全 文 ：　　辽宁大学学报
　　　自然科学版
第 27卷　第 1期　2000年
JOURNAL OF LIAONINGUNIVERSITY
　　　　　Natural Sciences Edition
　　　　　　Vol.27　No.1　2000
山蕨菜组织培养的研究
赵彦芳 , 　娄和林 , 　雷秀云
(辽宁大学 生物系 ,沈阳 110036)
关崇新 , 　张世明 , 　高光辉
(岫岩县人民政府 ,岫岩 114300)
摘　要:以蕨菜(pteridium aquilium L.)幼嫩根状茎先端为外植体 , 经灭菌 、接种于附加有多
种激素 、磷酸二氢钠 、活性炭等物质的 1/2 MS 培养基上 ,在一定条件下 , 接种近三个月时 ,
外植体上分化形成了聚集成团的不定芽丛 , 反复切割 、转移培养于继代培养基上 , 分化势
能不减.在附加有 GA 的培养基上 , 芽轴伸展并长出幼叶(羽状分裂叶).转移至生根培养
基上 20余天时 , 不定根群长出 ,但移栽成活率较低(仅 40%左右).
关键词:山蕨菜;根状茎;外植体;不定根;不定芽;再生植株.
中图分类号:Q945.51　　文献标识码:A　　文章编号:1000-5846(2000)01-0076-04.
长期以来 ,人们习惯采食的山野菜种类很多 ,其中 ,被誉为“山珍之王”的山蕨菜以其
富含人体所需十余种氨基酸 ,味道清新 ,不受农药和少受城市废气的污染 ,一直受到国内
外人们的欢迎.天然生长的蕨菜其可食部分采摘期很短 ,不易满足市场需要 ,特别是蕨菜
全身是宝 ,其成年的根状茎和叶均可用于提取单宁 、淀粉和优质纤维 ,用于医药 、食品和造
纸等工业.如任山乡人们任意挖掘 ,造成地表植被破坏 ,势必造成山地的水土流失.因此 ,
从发展菜篮子工程和保护环境的要求看 ,采用组织培养的方法 ,选择蕨菜中的良种 、良株
为材料 ,大量繁育幼苗 ,变野生为保护地周年栽培 ,并通过科学合理的深加工 ,把产品推向
国内 、外市场 ,有利于促进山区经济的发展.
1　材料和方法
1.1　植物材料的采集 、消毒和外植体截取
外植体材料(蕨菜)于 4月末采自岫岩山区.
材料采回后 ,截取根状茎的先端幼嫩部分 ,洗净泥土并经流水冲洗后 ,吸除材料表面
的水分.
在无菌条件下进行材料消毒(70%酒精溶液 10 ～ 20 s;0.1%升汞溶液6 ～ 10min;无菌
收稿日期:1999-01-14　作者简介:赵彦芳(1928-),女 ,江西南昌人 ,副教授 ,从事植物分类教学与研究.
水洗涤4 ～ 5遍;无菌纸吸除水分).
外植体截取:地下茎幼嫩先端(0.5 ～ 1.1cm).
1.2　培养基
基本培养基为 1/2 ms培养基.但附加有 NaH2PO4 200.0 mg/L 、活性炭 1.5 g/L.
诱导分化 ,附加激素为Kt 2.0 mg/L ,6-BA 3.0 mg/L 、NAA 0.5 mg/L.
继代培养 ,附加激素为Kt 2.0 mg/L ,NAA 0.2 ～ 0.5(mg/L).
壮苗培养附加激素为 6BA 0.5 ～ 1.0 mg/L 、NAA 0.1 ～ 1.0 mg/L 、GA0.2 ～ 0.5mg/L 、水
解乳蛋白 0.1%.
生根诱导 ,附加激素为 0.5 mg/L的 NAA.
1.3　接种和培养
接种方法　按形态学上部向上的原则 ,将所切取的外植体 ,直插于培养基中 ,插入深
度约为外植体长度的 1/3.
培养条件　白天温度为 25±2℃,夜间保持 15 ～ 18℃;光照强度 2 000 Lx ,日照时数 8
～ 10h.
2　培养结果
2.1　蕨菜组织培养外植体的最适类型
蕨不同类型的外植体 ,经过在 30余种培养基类型上的培养实践证明 ,只有以其地下
茎(根状茎)最幼嫩的包括生长点在内的先端一小段 ,经过诱导才可能具有产生大量不定
芽的能力.
2.2　蕨地下茎外植体接种后的分化和生长状态
外植体接种于上述诱导培养基上三个余月时 ,其顶端开始出现大量乳白色 、半透明状
态的小突起 ,继而生成一团结构紧密 、园球状的不定芽丛.(见图 1)
当不定芽稍长大 、整个成团状的不定芽丛(仍组成球状)继续增大.一般在继代培养基
上 ,每 45天左右转移一次 ,连续转移十余代 ,其分化势仍不见衰 ,但芽轴伸展不明显.
2.3　无根苗的诱导
在进行不定芽分化继代培养的同时 ,为促进不定芽生长速度的加快 ,将不定芽切割转
移到降低了细胞分裂素并附加有GA和水解乳蛋白的壮苗培养基上 ,经过 1.5 ～ 2个月的
培养后 ,不定芽的芽轴渐次伸展长成短小的茎段 ,并有小型的长条叶发生 ,再由这种长条
的小型叶渐渐长成羽分裂叶(见图 2).
2.4　生根诱导及移栽
截取无根苗转移到附加有NAA 0.5 mg/L的培养基上 , 20来天时 ,不定根相继产生 ,
形成完整的再生植株(组培苗)(见图3).
稍经锻练的组培苗移栽时 ,特别是由于不定根长而纤细 ,在洗涤去除琼脂时 ,易于损
伤 ,致使移栽后地上 、地下部分生长不良 ,不仅成活率低(约近40%)而且缓苗期长.
77作者:赵彦芳等　山蕨菜组织培养的研究
图 1　接种三个月对外植体先端长　　　图 2　已经长出了羽状分裂叶的　　　图 3　具有完整的根 、茎 、叶
　　　　　出的聚集成团的不定芽丛　　　　　　　蕨无根苗　　　　　　　　　　　　　的组培苗
3　讨论
3.1　蕨组织培养最适外植体的截取需要一定的经验
蕨组织培养可以成功 ,但要将它应用于生产繁育幼苗 ,还存在较大难度 、有待继续深
入摸索的问题 ,其中突出的问题是对外植体材料质量的审定能力有待于在实践中提高.
蕨为多年生植物 ,其庞大的地下茎多有分枝 ,而且分枝可伸展出很远.这就使我们取
材不能不带有很大的随机性和盲目性 ,造成的后果常可能由于外植体材料生理 、营养等诸
多水平的不同而接种后出现不同反应 ,给整个的组培工作造成混乱.
3.2　蕨组培苗的移栽方法尚须探索
蕨组培苗的移栽不能套用一般组培苗的常规方法 ,根据推断 ,如果采用水培(营养液
栽培)的过渡过程 ,有可能使移栽成活率大为提高.
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 　中国科学院植物研究所编.植物组织培养法[ M] , 北京:中国植物学会编印 , 1982
[ 2] 　刘世强等.细胞工程的理论与实践[ M] ,沈阳:辽宁大学出版社 , 1995
[ 3] 　曾宋君等.菠斯顿蕨的组织培养[ J] ,生理学通讯 , 1996 ,(3):198
The Experiment of Tissue Culture on Pteridium Aquilium
ZHAO Yanfang , 　LOU Helin , 　LEI Xiuyun
The Biology Department of Liaoning University , Shenyang 110036
GUAN Changxin , 　ZHANG Shiming , 　GAO Guanghui
The People s Government of Xiuyan County , Xiuyan 114300
ABSTRACT　Treat the young rhizome s tip of pteridium aquilinum as the explants , after steril-
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ized , inoculated to the 1/2 MS medium which contains NaH2PO4 , active-carbon and some hor-
mones.When cultured almost for three months , the tip of pteridium aquilinum dfferentiated , on the
top of the explant a group of green small adventitious buds were evolved.Cut off the adventitious
buds and transplant onto new medium repeatedly , the differentiation potential of bud keeps still.On
the medium with GA the stem of the adventitious buds stretched and some little leafs were grown.
Transplant the shoot without root onto 1/2MS medium only with NAA , twenty days after , the roots
were grown.Take 1-2 days for exercise , the regenerate plantlet maybe plant in soil , the survival
rate were under 40%.
KEY WORDS　pteridium aquilinum , rhizome , explant , adventitous root , adventitous bud , re-
generate plantlet.
(编辑　崔久满)
79作者:赵彦芳等　山蕨菜组织培养的研究