全 文 ：九头狮子草对细菌形态结构的影响
覃容贵1 , 李淑芳2 , 罗忠圣3
(1.贵阳医学院药学系生药学教研室 , 贵州贵阳　550004;2.贵阳医学院药理学教研室 , 贵州贵阳　550004;3.贵阳新天制药有限公司 ,
贵州 贵阳　550018)
[摘　要] 目的:研究九头狮子草对金黄色葡萄球菌 、β 溶血性链球菌 、铜绿假单胞菌 、肺炎克雷伯菌的抗菌作
用机理。方法:使用 BH-2 OLYMPUS 显微镜对亚最低抑菌浓度(MIC)各细菌进行观察 , 并使用 BH-2 OLYMPUS 显
微照相机拍照。结果:各细菌形态发生显著性改变 , 形成典型的细胞壁缺陷菌(细菌 L 型)。结论:九头狮子草
具有抗菌作用 ,其抗菌作用机理可能在于引起细菌细胞壁的缺损 ,造成菌体肿胀 、溶解而死亡。
[关键词] 细菌;细胞壁;L型菌;中草药;九头狮子草
[中图分类号] R285.5　　[文献标识码] A　　[文章编号] 1000-2707(2004)01-0058-03
The Effect of Herba Peristrophis on Morphology of Bacteria
QIN Rong-gui1 , LI Shu-fang2 , LUO Zhong-sheng3
(1.Department of Pharmacy , Guiyang Medical College , Guiyang 550004 , China;2.Darpartment of Pharmacology , Guiyang
Medical College , Guiyang 550004 , China ;3.Guiyang Xintian Pharmaceutical Limited Company , Guiyang 550018 , China)
[ Abstract] Objective:To study the antibacterial mechanism of herba peristrophis(HP)on Staphylococcus
aureus , β-Streptococcus hemolyticus , Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumonia.Methods:BH-2
microscope was used to observe the morphology of the bacteria and BH-2 micro-camera was used to photo the
sub-MIC bacteria.Results:Morphologies of the bacteria were obviously changed into typical L-form.Con-
clusion:The antibacterial mechanism of HP might be destroying the cell wall of bacteria.
[ Key words] bacteria;cell wall;L forms;durgs , chinese herbal;herba peristrophis
　　九头狮子草为爵床科植物九头狮子草[ Peri-
strophe japonica(Thunb.)Bremek.] 全草 , 功效为祛
风 、清热 、化痰 、解毒[ 1] ,民间多用于治疗小儿高热 、
小儿惊风 。前期研究工作表明 ,九头狮子草有明显
的解热作用 ,且对金黄色葡萄球菌 、β溶血性链球
菌 、铜绿假单胞菌 、肺炎克雷伯菌有较强的抑制作
用 ,并测出各细菌的最低抑菌浓度(MIC)[ 2] 。在此
基础上 ,于2001年12月使用BH-2显微镜对亚MIC
各细菌进行观察 ,以进一步明确其抗菌作用机理 ,
为临床应用九头狮子草治疗热病提供实验和理论
依据 。
1　实验材料
1.1　菌株　金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、β 溶血
性链球菌(ATCC0379)、肺炎克雷伯菌 、铜绿假单胞
菌(ATCC287530),由贵阳医学院微生物学教研室
及检验系提供 。
1.2　试药制备　九头狮子草水煎剂:称取剪碎的
九头狮子草(市售 ,由贵阳医学院药学系药用植物
与生药学教研室龙庆德讲师鉴定)32 g ,加蒸馏水
200 ml ,浸泡过夜后 ,文火煎煮 ,沸后 20 min过滤 ,
留滤液。药渣再加蒸馏水煎煮 ,过滤后合并滤液 ,
水浴浓缩至 1 g/ml水煎液。
1.3　培养基制备
1.3.1　营养肉汤的制备　称取营养肉汤粉(购自
上海医学化验所试剂厂)31 g ,加蒸馏水 1 000 ml ,
加热溶解 ,备用。
1.3.2　LB培养基的制备　按文献[ 3] 方法称取酪
蛋白胨(购自华美生物工程公司)1 g ,葡萄糖 1 g ,
氯化钠 1 g ,酵母提取物(购自华美生物工程公司)
0.5 g ,加蒸馏水 100 ml ,加热溶解 ,调 pH至 7.6 ,备
用。
1.3.3　2倍浓缩肉汤 、2倍浓缩 LB 培养基的制备
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第29卷　第 1期
2004年 2月 　　　 贵 阳 医 学 院 学 报JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE　　　Vol.29　No.12004.2
　以上各成分均倍量 。
1.4　主要仪器　隔水式电热恒温培养箱(上海市
跃进医疗器械一厂);BH-2 OLYMPUS显微镜;BH-2
OLYMPUS显微照相机。
2　实验方法
试管稀释法测定各细菌 MIC[ 4]后 ,观察亚 MIC
各细菌形态的变化 ,并拍照。
2.1　不同浓度含药培养基的制备　取 10支试管 ,
编号 ,每支试管加 2倍浓缩肉汤 2 ml ,吸取 2 ml九
头狮子草水煎液(1 g/ml)加入第 1支试管 ,混匀后
依次对倍稀释至第 7支试管 ,制成含药液体培养
基 ,使药物浓度依次分别为 0.5 ,0.25 ,0.125 ,0.062
5 ,0.031 ,0.015 ,0.007 8 g/ml。10支试管加棉塞后 ,
高压蒸汽灭菌 20 min。
2.2　菌液的制备[ 5] 　0.5 麦氏比浊标准各菌液 ,
用营养肉汤或 LB培养基作 1/10稀释(含菌量约为
107 CFU/ml)。
2.3　接种　用微量移液器取 100μl菌液依次由低
浓度至高浓度分别加入 7支含药培养基试管中(最
终接种菌量约为 5×105 CFU/ml),其余3支试管分
别作有药无菌 、有菌无药 、西药阳性对照(以青霉素
或庆大霉素作阳性对照)。
2.4　培养与检查　置温箱 37 ℃孵育过夜 ,用接种
环分别取管底菌液涂片 ,细胞壁染色 ,镜检。细菌
不生长的最低浓度即为九头狮子草对该菌的 MIC 。
每种敏感细菌为 1组 ,共做 4组。溶血性链球菌用
2倍浓缩 LB培养基培养 。
2.5　在油镜下观察亚MIC 细菌形态 ,并拍照。
3　结果
光学显微镜下各菌株形态发生显著变化(放大
倍数:15×100),如下:
3.1　正常金黄色葡萄球菌呈葡萄串状球形或单个
球形 ,药后菌体体积显著增大 ,呈单个球形或不规
则球形(见图 1)。
3.2　正常 β溶血性链球菌呈球形或卵球形 、链状
排列 ,药后菌体体积显著增大 ,呈球形或葡萄串状
球形 ,或几个变形菌体连接成条状(见图 2)。
3.3　正常铜绿假单胞菌呈球杆状 ,药后菌体体积
显著增大 ,呈球形 、椭球形 ,明显可见细胞壁缺损
(见图3)。
3.4　正常肺炎克雷伯菌呈卵圆形或球杆状 ,药后
菌体体积显著增大 ,呈球形 、椭球形或分支状 ,分支
末端明显可见无细胞壁(见图 4)。
图 1　药后金黄色葡萄球菌形态　(15×100)
Fig.1　The morphology of Staphylococcus
aureus affected by HP
图 2　药后 β溶血性链球菌形态　(15×100)
Fig.2　The morphology of changed β-Streptococcus
hemolyticus affected by HP
图 3　药后铜绿假单胞菌形态　(15×100)
Fig.3　The morphology of Pseudomonas
aeruginosa affected by HP
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　1期 覃容贵等　九头狮子草对细菌形态结构的影响
图 4　药后肺炎克雷伯菌形态　(15×100)
Fig.4　The morphology of Klebsiella
pneumonia affected by HP
4　讨论
九头狮子草长期以来在贵州省布依族民间广
为应用 ,主要用于治疗小儿高热 、小儿惊风(一种因
儿童高热引起的惊厥 、抽搐症状)等 ,因此 ,民间又
称其为惊药 、尖惊药 ,尤以治疗临床原因不明 ,其它
药物无效的高热效果特佳 。九头狮子草的解热作
用与其抗菌作用有密切关系。实验结果表明 ,各菌
株的形态变化非常显著。首先是体积明显增大 ,其
次是形态明显变化 ,无论是球菌还是杆菌均变为球
形或近似球形 ,有的甚至几个细菌连接融合形成
不规则长条状或分支状 。总之 ,在九头狮子草的作
用下 ,各细菌已变化成为典型的细胞壁缺陷菌(细
菌L 型)。由此推论九头狮子草的抗菌作用机理可
能在于它对细胞壁的作用。药物引起细菌细胞壁
缺损 ,细胞外液在渗透压的作用下进入菌体 ,造成
菌体肿胀 、溶解死亡 。九头狮子草通过抑制作为发
热激活物的病原微生物 ,从而抑制机体内生致热原
的产生而解热[ 6 〗。
5　参考文献
[ 1] 江苏新医学院.中药大辞典[ S] .上海:新华书店上海发
行所 , 1986.48-49.
[ 2] 覃容贵 ,李淑芳.九头狮子草的抗菌作用研究[ J] .贵阳
医学院学报 , 2000 , 25(2):130-131.
[ 3] 范秀容.微生物学实验[ M] .第 2 版.北京:高等教育出
版社 , 1990.263.
[ 4] 上海市第六人民医院检验组.快速检验诊断资料汇编
[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1973.213-214.
[ 5] 李影林.临床微生物学及检验[ M] .北京:人民卫生出版
社 , 1995.85.
[ 6] 李楚杰.发热机制研究的新进展[ J] .中国病理生理学
杂志 , 1990 , 6(5):51-52.
(2003-05-07收稿 , 2003-05-27 修回)
(上接第 57 页)
身心健康关系日益密切。而另一方面 ,由于我省经
济水平低 ,普通民众的收入低 ,尤其是民众的心理
卫生知识以及对心理卫生的重视程度都处于较低
水平 ,而医学心理咨询工作已经起步近 10年 ,且局
限于精神科的门诊部 ,社会上对此缺乏广泛的了
解。
有关咨询师的要求历来受到大家的关注 ,美国
心理学会 1953 年对心理学家提出了道德原则要
求 ,并在以后不断完善 、补充[ 1] ,同时也有许多学者
对咨询师提出各种要求 ,除要有一定的知识 、训练
及经验外 ,有关咨询师的心理品质多倾向于应具有
共性 、敏感性 、灵活性 、客观 、热情 、真诚 、具有同情
感 、自身具有健全的人格和良好情绪状态[ 2 ～ 4] 。对
咨询师的期望和要求 ,来源于两个方面:一是咨询
师本身 ,而另一个则是来源于就诊者。就诊者要求
咨询师是专家 、权威 ,有特别的知识和经验 ,可以给
予他们建议 、指导和忠告 ,甚至直接帮助他们解决
问题 ,或成为矛盾和问题的调解人 。由于心理咨询
师全为临床精神科医师 ,经短期专业培训后从事此
工作 ,应加强规范化培训 ,在严格资格认定制度的
同时 ,应加强对心理咨询和心理治疗作用的宣传和
普及 ,提高公众的接受性 。
4　参考文献
[ 1] Gross J J , American Psychological Association Ethical princi-
plest[ J] .American Psychogist , 1993 , 64(6):70-986.
[ 2] 布洛克著.陈一筠 , 全锋 , 译.心理治疗必读[ M] .北京:
中国科学出版社 , 1982.50 , 165.
[ 3] G Corey.Theory and practice of counseling and psychotherapy
[ M] .Brook:colepublishing Company , 1996.14-49.
[ 4] 钱铭怡.心理咨询与心理治疗[ M] .北京:北京大学出版
社 , 1994.17-55.
(2003-03-12收稿 , 2003-04-23 修回)
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贵 阳 医 学 院 学 报　 29卷