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新疆准噶尔铁线莲不同部位提取液抑菌活性初步研究



全 文 :117※基础研究 食品科学 2010, Vol. 31, No. 09
新疆准噶尔铁线莲不同部位提取液抑菌活性
初步研究
古丽巴哈尔·阿巴拜克力
(新疆师范大学生命科学学院,新疆 乌鲁木齐 830054)
摘 要:用水和 70%乙醇从准噶尔铁线莲不同部位中提取其活性成分,探讨其抑菌作用。结果表明:叶水提物
的MIC值分别为大肠杆菌 5g/100mL,金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌为 3g/100mL、枯草杆菌为 1g/100mL;叶醇
提物的MIC值分别为大肠杆菌 3g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为 0.5g/100mL、短小芽孢杆菌 1g/100mL。
茎水提物的MIC值分别为大肠杆菌 10g/100mL,金黄色葡萄球菌7g/100mL、短小芽孢杆菌、枯草杆菌为 5g/100mL。
茎醇提物的MIC值分别为大肠杆菌 7g/100mL,金黄色葡萄球菌 5g/100mL,枯草杆菌、短小芽孢杆菌为 3g/100mL。
花水提物的MIC值分别为大肠杆菌 5g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为 3g/100mL,短小芽孢杆菌 1g/100mL。
花醇提物的MIC值分别为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌为 1g/100mL,枯草杆菌为 0.5g/100mL。果
实水提物的MIC值分别为大肠杆菌、短小芽孢杆菌为 5g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为 3g/100mL;果实
醇提物的MIC值分别为大肠杆菌为 3g/100mL,金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草杆菌为 1g/100mL。
关键词:准噶尔铁线莲;不同部位;提取物;抑菌活性
Antibacterial Activities of PWE and PAE from Clematis songarica Bge. in Xinjiang
Gulibahaer·ABABAIKELI
(College of Life Science, Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China)
Abstract :Antibacterial activities of water extract (PWE) and alcohol extract (PAE, 70g/100mL ethanol) from Clematis songarica
Bge. were evaluated. Results indicated that minimum inhibition concentrations (MICs) of PWE from leaves were 5g/100mL for
Echerichia coli, 3g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus pumilus, and 1g/100mL for Bacillus subtilis. MICs of PAE from
leaves were 3g/100mL for Echerichia coli, 0.5 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, and 1 g/100mL for Bacillus
pumilus. MICs of PWE from stems were 10 g/100mL for Echerichia coli, and 7 g/100mL for Staphylococcus aureus, and 5 g/
100mL for Bacillus pumilus and Bacillus subtilis. MICs of PAE from stems were 7g/100mL for Echerichia coli, 5 g/100mL for
Staphylococcus aureus, and 3 g/100mL for Bacillus subtilis and Bacillus pumilus. MICs of PWE from flowers were 5 g/100mL
for Echerichia coli, 3 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, and 1g/100mL for Bacillus pumilus. MICs of PAE
from flowers were 1 g/100mL for Echerichia coli, Staphylococcus aureus and Bacillus pumilus, and 0.5 g/100mL for Bacillus subtilis.
MICs of PWE from fruits were 5 g/100mL for Echerichia coli and Bacillus pumilus, and 3 g/100mL for Staphylococcus aureus
and Bacillus subtilis. MICs of PAE from fruits were 3 g/100mL for Echerichia coli, and 1g/100mL for Staphylococcus aureus,
Bacillus pumilus and Bacillus subtilis.
Key words:Clematis songarica Bge.;different parts;extract;antimicrobial activity
中图分类号:TS201.3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2010)09-0117-03
收稿日期:2009-10-29
作者简介:古丽巴哈尔·阿巴拜克力(1969—),女,副教授,研究方向为植物有效成分分析。E-mail:gvlbahar.a@163.com
准噶尔铁线莲(Clematis songarica Bge.)毛茛科铁线
莲属,主要产于我国新疆、内蒙古西部,国外在蒙古、
中亚荒漠地区也有分布。生长于荒漠低山麓前洪积扇,
石砾质冲积堆以及荒漠河岸。直立小灌木,高 4 0~
120cm。单叶对生或簇生;花序为聚伞花序或圆锥状聚
伞花序,顶生;白色或淡黄色,花期 6~7月,果期 7~
8 月[ 1 ]。
迄今国内外对准噶尔铁线莲植物化学成分的研究比
较少,有关其水提液和醇提液抑菌效果的比较研究则尚
未见报道。因此,采用不同提取方法从准噶尔铁线莲
. . ..
2010, Vol. 31, No. 09 食品科学 ※基础研究118
不同部位中提取有效抗菌成分做抑菌实验,不仅有望筛
选到具有抗菌成分的药材新资源,也可获知有效的提取
方法。这对评价准噶尔铁线莲的药用价值,开发利用
这一自然资源具有实际意义[2 ]。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
准噶尔铁线莲,于 2008 年 8月采自新疆乌鲁木齐
县永丰乡农田田埂。将不同部位晾干、粉碎, 备用。
蛋白胨、琼脂、 牛肉膏、蔗糖、葡萄糖、乙醇、
Na Cl、N aO H、H Cl。
1.2 菌种与培养基
大肠肝菌(Es c he r i c h ia c o l i )、金黄色葡萄球菌
(Staphylococcus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、
短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、以下分别简称 E.c、
S . a、B . s、B . p。以上菌种均由新疆大学提供。
牛肉膏蛋白胨培养基[3 ]。
1.3 方法
1.3.1 不同部位水提取液的制备[4]
分别称取准噶尔铁线莲叶、茎、花以及果实各
5g,分别加 10倍样量的蒸馏水 50mL,90℃浸提 3h,然
后将样品趁热过滤收集滤液,滤渣中加入 25mL蒸馏水同
条件提取 2.5h,再次过滤并合并两次滤液,将滤液置入
旋转蒸发仪中旋转蒸发浓缩至黏稠状,然后用水溶解并定
容至 10mL制成水悬浊液,分别获得 0.5g/mL的水提取液。
1.3.2 不同部位醇提取液的制备
分别称取准噶尔铁线莲叶、茎、花以及果实各
5g,分别按照各自的最佳提取工艺进行浸提,然后将
样品趁热过滤收集滤液,将滤液置入旋转蒸发仪中旋转
蒸发浓缩至黏稠状,然后用水溶解并定容至 10mL制成
水悬浊液,分别获得 0.5g/mL的乙醇提取液。
1.3.3 菌悬液的制备[5]
将各供试菌菌种接种于普通营养琼脂斜面培养基上,
37℃培养 20~22h活化,然后将斜面活化好的各供试菌体
置于装有 9mL无菌生理盐水的试管中,振荡摇匀,再分
别稀释制成含菌量为 106~108CFU/mL的菌悬液。
1.3.4 抑菌实验
1.3.4.1 抑菌效力的测定[6]
将灭菌过的培养基制成平板,吸取 0.2mL菌悬液均
匀涂抹到平板上。将各浸渍过准噶尔铁线莲叶、茎、
花、果实水提液和醇提液中的滤纸圆片(6mm)风干,放
到每个涂有菌液的平板上,等距离放 3片,每个实验平
行 3 次,并用无菌水作空白对照,确定抑菌效果。在
37℃条件下培养 24h后测定抑菌圈直径大小,取平均值。
1.3.4.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定
配制足够量的牛肉膏蛋白胨液体培养基参照文献[7]
进行测定。以上操作均在无菌条件下进行。
3.4.3 最低杀菌浓度(MBC)的测定
将提取物浓度高于MIC(包括MIC)的各试管或培养
皿继续培养 24h,观察生长情况。以仍无菌生长的添加
量为该提取液的最低杀菌浓度。
2 结果与分析
2.1 准噶尔铁线莲水提取液和醇提取液对各供试菌的
影响
表 2 准噶尔铁线莲醇提取液的抑菌作用
Table 2 Antibacterial activity of PAE
提取部位
抑菌圈直径 /mm
E.c S.a B.s B.p
茎 9.4 11.5 12.5 9.7
叶 11.0 14.6 15.2 12.5
花 10.6 12.9 13.5 12.2
果实 10.3 12.0 13.1 11.5
提取部位
抑菌圈直径 /mm
E.c S.a B.s B.p
茎 7.2 7.4 7.9 7.6
叶 9.0 9.8 11.8 9.3
花 7.7 9.3 8.8 8.5
果实 7.5 8.9 8.5 7.9
表 1 准噶尔铁线莲水提取液的抑菌作用
Table 1 Antibacterial activity of PWE
由表 1 可知,准噶尔铁线莲茎、叶、花以及果实
部位水提取液对 4种供试菌株具有不同的抑菌效果。抑
菌效果依次为:叶>花>果实>茎。茎、叶水提取液
对 4种菌株的抑菌效果依次为:枯草杆菌 >短小芽孢杆
菌>金黄色葡萄球菌>大肠肝菌。花、果实水提取液
对 4种菌株的抑菌效果依次为:金黄色葡萄球菌>枯草
杆菌>短小芽孢杆菌>大肠肝菌。
由表 2可知,准噶尔铁线莲不同部位醇提取液对 4
种供试菌株的抑菌效果依次为:叶>花>果实>茎。
茎、叶、花、果实等部位醇提取液对 4 种供试菌株的
抑菌效果依次为:枯草杆菌>金黄色葡萄球菌>短小芽
孢杆菌>大肠肝菌。
2. 2 水提取液与醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓度
由表 3可知,准噶尔铁线莲叶水提取液对 4种供试
细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌为 5g/100mL,短
小芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌 3g/100mL,枯草杆菌为
1g/100mL。醇提取液抑菌效果较水提取液好,醇提取
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液对 4 种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌为
3g/100mL,金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为 0.5g/100mL,
短小芽孢杆菌为 1g/100mL。
由表 4可知,准噶尔铁线莲茎水提取液对 4种供试
细菌的最低抑菌浓度分别为:大肠杆菌为 10g/100mL,对
枯草杆菌、短小芽孢杆菌的最低抑菌浓度为 5g/100mL,
对金黄色葡萄球菌为 7g/100mL。
醇提取液对 4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大
肠杆菌 7g/100mL,金黄色葡萄球菌 5g/100mL,枯草杆
菌、短小芽孢杆菌为 3g/100mL。
由表 6可知,准噶尔铁线莲果实水提取物对 4种供
试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌 5g/100mL、短小
芽孢杆菌 5g/100mL、金黄色葡萄球菌 5g/100mL、枯
草杆菌 3g/100mL。醇提取物对各供试细菌的最低抑菌
浓度分别为:大肠杆菌为 3g /100mL,金黄色葡萄球
1g/100mL、枯草杆菌、短小芽孢杆菌为 1g/100mL。
3 结 论
准噶尔铁线莲水提取液和醇提取液都具有不同程度
的抑菌活性,其中醇提取液的抑菌效力强,对球菌和
杆菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有抑菌活性。醇
提取液比水提取液具有更明显的抑菌效果,这说明乙醇
更容易将植物体内有效抑菌物质提取出来。此实验证明
准噶尔铁线莲提取液对造成食品腐败的几种微生物具有
一定的抗性,为其有效成分提取及开发利用提供了参
考。对于其抗菌活性物质还有待进一步的研究。
参考文献:
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卫生出版社, 1994.
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买买提, 等. 心草水提液和醇提液抑菌作用研究[J]. 食品科学, 2006,
27(12): 198-200.
质量浓度 /(g/100mL)
水提取液 醇取提液
E.c S.a B.s B.p E.c S.a B.s B.p
0.125 ++ ++ ++ ++ ++ + + +
0.25 ++ + ++ ++ + + + +
0.5 + + + + + - - +
1 + + - + + - - -
3 + - - - - - - -
5 - - - - - - - -
7 - - - - - - - -
10 - - - - - - - -
表3 准噶尔铁线莲叶水提液、醇提液对各供试菌的最低抑菌浓度
Table 3 MICs of PWE and PAE from leaves on different bacteria
注:-.无菌生长;+ .少量菌生长;+ + .菌大量生长。下同。
质量浓度 /(g/100mL)
水提取液 醇提取液
E.c S.a B.s B.p E.c S.a B.s B.p
0.125 ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
0.25 ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
0.5 ++ ++ ++ ++ + + + +
1 ++ ++ + + + + + +
3 + + + + + + - -
5 + + - - + - - -
7 + - - - - - - -
10 - - - - - - - -
表4 准噶尔铁线莲茎水提取液、醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓度
Table 4 MICs of PWE and PAE from stems on different bacteria
质量浓度 / 水提取液 醇提取液
(g/100mL) E.c S.a B.s B.p E.c S.a B.s B.p
0.125 ++ ++ ++ + + + + +
0.25 ++ + + + + + + +
0.5 + + + + + + - +
1 + + + - - - - -
3 + - - - - - - -
5 - - - - - - - -
7 - - - - - - - -
10 - - - - - - - -
表5 准噶尔铁线莲花水提取液、醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓
度(MIC)
Table 5 MICs of PWE and PAE from flowers on different bacteria
质量浓度 / 水提取液 醇提取液
(g/100mL) E.c S.a B.s B.p E.c S.a B.s B.p
0.125 ++ ++ ++ ++ + + + +
0.25 ++ + + ++ + + + +
0.5 + + + + + + + +
1 + + + + + - - -
3 + - - + - - - -
5 - - - - - - - -
7 - - - - - - - -
10 - - - - - - - -
表6 准噶尔铁线莲果实水提取液、醇提取液对各供试菌的最低抑菌
浓度
Table 6 MICs of PWE and PAE from fruits on different bacteria
由表 5可知,准噶尔铁线莲花醇提取液抑菌效果较
水提取液好。水提取液对 4种供试细菌的最低抑菌浓度
分别为大肠杆菌 5g/100mL,枯草杆菌、金黄色葡萄球
菌为 3g/100mL,短小芽孢杆菌为 1g/100mL。醇提液对
4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌 1g/100mL、
金黄色葡萄球菌 1g/100mL、短小芽孢杆菌为 1g/100mL,
枯草杆菌为 0.5g/100mL。