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比色法测定琐琐葡萄中三萜类成分的含量



全 文 :药品质量与检验
比色法测定琐琐葡萄中三萜类成分的含量
帕丽达 ,堵年生 ,丛媛媛 ,王晓文
(新疆医科大学药学院 ,乌鲁木齐  830054)
摘 要 目的: 测定琐琐葡萄中总三萜类成分含量 ;方法:比色法 ;结果:总三萜类成分为 0. 49% , R SD 2. 33% ( n
= 5);结论:该方法呈色稳定 ,灵敏度高 ,重现性好。
关键词 比色法 ,琐琐葡萄 ,三萜类
中图分类号: R729. 11   文献标识码: A   文章编号: 1006-5687( 2002) 04-0070-01
  琐琐葡萄 ( Vitis amurensis Pnpy)系葡萄属植物 ,主产于
新疆、甘肃等省自治区 ,以果实入药 ,具有清热、活血、抗病毒
等功效 [1]。本实验首次测定琐琐葡萄中总三萜类成分 ,同时参
考有关测定方法 [2 ]并加以改进 ,建立了测定琐琐葡萄中总有
效成分三萜类成分含量的比色法。 该方法简便、快速 ,可供琐
琐葡萄质量控制。
1 仪器与试药
1. 1 仪器  UV-365型紫外可见分光光度计 (日本岛津 )。
1. 2 试药 高氯酸 (上海桃浦化工厂 ,分析纯 ) ,冰醋酸 (上海
化学试剂厂 ,分析纯 ) ,香草醛 (北京化工厂 ,分析纯 ) ,齐墩果
酸对照品 (中国生物制品检定所 ) ,琐琐葡萄 (购于新疆维吾尔
自治区中医院 )。
2 方法与结果
2. 1 对照液的制备 精密称取齐墩果酸对照品 20 mg ,置于
100 m l容量瓶中 ,加甲醇溶液稀释至刻度 ,摇匀 ,备用。
2. 2 测定波长的选择 将齐墩果酸对照品加显色剂后 ,与紫
外可见分光光度计上扫描 ,得吸收光谱图 ,结果见图 1。 结果
表明 ,齐墩果酸在 560 nm处有一吸收峰 ,故确定 560 nm为
测定波长。
图 1 齐墩果酸对照品紫外线吸收图
2. 3 对照曲线的制备 精密吸取上述对照液 0. 2、 0. 3、 0. 4、
0. 5、 0. 6、 0. 7和 0. 8 ml,分别置具塞试管中 ,挥去溶剂 ,准确
加入 5%香草醛冰醋酸 0. 4 ml、高氯酸 1. 6 ml,混匀 ,置 70℃
恒温水浴中加热 15分钟 ,冷却至室温 ,并转移至 10 ml量瓶
中加乙酸乙酯稀释至刻度 ,摇匀 ,在 560nm波长处测定吸收
度 ,以吸收度 A对浓度 C回归得方程为: Y = 0. 057 3 8X +
0. 012, r = 0. 999 5 , 线形范围为 4~ 16μg /ml。
2. 4 供试品溶液的置备 精密称取琐琐葡萄药材粉末 250
mg ,置 25 ml量瓶中 ,加乙醚 15 ml,超声提取 30分钟 ,再添
加乙醚至刻度。精密吸取 15. 0 ml,置于 25 ml量瓶内 ,挥干溶
剂 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀。
2. 5 含量测定方法 精密称取供试液溶液 3 ml,按样品测
定项下: “置于 25 ml量瓶中…于波长 560 nm处测定”操作 ,
代入标准曲线方程 ,计算含量。结果表明总三萜类成分含量为
0. 49% ( n = 5) , R SD = 2. 33%。
2. 6 稳定性试验 同一份样品按上述方法处理 ,在 1日之内
隔 1小时测定 ,共测 7次 ,得平均含量为 0. 47% , R SD为
2. 38% ,结果说明显色反应在 7小时基本稳定。
2. 7 回收率测定 精密称取琐琐葡萄样品适量 ,分别加入不
同量对照品 ,依法操作 ,结果见表 1。
表 1 回收率测定结果 ( n = 5)
加入量
( mg )
平均测得量
( mg)
平均回收率
(% )
R SD
(% )
0. 366 1. 590 101. 2 2. 7
0. 610 1. 824 98. 90 2. 7
0. 854 2. 072 99. 8 3. 6
3 讨论
三萜类总成分的含量测定多为比色法 ,其样品供试液的
制备一般常采用甲醇提取加水混悬 ,经萃取后再进行测定 ,改
用乙醚超声提取后直接测定的方法操作省时 ,方法简便 ,重现
性好。
参考文献
1 新疆维吾尔自治区卫生厅编 . 维吾尔药材标准 (上册 ) ,新疆科技
卫生出版社 , 1993. 347
2 陈明珠 .齐墩果酸片的比色测定 . 中草药 , 1981, 12( 9): 13
70 天津药学  2002年 8月 第 14卷第 4期
收稿日期: 2002-04-19