全 文 ：［作者简介］王春红，女，本科，副主任药师，研究方向：药物分析，电话：０２７－８７８２６０１２，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｃｈ５６５９２００６＠１２６．ｃｏｍ
甜地丁不同产地、不同药用部位黄酮类成分含量分析
王春红，肖凌，聂晶　 （湖北省食品药品监督检验研究院，湖北 武汉４３００６４）
［摘要］　目的：探讨甜地丁不同用药部位中黄酮类成分的含量差异，为该药材的质量评价及资源开发提供依据。方法：采
用高效液相色谱法测定不同部位的芹菜素含量，采用比色法测定总黄酮类含量，并将结果进行统计学处理。结果：甜地丁
药材中不同部位的总黄酮含量与芹菜素含量呈现相关性，不同部位与总黄酮含量相关性显著、与芹菜素含量相关性不显
著。结论：总黄酮与芹菜素含量相结合可作为评价甜地丁药材质量的依据。甜地丁以全草入药最佳，产地对其质量影响
不大。
［关键词］　甜地丁；不同部位；不同产地；黄酮类；芹菜素
［中图分类号］Ｒ２８２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）０９－０７６５－０３　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．０９．２２
Ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｒｅａ　ｏｆ　Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａ
ＷＡＮＧ　Ｃｈｕｎ－ｈｏｎｇ，ＸＩＡＯ　Ｌｉｎｇ，ＮＩＥ　Ｊｉｎｇ（Ｈｕｂｅｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｈｕｂｅｉ　Ｗｕｈａｎ
４３００６４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａｖｅｒｎａ（Ｇｅｏｒｇｉ）
Ａ．Ｂｏ．，ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｔｈｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｉｔｓ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＭＥＴＨＯＤＳ　ＲＰ－ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｓ－
ｓａｙ　ｔｈｅ　ａｐｉｇｅｎｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｓｓａｙ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｓｔａ－
ｔｉｓｔｉｃｓ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ａｐｉｇｅｎｉｎ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｒｅｌｅｖａｎｃｅ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈｅ　ｍａｒｋｅｄ　ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｔｏ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｔｈｅ　ｌｉｔｔｌｅ　ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｔｏ　ａｐｉｇｅｎｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏ－
ｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ａｐｉｇｅｎｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｂａｓｅ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａ　ｖｅｒｎａ（Ｇｅｏｒｇｉ）Ａ．Ｂｏｒ．
Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｐａｒｔ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｗｈｏｌｅ　ｈｅｒｂ．Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｒｅａ　ｈａｓ　ｎｏ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｉｔｓ　ｑｕａｌｉｔｙ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａｖｅｒｎａ（Ｇｅｏｒｇｉ）Ａ．Ｂｏｒ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐａｒｔｓ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｒｅａ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄ；ａｐｉｇｅｎｉｎ
　　甜地丁为豆科植物米口袋 Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａ
ｖｅｒｎａ（Ｇｅｏｒｇｉ）Ａ．Ｂｏｒ．的干燥全草。始载《本草纲
目》［１］，列入草部。全草入药，具清热解毒功能，用于
疔疮痈肿，急性阑尾炎，一切化脓性炎症［２］。许多医
药厂家近几年来又围绕甜地丁开发出了一系列的新
药产品，如石家庄欧意制药的清热解毒软胶囊，河南
康鑫药业的清热解毒片，陕西宏府怡悦药厂的热毒
平颗粒等，表明该药材发展前景良好。
据报道［３－４］，甜地丁含大量黄酮类化合物，具有
显著的生理活性，其中芹菜素 Ａｐｉｇｅｎｉｎ是其主要
活性成分之一，具抗癌、抗炎、抗病毒、抗氧化等作
用。目前，国内关于甜地丁的研究较少，仅在全国
中草药汇编、中国药典１９７７年版一部正文对性状
进行了描述，其他几版中国药典均在附录中作为
中成药的原料药收载，且没有更多的内在质量控
制。为全面了解甜地丁质量控制和有效的药用部
位，本实验研究对不同部位芹菜素和总黄酮的含
量进行分析，为甜地丁药材的系统开发和合理利
用提供参考依据。
１　仪器与材料
高效液相色谱仪ＤＩＯＮＥＸ　Ｕ３０００；紫外分析仪
ＵＮＩＣＡＭ　ＵＶ－５００；超声波仪ＣＱ２５０（上海超声波
仪器厂）；ＸＳ－２０４Ｓ电子天平；Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃ１８色谱柱
（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ）。芹菜素对照品（中国药
品生物制品检定所，批号１０００８０－２０１００６）；芦丁对
照品（中国药品生物制品检定所，批号 １０００８０－
２００３０６）。甜地丁药材信息见表１。
２　方法与结果
２．１　总黄酮含量测定　采用碱性硝酸铝－亚硝酸钠
比色法测定。
２．１．１　检测波长的选择　取对照品溶液，在４００～
７００　ｎｍ波长进行扫描，结果在５００　ｎｍ有最大吸收，
参照相关文献［５］，将检测波长定为５００　ｎｍ（见
图１）。
２．１．２　对照品溶液的制备　取芦丁对照品５１．２
ｍｇ，精密称定，置２５　ｍｌ量瓶中，加７０％乙醇７０　ｍｌ，
置水浴上微热使溶解，放冷，加７０％乙醇至刻度，摇
匀。精密量取５　ｍｌ，置５０　ｍｌ量瓶中，加水至刻度，
·５６７·中国医院药学杂志２０１４年５月第３４卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｍａｙ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．９
图１　芦丁紫外扫描
Ｆｉｇ　１　ＵＶ　ｓｃａｎｎｉｎｇ　ｏｆ　ｒｕｔｉｎ
摇匀，得１　ｍｌ含０．２０４　８　ｍｇ的芦丁对照品溶液。
２．１．３　供试品溶液的制备及测定［５］　取样品粉末
１　ｇ，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚（６０℃～
９０℃）８０　ｍｌ，提取至提取液无色，弃去石油醚液，再
加乙醚８０　ｍｌ，提取至提取液无色，弃去乙醚液，再
加７０％乙醇溶液８０　ｍｌ，提取至提取液无色，将提取
液转移至１００　ｍｌ量瓶中，用少量７０％乙醇洗涤索
氏提取器，洗涤液并入量瓶中，并加至刻度，摇匀，即
得。精密量取３　ｍｌ，置２５　ｍｌ量瓶中，照标准曲线制
备项下方法，自“加水６．０ｍｌ”起，依法测定吸光度，
计算出总黄酮的量。结果见表１。
２．１．４　方法学验证
（１）标准曲线的制备：精密量取对照品溶液１，
２，３，４，５，６　ｍｌ分别置２５　ｍｌ量瓶中，各加水６．０ｍｌ，
加５％亚硝酸钠溶液１　ｍｌ，混匀，放置６　ｍｉｎ，加
１０％硝酸铝溶液１　ｍｌ，摇匀，放置６　ｍｉｎ，加氢氧化
钠试液１０　ｍｌ，再加水至刻度，摇匀，放置１５　ｍｉｎ，以
相应的试剂为空白，照紫外－可见分光光度，在５００
ｎｍ处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，芦丁的量为
横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Ｙ＝０．５１７　１　Ｘ
－０．０１０，ｒ＝０．９９９　５，芦丁在０．２０４　８～１．２２８　８　ｍｇ
范围内呈良好线性关系。
（２）重复性考察：取样品６份，按照“２．１．３”项下
方法制备供试品溶液测定。结果总黄酮含量分别为
２．０２％，２．０１％，２．０３％，１．９８％，１．９７％，２．０５％，平
均含量为２．０１％，ＲＳＤ＝１．５％（ｎ＝６），表明本方法
重复性良好。
（３）稳定性考察：取同一供试品溶液，分别在０，
２０，４０，６０，８０，１００　ｍｉｎ时依法测定吸收度，结果
ＲＳＤ＝１．３１％，说明供试品在１００　ｍｉｎ内基本稳定，
能满足含量测定的时间要求。
（４）准确度考察：称取已知含量的样品粉末０．５
ｇ，精密称定，共６份，分别精密加入芦丁对照品溶液
２　ｍｌ，依法制备供试品溶液，并按上述测定，计算加
样回收率，结果平均回 收 率 为９８．１％，ＲＳＤ＝
２．１２％，表明本方法准确性良好。
２．２　芹菜素含量测定　参考相关文献［６－８］，采用
ＨＰＬＣ法测定。色谱条件与系统适用性实验：色谱
柱Ｃ１８色谱柱（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ）；流动性：甲
醇－０．３％磷酸溶液（６０∶４０）；检测波长：３３９　ｎｍ；流
速：１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测波长：３３９　ｎｍ；进样量：１０
μｌ；理论板数按芹菜素峰计算应不低于３　０００。
２．２．１　对照品溶液的制备　取芹菜素对照品适量，
加甲醇制成每１　ｍｌ含７．２５μｇ的溶液，即得。
２．２．２　供试品溶液的制备　供试样品自然干燥，
粉碎成细粉，过三号筛，称取粉末约１　ｇ，精密称
定，置具塞锥形瓶中，精密加７０％乙醇２０　ｍｌ，密
塞，摇匀，称定重量，加热回流１　ｈ，放冷，再称定重
量，用７０％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续
滤液，即得。
２．３　样品的测定　分别取不同产地不同批次不同
用药部位的样品，按供试品溶液的制备方法制备供
试品溶液，按上述条件，进样测定，计算芹菜素和总
黄酮的含量，见表１。
表１　样品测定结果表（ｎ＝２）
Ｔａｂ　１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ（ｎ＝２）
序列 产地 药用部位
总黄酮
测得含量／％
芹菜素
测得含量／％
１ 安徽
地上
根
全草
２．０２
２．３０
２．５６
０．０３１　５
０．００２　８
０．０２８　０
２ 湖北
地上
根
全草
１．８９
１．９２
２．１３
０．０２７　８
０．００２　８
０．０１２４
３ 河北
地上
根
全草
１．０３
１．２３
１．３５
０．００５　６
０．００１　１
０．００３１
４ 河北
地上
根
全草
１．９１
２．０１
２．３５
０．０２８　４
０．００２　０
０．０２０４
５ 河南
地上
根
全草
１．２５
１．６８
１．８０
０．００９　８
０．００１　４
０．００８６
６ 河南
地上
根
全草
１．７２
１．８６
２．２１
０．０２１　４
０．００２　４
０．０１５７
２．４　数据分析　将上述测定结果，采用Ｅｘｃｅｌ２００７
作图及ＳＰＳＳ　１８软件进行统计分析，相关性分析设
置信水平（Ｐ）＝０．０５作单侧显著性检验。
２．４．１　不同部位总黄酮及芹菜素含量比较　将总
黄酮及芹菜素的含量，作分布直方图（图１），总黄酮
含量为全草最高，结果为全草＞根＞地上，而根的芹
菜素含量明显比全草及地上部分含量低，结果为地
上＞全草＞根。总黄酮量与不同部位作相关性分
析，结果药用部位与总黄酮含量相关系数为０．４３４，
·６６７· 中国医院药学杂志２０１４年５月第３４卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｍａｙ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．９
两者相关性显著；芹菜素量与不同部位作相关性分
析，结果药用部位与芹菜素含量相关 系 数 为
－０．２３１，两者相关性不显著。将甜地丁总黄酮及芹
菜素两者含量作相关分析，结果相关系数为０．４３８，
两者相关性显著。结果说明甜地丁药材不同药用部
位质量的差异体现在总黄酮含量上，而总黄酮含量
与芹菜素含量两者相关。
图２　不同部位总黄酮含量、芹菜素含量比较图
Ａ．总黄酮；Ｂ．芹菜素
Ｆｉｇ　２　Ｃｏｍｐａｒｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｎｄ　ａｐｉｇｅｎｉｎ　ｉｎ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐａｒｔｓ　ｏｆ　Ｇｕｅｌｄｅｎｓｔａｅｄｔｉａ
Ａ．ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；Ｂ．ａｐｉｇｅｎｉｎ
２．４．２　甜地丁药材产地分析　分别将两者含量与
产地作相关分析，结果总黄酮与产地相关系数为
－０．２５８；芹菜素与产地相关系数为－０．２１７，说明两
者含量与产地均相关性不显著。
３　讨论
甜地丁含有大量的黄酮类化合物，芹菜素作为黄
酮类的代表成分，具有显著的抗菌、抗病毒生理活
性［９］，能有效地达到清热解毒的功能［１０］。近年，甜地
丁中黄酮类化合物在抗氧化、消除氧自由基方面的应
用越来越受到关注，具有广阔的应用前景。因此总黄
酮和芹菜素含量是评价该药材的重要指标之一。不
同部位总黄酮及芹菜素含量比较结果说明甜地丁药
材不同药用部位质量的差异体现在总黄酮含量上，而
总黄酮含量与芹菜素含量两者相关，因此评价该药材
质量建议综合分析总黄酮及芹菜素的含量。
甜地丁遍布我国十几个省份，属野生植物，采收
期较短，从季节上去讲，它的采收期为每年的３～５
月份。从显著性差异分析结果可看出，６批药材的
总黄酮含量差异明显，芹菜素含量差异不明显，产生
差异的原因与品种的产地采收加工方法、采收季节
和时间、贮藏等因素有关。两者含量分析结合药用
资源考虑，最佳药用部位为全草。不同产地对该药
材质量无明显影响。
参考文献：
［１］　卫生药政管理局，中国药品生物制品检定所．中药材手册［Ｍ］．
北京：人民卫生出版社，１９８９：４２３．
［２］　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志（第４２卷２分
册）［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９８：１４７－１５６．
［３］　段旭静，李佳，张永清．米口袋属药用植物研究 ［Ｊ］．山东中医
药大学学报，２０１２，３４（２）：１８１－１８３．
［４］　韩毅丽，高黎明．米口袋的化学成分研究［Ｊ］．山西中医学院学
报，２００９，１０（５）：２４－２５．
［５］　中国药典［Ｓ］．一部，２０１０：３３３，附录ＶＡ．
［６］　王春红，严寒，聂晶，等．高效液相法测定甜地丁中芹菜素的含
量［Ｊ］．中国药师，２０１１，１４（１）：８８－９０．
［７］　黄海芹．高压液相色谱法测定中药米口袋中木犀草素和芹菜素
的含量［Ｊ］．临床合理用药，２０１２，５（９Ｂ）：３７－３８．
［８］　吕应年，吴科隆，梁念慈，等．高效液相色谱法测定半边旗中芹
菜素含量［Ｊ］．中国药业，２００７，１６（５）：１６－１７．
［９］　王海娣，刘艾林，杜冠华．芹菜素药理作用的研究进展［Ｊ］．中
国新药杂志，２００８，１７（１８）：１５６１－１５６５．
［１０］全国中草药汇编编写组．全国中草药汇编（上册）［Ｍ］．２版．北
京：人民卫生出版社，１９７５：８０５．
［收稿日期］２０１３－０８－１２
·７６７·中国医院药学杂志２０１４年５月第３４卷第９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｍａｙ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．９