全 文 ：收稿日期:2004 12 29
作者简介:刘晓秋(1964 ),女(汉族), 辽宁辽阳人 , 教授 ,博士 , 硕士生导师 ,主要从事中药质量标准规范化研究及新
药研究 , Tel.024 23986469 , E mail mjwlxq@online.ln.cn;陈发奎(1943 ), 男(汉族), 山西闻喜人 , 教授 , 博士生导
师 ,主要从事中药质量标准规范化研究 , Tel.024 23986498。
文章编号:1006 2858(2006)01 0015 03
拳参正丁醇提取物的化学成分
刘晓秋 , 李维维 , 生可心 , 刘　健 , 陈发奎
(沈阳药科大学 中药学院 , 辽宁 沈阳　110016)
摘要:目的 分离拳参(Polygonum bistorta L.)根茎正丁醇提取物的化学成分并进行结构鉴定。方
法 利用硅胶 、聚酰胺和 Sephadex LH 20 柱色谱进行分离纯化 ,根据理化性质和光谱数据进行结构
鉴定。结果 得到 4个化合物 , 分别鉴定为丁香苷(syringin , Ⅰ)、儿茶素(catechin , Ⅱ)、芦丁(rutin ,
Ⅲ)、mururin A(Ⅳ)。结论 Ⅰ和Ⅳ为首次从该属植物中分离得到。
关键词:结构鉴定;拳参;根茎;丁香苷;mururin A
中图分类号:R 284　　　文献标识码:A
　　作者曾报道从拳参(Polygonum bistorta L.)
95%乙醇提取物中的乙酸乙酯溶解部分分离鉴定
了5个化合物[ 1] ,现从拳参的正丁醇溶解部分中
分离得到 4个化合物 ,根据理化性质和光谱数据
鉴定其结构为丁香苷(sy ringin , Ⅰ)、儿茶素(cate-
chin , Ⅱ)、芦丁(rutin , Ⅲ)、mururin A(Ⅳ)。其中
Ⅰ和Ⅳ为首次从该属植物中分离得到。
1　仪器与材料
瑞士 Bruker ARX 300 核磁共振光谱仪
(TMS 内标),瑞士 Bruker AVANCE 600型核磁
共振光谱仪 ,美国Agilent公司1100系列 SL 离子
阱质谱仪(电喷雾离子化源),日本 Yanaco M P S3
熔点测定仪(温度未校正)。
柱色谱用硅胶(50 ～ 79 μm)和薄层色谱用硅
胶H(10 ～ 40μm ,青岛海洋化工有限公司),柱色
谱用聚酰胺(160 ～ 280 μm)和聚酰胺薄膜(浙江
省台州市路桥四甲生化塑料厂),Sephadex LH 20
(Pharmacia),试剂均为分析纯 。
拳参药材购于辽宁省药材公司 ,由沈阳药科
大学郭允珍教授鉴定为拳参(Polygonum bistorta
L.)的根茎。
2　提取分离
拳参(10 kg)经体积分数为 95%的乙醇加热
回流提取 ,减压回收乙醇得浸膏 ,加适量水制成混
悬液 ,依次用石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ,减压
回收溶剂得各层浸膏 。正丁醇萃取部分经硅胶柱
色谱 ,用氯仿 甲醇系统洗脱 ,得到化合物 Ⅰ;经聚
酰胺柱色谱和 Sephadex LH 20 柱色谱 ,用氯仿
甲醇系统洗脱 ,得到化合物Ⅱ 、Ⅲ和Ⅳ。
3　结构鉴定
化合物 Ⅰ:白色针晶(甲醇), mp 191.0 ～
192.0 ℃,体积分数为 5%的硫酸 乙醇溶液显蓝
色。 1H NMR(300 MHz , DMSO d 6)谱中存在
δ6.73(2H , s)、δ6.46(1H , d , J =15.6 Hz)、
δ6.33(1H ,dt , J =4.1 ,15.6 Hz)、δ4.10(2H , s)
表明结构中含有苯环和反式取代的烯丙醇基结构
片段 。根据苯环上有 2个磁等同质子信号 ,可推
断苯环有对称取代 。另外 , δ3.76(6H , s)的吸收
峰表明有两个磁等同的—OCH3 基团 。13C NMR
(75 MHz ,DMSO d6)谱中共有 17 个碳信号 ,其
中 δ102.3 、δ77.1 、δ76.4 、δ74.0 、δ69.8 和
δ61.3及 1H NMR 谱中 δ4.90(1H , d , J =
6.4 Hz)的信号 ,可推测该化合物含有 β D 吡喃
葡萄糖基。将该化合物与文献[ 2]报道的丁香苷
的碳氢核磁共振光谱对照 ,数据基本一致 ,故鉴定
该化 合 物 为 丁 香 苷 (sy ring in)。 13C NMR
(75 MHz ,DMSO d6):δ152.6(C 2 , 6)、δ133.6
(C 1)、δ132.4(C 4)、δ130.3(C 8)、δ128.3
(C 7)、δ104.3(C 3 ,5)、δ102.4(C 1′)、δ77.1
(C 3′)、δ76.4(C 5′)、δ74.0(C 2′)、δ69.8(C
4′)、δ61.3(C 9)、δ60.7(C 6′)、δ56.2(2 , 6
第 23 卷 第 1 期
2 0 0 6 年 1 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.23 　No.1
Jan.2006 p.15
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2006.01.005
OCH3)。
化合物 Ⅱ:白色结晶粉末(氯仿 甲醇), FeCl3
反应 阳 性。 1H NMR (300 MHz , CD3OD)中
δ4.55(1H ,d , J =7.5 Hz)、δ3.93(1H , ddd , J =
8.1 , 5.5 , 7.5 Hz)和 δ2.49(1H , dd , J =7.5 ,
16.1 Hz)、δ2.84(1H , dd , J =16.1 , 5.5 Hz),结
合13C NMR中 15个碳信号 ,提示结构中含有黄
烷 3 醇骨架 ,上述氢信号可分别归属为黄烷 C
2 、C 3和C 4位的氢信号。由 2位氢的偶合常数
推断 C 2和 C 3位氢呈反式构型 。1H NMR谱还
存在黄烷 B环的 ABX偶合系统:δ6.69(1H , dd ,
J =8.1 , 1.8 Hz , H 6′)、 δ6.75(1H , d , J =
8.1 Hz ,H 5′)和 δ6.82(1H , d , J =1.8 Hz , H
2′)。另外还有 6位和 8位 2个质子信号 δ5.83
(1H , d , J =2.0 Hz)和 δ5.91(1H , d , J =
2.0 Hz)。 13C NMR(75 MHz , CD3OD)中共有
15个碳信号 ,经与文献[ 3]中(+)儿茶素的数据
对照 ,基本一致 ,故鉴定该化合物为(+)儿茶素
[(+)catechin] 。 13C NMR(75 MHz , CD3OD):
δ157.8(C 5)、δ157.6(C 7)、δ156.9(C 8a)、
δ146.32(C 4′)、δ146.2(C 3′)、δ132.2(C
1′)、δ120.0(C 6′)、δ116.1(C 5′)、δ115.2(C
2′)、δ100.8(C 4a)、δ96.2(C 8)、δ95.5(C 6)、
δ82.9(C 2)、δ68.8(C 3)、δ28.5(C 4)。
化合物 Ⅲ:黄色粉末(甲醇), mp 190.0 ～
192.0 ℃,镁 盐酸反应阳性 , Molish 反应阳性 ,说
明该化合物为黄酮苷类化合物 。将其酸水解 ,检
出葡 萄 糖 和 鼠 李 糖 。 1H NMR (300 MHz ,
DMSO d6)谱中 , δ12.60(1H , s)、δ10.83(1H ,
s)、δ9.67(1H , s)、δ9.18(1H , s)分别为黄酮母核
5 、7 、4′和 3′位的羟基质子信号 。δ7.55(1H ,
br.d , J =8.7 Hz)、δ6.83(1H , d , J =8.7 Hz)、
δ7.53(1H ,br.s)呈ABX偶合系统 ,为 B环 6′、5′
和 2′位氢信号 。δ6.83(1H , d , J =1.98 Hz)与
δ6.19(1H ,d , J =1.98 Hz)分别为 A 环 8位和 6
位氢信号 。δ0.99(3H , d , J =6.1 Hz)为鼠李糖 5
位甲基氢信号 。13C NMR谱中可见 2组糖的碳
信号 ,将该化合物的碳谱数据与槲皮素对照 ,发现
其 3位向高场位移 2.4 , 2位和 4 位向低场位移
1.6和 1.5 ,其他位置无明显变化 ,说明 2个糖连
在 3位 ,将该化合物的碳谱数据与文献[ 4]中的芦
丁相对照基本一致 , 故鉴定该化合物为芦丁
(rutin)。
化合物Ⅳ:黄色粉末 , mp>280 ℃,紫外灯下
显亮蓝色荧光 , ESI MS 给出准分子离子峰[ M
1] m / z 446.9 ,结合1H NMR和 13C NMR推测
该化合物的分子式为 C24H16O9 。
1H NMR (600 MHz , DMSO d 6)谱 中 ,
δ4.90(1H , d , J =6.2 Hz)、δ4.07(1H , dd , J =
5.9 , 6.2 Hz)、δ2.69(1H , dd , J =6.7 , 16.3 Hz)
和 δ2.82(1H ,dd , J =4.3 , 16.3 Hz)提示结构中
含有黄烷 3 醇母核 。上述 H 信号分别为黄烷
H 2 、H 3和 H 4信号 。由 2位偶合常数可判断该
化合物 2位与 3 位呈反式取代 ,为儿茶素母核。
1H NMR谱中还给出黄烷 AMX偶合系统的氢信
号 ,即 δ6.61(1H , dd , J =2.0 , 8.0 Hz , H 6′)、
δ6.69(1H ,d , J =8.0 Hz , H 5′)和 δ6.71(1H ,
d , J =2.0 Hz , H 2′),说明黄烷环 3 , 4 位羟基被
二取代 。另外1H NMR谱中 δ6.65(1H , s ,H 8)
提示该黄烷的 6位被取代。 13C NMR谱中共给
出 24 个碳信号 , 其中有 21 个为 sp2 杂化碳。
δ161.2为 α, β 不饱和酯羰基碳信号。
在HSQC谱中亚甲基 δ2.69 、δ2.82二个氢
信号与 δ25.8 碳信号直接相关 , δ4.07 、δ4.90
氢信号分别与 δ64.8和 δ81.7 碳直接相关 ,可
将δ64.8归属为 C 3位 、δ81.7 归属为 C 2位。
另外 δ6.10 、δ6.74 、δ7.43信号分别与 δ92.3 、
δ103.5 、δ109.2直接相关 。而在HMBC谱中亚
甲基氢信号 δ2.69 、δ2.82 分别与 δ103.3 、
δ151.8 、δ157.9有远程相关 , δ4.90与 δ157.9
有远程相关 ,则可将 δ157.9 、δ103.3 、δ151.8
分别归属为 8a、4a 和 5位 ,由此可推断 5位羟基
被取代 ,而使其向高场位移 。在 HSQC 谱中 8位
δ6.65氢与 δ148.7 、δ157.9 、δ103.3和δ99.7
碳有远程相关 ,故可将 δ99.7 、δ148.7归属为 6
位和 7位碳。另外 , δ6.10与 δ99.7 、δ161.2有
远程相关 ,说明 α, β 不饱和酯由 6 位与黄烷相
连。δ6.76 与 δ106.2 、δ143.8 、δ146.6 和
δ152.5有 远 程相 关。 δ 7.34 与 δ103.5 、
δ141.6 、δ152.5有远程相关 。综上分析 ,该化合
物应为黄烷木质素类化合物 ,与文献[ 5]中报道的
mururin A 的数据对照 ,基本一致 ,故鉴定该化合
物为 mururin A 。该文献报道 , mururin A 在
20μmol·L -1浓度下对蛋白激酶 C(PKC)抑制率
为 60%。 1H NMR和13C NMR数据见表 1 ,结构
见图 1。
16 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 23卷
Table 1　1H-NMR and 13C-NMR data of compound Ⅳ(DMSO-d6)
Positions δC δH Positions δC δH
2 81.7 4.90(1H , d , J=6.2 Hz) 4′ 145.2
3 64.8 4.07(1H , m) 5′ 115.4 6.71(1H , d , J=8.0 Hz)
4 25.8 2.69(1H , dd , J=6.7 , 16.3 Hz) 6′ 118.0 6.61(1H , d , J=2.0 , 8.0 Hz)
2.82(1H , dd , J= 4.3 , 16.3 Hz)
5 151.8 1″ 106.1
6 99.7 2″ 152.5
7 148.7 3″ 103.5 6.76(1H , s)
8 97.2 6.67(1H , s) 4″ 146.6
9 157.9 5″ 143.8
10 103.3 6″ 109.2 7.34(1H , s)
1′ 129.5 7″ 141.6
2′ 114.1 6.71(1H , d , J=2.0 Hz) 8″ 92.0 6.10(1H , s)
3′ 145.1 9″ 161.2
Fig.1　Key HMBC correlations of compound Ⅳ
参考文献:
[ 1] 刘晓秋 , 陈发奎 ,吴立军 , 等.拳参的化学成分 [ J] .沈
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folium and their protein kinase inhibitory activity [ J] .
P lanta Med , 2002 , 68:621-625.
Studies on the chemical constituents of the n-BuOH
extract of Polygonum bistorta L.
LIU Xiao-qiu , LI Wei-wei , SHENG Ke-xin , LIU Jian , CHEN Fa-kui
(School of Tradit ional Chinese Meteria Medica , Shenyang Pharmaceutical Universi ty , Shenyang 　
110016 , China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of the n-BuOH extract of the rhizoma of Polygon-
um bistorta L.Methods The chemical constituents were isolated on column chromatography of silical gel ,
polyamide and Sephadex LH-20 , and identified by physico-chemical characters and spect roscopic analysis.
Results Four compounds were isolated and identified as sy ringin(Ⅰ), catechin(Ⅱ), rutin(Ⅲ), mururin A
(Ⅳ).Conclusions Ⅰ and Ⅳ are isolated from the genus for the f irst time.
Key words:st ructure identification;Polygonum bistorta L.;rhizoma;sy ringin;mururin A
17第 1 期 刘晓秋等:拳参正丁醇提取物的化学成分