全 文 ：参 考 文 献
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青果药材的质量控制研究
申　放 ,黄婉锋
(广东省佛山市药品检验所 , 广东 佛山 528000)
　　摘要　目的:对青果药材进行薄层色谱鉴别及 RP-HPLC含量测定研究 ,以全面客观评价青果药材的质量。方
法:薄层色谱鉴别以青果对照药材及东莨菪内酯对照品为对照 , 以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(6∶10∶7∶1.2)
为展开剂 , 在紫外 365 nm下检视;含量测定采用 HypersilODS2色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-
0.25%冰醋酸溶液(5∶95), 流速:1.0mL/min, 检测波长:271 nm。 结果:青果药材中在对照药材 、东莨菪内酯对照
品相应位置上有相应的荧光斑点;含量测定中没食子酸在 0.07035 ～ 0.70350 μg呈良好的线性关系 , 样品中没食
子酸峰分离度良好。结论:首次建立了青果药材中东莨菪内酯的薄层色谱鉴别方法 , 并进行了没食子酸的含量测
定 , 提供了全面控制青果药材的科学依据。
关键词　青果;东莨菪内酯;薄层色谱;没食子酸;HPLC
中图分类号:R284.1/R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)07-1079-03
收稿日期:2009-03-18作者简介:申放(1962-),男 ,副主任药师 ,主要从事药品监督检验工作;Tel:0757-83356538。
　　青果为橄榄科植物橄榄 CanariumalbumRae-
usch.的干燥成熟果实 ,收载于 2005年版中国药典
一部 ,具有清热 、利咽 、生津 、解毒的功效〔1〕。现代
研究表明 ,青果所含东莨菪内酯具有消肿 、抗炎及镇
痛作用 〔2〕;没食子酸具有抗炎 、抗肿瘤 、杀虫等药理
作用〔3〕 ,与青果的功能主治相一致 。但是 2005年版
中国药典收载的青果标准 ,仅有性状和显微鉴别两
项 ,对于青果的上述有效成分没有指标控制 ,可能导
致市场上的药材质量差异。有鉴于此 ,本文对青果
药材中所含东莨菪内酯进行了薄层色谱鉴别以及对
没食子酸进行了 RP-HPLC含量测定研究 ,以期为青
果药材的采购 、生产 、临床应用提供全面 、客观和科
学的质量控制依据。
1　仪器与材料
1.1　仪器 　Agilent1100高效液相色谱仪 , KB-
250B超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2　材料　甲醇为色谱纯 ,冰醋酸为分析纯 ,水为
超纯水 ,其余试剂均为分析纯;青果对照药材采集于
广东省潮州市归湖镇金光山 ,批号:20080716 ,经笔
者鉴定为橄榄科植物橄榄 CanariumalbumRaeusch.
的干燥成熟果实 。东莨菪内酯对照品 、没食子酸对
照品均购自中国药品生物制品检定所 ,批号分别为:
768-200103、110831-200302,测试药材购自广东 、四
川 、福建 、广西 ,经笔者鉴定均为橄榄科橄榄 Canari-
umalbumRaeusch.的干燥果实 。见表 1。
2　方法与结果
2.1　薄层色谱鉴别　取青果药材粉末 3 g,加浓氨
试液 2 mL润湿 ,加二氯甲烷 20 mL,超声处理 20
min,滤过 ,滤液在水浴上挥干。残渣加二氯甲烷 1
mL使溶解 ,即得。另取青果对照药材 3g,同法制成
对照药材溶液 。再取东莨菪内酯对照品适量 ,加二
氯甲烷制成每 1 mL含 0.2 mg溶液 ,作为对照品溶
液。分别吸取供试品 、对照药材溶液各 10 μL,对照
品 1 μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以环己烷 -
三氯甲烷 -乙酸乙酯-甲酸(6∶10∶7∶1.2)为展开剂 ,
展开 ,取出。晾干 ,置紫外光灯(365 nm)下检视。
结果供试品在与对照药材相应位置上显相同颜色的
两个主斑点 ,与东莨菪内酯对照品对应位置上显相
同颜色的斑点 。见图 1。
2.2　含量测定 [ 4]
2.2.1　色谱条件与系统适用性:色谱柱:Hypersil
ODS2(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流动相:甲醇 -
0.25%冰醋酸溶液(5∶95),柱温:30℃,检测波长:
271 nm。理论塔板数按没食子酸计算应不低于
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图 1　青果薄层色谱图
1.东莨菪内酯　2.青果对照药材　3 ～ 5.青果药材
5 000。对照品与样品色谱图见图 2。
2.2.2　对照品溶液的制备:精密称取没食子酸对
照品 14.07 mg,置 50 mL量瓶中 ,加甲醇溶解并稀
释至刻度;精密量取上述溶液 5 mL置 20 mL量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得 。
2.2.3　供试品溶液的制备:取青果药材 ,粉碎 ,过
3号筛 。精密称取上述粉末 1 g,置锥形瓶中 ,精密
加入 25 mL甲醇 , 称定重量 , 超声处理 30 min
(250W, 40kHz),取出 ,放冷 ,再称定重量 ,用甲醇补
足减失重量 , 滤过 ,取续滤液 ,过 0.45 μm微孔滤
膜 ,取续滤液 ,即得 。
图 2　对照品(A)和样品(B)色谱图
1.没食子酸
2.2.4　线性关系的考察:精密吸取对照品溶液
(70.35 μg/mL)1、3、5、7、10μL,注入液相色谱仪 ,测
定峰面积。以进样量为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,作
线性回归 ,得标准曲线:Y=2.8373X-4.1541 , r=
0.9999。结果表明没食子酸在 0.07035 ～ 0.70350
μg呈良好的线性关系。
2.2.5　稳定性试验:取同一供试品溶液 ,分别在
0、2、4、8、10、24h精密吸取 5μL,注入液相色谱仪 ,
测定各时间点没食子酸的峰面积 ,计算 6个时间点
的 RSD为 0.4%,结果表明没食子酸在上述色谱条
件及溶液中稳定性良好。
2.2.6　精密度试验:精密吸取同一对照品溶液
5μL,重复进样 5次 ,测定没食子酸峰面积值 ,计算
RSD为 1.2%,表明仪器精密度良好 。
2.2.7　重复性试验:精密称取同一批号样品(广西
20081010)5份 ,照 “2.2.3”项下制备供试品溶液 ,注
入液相色谱仪 ,测定 5份样品中没食子酸的含量 。
计算 RSD为 1.7%,表明本方法的重复性良好。
2.2.8　加样回收率试验:精密称取同一批号样品
(广西 20081010,含量为 0.13%)6份 ,每份 0.5g,置
锥形瓶中 ,精密加入没食子酸对照品溶液 2mL(浓
度 为:0.2814mg/mL), 加 甲醇 补 足 25mL, 照
“ 2.2.3”项下制备供试品溶液 ,注入液相色谱仪 ,测
定没食子酸含量 ,结果平均回收率为 99.02%, RSD
为 1.0%。
2.2.9　样品测定:取不同产地的青果药材 , 照
“2.2.3”项下制备供试品溶液 ,分别吸取对照品溶
液和供试品溶液各 5μL,注入液相色谱仪 , 测定含
量。结果见表 1。
　表 1 　青果中没食子酸的含量测定结果
产地-批号 没食子酸含量 /%
广东潮州归湖镇 20080914 0.22
广东潮州文祠镇 20080915 0.25
广东从化 20080826 0.09
广东从化 20080827 0.11
广东汕头 20080902 0.21
四川合江 20081020 0.23
四川合江 20081023 0.29
广西 20080922 0.16
广西 20081010 0.13
福建闽侯 20080906 0.24
福建闽清 20080907 0.27
3　讨论
3.1　薄层色谱鉴别中 ,采用对照药材除东莨菪内
酯外 ,另外可见一个明显特征蓝色斑点 。因此 ,薄层
色谱鉴别采用对照药材 、对照品双对照 ,既可体现青
果药材的特征 ,又可体现青果药材有效成分的特征。
3.2　在没食子酸含量测定中 ,本文以超声法比较
了水 、50%甲醇 、甲醇 3种不同的提取溶剂 ,结果它
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们均能将青果中没食子酸有效提出 ,但水与 50%甲
醇提出的极性杂质较甲醇多 ,影响没食子酸的色谱
分离 ,故确定甲醇为提取溶剂 。笔者还比较了流动
相中冰醋酸溶液的 3个浓度 0.25%、0.5%、1.0%
对没食子酸的峰形以及分离度的影响 ,结果发现上
述 3个冰醋酸溶液的浓度均能使没食子酸的理论塔
板数达到 4 000以上 ,峰形较好 ,分离度符合要求 ,
因此 ,选择浓度最低的冰醋酸溶液(0.25%)作为本
实验流动相中水相。
3.3　本实验在收集青果药材时发现 ,许多地方药
材市场流通的青果并非橄榄科植物橄榄 Canarium
albumRaeusch.的干燥成熟果实 ,而是西青果(使君
子科植物诃子 TerminaliachebulaRetz.的干燥幼
果)。究其原因 ,可能由于青果(鲜品即为橄榄)被
广泛作为果品 、食品加工之用 ,而西青果具有清热解
毒 、生津利咽等功效 ,与青果功效相仿。西青果能否
替代青果入药 ,需对两者做进一步深入研究 。
参 考 文 献
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RP-HPLC法测定羊蹄根中大黄酚的含量
邹剑成 1 ,邱小梅1 ,王定勇 2
(1.中山市博爱医院药剂科 ,广东 中山 528403;2.广东药学院药科学院 ,广东 广州 510006)
　　摘要　目的:建立羊蹄根中大黄酚的 HPLC测定方法。方法:外标法 , 色谱柱:AgilentZORBAXSC2 C18柱(250
mm×4.6 mm, 5 μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸水溶液(65∶35);检测波长:254 nm;流速:1.0 mL/min;进样量:10
μL;柱温:25℃。结果:大黄酚在 0.85 ～ 5.56μg范围内呈良好的线性关系 , r=0.9998(n=5), 平均回收率为
99.2%, RSD为 1.6%(n=6)。结论:该方法操作简便 、结果准确 、分析快速 , 可作为羊蹄根中大黄酚的定量分析和
质量控制方法。
关键词　羊蹄根;大黄酚;RP-HPLC法;含量测定
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2009)07-1081-03
收稿日期:2009-03-25基金项目:广东省中山市科技计划项目(2007J006)作者简介:邹剑成(1977-),男,主管药师 ,主要从事医院药学研究;Tel:0760-22386580。
　　羊蹄 RumexjaponicusHout.为蓼科酸模属植物
多年生草本 ,广泛分布于我国华东 、华中 、华南等地
区 ,资源丰富 。羊蹄根部为较常用草药 ,味苦 ,性寒 ,
有杀虫 、活血止血 、清热解毒等功效 ,用于治疗皮肤
病 、疥癣 、各种出血及各种炎症 〔1〕。大黄酚是羊蹄
根中的主要化学成分 ,具有止血和抗衰老等药理活
性 〔2, 3〕。目前尚未见用 HPLC法测定羊蹄根中大黄
酚含量的报道 ,本实验建立了 HPLC测定羊蹄根中
大黄酚含量的方法 ,以期为羊蹄根中大黄酚的定量
分析和质量控制提供可靠方法 。
1　仪器与材料
1.1　仪器 　Agilent1100型高效液相色谱仪 ,
G1311A系列四元梯度泵 , G1322A脱气机 , G1314A
VWD可变波长紫外检测器 , 手动进样器 , HP
Rev.A.0501化学工作站 (Agilent公司);SB3200-T
超声波清洗仪(必能信超声上海有限公司);METTL
ER220电子天平(美国梅特勒公司)。
1.2　材料　大黄酚对照品(自制 ,面积归一化法测
定含量为 98.95%);羊蹄根药材于 2008年 8月采
自湖南省洞口县 ,由广东药学院曾令杰博士鉴定为
蓼科酸模属植物羊蹄 RumexjaponicusHout.的根;
甲醇(色谱纯 ,天津康科德科技有限公司);二氯甲
烷 、磷酸等试剂均为分析纯(天津市富宇精细化工
有限公司),水为超纯水 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:AgilentZORBAXSC2 C18
柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);甲醇 -0.2%磷酸水溶
液(65∶35)为流动相;检测波长:254 nm;流速:1.0
·1081·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 32卷第 7期 2009年 7月