全 文 ：福建农林大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　第 33卷 第 3 期
Journal of Fujian Agriculture and Forestry University(Natural Science Edition)　　　　　　　　　　　　　　　　　2004年 9 月
收稿日期:2003-12-04　　修回日期:2004-04-06
基金项目:陕西省教育厅省级重点实验室重点科研资助项目(04JS32).
作者简介:邓百万(1963-),男 ,副教授.研究方向:微生物资源的保护 、开发和利用.
美味牛肝菌母种培养基的筛选
邓百万 , 陈文强
(陕西理工学院陕西省资源生物重点实验室 ,陕西 汉中 723001)
摘要:对美味牛肝菌(Boletus edulis Bull.ex Fr.)进行了母种培养基筛选试验.结果表明 ,美味牛肝菌母种最适培养基为 20.0 g
葡萄糖+7.0 g酵母粉+3.0 g黄豆粉+1.0 g KH2PO4+0.5 g MgSO4·7H2O+0.5 g MnSO4·H2O+20.0 g 琼脂.
关键词:美味牛肝菌;母种培养基;筛选
中图分类号:S646.11 文献标识码:A 文章编号:1006-7817(2004)03-0396-04
Selection of mother culture media of Boletus edulis
DENG Bai-wan , CHEN Wen-qiang
(Shaanxi Key Laboratory of Bio-resources , Shaanxi University of Technology , Hanzhong , Shaanxi 723001 , China)
Abstract:A prelimirary study on the selection of optimum mother culture medium for Boletus deulis was conducted.The experiment result
showed that the optimum medium was 20.0 g glucose+7.0 g yeast powder+3.0 g soybean powder+1.0 g KH2PO4+0.5 g MgSO4·7H2O
+0.5 g MnSO4·H2O+20.0 g agar.
Key words:Boletus deulis;mother culture medium;selection
美味牛肝菌(Boletus edulis)俗称大脚菇 ,属层菌纲 ,伞菌目 ,牛肝菌科 ,其菌盖为扁平球形 ,直径 5-16
cm ,呈黄褐色 、褐色或红褐色 ,光滑 ,不粘 ,边缘钝圆 ,略成波状;菌管乳白色或淡褐色 ,肥厚 ,菌柄长 3-15
cm ,粗 2-4 cm;基部膨大 ,与菌盖同色 ,有明显的突出网纹;内实 ,常与栎和松树的树根形成菌根.尚未通
过人工栽培成功.美味牛肝菌含多种微量元素和维生素 ,是一种食药用真菌 ,能增强人体免疫功能 ,降低机
体耗氧量 ,增强血红蛋白的载氧能力 ,还具有降血脂 、抗癌及抗流感病毒等作用[ 1] .本文对其基本营养条件
进行研究 ,筛选出适宜其菌丝生长的母种培养基[ 2 ,3] ,旨在有效地开发利用这一珍贵的真菌资源.
1　材料和方法
1.1　材料
1.1.1　供试菌种　美味牛肝菌菌种由陕西省资源生物重点实验室食药用菌菌种保藏中心提供.
1.1.2　培养基　主要有以下几种:
母种培养基:马铃薯麦麸综合培养基(20.0 g葡萄糖+200.0 g马铃薯+100.0 g 麸皮+5.0 g KH2PO4+
3.0 g MgSO4·7H2O+10.0 mg VB1+20.0 g琼脂+1000 mL水).
基础培养基:以李崇安报道的培养基[ 4]作为基础培养基(20.0 g 葡萄糖+2.0 g蛋白胨+1.0 g KH2PO4
+0.5 g MgSO4·7H2O+20.0 g琼脂+1000 mL 水).
碳源筛选培养基:以基础培养基中葡萄糖(F1)作对照 ,分别用 A1(20.0 g 麦芽糖)、B1(20.0 g 乳糖)、C1
(20.0 g 半乳糖)、D1(20.0 g 甘露醇)、E1(20.0 g 果糖)、G2(20.0 g 蔗糖)代替其碳源进行试验 ,观察不同碳源
对美味牛肝菌丝生长的影响.
氮源筛选培养基:以基础培养基中蛋白胨(D2)作对照 ,分别用 A2(10.0 g 牛肉膏)、B2(10.0 g 黄豆粉)、
C2(10.0 g 玉米浆)、E2(10.0 g 酵母粉)、F2(7.0 g酵母粉+3.0 g 黄豆粉)、G2(6.0 g黄豆粉+3.0 g 玉米浆+
1.0 g 麸皮)代替其氮源进行试验 ,观察不同氮源对美味牛肝菌丝生长的影响.
无机盐筛选培养基:以基础培养基 A3(1.0 g KH2PO4+0.5 g MgSO4·7H2O)作对照 ,分别添加 B3(0.1 g
DOI :10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2004.03.030
MnSO4)、C3(0.05 g MnSO4·H2O)、D3(0.1 g FeSO4·7H2O)、E3(0.05 g FeSO4·7H2O)、F3(0.1 g ZnSO4·7H2O)、G3
(0.05 g ZnSO4·7H2O)、H3(0.1 g FeSO4·7H2O)+0.05 g ZnSO4·7H2O)、I3(0.05 g MnSO4+0.1 g FeSO4·7H2O)、J3
(0.05 g MnSO4+0.05 g FeSO4·7H2O+0.05 g ZnSO4·7H2O)、K3(0.05 g MnSO4+0.1 g FeSO4·7H2O+0.05 g Zn-
SO4·7H2O)无机盐进行试验 ,观察不同无机盐对美味牛肝菌丝生长的影响.
1.2　方法
1.2.1　培养基的制备　将配制的培养基分装于试管中 ,以常规方法灭菌 ,放置斜面 ,备用.
1.2.2　接种与培养　试验前先将供试菌种置于马铃薯麦麸综合培养基上活化 ,以常规方法灭菌 ,制平板.
每种培养基重复 6次 ,(28±1)℃恒温培养 ,并定期测量菌丝生长速度(正面对角线测量菌落直径),并观
察菌丝生长状况.
2　结果与分析
2.1　碳源培养基对美味牛肝菌丝生长的影响
2.1.1　美味牛肝菌丝的生长状况　将活化后的美味牛肝菌母种在不同碳源培养基中培养 ,从菌丝密度 、
菌落边缘整齐度 、菌丝生长势 、菌丝颜色等方面观察菌丝的生长状况(表 1).
　表 1　美味牛肝菌丝在不同碳源培养基中的
　生长状况
　Table 1　Growth situation of Boletus edulis mycelia
　in different carbonium culture media
培养基
编号　
菌丝
密度
菌落边缘
整齐度　
菌丝生
长势　 菌丝颜色
A1 较稀 整齐 不粗壮 淡黄绿色
B1 较稀 整齐 不粗壮 淡黄绿色
C1 较密 整齐 不粗壮 洁白
D1 较密 整齐 不粗壮 洁白
E1 稠密 整齐 粗壮 洁白
F1 稠密 整齐 粗壮 洁白
G 1 较密 整齐 粗壮 洁白
2.1.2　美味牛肝菌丝的生长速度　不同碳源培养基中美味牛
肝菌丝的生长速度如表 2所示.
结果(表 1 、2)表明 ,美味牛肝菌丝在 E1 、F1 培养基中菌丝稠
密 ,菌落边缘整齐 ,长势粗壮 ,菌丝洁白;A1、B1培养基中菌丝较
稀 ,呈淡黄绿色.美味牛肝菌丝在 7种不同碳源培养基中的生长
速度各不相同 ,在 E1培养基中菌丝平均生长速度最快 ,F1培养
基中菌丝的生长速度略慢 E1 培养基.不同碳源培养基中菌丝生
长速度快慢的顺序是果糖>甘露醇>葡萄糖>麦芽糖>乳糖>
半乳糖>蔗糖.根据不同碳源培养基中美味牛肝菌丝的生长状
况 、生长速度及差异显著性 ,可以确定其最适碳源培养基是 F1
培养基(葡萄糖 20.0 g).
表 2　美味牛肝菌丝在不同碳源培养基中的生长速度
Table 2　Comparison of Boletus edulis mycelium growth rate in different carbonium media
培养基编号 菌丝生长速度/(cm·d
-1)
1 2 3 4 5 6 7
平均值
cm
差异显著性
0.05 0.01
A1 0.75 0.57 0.76 0.66 0.93 0.58 0.60 0.693 c C
B1 1.15 0.33 0.95 0.80 0.79 0.22 0.24 0.640 e E
C1 0.67 0.65 0.62 0.77 0.80 0.61 0.63 0.678 d D
D1 0.69 0.68 1.01 0.92 0.56 0.56 0.58 0.714 b B
E1 0.70 0.72 0.91 0.63 0.91 0.70 0.73 0.757 a A
F1 1.07 0.69 0.77 0.69 0.54 0.56 0.58 0.700 b BC
G1 0.85 0.47 0.90 0.65 0.80 0.29 0.31 0.610 f F
2.2　氮源培养基对美味牛肝菌丝生长的影响
2.2.1　美味牛肝菌丝的生长状况　将美味牛肝菌母种在不同氮源培养基中培养 ,从菌丝密度 、菌落边缘
整齐度 、菌丝生长势 、菌丝颜色等方面观察菌丝的生长状况(表 3).
·397·　第 3 期　　　　　　　　　　　　邓百万等:美味牛肝菌母种培养基的筛选
　表 3　美味牛肝菌丝在不同氮源培养基中
　的生长状况
　Table 3　Growth situation of Boletus edulis in diff-
　erent nitrogen mother culture media
培养基
编号　
菌丝
密度
菌落边缘
整齐度　
菌丝生
长势　
菌丝
颜色
A 2 较密 整齐 粗壮 洁白
B2 稀少 整齐 不粗壮 洁白
C2 稠密 整齐 粗壮 洁白
D2 较稀 整齐 不粗壮 洁白
E2 较密 整齐 粗壮 洁白
F2 稠密 整齐 粗壮 洁白
G 2 较密 整齐 粗壮 洁白
2.2.2　美味牛肝菌丝的生长速度　不同氮源培养基中美味牛
肝菌丝生长速度如表 4所示.
结果(表3 、4)表明 ,在 C2 、F2培养基中菌丝稠密 ,菌落边缘
整齐 ,长势粗壮 ,菌丝洁白.美味牛肝菌在 7种不同氮源培养基
中的生长速度不同 ,在 F2 培养基中菌丝平均生长速度最快 ,C2
培养基中菌丝的生长速度慢于 F2培养基.不同氮源培养基中菌
丝生长速度快慢的顺序是酵母粉+黄豆粉>蛋白胨>黄豆粉>
牛肉膏>玉米浆>酵母粉>黄豆粉+玉米浆+麸皮.根据美味
牛肝菌丝在不同氮源培养基中的生长状况 、生长速度及差异显
著性 ,可以确定其最适氮源培养基是 F2 培养基(7.0 g 酵母粉+
3.0 g 黄豆粉).
表 4　美味牛肝菌丝在不同氮源培养基中的生长速度
Table 4　Comparison of Boletus edulis mycelium growth rate in different nitrogen media
培养基编号 菌丝生长速度/(cm·d
-1)
1 2 3 4 5 6 7
平均值
cm
差异显著性
0.05 0.01
A2 0.76 0.87 0.82 0.82 0.76 0.72 0.57 0.760 c C
B2 1.15 0.57 0.67 0.88 0.57 0.72 0.86 0.774 b B
C2 0.43 0.77 0.77 0.87 0.82 0.68 0.76 0.734 d D
D2 0.58 0.96 0.74 0.88 0.82 0.70 0.76 0.777 b B
E2 0.50 0.97 0.71 0.76 0.89 0.60 0.67 0.729 e E
F2 0.80 0.83 0.63 1.02 0.67 0.66 0.97 0.797 a A
G2 0.71 0.96 0.71 0.75 0.65 0.61 0.64 0.719 f F
2.3　无机盐培养基对美味牛肝菌丝生长的影响
2.3.1　美味牛肝菌丝的生长状况　将美味牛肝菌母种在不同无机盐培养基中培养 ,从菌丝密度 、菌落边
缘整齐度 、菌丝生长势 、菌丝颜色等方面观察菌丝的生长状况(表 5).
　表 5　美味牛肝菌丝在不同无机盐母种培养基中的
　生长状况
　Table 5　Growth situation of Boletus edulis in different min-
　eral salt mother culture media
培养基
编号　
菌丝
密度
菌落边缘
整齐度　
菌丝生
长势　 菌丝颜色
A3 稠密 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
B3 较稠 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
C3 稠密 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
D3 较稀 整齐 粗壮 灰黑色
E3 较稠 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
F3 稠密 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
G 3 稠密 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
H3 较稀 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
I3 稀少 整齐 不粗壮 灰黑色
J3 较稀 整齐 不粗壮 淡黄色※洁白
K3 较稀 整齐 粗壮 淡黄色※洁白
2.3.2　美味牛肝菌菌丝的生长速度　不同无机盐培养基
中美味牛肝菌丝的生长速度如表 6所示.
结果(表 5 、6)表明 ,美味牛肝菌菌丝在 A3 、C3 、F3 、G3培
养基中 ,菌丝稠密 ,菌落边缘整齐 ,长势粗壮 ,菌丝颜色由淡
黄到洁白;而在 D3、I3培养基中菌丝有泛黑现象 ,可能是培
养基中 Fe2+影响所致.美味牛肝菌丝在 11 种不同无机盐
培养基中的生长速度不同 ,在 C3 培养基中菌丝平均生长速
度最快 ,A3 、F3 、G3 培养基中菌丝的生长速度小于 C3 培养
基.在基础培养基中添加不同无机盐对菌丝生长速度影响
的快慢顺序是 0.05 g MnSO4·H2O>0.05 g FeSO4·7H2O>0.1
g MnSO4>1.0 g KH2PO4+0.5 g MgSO4·7H2O>0.05 g ZnSO4·
7H2O>0.1 g ZnSO4·7H2O>0.1 g FeSO4·7H2O+0.05 g ZnSO4
·7H2O>0.05 g MnSO4+0.05 g FeSO4·7H2O+0.05 g ZnSO4·
7H2O>(0.1 g FeSO4·7H2O>0.05 g MnSO4 +0.1 g FeSO4·
7H2O>0.05 g MnSO4 +0.1 g FeSO4·7H2O+0.05 g ZnSO4·
7H2O.根据美味牛肝菌丝在不同无机盐培养基中的生长状况 、生长速度及差异显著性 ,可以确定其较适无
机盐是1.0 g KH2PO4、0.5 g MgSO4·7H2O 、0.5 g MnSO4·H2O.
·398· 福建农林大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　　　　　第 33卷　
表 6　美味牛肝菌丝在不同无机盐培养基中的生长速度
Table 6　Comparison of Boletus edulis mycelium growth rate in different mineral salt media
培养基编号 菌丝生长速度/(cm·d
-1)
1 2 3 4 5 6 7
平均值
cm
差异显著性
0.05 0.01
A3 0.60 0.72 0.65 0.62 0.60 0.60 0.54 0.616 c C
B3 0.73 0.67 0.27 0.63 0.67 0.75 0.62 0.620 b BC
C3 0.59 0.68 0.58 0.69 0.78 0.73 0.68 0.675 a A
D3 0.68 0.38 0.48 0.44 0.69 0.45 0.55 0.524 g G
E3 0.58 0.63 0.75 0.43 0.80 0.67 0.58 0.634 b B
F3 0.49 0.60 0.64 0.43 0.68 0.48 0.55 0.553 e E
G3 0.53 0.41 0.65 0.77 0.91 0.49 0.38 0.591 d D
H3 0.35 0.49 0.56 0.49 0.70 0.53 0.66 0.540 h H
I3 0.56 0.48 0.50 0.50 0.52 0.54 0.50 0.514 h H
J3 0.39 0.66 0.55 0.53 0.70 0.50 0.44 0.539 f F
K3 0.47 0.54 0.51 0.38 0.68 0.40 0.50 0.497 i I
3　小结
(1)在 7种供试碳源中 ,以葡萄糖为碳源的培养基 ,菌丝生长最快 ,日生长速度为 0.700 cm ,菌落完整 ,
菌丝洁白 、浓密 、健壮 ,这是因为食药用菌在含有葡萄糖的培养基中可利用单糖 ,菌丝生长无需适应期.
(2)在 7种供试培养基中 ,以酵母粉和黄豆粉为氮源的培养基 ,菌丝生长最快 ,日生长速度为 0.797
cm ,菌落完整 ,菌丝洁白 、浓密 、健壮 ,这是因为氮源大部分是以胨 、肽 、氨基酸的形式存在 ,微生物对其利
用率比较高.
(3)美味牛肝菌母种生长的最适培养基是 20.0 g葡萄糖+7.0 g酵母粉+3.0 g 黄豆粉+1.0 g KH2PO4
+0.5 g MgSO4·7H2O+0.5 g MnSO4·H2O+20.0 g琼脂.美味牛肝菌丝在所筛选出的最适碳 、氮源组成的母
种培养基上表现出了较强的生长优势 ,栽培过程中是否能获得较高的产量 ,有待进一步研究.
参考文献:
[ 1] 应建浙 ,卯晓岚 , 马启明 ,等.中国药用真菌图鉴[ M] .北京:科学出版社 , 1987.371.
[ 2] 陈文强 ,周选围 , 邓百万.姬松茸母种培养基筛选研究初报[ J] .食用菌学报 , 2002 , 9(2):31-34.
[ 3] 陈宇航 ,陈政明 , 林国华.远东疣柄牛肝菌仿生栽培[ J] .福建农林大学学报(自然科学版), 2002 , 32(1):532-535.
[ 4] 何培新.名特新食用菌 30 种[ M] .北京:中国农业出版社 , 2000.22.
(责任编辑:叶济蓉)　　
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