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鬼灯檠中岩白菜素的薄层扫描测定



全 文 :鬼灯檠中岩白菜素的薄层扫描测定
董留民
(平顶山广播电视大学 ,平顶山  467000)
摘 要 采用薄层扫描法测定了鬼灯檠根茎、醇提物中岩白菜素的含量。
关键词 鬼灯檠 岩白菜素 含量测定
分类号  Q949. 781. 2
鬼灯檠为虎耳草科植物老蛇盘 ( Rodgersia aesculifolia Batal)的根茎。 具有清热化湿、
收敛止血、去腐生肌的作用 ,临床上用于治疗湿热下痢、慢性气管炎、胃炎、子宫脱垂及外伤
出血等症 [1 ]。近年研究发现具有抑菌和广谱性的抗病毒作用。岩白菜素不但是鬼灯檠中的
主要有效成分 ,而且含量较高。 曾有人报道 [2 ]采用分光光度法测定鬼灯檠中岩白菜素的含
量。本文采用薄层扫描法测定鬼灯檠根茎及醇提物中岩白菜素的含量。结果表明该法简便
快速、准确可靠、重现性好。
1 仪器与试剂
   CS- 9301双波长薄层扫描仪 (日本岛津 ) ,微量分析天平 ( M ET TLER AE 240瑞士 ) ,
三用紫外线分析仪 (江苏省江阴市申港电光仪器厂 ) ,点样定量毛细管 ( Drummond Scien-
ti fic CO USA) , PBQ I型薄层自动铺板器 (重庆南岸新力实验电器厂 ) ,硅胶 GF254 (青岛海
洋化工厂 )。
鬼灯檠 Rodgersia aesculifolia Ba tal.于 96年 9月采自河南省栾川县伏牛山区龙峪湾 ,
原植物标本经河南中医学院标本室王中会副教授鉴定。
岩白菜素对照品经分离鉴定 [3 ]后用 a和 b两种不同的展开剂展开均显示一个斑点 , Rf
值分别为 0. 60和 0. 35。展开剂 a: n- BuOH- HAc- H2O( 4∶ 1∶ 5上层 ) ;展开剂 b: CHCl3
- EtOAc- HCOOH( 4∶ 4∶ 1. 5)。
其它试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备 精密称取岩白菜素对照品 2. 89mg ,置 1ml容量瓶中 ,加甲醇溶
解并稀释至刻度 ,为 2. 89mg /ml。
2. 2 样品溶液的制备 将鬼灯檠根茎去除老皮后粉碎过 40目筛 ,精密称取 10g ,用 200m l
甲醇做溶剂进行索氏提取 ( 10hr )。 滤过 ,定容至 50ml容量瓶中成为样品溶液 A。
第 16卷 第 3期
1998年 9月
河 南 科 学
HENAN  SCIEN CE
Vo l. 16 No . 3
Sept. 1998
 
收到日期  1998- 01- 08 作者董留民 男  38岁 讲师
DOI : 10. 13537 /j . i ssn. 1004 -3918. 1998. 03. 012
另精密称取由上述提取方法所得的醇提物干粉 1g ,用甲醇溶解并定容至 25ml容量瓶
中 ,成为样品溶液 B。
2. 3 薄层层析条件 吸附剂:硅胶 GF254— 0. 3% CMC- Na ( 3∶ 1)搅拌均匀后涂布于 ( 10
× 20cm)玻璃板上 ,厚度为 0. 5mm ,室温晾干后于 105℃活化 1hr后置干燥器中备用。展开
剂:氯仿—乙酸乙酯—甲酸 ( 4∶ 4∶ 1. 5) ,展开方式: 上行 ,展开两次 ,展距 15cm。
2. 4 薄层扫描条件 采用反射法双波长锯齿扫描法 ,狭缝 0. 4mm× 0. 4mm ,线性参数 SX
= 3,扫描宽度: 12mm ,灵敏度中等 ,测定波长λs= 283nm ,参比波长λR= 350nm。
2. 5 标准曲线的绘制 用定量毛细管吸取上述对照品溶液 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0μl点于
同一硅胶 GF254薄层板上 ,以展开剂展开 ,取出 ,晾干 ,放置 30min开始扫描。以岩白菜素量
(μg )为横座标 ,以斑点峰面积值为纵座标绘制标准曲线 ,经回归分析: Y= 2828. 59X -
614. 57, r= 0. 999( n= 5) ,见表 1。 结果表明岩白菜素在 2. 89— 14. 45μg范围内 ,浓度与其
峰面积值呈一不通过原点的直线 ,故用外标两点法定量。
表 1 岩白菜素点样量与峰面积值关系
Table 1  The rela tions betw een content and ar ea
编号 对照品点样量 (μg) 测得峰面积值
1
2
3
4
5
2. 890
5. 780
8. 670
11. 560
14. 450
3712. 661
7638. 521
11277. 135
15563. 020
20257. 707
2. 6 稳定性考察 在同一块硅胶 GF254薄层板上 ,点岩白菜素对照品溶液 3μl,展开后 ,分
别于 30, 60, 90, 120min进行扫描 ,结果 2hr内斑点峰面积值基本不变 , X= 11985. 320,
RSD= 0. 28% 。
2. 7 精密度试验 用定量毛细管吸取对照品溶液 3μl点于同一硅胶 GF254薄层板上 ,进行
展开、扫描 ,结果斑点峰面积值平均值 X= 11942. 114, RSD= 2. 79%。
2. 8 鬼灯檠生药中岩白菜素的含量测定 吸取样品溶液 A 2μl点于硅胶 GF254薄层板上 ,
并随行点对照品溶液 1μl和 3μl,进行展开、扫描 ,用外标两点法计算出鬼灯檠生药中岩白
菜素的含量 ,结果见表 2。
表 2 鬼灯檠生药中岩白菜素含量测定结果
Table 2  The content of ber genin in Rodger sia aesculifo lia Ba ta l
样号 岩白菜素含量 (% ) X(% ) RSD(% )
1
2
3
4
5
2. 643
2. 621
2. 654
2. 692
2. 687
2. 658
1. 12
2. 9 鬼灯檠醇提物中岩白菜素的含量测定 吸取样品溶液 B 2μl和 3μl点于硅胶 GF254薄
层板上 ,并随行点对照品溶液 1μl和 4μl,进行展开、扫描 ,用外标两点法计算出鬼灯檠提取
—307—  1998年 9月 鬼灯檠中岩白菜素的薄层扫描测定
物中岩白菜素的含量 ,结果见表 3。
表 3 鬼灯檠醇提物中岩白菜素含量测定结果
Table 3  The content o f berg enin in ex tractiv e o f Rodgersia aesculifolia Batal
样号 岩白菜素含量 (% ) X(% ) RSD(% )
1
2
3
4
5
5. 372
5. 457
5. 356
5. 488
5. 343
5. 383 1. 20
2. 10 加样回收率试验 取 2μl对照品溶液点于硅胶 GF254薄层板上 ,共点四个点 ,在前两
个点上分别加点 1μl、后两个点上分别加点 2μl已测定含量的样品溶液 B,另在同一板上随
行点对照品溶液 1μl和 5μl ,进行展开 、扫描 ,以外标两点法计算 ,回收率为 99. 12% ,
97. 16% , 98. 93% , 97. 34% ,平均回收率 X= 98. 14% , RSD= 1. 05%。
3 小结
3. 1 展开剂选用氯仿—乙酸乙酯—甲酸 ( 4∶ 4∶ 1. 5)能达到较好的分离效果 ,展开的斑点
圆整 ,但需要经过两次展开。
3. 2 本法不用显色剂即可在紫外灯 ( 254nm )下定位 ,从而进行扫描测定。这就避免了用显
色剂时由于显色不均匀而带来的测定上的误差。
3. 3 采用薄层扫描法测定鬼灯檠中岩白菜素的含量 ,方法简便、快速准确 ,重现性好。
致谢:在本研究中 ,河南中医学院分析测试中心协助进行扫描测定 ,中药系 94级学生
和殿峰帮助上山采集标本 ,在此一并致谢。
参考文献
1 江苏新医学院编 .中药大辞典 .上海科学技术出版社 (第一版 ) . 1986年 6月 , 2540
2 王俊平 ,李百华 .鬼灯檠中岩白菜素的含量测定 .中成药 , 1991, 13( 2): 31
3 袁珂 ,刘延泽 ,王玲等 .鬼灯擎根茎中丹宁及多元酚类化合物的分离与鉴定 (Ⅰ ) .河南科学 . 1994, 12
( 1): 38
DETERMINATION OF BERGENIN IN RODGERSIA
AESCULIFOLIA BATAL BY TLC- SCANNINGMETHOD
Dong Liumin
( The Broadcas ting and TV University of Pingdingsh an, Pingdingshan, 467000)
Abstract We have determined the content o f berg enin in the rhizome and MeOH ex-
tractive o f Rodgersia aesculi fo lia Ba tal by TLC- scanning method.
Key words Rod gersia aescul ifolia Batal; Bergenin; Determination of content
—308— 河 南 科 学 第 16卷 第 3期