦
玄参供试液，分别于０、２、４、８、１２、２４ｈ进样，计算苦
玄参苷ＩＡ和ＩＢ峰面积的ＲＳＤ值分别为：０．４３％和
０．３３％，结果表明，样品供试液在２４ｈ内稳定。
２．４不同生长期苦玄参样品中苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ的
含量变化
在“２．１”项的色谱条件下，分别将１２份不同生
５３１１期 宁德生等：苦玄参苷类成分的积累动态研究
长期苦玄参试样的制备液注入 ＨＰＬＣ中进行检测，
得到１２份供试样品的色谱（图１）以及苦玄参苷ＩＡ
和ＩＢ的峰面积。以采收时间为横坐标，苦玄参苷
ＩＡ和ＩＢ的峰面积为纵坐标，绘制苦玄参不同采收
期苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ的含量变化趋势图（图２）。
２．５不同生长期苦玄参样品中苦玄参总苷含量变化
采用比色分析方法进行苦玄参总苷含量测定
（陈战国等，１９９６）：分别精密吸取“２．２”项制备的１２
图１ 不同生长期的苦玄参试样色谱图
Ｆｉｇ．１ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ Ｐ．ｆｅｌｔｅｒｒａｅｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅｓ
图２ 不同采收期苦玄参中苦玄参苷
ＩＡ和ＩＢ的含量变化趋势图
Ｆｉｇ．２ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｔｒｅｎｄ ｃｈａｒｔ ｏｆ ｐｉｃｆｅｌｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＡ ａｎｄ
Ｐｔａｒｒａｅｎｉｎ ＩＢ ｉｎ Ｐ．ｆｅｌｔｅｒｒａｅ ｃｏｌｅｃｔｅｄ
ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅｓ
份供试液０．２ｍＬ于置塞试管中，在水浴中蒸干，分
别加入０．２ｍＬ的５％香兰素醋酸溶液和０．８ｍＬ
高氯酸，摇匀，在６０℃的水浴中保温１５ｍｉｎ后迅速
取出，置于冰水中冷却，加入５ｍＬ的冰醋酸，摇匀
放置１０ｍｉｎ后，于５５５ｎｍ检测。以采收时间为横
坐标，总苷吸收值为纵坐标，绘制苦玄参不同采收期
总苷含量变化趋势图（图３）。
３ 结果与讨论
３．１苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ的含量变化
由图２可知，不同采收期的苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ
图３ 不同采收期的苦玄参总苷含量变化趋势图
Ｆｉｇ．３ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｔｒｅｎｄ ｃｈａｒｔ ｏｆ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｉｎ Ｐ．
ｆｅｌｔｅｒｒａｅ ｃｏｌｅｃｔｅｄ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｓｔａｇｅｓ
的变化具有同步性。苦玄参植株从幼苗期到幼苗后
期，苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ开始富集，但当苦玄参植株开
始分枝时，两者的含量大幅度下降；随后苦玄参植株
不断生长，苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ含量不继增加，并都在
７５ｄ两者含量均达到最高；此后，含量开始缓慢下
降，但在果期的前期（１２０ｄ）两者的含量有较大幅度
的回升，而在果期后期至枯萎之间，两者含量出现急
剧下降，且含量达到整个生理期最低点。
３．２苦玄参总苷的含量变化
对不同采收期苦玄参总苷含量变化趋势图（图
３）及图１中色谱峰的变化情况进行分析，可以发现，
苦玄参从萌芽开始许多成分就开始合成与代谢。该
植物从幼苗期到幼苗后期，苦玄参总苷开始富集，但
６３１ 广 西 植 物 ３２卷
长生发育到植株开始分枝时，总苷含量大幅度下降；
随后又重新富集并在７５ｄ含量达到整个生理期最
高峰；此后，总苷含量显波浪性变化，在花期后期
（１１０ｄ）和果期后期（１３０ｄ）再次出现两次次高峰；
当生长期进入枯萎期时，总苷含量急剧下降，且含量
达到整个生理期最低点。
３．３苦玄参总苷、苷ＩＡ和ＩＢ三者的一致性与差异
性分析
通过对图２和图３的比较，可以发现苦玄参总
苷、苷ＩＡ和ＩＢ含量随着生长周期变化趋势基本上
是一致的，即在开始分枝时出现较大幅度的下降，这
可能是由于在嫩芽期时，苦玄参植株中水分多，经烘
干后成分被高度浓缩，而当分枝时，茎叶已纤维化造
成含量下降的原故；生长至７５ｄ时含量达到整个生
长期中最高峰，此后开始下降；不同的是，苦玄参总
苷含量在花期后期和果期后期再次出现两次次高
峰，而苷ＩＡ和ＩＢ含量仅在果期的前期出现第二次
次高峰，这可能与成分在植物体内分布有关。有文
献报告（陈君等，２００７）苦玄参苷ＩＡ主要分布于叶
子（１．６４％）、花其次（１．１２％）、茎（０．１１％）、根中检
测不到。苦玄参在７５ｄ时正处于旺盛生长期，枝叶
茂盛，但随后茎叶高度纤维化，可能是造成含量下降
的原因；而在花期时，出现含量回升，也应是由于成
分在花中大量富集的结果。
３．４苦玄参最佳采收期的确定
苦玄参苷ＩＡ和ＩＢ是苦玄参的主要成分，其含
量的高低直接影响该药材质量好坏，因此采收时间
的确定极为重要。通过对不同生长期植株中苦玄参
苷ＩＡ和ＩＢ含量的比较，发现两者的含量都在７５ｄ
达到整个生理期最高峰，但此时的植株正处于大量
分枝生长的阶段，生物量也未达到最大，不易做为采
收期。从图２中不难看出，在花期两者的含量变化
比较平缓，并在果期的前期两者含量出现回升，但此
后开始下降，因此把果期的前期（１２０ｄ）作为苦玄参
药材的最佳采收期，既能保证药材中有效成分的质
量，又能达到最大生物量。与桂南地区的采收期相
比（陈勇等，２０１０），相对较晚，这是由于受到气候影
响，种子播种到萌芽时间较长，前期的生长发育较为
缓慢所致。
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Ｌｉａｎｇ ＸＹ（梁小燕），Ｆａｎｇ Ｈ（方宏），Ｎｉｎｇ ＤＳ（宁德生），ｅｔ ａｌ．
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