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超声波辅助酶法提取黑莓酒渣中花色苷工艺优化及其生物活性



全 文 :※工艺技术 食品科学 2015, Vol.36, No.06 63
超声波辅助酶法提取黑莓酒渣中花色苷
工艺优化及其生物活性
李亚辉,马艳弘*,黄开红,张宏志
(江苏省农业科学院农产品加工研究所,江苏 南京 210014)
摘  要:利用响应面法对超声波辅助果胶酶提取黑莓酒渣中花色苷的条件进行了优化,并通过测定所提花色苷的抗
氧化能力和对细菌生长的影响,评价其生物活性。结果显示,当料液比1∶15(g/mL)、超声波功率300 W、pH 4.5
时,最佳提取条件为加酶量0.30%、提取温度48 ℃、提取时间20 min,此条件下花色苷提取量为4.70 mg/g,比酸化
乙醇法提高了14.08%;所提花色苷具有一定的抗猪油氧化能力、羟自由基清除能力和较强的1,1-二苯基-2-三硝基苯
肼自由基清除能力,并可有效抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长。
关键词:黑莓酒渣;花色苷;超声波;果胶酶;生物活性
Ultrasonic-Assisted Enzymatic Extraction and Bioactivity Assessment of Anthocyanins from Blackberry Wine Pomace
LI Yahui, MA Yanhong*, HUANG Kaihong, ZHANG Hongzhi
(Institute of Farm Product Processing, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China)
Abstract: This study was focused on applying response surface methodology to optimize the ultrasonic-assisted enzymatic
hydrolysis of blackberry wine pomace using pectinase for anthocyanins extraction. The bioactivity of the extracted anthocyanins
was also evaluated with respect to antioxidant and antibacterial activities. Results showed that the optimum extraction
conditions were determined as follows: enzyme dosage, 0.30%; extraction temperature, 48 ℃; extraction time, 20 min;
solid-to-liquid ratio, 1:15 (g/mL); ultrasonic power, 300 W; and pH, 4.5. Under these conditions, the anthocyanins yield was
4.70 mg/g, which was improved by 14.08% compared to that obtained by acidified ethanol extraction. The anthocyanins
extracted from blackberry wine pomace exhibited a good antioxidant activity by inhibiting lard oxidation and scavenging
1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and hydroxyl radicals, and exerted potent inhibition on E. coli and Staph. aureus.
Key words: blackberry wine pomace; anthocyanins; ultrasonic; pectinase; biological activity
中图分类号:S567.2 文献标志码:A 文章编号:1002-6630(2015)06-0063-06
doi:10.7506/spkx1002-6630-201506012
收稿日期:2014-08-14
基金项目:江苏省博士后基金项目(1302057B);江苏省自然科学基金项目(BK2012786)
作者简介:李亚辉(1985—),男,助理研究员,博士,主要从事食品生物技术研究。E-mail:liqianhao217@126.com
*通信作者:马艳弘(1972—),女,副研究员,博士,主要从事食品功能因子开发利用研究。E-mail:ma_yhhyy@126.com
黑莓又名覆盆子,是新兴的第三代水果。黑莓商业
化栽培始于欧洲和北美,于1986年由江苏省中科院植物
研究所首次引入中国[1-2]。目前我国黑莓种植面积约占世
界种植面积的1/5,其中江苏省黑莓种植面积约占我国种
植面积的80%[1,3]。黑莓具有较高营养价值,尤其花色苷
含量丰富[4-6],其具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌、降血
糖、降血压、保护血管和减缓衰老等多种功效[5,7-12]。
新鲜黑莓保质期短、不易储存,因此对其进行深加
工是黑莓产业发展的必由之路。黑莓果酒最大限度的保
留了其营养和生物活性物质,是黑莓深加工的重要途径
之一。酒渣是果酒酿造中重要的副产物,直接排放不仅
污染环境,而且造成资源浪费。黑莓酒渣中含有大量的
花色苷,和其目前被用作肥料或动物饲料相比,从中提
取花色苷可大大提高其应用和经济价值。目前,关于浆果
类花色苷的提取国内外已有较多报道,提取方法主要为有
机溶剂萃取法,除此之外还有超临界CO2萃取法、酶法、
发酵法、微波辅助和超声波辅助法等[13-17]。花色苷存在于
植物细胞液中,被细胞壁和细胞膜包裹难于溶出[13]。超声
波的机械作用可破坏细胞壁和细胞膜的结构,加速内容
物的溶出;果胶酶可破坏植物细胞壁,提高细胞壁和细
胞膜的通透性,也可加速花色苷的溶出[18-19]。目前,关于
黑莓果实花色苷的提取及活性研究虽已有报道[4,8-11],但
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对于黑莓酒酿造中副产物黑莓酒渣中花色苷的研究还
鲜有报道。因此,本实验利用超声波辅助果胶酶法提
取黑莓酒渣中花色苷,通过响应面优化其提取条件,
并对所提花色苷的抗氧化性和抑菌活性进行初步研
究。这对黑莓资源的综合利用和黑莓产业的持续发展
具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
黑莓酒渣由句容万山红遍生物科技有限公司提供。
果胶酶(5万 U/g) 无锡明辉国际贸易有限公司
化工分公司;猪油 南京某菜市场;大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌 实验室保存;VC、硫酸亚铁、水杨酸、过氧
化氢 天津科密欧试剂公司;其他试剂均为市售分析纯。
1.2 仪器与设备
KQ-2500E型超声波清洗器 昆山禾创仪器有限公
司;UV-3802H紫外-可见分光光度仪 上海尤尼柯仪器
有限公司;真空冷冻干燥机 上海比朗仪器制造有限公
司;R-120型旋转蒸发器 瑞士Büchi公司;pH酸度计
梅特勒-托利多公司;DHG-9070电热鼓风干燥箱 上海
齐欣科学仪器有限公司;HH-2数显恒温水浴锅 国华
电器有限公司;培养箱、超净工作台 苏州苏净净化设
备厂。
1.3 方法
1.3.1 黑莓酒渣前处理
取新压榨分离的黑莓酒渣,用鼓风干燥箱40 ℃烘
12~15 h。将烘干的酒渣放入粉碎机粉碎并用200 目筛网
过滤,然后置于棕色瓶内在4 ℃条件下密封保存备用。
1.3.2 黑莓酒渣花色苷的提取
超声波辅助果胶酶法提取:将黑莓酒渣干粉按一定
料液比加入到蒸馏水中,复水30 min,调节pH值,加入
果胶酶0.30%(m/m),超声辅助提取,获得花色苷提
取液。将提取液抽滤后在40 ℃真空旋转蒸发至体积约
10~15 mL,然后-80 ℃冷冻24 h,最后冷冻干燥即得花
色苷粗提物干品。
酸化乙醇法提取:参照王秀菊等[20]优化的蓝莓酒渣
中花色苷的提取条件进行提取。以含1% HCl的70%乙醇
溶液为提取溶剂,其他条件为料液比1∶25(g/mL)、提
取温度70 ℃、提取时间60 min。
1.3.3 花色苷含量的测定
参照宋德群等[21]报道的pH示差法测定提取花色苷的
含量。计算公式为:
ρ/˄mg/g˅˙ ˄A0ˉA1˅hVhnhMεhm
式中:ρ为花色苷提取量/(mg/g);A0、A1分别为
pH 1.0、pH 4.5时花色苷在520 nm波长处的吸光度;V为
提取液总体积/mL;n为稀释倍数;M为矢车菊色素-3-葡
萄糖苷的相对分子质量,449;ε为矢车菊色素-3-葡萄糖
苷的消光系数,29 600;m为样品质量/g。
1.3.4 单因素试验
按照1.3.2节所述超声波辅助果胶酶法,分别研究在
料液比1∶10、超声波功率400 W、pH 4.0、加酶量0.2%、
提取温度50 ℃和提取时间40 min条件下,改变单一因素
对花色苷提取量的影响,单因素试验水平如下:料液比
1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶25(g/mL),超声波功率
100、200、300、400、500 W,pH 3.0、3.5、4.0、4.5、
5.0,加酶量0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%,提取温
度30、40、50、60、70 ℃,提取时间10、20、30、40、
50 min。每个单因素试验平行重复3 次,结果取平均值。
1.3.5 响应面试验设计
在单因素试验结果基础上,选择料液比1∶15(g/mL)、
超声波功率300 W、pH 4.5,采用Box-Behnken试验设
计,以加酶量、提取温度和提取时间3 个因素为自变量,
进行响应面分析,以-1、0、1分别代表自变量的低、
中、高3 个水平,试验因素水平设计见表1。
表 1 响应面试验设计因素与水平
Table 1 Factors and levels used in response surface methodology
水平
因素
X1加酶量/% X2提取温度/℃ X3提取时间/min
-1 0.2 40 20
0 0.3 50 30
1 0.4 60 40
1.3.6 黑莓酒渣花色苷的抗氧化性分析
1.3.6.1 抗油脂氧化能力测定
参照李颖畅等[22]所述方法,称取黑莓酒渣花色苷粗
提物,按0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%添加量加入到
50 g猪油中进行实验,空白组不加花色苷粗提物,阳性对
照组加相同质量浓度的VC,每个样品重复3 次。
1.3.6.2 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-
picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力测定
参照Atoui等[23]所述方法,分别取1 mL质量浓度为
0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的黑莓酒渣花色苷溶液进
行实验,空白组用水代替样品,对照组用同等质量浓度
的VC代替,每个样品重复3 次。
1.3.6.3 羟自由基清除能力测定
参照李颖畅等[24]所述方法,分别取1 mL质量浓度为
0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的黑莓酒渣花色苷溶液进
行实验,空白组用水代替样品,对照组用同等质量浓度
的VC代替,每个样品重复3 次。
※工艺技术 食品科学 2015, Vol.36, No.06 65
1.3.7 黑莓酒渣花色苷的抑菌活性分析
参照韩永斌等[25]所述方法,将大肠杆菌和金黄色葡
萄球菌分别培养至对数生长中期,按5%接种量分别接种
于100 mL LB液体培养基中,对照组中不添加花色苷,
实验组添加不同量花色苷,使其终质量浓度分别为0.4、
0.8、1.2、1.6、2.0 mg/mL。37 ℃培养,24 h后取样在
600 nm波长处测定其吸光度(A)。每个样品重复3 次。
1.4 数据分析
利用SPSS 18.0和Design-Expert V8.0软件进行数据处
理及统计分析。
2 结果与分析
2.1 单因素试验结果
表 2 料液比对花色苷提取量的影响
Table 2 Effects of solid/liquid ratio on the extraction yield of anthocyanins
料液比(g/mL) 1∶5 1∶10 1∶15 1∶20 1∶25
花色苷提取量/(mg/g) 2.40±0.05c 3.50±0.07b 4.00±0.09a 4.08±0.08a 4.10±0.07a
注:不同字母表示差异显著(P<0.05)。下同。
如表2所示,随着溶剂用量的增加,花色苷提取量逐
渐升高,当料液比为1∶25、1∶20和1∶15时,花色苷提取
量无显著差异,因此选择1∶15为最佳料液比。
表 3 超声波功率对花色苷提取量的影响
Table 3 Effects of ultrasonic power on the extraction yield of anthocyanins
超声波功率/W 100 200 300 400 500
花色苷提取量/(mg/g) 3.01±0.08c 3.50±0.05b 4.08±0.07a 4.16±0.04a 4.18±0.05a
如表3所示,随着超声波功率的增加,花色苷提取量
逐渐增加,当功率为300、400、500 W时,花色苷提取量
无显著差异,因此选择300 W为最佳提取功率。
表 4 pH值对花色苷提取量的影响
Table 4 Effects of pH on the extraction yield of anthocyanins
pH 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0
花色苷提取量/(mg/g) 2.97±0.04d 3.35±0.08c 3.95±0.05b 4.26±0.03a 4.18±0.05a
如表4所示,当提取液pH值小于4.5时,花色苷提取
量随pH值的升高逐渐升高,pH 5.0时,花色苷提取量开
始降低,因此选择pH 4.5为提取液最佳pH值。
表 5 加酶量对花色苷提取量的影响
Table 5 Effects of enzyme dosage on the extraction yield of anthocyanins
加酶量/% 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
花色苷提取量/(mg/g) 3.98±0.06b 4.22±0.08b 4.51±0.05a 4.49±0.07a 4.54±0.04a
如表5所示,随着加酶量的增大,花色苷提取量逐渐
增大,但当加酶量大于0.3%时花色苷提取量没有显著差
异,所以选择最佳加酶量为0.3%。
表 6 提取温度对花色苷提取量的影响
Table 6 Effects of extraction temperature on the extraction
yield of anthocyanins
提取温度/℃ 30 40 50 60 70
花色苷提取量/(mg/g) 3.81±0.07b 4.02±0.06a 4.11±0.04a 3.88±0.05b 3.76±0.06b
如表6所示,50 ℃时提取量最高,选为最佳提取温
度;60、70 ℃时提取量降低可能是因为高温使酶变性,
其活力下降造成的。
表 7 提取时间对花色苷提取量的影响
Table 7 Effects of extraction time on the extraction yield of anthocyanins
提取时间/min 10 20 30 40 50
花色苷提取量/(mg/g) 3.45±0.09c 3.98±0.05b 4.23±0.07a 4.25±0.06a 4.27±0.08a
如表7所示,随着提取时间的延长,花色苷提取量
逐渐增大,当提取时间大于30 min时提取量没有显著差
异,所以选择30 min为最佳提取时间。
2.2 响应面优化试验结果
2.2.1 回归模型的建立及其显著性检验
表 8 响应面试验设计及结果
Table 8 Design and results of response surface methodology
试验号 X1加酶量 X2提取
温度
X3提取
时间
花色苷提取量/(mg/g)
试验值 预测值
1 0 -1 1 4.63±0.11 4.61
2 0 1 1 4.58±0.09 4.56
3 0 -1 -1 4.76±0.07 4.77
4 -1 -1 0 4.34±0.10 4.37
5 0 1 -1 4.80±0.09 4.83
6 1 0 1 4.62±0.12 4.61
7 0 0 0 4.79±0.08 4.83
8 0 0 0 4.71±0.07 4.68
9 1 1 0 4.89±0.11 4.83
10 0 0 0 4.63±0.09 4.65
11 -1 1 0 4.55±0.13 4.52
12 1 0 -1 4.44±0.12 4.45
13 1 -1 0 4.70±0.08 4.73
14 -1 0 -1 4.52±0.09 4.51
15 -1 0 1 4.61±0.14 4.61
响应面试验结果及其预测值如表8所示(3 次重
复)。对表中试验数据进行多元回归拟合,获得花色苷
提取量对自变量的二次多项回归模拟方程如下:
Y=14.437X1+0.140X2-1.625×10
-3X3-0.018X1X2+
4.129×10-16X 1X 3-7.500×10
-5X 2X 3-23.000X 1
2-
1.375×10-3X2
2+5.000×10-5X3
2-0.603
式中:Y表示花色苷提取量;X1、X2、X3分别为加酶
量、提取温度和提取时间的编码值。利用该方程所得预
测值与试验值较为接近,说明该方程合理、拟合度高。
66 2015, Vol.36, No.06 食品科学 ※工艺技术
表 9 回归模型方差分析
Table 9 ANOVA of response surface model
来源 平方和 自由度 均方 F值 P值
X1加酶量 4.512×10
-3 1 4.512×10-3 1.770 0.240 5
X2提取温度 0.022 1 0.022 8.660 0.032 1*
X3提取时间 4.512×10
-3 1 4.512×10-3 1.770 0.240 5
X1X2 1.225×10
-3 1 1.225×10-3 0.480 0.518 7
X1X3 -2.220×10
-16 1 -2.220×10-16 -8.725×10-14 1.000 0
X2X3 2.250×10
-4 1 2.250×10-4 0.088 0.778 2
X1
2 0.200 1 0.200 76.750 0.000 3**
X2
2 0.070 1 0.070 27.430 0.003 4**
X3
2 9.231×10-5 1 9.231×10-5 0.036 0.856 4
模型 0.280 9 0.032 12.430 0.006 3**
残差 0.013 5 2.545×10-3
失拟项 5.325×10-3 3 1.775×10-3 0.480 0.729 3
误差 7.400×10-3 2 3.700×10-3
总离差 0.300 14
如表9所示,提取温度(X2)对花色苷提取量影响显
著(P<0.05),加酶量二次项(X1
2)和提取温度二次项
(X2
2)对花色苷提取量影响极显著(P<0.01),说明
提取温度对花色苷提取量具有较大影响,加酶量对其有
一定影响,而提取时间对其影响较小。所得模型极显著
(P<0.01),失拟项不显著(0.729 3),且表8中预测
值与试验值较接近,说明该回归模型合理,可很好解释
响应值。
2.2.2 响应面分析及优化
4.5
4.7
4.8
4.6
4.4
4.3
4.9
1.0
1.0 ˉ1.0ˉ0.50.0 0.0ˉ1.0ˉ 0.50.5 0.5X2˖ᨀਆ⑙ᓖ X 1˖ ࣐䞦䟿㣡㢢㤧ᨀਆ䟿/ ˄mg/g ˅
图 1 加酶量和提取温度对黑莓酒渣花色苷提取量影响的响应面图
Fig.1 Response surface plot showing the effects of enzyme amount
and extraction temperature on the yield of anthocyanins extracted from
blackberry wine pomace
4.5
4.7
4.8
4.6
4.4
4.3
4.9
1.0
1.0 ˉ1.0ˉ0.50.0 0.0ˉ1.0ˉ 0.50.5 0.5X3˖ᨀਆᰦ䰤 X 1˖ ࣐䞦䟿㣡㢢㤧ᨀਆ䟿/ ˄mg/g ˅
图 2 加酶量和提取时间对黑莓酒渣花色苷提取量影响的响应面图
Fig.2 Response surface plot showing the effects of enzyme amount and
extraction time on the yieldo f anthocyanins extracted from
blackberry wine pomace
4.5
4.7
4.8
4.6
4.4
4.3
4.9
1.0
1.0 ˉ1.0ˉ0.50.0 0.0ˉ1.0ˉ0.50.5 0.5X3˖ᨀਆᰦ䰤 X 2˖ ᨀਆ⑙ᓖ㣡㢢㤧ᨀਆ䟿/ ˄mg/g ˅
图 3 提取温度和提取时间对黑莓酒渣花色苷提取量影响的响应面图
Fig.3 Response Surface plot showing the effects of extraction
temperature and time on the yield of anthocyanins extracted from
blackberry wine pomace
由图1~3可看出,任何两个交互因素的响应面都存
在最高点,加酶量和提取温度对花色苷提取量的影响较
大,而提取时间对其影响较小。通过Design-Expert V8.0
软件分析得到黑莓酒渣中花色苷的最佳提取条件为加酶
量0.30%、提取温度48.39 ℃、提取时间20 min,在此提取
条件下黑莓酒渣中花色苷提取量的预测值为4.86 mg/g。为
了验证该响应面结果的可行性,对所得最佳条件进行了
优化和验证实验。在加酶量、提取温度和提取时间分别
为0.30%、48 ℃和20 min条件下进行5 次实验,所得花色苷
提取量平均值为4.70 mg/g,标准偏差为0.07 mg/g,说明该
条件下试验结果稳定;与预测值的相对误差为3.29%,说
明该响应面结果可靠。
2.3 超声波辅助果胶酶法与酸化乙醇法的比较
利用优化的超声波辅助果胶酶法提取黑莓酒渣中花
色苷提取量为(4.70±0.11) mg/g,与常用的酸化乙醇
法所得提取量(4.12±0.06) mg/g相比提高了14.08%。
这可能是因为花色苷存在于黑莓皮渣细胞内部的液泡
中,果胶酶酶解掉黑莓细胞壁中的果胶,促使细胞破
裂;另外,超声波的空化效应和振动作用,也促使黑莓
细胞破裂;同时,超声波还有助于果胶酶与细胞壁中果
胶充分结合和作用[18-19]。因此在果胶酶和超声波的双重作
用,大大加速了黑莓细胞壁的溶解和细胞的破裂,从而
促进了细胞内部花色苷的溶出。
2.4 黑莓酒渣中花色苷的抗氧化性分析
图4A显示的是花色苷的抗猪油氧化能力测定结果,
随着花色苷添加量的增加,其抗猪油氧化的能力逐渐增
强;添加量为0%~0.8%时,随着添加量的增加,其抗
氧化能力增加较快,添加量大于0.8%时其对猪油的抗氧
化能力达到最大;和VC相比,其抗猪油氧化能力略小
于同等添加量条件下VC。图4B、4C分别显示的是提取
花色苷的羟自由基清除能力和DPPH自由基清除能力测
定结果。随着花色苷质量浓度的增加,其羟自由基清除
能力和DPPH自由基清除能力均逐渐增强;花色苷质量
浓度在0~0.4 mg/mL时,随着质量浓度的增加,其羟自
由基和DPPH自由基清除能力增加较快,质量浓度大于
※工艺技术 食品科学 2015, Vol.36, No.06 67
0.4 mg/mL时两清除率均达70%以上;和同质量浓度的VC
相比其羟自由基清除率略小,而其DPPH自由基清除率略
大。这些结果说明黑莓酒渣中花色苷具有一定的抗猪油
氧化能力、羟自由基清除能力和较强的DPPH自由基清除
能力。
0
3
6
9
12
15
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0␫࣐䟿/%ᣇ⥚⋩≗ॆ㜭࣋/˄mmol/kg˅ VCa A a bb cc dc c ce e
0
20
40
60
80
100
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
㗏㠚⭡ส␵䲔⦷/% VCB bba
a
c
c

d
e e
e e
d
0
30
60
90 C
0.0 0.1
a
a
b
b
c
c
d
d
e
e e
e
0.2 0.3 0.4 0.5䍘䟿⎃ᓖ/˄mg/mL˅
A.抗猪油氧化能力;B.羟自由基清除能力;C. DPPH自由基清除能力。
不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同。
图 4 黑莓酒渣中花色苷的抗氧化性
Fig.4 Anti-oxidant activity of anthocyanins extracted from
blackberry wine pomace
2.5 黑莓酒渣中花色苷的抑菌活性分析
1.20.4 0.8
བྷ㛐ᵶ㧼䠁哴㢢㪑㨴⨳㧼
2.01.60.0
1.2
0.6
0.9
a
a b
b
c
c
d
c c
d
d
c
0.3
0.0 䍘䟿⎃ᓖ/˄mg/mL˅A 600 nm
图 5 黑莓酒渣花色苷对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长的抑制作用
Fig.5 Inhibitory effects of anthocyanins from blackberry wine pomace
on growth of E. coli and Staph. aureus
由图5可知,接种于LB液体培养基培养24 h后,随
着培养基中花色苷质量浓度的增加,大肠杆菌和金黄色
葡萄球菌的A600 nm值均逐渐减小,在0~1.2 mg/mL质量浓
度范围内金黄色葡萄球菌的A600 nm值下降更为明显;金
黄色葡萄球菌和大肠杆菌在花色苷质量浓度分别大于
1.2 mg/mL和1.6 mg/mL时,A600 nm值接近于0(说明其没
有生长)。这些结果说明了黑莓酒渣中花色苷对大肠杆
菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用;对金黄色葡
萄球菌的最低抑制质量浓度为1.2 mg/mL,对大肠杆菌的
最低抑制质量浓度为1.6 mg/mL;在一定质量浓度范围内
对金黄色葡萄球菌的抑制作用要明显于对大肠杆菌的抑
制作用。
3 结 论
响应面优化超声波辅助果胶酶法提取黑莓酒渣中花
色苷得:当料液比1∶15(g/mL)、超声波功率300 W、
pH 4.5时,最佳提取条件为果胶酶添加量0.30%、提取
温度48 ℃、提取时间20 min,此条件下花色苷提取量为
4.70 mg/g,和常用的酸化乙醇法相比提高了14.08%。所
提花色苷具有一定的抗猪油氧化能力、羟自由基清除能
力和较强的DPPH自由基清除能力,并可有效抑制大肠杆
菌和金黄色葡萄球菌的生长。此研究对提高黑莓酿酒副
产物的经济价值和促进黑莓产业的发展具有重要意义。
参考文献:
[1] 李维林, 吴文龙, 张春红, 等. 世界黑莓产业发展和研究现状及前景[J].
植物资源与环境学报, 2012, 21(3): 105-115.
[2] 王学勇, 张均营. 树莓和黑莓的研究进展[J]. 安徽农业科学, 2010,
38(10): 5070-5073.
[3] 吴文龙, 李维林. 黑莓引种栽培与利用[M]. 南京: 江苏科学技术出
版社, 2010: 6-17.
[4] 陈钢, 黄立山, 徐静, 等. 黑莓花色苷的超声波提取与抗氧化性活性
研究[J]. 食品科学, 2012, 33(24): 117-121.
[5] 吴文龙, 李维林, 闾连飞, 等. 不同品种黑莓鲜果营养成分的比较[J].
植物资源与环境学报, 2007, 16(1): 58-61.
[6] WANG S Y, LIN H S. Antioxidant activity in fruit and leaves of
blackberry, raspberry and strawberry is affected by cultivar and
maturity[J]. Journal of Agriculture and Food Chemistry, 2000, 48:
140-146.
[7] 尹震花, 王佳佳, 顾海鹏, 等. 黑莓(萨尼)果实体外抗氧化活性研究[J].
天然产物研究与开发, 2013, 25(4): 530-532.
[8] KONG J M, CHIA L S, GOH N K, et al. Analysis and biological
activities of anthocyanins[J]. Phytochemistry, 2003, 64(5): 923-933.
[9] 张丽霞, 周剑忠, 顾振新, 等. 黑莓花色苷的分离纯化与抗氧化活性
研究[J]. 江苏农业科学, 2012, 40(8): 244-247.
[10] CACACE J E, MAZZA G. Optimization of extraction of anthocyanins
from black currants with aqueous ethonal[J]. Journal of Food Science,
2003, 68(1): 240-248.
68 2015, Vol.36, No.06 食品科学 ※工艺技术
[11] ELISIA I, HU C, POPOVICH D G, et al. Antioxidant assessment of
an anthocyanin-enriched blackberry extract[J]. Food Chemistry, 2007,
101: 1052-1058.
[12] BOATENG J, VERGHESE M, SHACKELFORD L, et al. Selected
fruits reduce azoxymethane (AOM)-induced aberrant crypt foci (ACF)
in Fisher 344 male rats[J]. Food and Chemical Toxicology, 2007, 45:
725-732.
[13] 于东, 陈桂星, 方忠祥, 等. 花色苷提取分离纯化及鉴定的研究进展[J].
综述与专题评论, 2009, 35(3): 127-133.
[14] 冷吉燕, 张婧, 邵明柏. 蓝莓花色苷的研究进展[J]. 中国老年学杂志,
2011, 31(9): 3419-3423.
[15] 李立, 刘晔玮, 岳雄, 等. 黑莓果渣中花色苷的提取工艺研究[J]. 天
然产物研究与开发, 2011, 23(5): 939-945.
[16] 卢锋波, 袁晔, 李玮, 等. 黑莓花色苷色素提取方法比较研究及优化[J].
江苏农业科学, 2010(5): 366-369.
[17] 卢锋波, 刘桂玲, 王烁, 等. 响应面法优化果胶酶酶解提取黑莓花色
苷的工艺参数[J]. 食品科学, 2010, 31(16): 11-15.
[18] CHANDINIA S K, JAGANMOHAN R L, GOWTHAMAN M K, et
al. Enzymatic treatment to improve the quality of black tea extracts[J].
Food Chemistry, 2011, 127(3): 1039-1045.
[19] 袁春龙, 张金. 纤维素酶和果胶酶对番茄红素提取的影响[J]. 食品
科学, 2010, 31(13): 100-104.
[20] 王秀菊, 杜金华, 马磊, 等. 蓝莓酒渣中花色苷提取工艺的优化及其
稳定性的研究[J]. 分离与提取, 2009, 35(9): 151-156.
[21] 宋德群, 孟宪军, 王晨阳, 等. 蓝莓花色苷的pH示差法测定[J]. 沈阳
农业大学学报, 2013, 44(2): 231-233.
[22] 李颖畅, 马春颖, 孟宪军, 等. 蓝莓花色苷提取物抗油脂氧化能力的
研究[J]. 中国粮油学报, 2010, 25(2): 92-95.
[23] ATOUI A K, MANSOURI A, BOSKOU G, et al. Tea and herbal
infusions: their antioxidant activity and phenolic profile[J]. Food
Chemistry, 2005, 89: 27-36.
[24] 李颖畅, 李冰心, 孟良玉, 等. 圣云蓝莓花色苷不同组分的体外抗氧
化性和稳定性[J]. 食品科学, 2012, 33(9): 105-109.
[25] 韩永斌, 朱洪梅, 顾振新, 等. 紫甘薯花色苷色素的抑菌作用研究[J].
微生物学通报, 2008, 35(6): 913-917.