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HPLC法测定民族药材广枣中金丝桃苷的含量



全 文 :20mgg -1,RSD为 1. 33%。
2. 7 回收率实验:取上述含量的同批样品 6 份(花提取
物) ,每份约 0. 12g,置 50 mL量瓶中,依次精密加入分别加
入 0. 1mL(每 mL 含绿原酸 4. 20 mg)对照品溶液,挥去溶
剂,按供试品溶液的制备操作,测定含量,计算回收率。绿
原酸平均回收率为 101. 2%,RSD为 2. 63%。
2. 8 样品测定:精密称蒙古山萝卜药材不同部位,按以上
确定的方法制成供试品溶液,测定样品中的含量,不同部位
绿原酸含量分别为,根 0. 46%,茎 0. 32%,花 0. 46%,叶 0.
17%。含量范围 0. 17% ~ 0. 46%之间,根与花卉绿原酸含
量相等,叶含量最低。
3 讨 论
蒙古山萝卜是蒙医治疗肝性疾病的特色药材,绿原酸
为主要成分,上述研究表明:根、茎、花及叶中含较高的绿原
酸成分,绿原酸含量 0. 17% ~ 0. 46%,根与花卉中绿原酸
含量相等,叶中含量最低。
蒙古山萝卜仅花卉作为药材使用,其他部位不用。由
于蒙古山萝卜为药用野生资源,产量少,很大程度限制了该
药材的临床使用。本文研究提示,蒙古山萝卜非药用部位
主要成分与药用部位一直,而生物活性与毒性情况有待深
入研究。
参考文献
[1]白音夫,周雪梅,周长凤,等.蒙古山萝卜有效成分的分
离鉴定及含量测定[J].西北药学,2014,29(6)﹕ 564.
2014 年 12 月 21 日收稿
△内蒙古自治区自然科学基金(编号:2014MS0860)
作者简介:李占海,副主任药师,研究方向:临床药学。
* 通讯作者:白音夫
HPLC法测定民族药材广枣中金丝桃苷的含量△
李占海1 白音夫2* 周雪梅3 盛 惟3
(1.内蒙古自治区人民医院,内蒙古 呼和浩特 010017;
2.内蒙古自治区中医药研究所,内蒙古 呼和浩特 010020;
3.内蒙古自治区食品药品检验所,内蒙古 呼和浩特 010070)
摘 要:目的:建立民族药材广枣中金丝桃苷的 HPLC测定方法。方法:采用 HPLC法测定;流动相为甲醇 -水 -磷酸 -三
乙胺溶液(25:30:0. 1:0. 15) ,流速 1. 0mL·min -1,检测波长为 350nm,柱温为 30℃。结果:金丝桃苷在 0. 007 ~ 0. 464μg范
围内呈良好的线性关系,r = 0. 9999;平均回收率 100. 37%,RSD = 1. 68%(n = 6)。结论:药材中金丝桃苷含量高,成分稳定,
测定方法简便、可靠,重现性好。
关键词:HPLC法;广枣;金丝桃苷
中图分类号:R291. 2 文献标识码:A 文章编号:1006 - 6810(2015)01 - 0046 - 02
本品系藏蒙医习用药材,蒙药名宁芍沙或珠如很 -芍
沙。为漆树科植物南酸枣 Choerospondiasaxillaris(Roxb.)
BurttetHill的干燥成熟果实。别名:五眼果、山枣、山枣子。
性味甘、酸,平。功能与主治:安神养心,消食开胃。用于气
滞血瘀,胸痹作痛,心神不安,消化不良。已载入中国药
典[1]。文献记载广枣含有没食子酸、原儿茶酸、水杨酸、鞣
花酸、谷甾醇、槲皮素、柚皮素、山奈酚葡萄糖苷等化学成
分[2 - 3]。本文采用高效液相色谱(HPLC)法建立了测定广
枣新发现成分金丝桃苷方法。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器:1100 型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司) ,
TJ - 912 型色谱分析平台(太极计算机公司) ,IN - 180 型柱
温箱(上海英泰科技研究所) ,SH6150D 超生波清洗器(上
海昆山) ,电子天平(梅特勒)
1. 2 试药:金丝桃苷对照品(111521 - 200303)由中国药品
生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯;其他均为分析纯试
剂;水为纯化水;广枣市售(购于不同时间,共计 10 批)。
2 实验方法与结果
2. 1 色谱条件:Kromasi - C18 柱(200mm × 4. 6mm,5m) ;
流动相:甲醇 -水 -磷酸 -三乙胺溶液(25:30:0. 1:0. 15) ;
流速:1mL·min -1;温度:30℃;检测波长:350nm nm;进样
量 10L。在此条件下待测组分可达到基线分离。样品中金
丝桃苷与其它组分有较好的分离,见图 1。
图 1 HPLC图谱
A.金丝桃苷对照品;B.供试品;1. 金丝桃苷
64 中国民族医药杂志 2015 年 1 月第 1 期
DOI:10.16041/j.cnki.cn15-1175.2015.01.033
2. 2 对照品溶液的制备:精密称取金丝桃苷对照品适量,
加甲醇制成 0. 58mg·mL - 1 的溶液,即得。
2. 3 供试品溶液的制备:取本品,粉碎,过 100 目筛,精密
称定 30mg,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 10mL,称质量,
超声处理 50min ,放冷,称重,用甲醇补足减失的质量,摇
匀,滤过,取续滤液备用,即得。
2. 4 线性关系考察:精密吸取对照品溶液 0. 1、0. 2、0. 4、
1、2、4、8mL,分别加到 10mL量瓶中,加甲醇稀释到刻度,摇
匀,注入高效液相色谱仪,测定峰面积;以峰面积为纵坐标
(Y) ,进样量为横坐标(X)做线性回归,回归方程为 Y =
2284159 X + 58465,r = 0. 9999。结果表明,金丝桃苷在 0.
0058 ~ 0. 464μg范围内呈良好的线性关系。
2. 5 稳定性实验:取同一份供试品溶液,分别在 0,2,4,8,
12h进样测定,以金丝桃苷峰面积值计算 RSD 为 0. 64%。
结果表明,供试品溶液在 12h内稳定。
2. 6 精密度实验:吸取同一批供试品溶液,在上述色谱条
件下重复进样 6 次,测得金丝桃苷峰面积 RSD为 0. 47%。
2. 7 重复性实验:取同批药材(201111)按 2. 3 项下平行制
备 6 份样品溶液,并按 2. 1 项下测定,金丝桃苷的平均含量
为 0. 420%,RSD = 0. 57%。
2. 8 加样回收率实验:取同批药材(201111)已知含量的
样品 6 份,每份取约 20mg,精密称定,分别精密加入金丝桃
苷对照品溶液 1. 50 mL(0. 087 mg) ,按 2. 3 项下制备样品
溶液,同法操作,测定含量,计算回收率。金丝桃苷平均回
收率为 100. 37%,RSD为 1. 68%
2. 9 样品测定:取购置不同时间的广枣药材,按 2. 3 项下
方法制备供试品溶液,按拟定的色谱条件测定金丝桃苷含
量,结果 198606、0. 376%,198810、0. 312%,199204、0.
257%,199307、0. 284%,199611、0. 321%,199810、0. 349%,
200304、0. 417%,200611、0. 443%,200903、0. 365% ,
201111、0. 420% ,平均含量 0. 354%。
3 讨 论
广枣为蒙医药治疗心脑血管病使用率最高的药材。现
代药理学研究表明,广枣对心脑血管有多种活性。化学成
分研究显示广枣含有丰富的黄酮类化合物及有机酸成分,
其中以原儿茶酸、没食子酸作为广枣的质量标准成分,但含
量低、不具有特异性[2 - 3]。经 HPLC法测定,广枣金丝桃苷
含量 0. 35%以上,而且该成分具有明显的调理心脑血管及
中枢神经系统的作用,是一个较为理想的活性标记物。
不同时间购入的广枣金丝桃苷含量存在差异较小,含
量差异的规律性也不尽明显。金丝桃苷含量在 0. 257% ~
0. 443%范围内。本研究结果为广枣药材的质量评价提供
了依据。
参考文献
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[S]. 一部. 北
京:中国医药科技出版社,2010:41.
[2]白音夫,刘振国.蒙药广枣不同部位原儿茶酸含量测定
[J].内蒙古科技与经济 2003,(8) :73 - 74.
[3]刘莲英,杨瑞瑞,李维凤. 广枣中没食子酸的含量测定
[J]. 西北药学杂志 2002 ,17 (5) :204 - 205.
2014 年 12 月 23 日收稿
Determination of hyperoside in ethnic drug
Choerospondias axillaris(Roxb.)Burttet Hill. by HPLC
LI Zhan - hai1 BAI Yin - fu2※ ZHOU Xue -mei3 SHENG Wei3
(1. People Hospital of Inner Mongol Autonomy - region,Huhaote 010017 China;
2. Institute of Traditional Chinese Medicine of Inner Mongol Autonomy - region,Huhaote 010020,China ;
3. Institute for Food and Drug Control of Inner Mongol Autonomy - region,Huhaote,010070,China)
[Abstract]Objective:To establish anHPLC method for the determination of hyperoside in national medicine
materials Choerospondiasaxillaris(Roxb.)BurttetHill. Method:High performance liquid chromatography was
used,column:Kromasi - C18 (200mm × 4. 6mm,5μm) ;mobile phase:Methanol - water - phosphate acid -
triethylamine(25:30:0. 1:0. 15) ;the detection wavelength:350nm. Results:Hyperoside in the range of 0. 007
~ 0. 464μg,showed good linear relationship. The average recovery of hyperoside was 100. 37% with RSD1.
68% . Conclusion:Hyperoside content high,stable composition,determination method is simple,reliable ,re-
producible and can be used for the evaluation quality of Choerospondiasaxillaris(Roxb.)BurttetHill.
[Key words]national medicine materials ;Choerospondias axillaris(Roxb.)Burttet Hill. hyperoside
742015 年 1 月第 1 期 中国民族医药杂志