全 文 ：工作简报
反相高效液相色谱法测定鬼灯檠中
岩白菜素的含量
任　静 , 李多伟 , 陈俐宏 , 郭培莹 , 王　凡
(西北大学 生命科学学院 , 西安 710069)
摘　要:建立了反相高效液相色谱法测定鬼灯檠中岩白菜素的含量。色谱柱为 Symmetry C18
柱(5 μm , 4. 6 mm ×150 mm),流动相为甲醇-水(1∶3),流速为 1. 0 mL min- 1 ,柱温 30±1 ℃,检
测波长为 275 nm 。该方法线性范围为 0. 8 ～ 4. 0 μg(r=0. 998 7),平均加标回收率为 100. 5%,岩
白菜素的相对标准偏差为 1. 6%(n=6),检出限为 0. 1 ng 。方法快速 ,简单 ,灵敏度高。
关键词:反相高效液相色谱法;鬼灯檠;岩白菜素
中图分类号:O657. 3　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001-4020(2005)05-0329-02
REVERSED-PHASE HPLC DETERMINAT ION OF BERGENIN
IN RODGERIS AESCULIFOLIA BATAL
REN Jing , LI Duo-wei , CHEN Li-hong , GUO Pei-ying , WANGFan
(Collegeo f L i f e Seience , Northwest University , Xi′an 710069 , China)
Abstract:A RP-H PLC method fo r the determination of be rgenin in Rodge ris aesculifolia batal w as
developed. The Chromatog raphic conditions we re as follow s:a C18 column (5 μm , 4. 6 mm×150 mm , i. d.) w as
e luted w ith a mobile phase consisted of methanol and w ater(1+3) at the column temperature o f 30±1 ℃. The flow
rate w as 1. 0 mL min- 1 and the w aveleng th o f measurement was 275 nm. Linea rity of the w o rking curve w as kept
linear in the r ange of 0. 8 ～ 4. 0 μg w ith a corelation coefficient o f 0. 998 7. The average recove ry w as 100. 5% with
RSD 1. 6%(n =6). The detection limit w as 0. 1 ng . The method w as proved to be quick , simple and highly
sensitiv e.
Keywords:RP-H PLC;Rodgeris aesculifo lia batal;Bergenin
　　鬼灯檠又名索骨丹 (Rodgeria aesculifo lia
Batal)系虎耳草科多年生草本植物 ,为民间常用草
药。其地下根茎富含虎耳草素(Be rgenin)又称岩白
菜素 ,为制药工业原料 ,其制剂可用于防治慢性气管
炎 ,镇咳 ,消炎等[ 1] 。岩白菜素的含量测定以往多采
用比色法[ 2] ,紫外分光光度法[ 3] 和纸层析法[ 4] 。本
文从鬼灯檠根茎中用甲醇超声波直接提取岩白菜
素 ,用反相高效液相色谱法测定岩白菜素含量 ,方法
快速 、简单 、灵敏度高 。
收稿日期:2003-12-30
作者简介 :任静(1979 -), 女 ,西安人 ,在读硕士 , 从事天然产
　物分离及活性研究工作。
1　试验部分
1. 1　仪器与试剂
1525型高效液相色谱系统由 1525型高压恒流
泵 、2487 双通道紫外检测器和 Breeze 系统软件
组成 。
HS3120型超声波萃取器
TG L-16C离心机
岩白菜素对照品:红外光谱数据同文献[ 1] ,熔
点为 239. 5 ～ 240. 0 ℃,经纸层析 ,薄层层析检查均
为一个斑点 。称取岩白菜素对照品 10. 0 mg 置
50 mL容量瓶中 ,加甲醇溶解并用甲醇定容至刻度 ,
摇匀 ,制成 0. 200 0 g L - 1对照品溶液 。
鬼灯檠:采自甘肃康县 ,原植物标本经西北大学
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任静等:反相高效液相色谱法测定鬼灯檠中岩白菜素的含量
生物系鉴定。
试剂均为分析纯
1. 2　色谱条件
色谱柱:美国 Waters 公司 Symmetry C18 柱
(5 μm ,4. 6 mm ×150 mm i. d), 流动相:甲醇-水
(1∶3),流速为 1. 0 mL min- 1 ,柱温为 30±1 ℃,
检测波长为 275 nm 。
在色谱条件下岩白菜素的保留时间约为
5. 0 min ,峰形好 ,其他成分无干扰(高效液相色谱见
图 1)。
1. 3　样品测定方法
称取鬼灯檠粉末过 425μm(40目筛) 0. 200 0 g
置具塞离心管中 ,加甲醇 5 mL ,超声波提取 20 min ,
离心分离(3 000 r min - 1) 5 min ,倾出上清液 ,残
渣再同样操作两次 , 合并倾出液 , 用甲醇定容至
25 mL 。按色谱条件 ,吸取 10μL 进样测定 。
2　结果与讨论
2. 1　线性关系与检出限
用岩白菜素对照品配置成 0. 08 , 0. 16 , 0. 24 ,
0. 32 ,0. 40 g L - 1甲醇溶液。用微量进样器吸取
10 μL ,注入高效液相色谱仪中 ,按色谱条件进行测
定 ,记录色谱图和峰面积 ,岩白菜素峰面积(Y )与进
样量(X , μg)有良好的线性关系 。回归方程为
Y =2. 401 76×106 X - 479 010. 1 , r=0. 998 7 ,线性
范围为 0. 8 ～ 4. 0 μg ,检出限为 0. 1 ng 。
2. 2　精密度与稳定性试验
取同一浓度的岩白菜素对照品溶液 10 μL ,按
色谱条件进行测定 ,连续进样 6次 ,求出岩白菜素的
峰面积 , RSD为 1. 6%。
取样品溶液在0 ,0. 5 ,1. 0 , 2. 0 , 3. 0h分别进样
10 μL , 记录峰面积 , 5 次进样峰面积的 RSD 为
2. 3%,样品溶液在 3 h 内基本稳定 。
2. 3　回收率试验
按试验方法吸取鬼灯檠供试品溶液 1 mL ,共 7
份 ,其中 6份加入岩白菜素对照品溶液 1 mL ,用超
声波混匀 ,经 0. 45 μm 微孔滤膜过滤后 ,按色谱条
件吸取 10 μL ,进样测定 ,计算回收率 ,平均加标回
收率为 100. 5%。
2. 4　样品测定结果
按照样品测定的方法 ,测得鬼灯檠中岩白菜素
的平均含量为 5. 19%(n =5), 相对标准偏差为
0. 60%。高效液相色谱图见图 1。
图 1　岩白菜素高效液相色谱图
Fig. 1　HP LC chart of berginin
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(上接第 328页)
本文中暂借用钴(Ⅱ)与 PA R形成络合物 。
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