全 文 ：49 Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences  http://www.jcps.ac.cn 
Determination of bergenin in rat urine, feces and tissues by RP­HPLC method 
Yan­Bin Shi 1* , Yan­Ping Shi 2 , Xiao­Yun Zhang 1 , Quan­Yi Zhao 1 , Jing­Man Ni 1 
1. School of Pharmacy, Lanzhou University, Lanzhou 730000, China 
2. Lanzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou 730000, China 
OH 
CH 3 O 
HO 
O 
O 
O 
H 
H 
CH 2 OH 
OH 
OH 
5 
4 
3 
2 
1 
Received date: 2008­10­09. 
Foundation  items:  Natural  Science  Foundation  of  Gansu  Province 
(Grant No. ZS021­A25­051­N); Scientific & Technological Tackle Key 
Projects of Gansu Province, China. (Grant No. 2GS035­A43­048­01). 
* Corresponding author. Tel./fax: 86­931­8915686; 
e­mail: shiyb@lzu.edu.cn 
1. Introduction 
Bergenin is a C­glucoside of 4­O­methyl gallic acid 
(Fig. 1)  that  has been  isolated  from  the  rhizome  of 
Rodgersia aesculifolia Batalin [1] .  It  has been  reported 
that bergenin had antiarrhythmic [2] , hepatoprotective [3–5] , 
anti­inflammatory [6] ,  anti­HIV [7] ,  neuroprotective [8] , 
anti­ulcer [9] , and anti­tussive activities [10] . 
Drug absorption, distribution, metabolism and excre­ 
tion  (ADME)  is  one  of  the  key  properties  for  the 
design of a safe and effective drug. Data and infor­ 
mation obtained from ADME studies of the bioactive 
compounds of medicinal herbs could also help us to 
understand the complex actions of herbal medicines 
and  predict  a  variety  of  events  related  to  efficacy 
and toxicity of herbs and herbal preparations [11,12] . In 
our previous study, a RP­HPLC method for the quanti­ 
fication of bergenin in rat plasma has been developed 
and applied successfully to the pharmacokinetic study 
of bergenin. The result  indicated that bergenin in rats 
was  distributed  widely,  and  eliminated  moderately 
fast after intravenous administration [13] . 
In  this  paper,  the  determination  of  bergenin  in 
urine, feces and tissues were investigated in order to 
obtain more information for understanding the phar­ 
macokinetic properties of bergenin in rats. Therefore, 
Figure 1. Chemical structure of bergenin. 
an analytical method based on reversed­phase high­ 
performance  liquid  chromatography  (RP­HPLC)  to 
determine  bergenin  in  rat  urine,  feces  and  tissues 
was  developed.  The methods  for  the  quantification 
of bergenin in urine and tissues were validated with 
parameters  such  as  selectivity,  linearity,  precision, 
accuracy and recovery. 
2. Materials and methods 
2.1. Chemicals and animals 
Bergenin  (purity, 98%) was  provided by  Institute 
of  Pharmaceutics,  Lanzhou University.  The  reference 
standard  of  bergenin  (serial  number:  1532–2001) 
was  purchased  from  the National  Institute  for  the 
Control  of  Pharmaceutical  and  Biological  Products 
(Beijing,  China).  Bergenin  was  dissolved  in  1,2­ 
propanediol and redistilled water (1:5, v/v), and filtered 
through a 0.22 µm filter before rat experiment. The 
formulation  used  for  intravenous  administration 
Abstract: A RP­HPLC analytical method was developed for determining bergenin in rat urine, feces and tissues. The separation 
was performed on a C18  analytical column with methanol–water as the mobile phase at a flow rate of 0.8 mL/min. The column 
temperature was 40 ºC and the eluate was monitored at 220 nm. The calibration curve for urine analysis showed a good linearity 
(r = 0.9989) over the range of 0.5–100 µg/mL, and the absolute recoveries were in the range of 90.0%–92.6%. A good linearity 
(r≥0.9996) for all tested tissues was obtained over the range of 0.3–150 µg/g except for lung, which had a linearity range of 
0.5–150 µg/g. The absolute recoveries from tissues were higher than 63.9%. The method was successfully applied to determine 
the bergenin levels in several biological samples after rats were given bergenin formulation through tail vein injection. The results 
demonstrated that the amount of bergenin recovered from urine was about 35.36% of the total dose, and that from feces was less 
than 10%. Bergenin can be quickly and widely distributed in the rat, accumulating high levels in the kidney in comparison to all 
other tissues investigated. It was not distributed into the brain at any significant level owing to its hydrophilic property. 
Keywords: RP­HPLC; Bergenin; Excretion; Distribution 
CLC number: R917  Document code: A  Article ID: 1003–1057(2009)1–49–6
Y. B. Shi  et al. / Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 18 (2009) 49–54 50 
consisted  of  a  0.25%  (w/v)  solution  of  bergenin. 
HPLC­grade methanol was from Yuwang Chemical 
Reagents  Company  (Shandong,  China).  All  other 
chemicals  were  of  analytical  grade,  obtained  from 
Tianjin Second Reagent Factory (Tianjin, China). 
Wistar  rats  weighing  200–250  g were  purchased 
from  the  Laboratory  Animal  Services  Center  of 
Lanzhou  University.  The  animals  were  housed  in 
metabolite  cages  and  acclimated  in  the  laboratory 
for  at  least  one  week  prior  to  the  experiment  at 
ambient   temperature   (22–28  ºC).   All   procedures 
involving  animals  and  their  care  were  carried  out 
according  to  the  guidelines  of  the  Committee  on 
the Use of Animal Subject in Research of Lanzhou 
University.  Standard  rat  food  and  tap  water  were 
provided ad libitum. 
2.2. HPLC apparatus and conditions 
The  analysis was  carried  out  on  a HPLC  system 
(Shimadzu  Scientific  Instruments  Inc., Kyoto,  Japan) 
consisted  of  a LC­10AT  pump,  a  SPD­10A UV­vis 
detector (wavelength range from 190 to 790 nm), and 
a 7725i sample injector (CA, USA). The separation 
was  performed  on  a   Diamonsil TM ,   C18  analytical 
column (4.6 mm × 250 mm, 5 µm, Dikma, USA) with 
a Securityguard TM guard cartridge (Phenomenex, USA). 
The mobile  phase was composed  of a mixture  of 
methanol  and  water.  The  proportion  of  methanol– 
water was 20:80 (v/v)  for  the determination of ber­ 
genin in urine and feces samples, and 22:78 (v/v) for 
tissue  samples. The  solvents  used  for mobile  phase 
were filtered through a 0.22 µm filter and degassed 
prior  to  use.  The  flow  rate was  set  at  0.8 mL/min. 
The  column  temperature  was  40  ºC  and  the  eluate 
was  monitored  at  220  nm.  The  signals  from  the 
detector were collected and analyzed with a com­ 
puter  equipped with a  chromatography  data  system 
CLASS­VP TM software package (Version 6.1, Shimadzu 
Scientific Instruments Inc., Kyoto, Japan). 
2.3. Preparation of calibration samples 
A bergenin stock solution was prepared in methanol 
at a final concentration of 0.5 mg/mL, and stored in 
a refrigerator at 0–4 ºC. Working standard solutions 
with  concentrations  of 0.5–100 μg/mL were  prepared 
by  appropriate  dilution  of  the  stock  solution  with 
methanol. 
To prepare urine calibration standards, each 0.5 mL 
aliquot solution of different concentrations of bergenin 
(0.5–100  μg/mL)  were  transferred  to  polyethylene 
tubes, dried under a gentle nitrogen stream at ambient 
temperature. The residue was redissolved in 0.5 mL 
blank  urine with  vortex­mixing  for  2  min,  filtered 
through an organic membrane with a pore diameter 
of  0.22 µm. The  resulting  urine  samples  contained 
bergenin  in  the  concentrations  of  0.5,  1.0,  2.0,  10, 
20,  50  and  100  μg/mL.  The  urine  sample  volume 
injected into HPLC was 10 µL. 
To prepare tissue calibration standards, liver, kidney, 
lung, heart, spleen and brain were isolated from rats and 
homogenized  in  distilled water  (1  g:1 mL)  under 
ice­water bath. The tissue homogenates (0.5–1.0 mL) 
spiked with  1.0–2.0 mL  of  different  concentrations 
of  working  standard  solutions  of  bergenin  were 
vigorously  mixed  with  a  vortex  mixer  for  1  min. 
Thus, the tissues containing bergenin in the concen­ 
trations of 0.3, 0.75, 1.5, 3.0, 7.5, 15, 30, 75 and 
150 μg/g were  obtained, which were centrifuged at 
5000  r/min  for  10 min.  The  resulting  supernatants 
were  collected  and  dried  under  a  gentle  nitrogen 
stream  at  ambient  temperature.  The  residues  were 
dissolved  in  0.5  mL  methanol  and  filtered.  Filtrate 
(25 μL) of each tissue sample was injected into the 
HPLC system for analysis. 
2.4. Precision, accuracy and absolute recovery 
For  intra­day precision and accuracy, five replicates 
of  urine  samples  spiked  at  three  concentrations  of 
1.0, 20 and 100 µg/mL and tissue samples spiked at 
three concentrations of 0.75, 15 and 150 μg/g were 
analyzed  at  five  time  intervals  during  one  day, 
respectively.   The  precision  was  expressed  as  the 
relative standard deviation (RSD %) and calculated 
from the standard deviation divided by the mean of the 
detected  concentration.  The  accuracy was  expressed 
as  the  relative  error  percentage  (RE %)  and  calcu­ 
lated  as  ((mean  of  measured  concentration­added 
concentration)/added  concentration)  ×  100%.  Inter­ 
day precision and accuracy were determined in five 
replicates  of  the  biological  samples  spiked  at  the 
three levels mentioned above, which were analyzed 
over  three  consecutive  days.  Absolute  recovery  at 
the  three  levels was calculated as  (the peak area of 
bergenin in urine or tested tissue/peak area of bergenin 
in methanol) × 100%. 
2.5. Preparation of samples 
Five rats were given bergenin formulation through 
tail vein at a single dose of 22.5 mg/kg body weight. 
Urine samples were collected just before administra­ 
tion and at  the  following  time  intervals: 0–6, 6–12, 
12–18 and 18–24 h after administration. Feces samples 
were collected only once during 0–24 h. Urine samples 
were frozen at –20 ºC and feces samples were firstly 
dried at ambient temperature，then stored at –20 ºC 
until analysis. The storage time of samples was less 
than one week according to the stability of bergenin 
in plasma described in literature [13] . Before analysis, 
urine  samples  were  thawed  and  vigorously  mixed, 
then diluted with blank urine if necessary. A 1.0 mL
Y. B. Shi  et al. / Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 18 (2009) 49–54  51 
aliquot of urine sample was filtered through a 0.22 µm 
filter and 10 µL aliquot of filtrate was injected into 
HPLC for determination. Feces sample was grinded 
into  fine  power  and  transferred  into  glass  vessels, 
fivefold volume  (m/v) of methanol was added,  and 
mixed with  the content gently.  The  suspension was 
initially   homogenized   with   ultrasonic   vibration 
for 5 min and centrifuged at 3000 r/min for 5 min. 
The supernatant was collected and filtered. A 10 µL 
aliquot of feces filtrate was used for determination. 
Another twelve rats were given bergenin formulation 
through  tail  vein  at  the  same  dose  of  22.5  mg/kg. 
Three  rats  were  sacrificed  by  decapitation  at  each 
time­point.  Tissue  samples  including  liver,  kidney, 
lung, heart, spleen and brain, were collected at 0.5, 
2, 4 and 8 h, rinsed with 0.9% NaCl, gently cleaned 
with absorbent paper to remove surface liquid, weighed, 
and immediately frozen at –20 ºC until analysis. The 
storage time of all samples was less than one week. 
Before analysis, each sample of 0.5–1.0 g was sliced 
while frozen and processed with the similar procedure 
as described on the preparation of calibration samples. 
3. Results 
3.1. Specificity 
The HPLC chromatograms of  the urine and kidney 
samples from the rats treated with bergenin intrave­ 
nously,  the  blank  samples  spiked  with  bergenin  in 
vitro, and the blank samples before bergenin injection 
are shown in Figures 2 and 3. There are no endogenous 
interference  peaks  observed  at  the  retention  time 
when  bergenin was  detected. The  retention  time  of 
bergenin was  found  to  be  around 18.0±0.5 min  for 
urinary samples and 13.5±0.5 min for tissue samples 
because of the different mobile phases used. 
Figure 2.HPLC chromatograms of bergenin in rat urine. (A) Blank urine; (B) Blank urine spiked with bergenin; (C) Urine sample after i.v. administration. 
400 
200 
0 
(A) 
5  10         15 
400 
200 
0 
(B) 
5          10        15        20 
400 
200 
0 
(C) 
5         10       15        20 
bergenin 
bergenin 
m
A
U
 
m
A
U
 
m
A
U
 
min  min  min 
Figure 3. HPLC chromatograms of bergenin in rat kidney.  (A) Blank kidney homogenate before intravenous administration; (B) Blank kidney 
homogenate spiked with bergenin; (C) Kidney homogenate obtained from the rat treated with bergenin intravenously at 0.5 h after dosing. 
400 
300 
200 
100 
0 
(A) 
5  10            15 
bergenin 
400 
200 
0 
(C) 
5  10            15 
400 
200 
0 
(B) 
5  10            15 
bergenin 
m
A
U
 
m
A
U
 
m
A
U
 
min  min  min
Y. B. Shi  et al. / Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 18 (2009) 49–54 52 
3.2. Calibration curve, LOD and LOQ 
The  calibration  curves  were  prepared  using  the 
peak areas (A) of analytes versus the corresponding 
concentrations (C), and expressed by the linear least­ 
squares regression equation. Linearity was evaluated 
by  the  correlation  coefficients   of   the   regression 
equations  of  the  calibration  curves.  The  linearity 
range should cover the possible contents of analytes 
existed  in  the  tested  samples. The calibration curve 
for urine analysis was C = 4.933 × 10 –5 A – 0.0623 
(r  =  0.9989)  from 0.5  to  100 µg/mL. The  limit  of 
detection (LOD) (signal­to­noise ratio = 3) was found 
to  be  approximately  0.17  μg/mL,  and  the  limit  of 
quantification  (LOQ) was  0.5  μg/mL  with  RSD  of 
8.55% and RE of 13.13% (n = 10). 
The  calibration  curves  for  all  tested  tissues were 
listed  in  Table  1,  and  the  linearity  was  satisfactory 
based  on  the  value  of  correlation  coefficient  (r≥ 
0.9996).  The  linearity  ranges  for  all  tissue  samples 
were  from  0.3  to  150  µg/g  except  for  the  lung, 
which showed a linearity range from 0.5 to 150 µg/g. 
The  LODs were  in  the  range  of  0.08–0.15  μg/g, 
and  the  LOQs  were  0.3–0.5  μg/g  with  RSDs  of 
10.63%–17.35% and REs of –13.23%–7.10% (n = 8). 
3.3. Precision, accuracy and absolute recovery 
The  parameters  for  validating  the  HPLC  assay 
included precision,  accuracy and absolute  recovery. 
Table 2 showed the precision, accuracy and absolute 
recovery of the method for urine analysis. The varia­ 
tions  (RSD %)  at  three  levels  for  intra­day  assay 
were  between  3.11%–4.14%,  for   inter­day  assay 
were  between  1.07%–5.68%. All  of  the  accuracies 
(RE %) were  between  2.24%–9.35%. The absolute 
recoveries were in the range of 90.0%–92.6%. 
Table 3 showed the precision, accuracy and absolute 
recovery of the method for all tested tissue analysis. 
The intra­day and inter­day precisions (RSD %) for 
bergenin analysis in liver, kidney, lung, heart, spleen and 
brain at three levels were in the range of 0.74%–9.46% 
and  1.00%–9.24%,  respectively.  The  intra­day  and 
inter­day accuracies (RE %) were –0.96%–6.43% 
and –0.81%–9.19%, respectively. The absolute recoveries 
of bergenin  from all  tested tissues were higher  than 
63.9%. Among them, the absolute recovery of bergenin 
from brain  was  between 92.2%–95.5%, which was 
higher than those from other tissues. 
According to the literature criteria [14] , this method 
can  satisfy  the  basic  requirements  for  analyzing 
bergenin in biological samples. 
Tissue  Standard curves  r  Linearity (μg/g)  LOD (μg/g)  LOQ(μg/g) 
Liver 
Kidney 
Lung 
Heart 
Spleen 
Brain 
C = 2.289 × 10 ­5 A –0.2651 
C = 1.867 × 10 ­5 A– 0.0764 
C = 3.192 × 10 ­5 A + 0.1347 
C = 3.808 × 10 ­5 A–0.2908 
C = 3.686 × 10 ­5 A –0.2522 
C = 1.670 × 10 ­5 A– 0.1833 
0.9996 
0.9999 
0.9999 
0.9998 
0.9999 
0.9999 
0.3–150 
0.3–150 
0.5–150 
0.3–150 
0.3–150 
0.3–150 
0.08 
0.08 
0.15 
0.10 
0.08 
0.08 
0.3 
0.3 
0.5 
0.3 
0.3 
0.3 
Table 1. Calibration curves and sensitivity for determination of bergenin in rat tissues 
Amount added (µg/mL) 
Intra­day  Inter­day 
Absolute recovery (%) 
Amount detected(µg/mL)  RSD (%)  RE (%)  Amount detected(µg/mL)  RSD (%)  RE (%) 
1  1.09  4.14  9.00  1.09  5.68  9.00  92.6 ± 8.9 
20  21.87  3.37  9.35  21.31  1.07  6.55  91.1 ± 1.2 
100  107.83  3.11  7.83  102.24  2.12  2.24  90.0 ± 2.5 
Table 2. Intra­day (n = 5) and inter­day (3 d, n = 5) precision, accuracy and absolute recovery for urine analysis 
Tissues  Concentration range (µg/g) 
Precision (RSD %)  Accuracy (RE %) 
Absolute recovery (%) 
Intra­day  Inter­day  Intra­day  Inter­day 
Liver  0.75 – 150  1.74 – 3.07  1.00 – 4.71  1.63 – 5.88  1.12 – 3.90  69.9 – 76.7 
Kidney  0.75 – 150  0.74 – 6.71  1.41 – 8.33  –0.96 – 4.07  0.09 – 4.78  73.8 – 84.5 
Lung  0.75 – 150  0.95 – 2.21  1.64 – 4.66  –0.18 – 6.43  –0.81 – 9.19  76.5 – 80.1 
Heart  0.75 – 150  2.83 – 8.86  2.52 – 8.31  –0.48 – 6.09  –0.33 – 8.16  63.9 – 86.4 
Spleen  0.75 – 150  1.71 – 9.46  1.41 – 9.24  0.26 – 2.39  0.07 – 6.54  68.1 – 89.8 
Brain  0.75 – 150  1.13 – 4.13  1.20 – 6.83  –0.89 – 5.18  0.02 – 8.07  92.2 – 95.5 
Table 3. Intra­day (n = 5) and inter­day (3 d, n = 5) precision, accuracy and recovery for the tested tissue analysis
Y. B. Shi  et al. / Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 18 (2009) 49–54  53 
3.4.  Application  of  bergenin  analysis  to  urine, 
feces and tissue samples 
The concentrations  of bergenin  in  urine and  tissues 
were calculated using  the corresponding calibration 
curves. The result showed that there was a significant 
decrease  in  the  portion  of  bergenin  detected  from 
urine   as   sampling   periods   were   extended.   The 
amount  of  urinary  bergenin  detected  from  0–6  h 
following intravenous administration was 97.13% of 
the whole detected amount during 0–18 h. The excre­ 
tion ratio of kidney for bergenin was calculated using 
the formula: 
and  the  value was approximately 35.36%. The  per­ 
centage  of  the  dose  recovered  in  feces  was  about 
9.34%,  which  was  estimated  using  the  calibration 
curve for urinary bergenin analysis. 
Bergenin  distribution  amount  (Dt)  in  tissues was 
calculated as follows: 
As shown  in Table 4,  all  tested  tissues collected at 
0.5   h  following  intravenous   administration  were 
found to retain parent drug. The amount of bergenin 
was the highest in the kidney, and then in the spleen, 
lung,  liver,  heart  and  brain  sequentially.  The  organ 
of  brain  maintained  a  very  low  drug  concentration 
with a value of 0.44 ± 0.26 μg/g, which was  likely 
because  of  the  hydrophilic  properties  of  bergenin. 
The  order   of  the  resident  time  (from  longest  to 
shortest)  in  tested  tissues  was  kidney,  lung,  liver, 
spleen, heart and brain. 
4. Discussion 
A   simple,   practical   and   low­cost   RP­HPLC 
method  has  been  developed  for  the  quantitative 
determination of bergenin in biological samples. The 
results showed that bergenin was distributed widely 
and  eliminated  quickly  in  rat  after  intravenous  ad­ 
ministration. The fast metabolism of bergenin in rat 
likely  resulted  in  the  lower  plasma  drug concentra­ 
tion and excretion ratio of kidney. This observation 
was  in  agreement  with  our  previous  pharmacoki­ 
netic  study [13] .   Comparatively,   kidney  maintained 
the highest drug concentration and the longest drug 
resident  time, while  there were very  low  drug con­ 
centrations  in  brain,  which  indicated  that  bergenin 
tends  to accumulate  in  kidney  in comparison  to all 
other  tissues  investigated. Moreover,  bergenin  was 
not distributed easily  in brain because of  its hydro­ 
philic property. 
Acknowledgements 
The  research  is  funded by Natural Science Foun­ 
dation (Grant No. ZS021­A25­051­N) and Scientific 
&  Technological  Tackle  Key  Projects  (Grant  No. 
2GS035­A43­048­01)   of   Gansu  Province,   China. 
We  are  very  grateful  to  Zhen­Ying Hu  and Yong­ 
Jiang  Luo  (Lanzhou  Institute  of  Animal  Sciences 
and   Veterinary   Pharmaceutics,   CAAS)   for   their 
technical assistance. 
References 
[1] Shen, X.W.; Zhen, S.Z.; Fu, Z.S.; Chen, Y. Chem. J. Chin. 
Univ. 1987, 8, 528–532. 
[2] Pu, H.L.; Huang, X.; Zhao,  J.H.; Hong, A. Planta Med. 
2002, 68, 372–374. 
[3]  Lim,  H.K.;  Kim,  H.S.;  Choi,  H.S.;  Oh,  S.;  Choi,  J.  J. 
Ethnopharmacol. 2000, 72, 69–72. 
[4] Kim, H.S.; Lim, H.K.; Chung, M.W.; Kim, Y.C. J. Ethno­ 
pharmacol. 2000, 69, 79–83. 
[5]  Lim,  H.K.;  Kim,  S.H.;  Kim,  H.S.;  Chang, M.J.;  Rhee, 
G.S.; Choi, J. Arch. Pharm. Res. 2001, 24, 114–118. 
[6]  Li,  R.W.;  Leach,  D.N.; Myers,  S.P.;  Lin,  G.D.;  Leach, 
G.J.; Waterman, P.G.A. Planta Med. 2004, 70, 421–426. 
[7] Piacente, S.; Pizza, C.; De Tommasi, N.; Mahmood, N. J. 
Nat. Prod. 1996, 59, 565–569. 
[8]  Takahashi,  H.;  Kosaha, M.; Watanabe,  Y.;  Nakade,  K.; 
Fukuyama, Y. Bioorg. Med. Chem. 2003, 11, 1781–1788. 
[9] Goel, R.K.; Maiti, R.N.; Manickam, M.; Ray, A.B. Indian 
J. Exp. Biol. 1997, 35, 1080–1083. 
[10] Xie, J.X.; Wang, L.; Liu, C.X.; Zhang, D.Y. Acta Pharm. 
Sin. 1981, 16, 425–428. 
bergenin amount ( g) 
Dt =  100% 
tissue weight (g)
m
´ 
amount detected from urine 
fr =  100% 
dosage administrated
´ 
Table 4. Bergenin concentrations in rat tissues after a single intrave­ 
nous administration at 22.5 mg/kg body weight (         , μg/g) 
Tissue 
Sampling time (h) 
0.5  2  4  8 
Liver  1.52 ± 0.76  0.60 ± 0.39  ­  ­ 
Kidney  9.44 ± 1.41  1.53 ± 0.33  1.12 ± 0.12  ­ 
Lung  2.00 ± 0.34  0.65 ± 0.44  ­  ­ 
Heart  1.49 ± 0.53  ­  ­  ­ 
Spleen  3.64 ± 1.14  0.44 ± 0.26  ­  ­ 
Brain  0.44 ± 0.26  ­  ­  ­ 
­ : not detected or lower than LOQ. 
x s ±
Y. B. Shi  et al. / Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 18 (2009) 49–54 54 
[11] De Smet, P.A.; Rivier, L. J. Ethnopharmacol. 1989, 25, 
127–138. 
[12]  De  Smet,  P.A.;  Brouwers,  J.R.  Clin.  Pharmacokinet. 
1997, 32, 426–427. 
[13]  Shi, Y.B.; Shi, Y.P.; Meng, Q.G. Biomed. Chromatogr. 
2006, 20, 1065–1070. 
[14]  Zhang,  J.H.;  Zang,  H.C.  Assay  of  Drug  in  Biological 
Fluid. Beijing: Chemical Industry Press. 2002, 11–18. 
反相高效液相色谱法测定大鼠尿、粪便和组织中岩白菜素的含量
史彦斌 1* , 师彦平 2 , 张晓云 1 , 赵全义 1 , 倪京满 1 
1. 兰州大学 药学院, 甘肃 兰州  730000 
2. 中国科学院 兰州化学物理研究所,甘肃 兰州  730000 
摘要: 本文建立了应用反相高效液相色谱测定大鼠尿、粪便和组织中水溶性药物岩白菜素含量的方法。色谱条件为 
Diamonsil TM C18色谱柱, 甲醇–水为流动相, 流速  0.8 mL/min, 柱温  40 ºC, 检测波长  220 nm。尿中药物浓度在0.5–100 µg/mL 
范围内与峰面积呈良好线性关系(r = 0.9989), 绝对回收率介于90.0%–92.6%。肺中药物浓度在0.5–150 µg/g范围内, 其它被
测组织中药物浓度在0.3–150  µg/g  范围内与峰面积具有良好线性关系(r≥0.9996),  各组织中药物绝对回收率均大于 
63.9%。该方法用于测定大鼠静脉注射岩白菜素后尿液、粪便和组织中药物的浓度, 结果表明约有35.36%的服药剂量从
其尿液中回收, 不足10%的剂量从粪便中回收。原形药物能快速分布到被测组织中, 肾中药物分布最多, 而脑组织中分布
最少, 这与药物本身具有较好的水溶性相关。
关键词:反相高效液相色谱; 岩白菜素;排泄;分布