全 文 ：EGF的影响，而胃粘膜细胞的重建和修复是一个动态且复杂的
过程，黄芪总苷对上述指标的作用机制有待进一步研究。
参考文献
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bility to NSAID injury． J Clin Invest，2002;109(2)∶ 193 ～ 204
Effect of astragnaloside on the TFF1 and EGF in gastric mucosa with the spleen deficiency rats
Mi Hong1，Li Yanwu2，Wang Xiaoyan1，Wu Yanli2，Wang Ｒujun2，Liu Fenbin1
(1 the First Affiliated Hospital，2 Piwei Institute，Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou 510405)
Objective:To investigate the effects of astragaloside(AST)on the TFF1 and EGF in gastric mucosa of spleen deficiency rats under
stress． Methods:70 SD rats were selected and randomly divided into 7 groups:the control group，the spleen deficiency group，the model
group，the AST (high dose-200mg /kg，middle dose-100mg /kg，and low dose-50 mg /kg)group and the Buzhongyiqi pill group． The rhubarb
decoction was used to establish spleen deficiency model，then water immersion and restraint method was used to establish the stress model．
The protein express of the TFF1 and EGF were measured by ELISA;and the mＲNA expression of the TFF1 and EGF were detected by ＲT-
PCＲ． Ｒesults:Comparing with the control group，the protein and mＲNA expression of TFF1 were decreased in the deficiency group (P ＜ 0．
05)，and the mＲNA expression of EGF were lower (P ＜ 0． 05) ;while the protein and mＲNA expression of TFF1 in the model group were de-
creased (P ＜ 0． 05) ，the mＲNA expression of the EGF were increased (P ＜ 0． 05)． Comparing with the model group，the mＲNA expression
of the TFF1，EGF in the AST (high)group and the Buzhongyiqi pill group were increased (P ＜ 0． 05)． Conclusion:One of the protection
mechanisms of AST on gastric mucosal is perhaps concerned with the activity TFF1 and EGF．
Key words astragaloside(黄芪总苷);TFF;EGF
瘤果黑种草子总皂苷治疗类风湿性关节炎的作用研究
*
王林林，史玉柱，刘 燕，王 雪，杨巧丽，姚 华，黄 华，徐 芳＊＊
(新疆药物研究所，乌鲁木齐 830004)
摘 要 目的:考察瘤果黑种草子总皂苷提取物抗炎镇痛的药效作用，为其治疗类风湿性关节炎提供依据。方法:采用二甲
苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠扭体、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型，Freund＇s完全佐剂致大鼠原发性、继发性关节炎
损害和牛Ⅱ型胶原诱导大鼠胶原性关节炎等模型，对照观察瘤果黑种草子总皂苷提取物的抗炎、镇痛等作用。结果:瘤果黑种草子
总皂苷提取物在 6 ～ 24mg /kg均能能明显减少冰醋酸致小鼠扭体反应次数，均能减轻二甲苯致小鼠耳肿胀，均能抑制小鼠腹腔毛细
血管通透性增高，均在 24mg /kg剂量的抑制率高于野木瓜片;在 4． 2 ～ 16． 6mg /kg对完全佐剂所致大鼠原发性和继发性炎症及Ⅱ型
胶原诱导的大鼠胶原性关节炎均有一定抑制作用，佐剂所致大鼠原发性损害瘤果黑种草子总皂苷 8． 3 ～ 16． 6mg /kg 剂量作用均较
野木瓜片组好，病理显示与模型组比较，各给药组炎性症状均有所减轻，但野木瓜片组与瘤果黑种草子总皂苷各剂量组没有显著性
87 中药药理与临床 2014;30(3)
* 基金项目:新疆维吾尔自治区重大科技专项( 201130105 － 4) ＊＊通讯作者
差异;佐剂所致大鼠继发性损害 16． 6mg /kg剂量组则在第 25d ～ 29d能明显减轻大鼠左后足肿胀度;胶原性关节炎 16． 6mg /kg 剂量
组左后足和右后足肿胀度在致炎后第 17 ～ 26d均低于野木瓜片组。结论:瘤果黑种草子总皂苷提取物有良好的抗炎镇痛和治疗关
节炎的作用。
关键词 瘤果黑种草子;总皂苷;类风湿性关节炎
瘤果黑种草子总皂苷是从毛茛科黑种草属植物瘤果黑种
草 Nigella glandulifera Freyn et Sint． 种子中分离出的重要化合
物，瘤果黑种草子作为维吾尔族药收入 1977 年至今各版《中国
药典》。近年来，对瘤果黑种草子化学成分研究较多［1，2］，近年
的研究表明瘤果黑种草籽具有多种生理活性如:抗菌、抗肿瘤、
抗氧化、抗血小板聚集、降脂、降糖、保肝作用等［3 ～ 6］。对类风湿
性关节炎(Ｒheumatoid Arthritis，ＲA)的治疗作用的研究尚未见
报道。本课题观察了瘤果黑种草子总皂苷的抗炎镇痛作用及
对佐剂和胶原诱导关节炎大鼠的足肿胀的影响。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 瘤果黑种草子购自乌鲁木齐市维吾尔药材市
场，产地为新疆阿克苏地区，由新疆维吾尔自治区药物研究所
何江副研究员鉴定为毛莨科植物瘤果黑种草(N． glandulifera
Freyn et Sint．)的干燥成熟种子。瘤果黑种草子总皂苷的含量
为 66． 76%，提取率:1． 2%，由新疆维吾尔自治区药物研究所植
化室提供。野木瓜片，贵港市冠峰制药有限公司，批准文号:国
药准字 Z20063830，每片含野木瓜干浸膏 0． 4g，口服，一次 4 片，
一日 3 次。
1． 2 动物 昆明种小鼠、Wistar 大鼠，♀♂兼用，由新疆实验
动物研究中心提供，动物合格证号:SCXK(新)2011-0001，及由
新疆医科大学实验动物中心提供，动物合格证号:SCXK(新)
2011-0004，雌雄分笼常规饲养。
1． 3 试剂 Freund＇s完全佐剂，Sigma 公司，批号 038K8726;牛
Ⅱ型胶原，C7806，Sigma公司，批号 110M7002V;卡介苗，由中国
生物制品药品检定所提供，批号:2012-1。
1． 4 仪器 足趾容量测量仪，型号:YLS-TC，济南益延科技发
展有限公司。
1． 5 方法
1． 5． 1 对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响 取小鼠 50 只，雌雄
各半，体重 18 ～ 22 g，依体重、性别随机分为 5 组，即模型组、野
木瓜片组、瘤果黑种草子总皂苷提取物低、中、高剂量组，各组均
按设定剂量灌胃(ig)给药，模型组 ig 等量的生理盐水，给药体
积 0． 1ml /10g，每天 1 次，连续 3 天，于末次给药后 1h 50min，每
鼠腹腔注射(ip)0． 7%冰醋酸 0． 2ml，立即观察记录小鼠 15min
内扭体次数(扭体反应:腹部内凹、躯干与后腿伸张、臀部抬高、
身体左右扭动)，计算抑制率。
1． 5． 2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取小鼠 50 只，雌雄各
半，体重 18 ～ 22 g，实验分组及给药同 1． 5． 1，于末次给药后 1． 5
h，将 20μl二甲苯均匀涂抹于各组小鼠右耳廓两面致炎，以左耳
作对照。30 min 后脱颈椎处死小鼠，用直径 6 mm 打孔器分别
在左右耳对称部位打下圆形耳片，精密称重，计算肿胀度和肿
胀抑制率。每组小鼠耳廓肿胀度以每鼠左右耳重量之差的平
均值来表示。
1． 5． 3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 取小鼠 60 只，雌
雄各半，体重 18 ～ 22g，依体重、性别随机分为 5 组，即模型组、
野木瓜片组、瘤果黑种草子总皂苷低、中、高剂量组，各组均按设
定剂量灌胃(ig)给药，模型组 ig 等量的蒸馏水，给药体积 0．
1ml /10g，每天 1 次，连续 3 天，于末次给药后 1． 5h 各组小鼠尾
静脉注入 0． 5%的伊文思蓝生理盐水溶液 0． 1ml /10g，并立即 ip
0． 6%的乙酸生理盐水溶液，0． 2ml /只。20min 后处死小鼠，用
6ml NS注射洗涤腹腔，剪开腹部，吸出冲洗液，3000rpm 离心
15min，将上清液稀释至 2 倍，于 590nm处测吸收度值，进行组间
均数 t检验，计算小鼠腹腔毛细血管通透性增高的抑制率。
1． 5． 4 对大鼠佐剂性关节炎原发性损害的影响 取大鼠 60
只，雌雄各半，体重 180 ～ 220g，按体重随机分为 6 组，分别为正
常对照组、模型组、野木瓜片组、和瘤果黑种草子总皂苷低、中、
高剂量组。先以足趾容积测量仪测量每组大鼠右后足趾容积，
作为给药前基础值。各给药组按设定剂量 ig 给药，每天 1 次，
连续 20 天，正常对照组和模型组 ig等量的蒸馏水，除正常对照
组外，首次给药后 1 小时，其余各组均在右后足趾关节处皮内注
射 Freund＇s完全佐剂 0． 1ml。自注射后第 2 天起，隔天以足趾容
积测量仪测量大鼠右后足趾容积，共测 10 次。计算各组动物在
不同时间的足跖肿胀度，比较各给药组的药效。观察受试药对
佐剂性关节炎原发性损害的影响。实验结束后处死大鼠，剥离
切取各组大鼠足膝关节滑膜组织，立即放入 10%福尔马林溶液
中浸泡，常规梯度乙醇脱水，石蜡包埋，切片，苏木素-伊红(HE)
染色，光学显微镜下观察滑膜组织学变化。
1． 5． 5 对大鼠佐剂性关节炎继发性损害的影响 取大鼠 60
只，雌雄各半，体重 150 ～ 200g，分组同 1． 5． 4。先以足趾容积测
量仪测量每组大鼠左后足趾容积，除正常对照组外，其余各组均
在右后足跖皮内注射 Freund＇s 完全佐剂 0． 1ml，致炎后第 18 天
各给药组开始按设定剂量 ig给药，正常对照组和模型组 ig等量
的蒸馏水，连续 12 天，给药后各组均隔天以足趾容积测量仪测
量左后足趾容积，共测 6 次。计算各组动物在不同时间足跖肿
胀度，比较各给药组的药效。
1． 5． 6 对大鼠胶原诱导型关节炎(CIA)的影响 取牛Ⅱ型胶
原(CⅡ)溶于 0． 1mol /L醋酸中，在 4℃下搅拌使之充分溶解，终
浓度为 2mg /ml，置 4℃冰箱中过夜。冰浴下滴加等体积费氏完
全佐剂(CFA)，混合使充分乳化，制成 CⅡ乳剂。取大鼠 60 只，
雌雄各半，体重 120 ～ 150g，分组同 1． 5． 4，先以足趾容积测量仪
测量每组大鼠左、右后足趾容积。除正常组外各组均于右足足
垫皮内注射胶原乳化液 0． 1ml 致敏，正常组给予同等剂量的生
理盐水，1 周后于大鼠尾跟部用相同乳剂皮内注射 1 次。造模
成功后，空白组和模型对照组给予蒸馏水(1ml /100g)ig 给药，
其余各组分别给予相应药液，连续用药 2 周。以大鼠左后足出
现红肿为发病时间，每隔 2d，用足趾容积测量仪测定双后足趾
容积变化，直至处死。以同侧足趾给Ⅱ型胶原前、后足趾容积之
差为关节肿胀度［7 ～ 10］。
2 结果
2． 1 对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响 与模型组比较，野木
97中药药理与临床 2014;30(3)
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.03.025
瓜片、瘤果黑种草子总皂苷提取物在 6 ～ 24mg /kg 对冰醋酸致
小鼠扭体反应均有明显抑制作用，且瘤果黑种草子总皂苷提取
物 24mg /kg剂量的抑制率高于野木瓜片，见表 1。
表 1 瘤果黑种草子总皂苷提取物对冰醋酸致小鼠扭体反应的影
响(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
扭体次数
(次)
抑制率
(%)
模型对照 10 71 ± 19
野木瓜片 649 10 33 ± 8＊＊ 54． 5
瘤果黑种草子总皂苷 6 10 38 ± 8＊＊ 46． 5
12 10 33 ± 9＊＊ 53． 6
24 10 29 ± 8＊＊ 59． 2
与模型组比较 * P ＜0． 05，＊＊ P ＜0． 01(下同)
2． 2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 与模型组比较，野木瓜
片、瘤果黑种草子总皂苷提取物在 6 ～ 24mg /kg 对二甲苯致小
鼠耳肿胀均有一定的抑制作用，其中野木瓜片组、瘤果黑种草
子总皂苷提取物 12 ～ 24mg /kg 剂量样品抑制作用明显，且瘤果
黑种草子总皂苷提取物 24mg /kg 剂量的抑制率高于野木瓜片，
见表 2。
表 2 瘤果黑种草子总皂苷提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
肿胀度
(mg)
抑制率
(%)
模型对照 10 9． 8 ± 1． 9
野木瓜片 649 10 6． 8 ± 2． 2＊＊ 30． 3
瘤果黑种草子总皂苷 6 10 8． 2 ± 1． 8 16． 6
12 10 7． 3 ± 1． 8＊＊ 25． 9
24 10 6． 3 ± 1． 6＊＊ 35． 5
2． 3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 与模型组比较，野木
瓜片组、瘤果黑种草子总皂苷提取物在 6 ～ 24mg /kg均能抑制冰
醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高，其中野木瓜片组、瘤果黑
种草子总皂苷提取物 24mg /kg剂量组作用明显，瘤果黑种草子总
皂苷提取物 12mg /kg剂量组作用较明显，且瘤果黑种草子总皂苷
提取物 24mg /kg剂量的抑制率高于野木瓜片组，见表 3。
表 3 瘤果黑种草子总皂苷提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的
影响(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
吸光度
(A)
抑制率
(%)
模型对照 12 0． 65 ± 0． 13
野木瓜片 649 12 0． 48 ± 0． 05＊＊ 26． 9
瘤果黑种草子总皂苷 6 12 0． 54 ± 0． 11 17． 9
12 12 0． 50 ± 0． 08* 23． 9
24 12 0． 46 ± 0． 03＊＊ 29． 4
2． 4 对大鼠佐剂性关节炎原发性损害的影响 由表 4 可见，与
正常对照组比较，模型组注射佐剂后第 2d ～20d右后足肿胀度明
显增加，说明造模成功。与模型组比较，各给药组 4． 2 ～ 16． 6mg /
kg和野木瓜片在观察期内对足肿胀均有抑制作用，瘤果黑种草
子总皂苷 8． 3 ～16． 6mg /kg剂量作用均较野木瓜片组好。
病理结果显示，模型组呈现滑膜及纤维组织增生水肿，少
量散在炎细胞浸润。滑膜血管增生、扩张、充血;阳性对照组滑
膜细胞轻度增生，滑膜层充血、水肿和炎细胞浸润明显，血管扩
张;瘤果黑种草子总皂苷不同剂量组均有滑膜细胞轻度增生，
细胞间纤维组织增生、水肿和不同程度的炎细胞浸润。与模型
组比较，各给药组炎性症状均有所减轻，但野木瓜片组与瘤果
黑种草子总皂苷各剂量组没有显著性差异，且瘤果黑种草子总
皂苷各剂量组间也没有剂量依赖性，见图 1。
表 4 瘤果黑种草子总皂苷对大鼠佐剂性关节炎右后足原发性损害的影响(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg /kg)
致炎后不同时间(d )肿胀度(ml)
2d 4d 6d 8d 10d 12d 14d 16d 18d 20d
正常对照 0． 01 ± 0． 02＊＊0． 03 ± 0． 04＊＊0． 04 ± 0． 03＊＊0． 06 ± 0． 05＊＊0． 10 ± 0． 08＊＊0． 12 ± 0． 10＊＊0． 14 ± 0． 13＊＊0． 16 ± 0． 15＊＊0． 17 ± 0． 17＊＊0． 19 ± 0． 06＊＊
模型对照 1． 09 ± 0． 33 0． 91 ± 0． 33 0． 71 ± 0． 29 0． 65 ± 0． 31 1． 06 ± 0． 27 0． 76 ± 0． 30 0． 69 ± 0． 26 0． 74 ± 0． 25 0． 68 ± 0． 18 0． 83 ± 0． 22
野木瓜片 450 0． 96 ± 0． 38 0． 85 ± 0． 21 0． 66 ± 0． 22 0． 57 ± 0． 21 0． 73 ± 0． 21＊＊0． 64 ± 0． 24 0． 57 ± 0． 28 0． 69 ± 0． 34 0． 63 ± 0． 31 0． 64 ± 0． 11
瘤果黑种草子总皂苷 4． 2 1． 03 ± 0． 30 0． 84 ± 0． 34 0． 60 ± 0． 33 0． 59 ± 0． 32 0． 76 ± 0． 38 0． 70 ± 0． 28 0． 63 ± 0． 29 0． 63 ± 0． 25 0． 59 ± 0． 28 0． 61 ± 0． 28
8． 3 0． 90 ± 0． 24 0． 75 ± 0． 29 0． 53 ± 0． 34 0． 53 ± 0． 31＊＊0． 76 ± 0． 37 0． 59 ± 0． 29 0． 42 ± 0． 35* 0． 52 ± 0． 44 0． 45 ± 0． 38* 0． 55 ± 0． 41
16． 6 0． 89 ± 0． 41 0． 68 ± 0． 30 0． 51 ± 0． 22 0． 52 ± 0． 33 0． 73 ± 0． 40* 0． 57 ± 0． 36 0． 47 ± 0． 31 0． 46 ± 0． 27* 0． 40 ± 0． 25* 0． 45 ± 0． 22*
a:正常对照; b:模型对照; c:野木瓜片 450 mg /kg; d:瘤果黑种草子总皂苷 4． 2mg /kg; e:瘤果黑种草子总皂苷 8． 3mg /kg; f:瘤果黑种草子总皂苷 16． 6mg /kg
图 1 瘤果黑种草子总皂苷对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜病理组织学的影响( HE，× 100)
08 中药药理与临床 2014;30(3)
2． 5 对大鼠佐剂性关节炎继发性损害的影响 由表 5 可见，与
正常对照组比较，模型组注射佐剂后第 20d ～ 30d左后足肿胀度
明显增加，说明造模成功。与模型组比较，各给药组在 4． 2 ～
16． 6mg /kg和野木瓜片大鼠足肿胀程度在观察期有所减轻，在
给药后期尤为明显。16． 6mg /kg 剂量组则在第 25d ～ 29d 能明
显减轻大鼠左后足肿胀度，从抑制率来看，在给药期内，给药时
间越长，整体上其抑制作用越明显。
表 5 瘤果黑种草子总皂苷对大鼠佐剂性关节炎左后足继发性损害的影响(珋x ± s，n = 10)
组 别
剂量
(mg /kg)
致炎后不同时间(d)的肿胀度(ml)
19d 21d 23d 25d 27d 29d
正常对照 0． 15 ± 0． 06* 0． 18 ± 0． 07* 0． 20 ± 0． 06＊＊ 0． 21 ± 0． 07＊＊ 0． 22 ± 0． 08＊＊ 0． 24 ± 0． 10＊＊
模型对照 0． 33 ± 0． 10 0． 36 ± 0． 09 0． 43 ± 0． 14 0． 43 ± 0． 09 0． 42 ± 0． 10 0． 41 ± 0． 09
野木瓜片 450 0． 30 ± 0． 13 0． 33 ± 0． 10 0． 37 ± 0． 17 0． 35 ± 0． 14 0． 31 ± 0． 14* 0． 27 ± 0． 14＊＊
瘤果黑种草子总皂苷 4． 2 0． 28 ± 0． 14 0． 32 ± 0． 13 0． 38 ± 0． 17 0． 34 ± 0． 10* 0． 31 ± 0． 11* 0． 30 ± 0． 19
8． 3 0． 28 ± 0． 11 0． 30 ± 0． 11 0． 38 ± 0． 14 0． 35 ± 0． 15 0． 30 ± 0． 13* 0． 30 ± 0． 15*
16． 6 0． 27 ± 0． 07 0． 32 ± 0． 09 0． 36 ± 0． 11 0． 30 ± 0． 13＊＊ 0． 29 ± 0． 13* 0． 27 ± 0． 13＊＊
2． 6 对大鼠胶原诱导型关节炎(CIA)的影响 从表 6、7 可看
出，模型组大鼠于致炎后第 2 天右足即出现原发足肿胀，第 14d
左足出现继发足肿胀，致炎约 24d 后肿胀度达峰值。与模型组
相比，给药组在 4． 2 ～ 16． 6mg /kg和野木瓜片对其均有明显抗炎
作用，且抑制作用有一定的剂量相关性，16． 6mg /kg剂量组左后
足和右后足肿胀度在致炎后第 17 ～ 26d均低于野木瓜片组。
表 6 瘤果黑种草子总皂苷对大鼠胶原性关节炎的影响(右后足)(珋x ± s，n = 10)
组 别
剂量
(mg /kg)
致炎后不同时间(d)的肿胀度(ml)
14d 17d 20d 23d 26d
正常对照 0． 37 ± 0． 05 0． 40 ± 0． 08 0． 50 ± 0． 12 0． 60 ± 0． 10 0． 73 ± 0． 15
模型对照 1． 63 ± 0． 19 1． 58 ± 0． 24 1． 72 ± 0． 22 1． 73 ± 0． 20 1． 73 ± 0． 18
野木瓜片 450 1． 39 ± 0． 22* 1． 16 ± 0． 22＊＊ 1． 05 ± 0． 20＊＊ 1． 08 ± 0． 16＊＊ 1． 02 ± 0． 18＊＊
瘤果黑种草子总皂苷 4． 2 1． 44 ± 0． 24 1． 29 ± 0． 15＊＊ 1． 35 ± 0． 13＊＊ 1． 26 ± 0． 17＊＊ 1． 24 ± 0． 16＊＊
8． 3 1． 44 ± 0． 20* 1． 26 ± 0． 16＊＊ 1． 13 ± 0． 19＊＊ 1． 13 ± 0． 20＊＊ 1． 10 ± 0． 19＊＊
16． 6 1． 33 ± 0． 21＊＊ 1． 09 ± 0． 22＊＊ 1． 03 ± 0． 19＊＊ 0． 99 ± 0． 18＊＊ 0． 95 ± 0． 19＊＊
表 7 瘤果黑种草子总皂苷对大鼠胶原性关节炎的影响(左后足)(珋x ± s，n = 10)
组 别
剂量
(mg /kg)
致炎后不同时间(d)的肿胀度(ml)
14d 17d 20d 23d 26d
正常对照 0． 38 ± 0． 06 0． 45 ± 0． 11 0． 52 ± 0． 10 0． 53 ± 0． 12 0． 71 ± 0． 14
模型对照 0． 92 ± 0． 22 0． 96 ± 0． 20 1． 03 ± 0． 20 1． 06 ± 0． 17 1． 07 ± 0． 20
野木瓜片 450 0． 76 ± 0． 12* 0． 62 ± 0． 15＊＊ 0． 67 ± 0． 14＊＊ 0． 61 ± 0． 11＊＊ 0． 62 ± 0． 15＊＊
瘤果黑种草子总皂苷 4． 2 0． 84 ± 0． 13 0． 72 ± 0． 15＊＊ 0． 77 ± 0． 15＊＊ 0． 68 ± 0． 16＊＊ 0． 68 ± 0． 18＊＊
8． 3 0． 79 ± 0． 17* 0． 67 ± 0． 19＊＊ 0． 68 ± 0． 18＊＊ 0． 61 ± 0． 13＊＊ 0． 58 ± 0． 13＊＊
16． 6 0． 79 ± 0． 11＊＊ 0． 58 ± 0． 14＊＊ 0． 65 ± 0． 10＊＊ 0． 57 ± 0． 12＊＊ 0． 55 ± 0． 16＊＊
3 讨论
以上实验结果表明，瘤果黑种草子总皂苷对佐剂性关节炎
原发性、继发性损害和胶原性关节炎均有保护作用，瘤果黑种
草子总皂苷能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，明显减少冰醋酸致小
鼠扭体反应次数，以上实验结果提示瘤果黑种草子总皂苷有良
好的抗炎镇痛和治疗关节炎的作用，为其临床应用提供了药理
学依据。
ＲA是一种以关节滑膜炎为特征的慢性自身免疫性疾病，
病理表现为反复发作的慢性滑膜炎［11］，目前的研究认为，类风
湿关节炎的发病多与免疫系统功能紊乱有密切关系，因此我们
在证实瘤果黑种草子总皂苷的抗炎、镇痛药效作用的基础上，
将进一步考察其是否是通过对免疫系统的抑制作用发挥其主
要药效学作用。
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Evaluation on arthritis of total sapionins from Nigella glandulifera seeds
Wang Linlin，Shi Yuzhu，Liu Yan，Wang Xue，Yang Qiaoli，Yao Hua，Huang Hua，Xu Fang
(Xinjiang Institute of Materia Medica，Urumqi 830004)
Aim:To study the pharmacodynamics of total sapionins from Nigella glandulifera seeds(NGS)on anti-inflammatory analgesic，provide
the basis for the treatment of arthritis． Methods:The anti-inflammatory and analgesic effects were studied by applying the models of oxylene-
induced swelling of ear in mice，acetic acid-induced twisting reaction in mice，higher capillary permeability was caused by acetic acid，the
primary and secondary arthritis of rats induced by the complete Freund＇s adjuvant and CIA model in rats was aroused by injection of bovine
collagen type Ⅱ(BCⅡ)emulsion． Ｒesults:The total sapionins from NGS in the 6 ～ 24mg /kgod dose could obviously decrease twisting times
of mice caused by acetic acid，alleviate the ear edema induced by oxylene in mice，and nhibit increasing capillary permeability，inhibition rate
of all in the 24mg /kgod dose was higher than Ye Mugua tablet． It in the 4． 2 ～ 16． 6mg /kgod dose could inhibit the primary，secondary and
CIA inflammation of rats induced by CFA and BCⅡ，respectively． Its effects in the 8． 3 ～ 16． 6mg /kgod dose were better than Ye Mugua tab-
let to the primary arthritis of rats induced by the CFA． Pathology displayed inflammatory symptoms of the treatment group were all reduced
than the model group，but there was no significant difference in positive control group and test group． It could significantly reduce left hind
paw swelling of the rat in 16． 6mg /kgod dose at 25d ～ 29d to the secondary arthritis of rats induced by the CFA． The left and right hind paw
swelling in 16． 6mg /kgod dose were lower than Ye Mugua tablet at 17d ～ 26d to arthritis of rats induced by BCⅡ． Conclusion:The total sap-
ionins from NGS has the anti-inflammatory analgesic and effects．
Key words Nigella glandulifera seeds(瘤果黑种草子);total sapionins;arthritis
开口箭皂苷诱导肿瘤细胞凋亡研究
*
谢锦艳1，张东东1，李玉泽1，李 真1，宋 蓓1，乔蓉霞2，刘海静2，宋小妹1＊＊
(1陕西中医学院，药学院，咸阳 712046;2陕西省食品药品检验所，西安 710065)
摘 要 目的:研究开口箭皂苷对肿瘤细胞凋亡的影响，并对其机制进行研究。方法:采用 MTT法检测开口箭皂苷对体外培
养的肿瘤细胞系 HepG2、A549 和 SGC-7901 增殖的影响，利用荧光染色技术及流式细胞术研究开口箭皂苷对 HepG2 细胞周期和细
胞凋亡的影响，利用 Western blotting技术检测 Bax、Bcl-2、P53 蛋白的表达情况。结果:开口箭皂苷对 HepG2 肝癌细胞具有显著的抑
制作用，其 24、48 及 72 h对 HepG2 细胞的半数抑制浓度( IC50 ) 分别为 13． 99 μg /ml、11． 78 μg /ml 和 10． 01 μg /ml，且呈一定的量效
关系和时效关系; 对 A549 肺癌细胞的 72h的 IC50为 23． 68 μg /ml，而对 SGC-7901 胃癌细胞的增殖无明显抑制作用。流式细胞仪检
测结果显示，HepG2 细胞经浓度为 10、15 和 20 μg /ml的开口箭皂苷处理 24h后，S期细胞的比例分别为 28． 81%、34． 96%、46． 57% ;
凋亡细胞的比例分别为 30． 06%、30． 32%和 40． 34%。Western blotting结果显示，随着开口箭皂苷浓度的增加，Bax、P53 蛋白的表达
量增加，而 Bcl-2 的表达量减少。结论:开口箭皂苷可抑制 HepG2 和 A549 细胞的增殖并诱导 HepG2 细胞凋亡，其机制可能与开口
箭皂苷上调 P53 蛋白表达，从而影响 Bax和 Bcl-2 表达，使细胞阻滞于 S期，并最终导致细胞凋亡。
关键词 开口箭;人肝癌细胞株(HepG2);人肺腺癌细胞(A549);人胃癌细胞株(SGC7901);凋亡
开口箭(Tupistra chinensis Baker．)为百合科开口箭属植物，
是著名的太白七药之一，具有清热解毒、清热利咽、散瘀止痛
等多种功效［1 ～ 3］，主治劳热咳嗽、跌打损伤、风湿痹痛等症，民间
用于治疗咽喉炎、扁桃体炎等。现代研究发现开口箭具有祛痰、
28 中药药理与临床 2014;30(3)
* 基金项目:陕西省科技统筹创新计划项目( 2013KTCQ03 － 14) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.03.026