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至80 mL ,按供试品溶液制备方法制备并测定 ,计算回 收率 ,结果见表 2 ,表明各组分回收率良好。
表 2　加样回收实验结果(n=6)
成分 取样量/ g 样品中含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/ %
人参皂苷 Rg1 0.988 0 0.505 5 0.481 6 0.988 5 100.29 101.6 1.7
1.003 3 0.513 3 0.481 6 0.998 9 100.83
0.981 2 0.502 0 0.481 6 0.983 9 100.06
1.005 3 0.514 3 0.481 6 1.002 6 101.39
1.016 9 0.520 2 0.481 6 1.024 5 104.71
0.997 8 0.510 5 0.481 6 1.003 2 102.30
人参皂苷 Rb 1 0.988 0 0.481 9 0.394 4 0.873 9 99.39 99.8 2.8
1.003 3 0.489 4 0.394 4 0.901 7 104.54
0.981 2 0.478 6 0.394 4 0.867 1 98.50
1.005 3 0.490 4 0.394 4 0.880 2 98.83
1.016 9 0.496 0 0.394 4 0.876 0 96.35
0.997 8 0.486 7 0.394 4 0.885 8 101.19
三七皂苷 R1 0.988 0 0.109 3 0.179 6 0.288 3 99.67 97.7 1.7
1.003 3 0.111 0 0.179 6 0.287 4 98.22
0.981 2 0.108 5 0.179 6 0.286 9 99.33
1.005 3 0.111 2 0.179 6 0.285 5 97.05
1.016 9 0.112 5 0.179 6 0.285 8 96.49
0.997 8 0.110 4 0.179 6 0.281 8 95.43
2.9　含量测定　按上述制备方法和色谱条件对 3批
胃痞消颗粒进行含量测定 ,结果见表 3。
表 3　胃痞消颗粒含量测定结果
批号 人参皂苷 Rg1/mg· g -1 人参皂苷 Rb1/mg· g -1 三七皂苷 R1/mg· g -1
07001 1.308 0.914 0.220
07002 1.328 0.924 0.206
07003 1.320 0.918 0.254
平均值 1.319 0.919 0.227
3　讨论
参考文献方法[ 2] ,选择乙腈-水(20∶80)为流动
相 ,但阴性样品有干扰;参考《中国药典》(2005年版
一部)中三七药材的含量测定方法[ 3] ,选择 203 nm
为检测波长 ,以乙腈-水为流动相 ,进行梯度洗脱:0 ～
12 min(19∶81), 12 ～ 60 min (19 ～ 36∶81 ～ 64),结
果供试品中 3种皂苷成分不能有效分离 ,后对流动相
的梯度洗脱条件进行优化 ,采用梯度洗脱:0 ～ 22 min
(19∶81),22 ～ 70 min(19 ～ 35∶81 ～ 65),结果 3种
皂苷成分与杂质峰的分离度好 ,基线分离 ,阴性对照
无干扰。
实验中对超声提取时间进行了考察 ,对样品分别
超声 30 ,45和 60 min ,结果发现超声 45和 60 min的
含量比超声 30 min的含量高 ,且差异有统计学意义。
而超声 45和 60 min的样品含量差异无统计学意义 ,
因此最终确定提取时间为 45 min。
我们对溶剂甲醇的用量进行了比较 ,结果发现 ,
溶剂用量为 60 mL 的供试品含量明显较 80 和 100
mL 的低 ,而溶剂用量为 100和 80 mL 的含量差异无
统计学意义 ,最终确定溶剂加入量为 80 mL ,即可完
全提取出 3种皂苷。
参考文献:
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(收稿日期:2010-07-21)
比色法测定刺山柑巴布剂总酚酸
含量
张　华1 ,朱晓薇1 ,王新春2 ,陈　文1＊(1.石河子大学药
学院 , 新疆 石河子 832002;2.石河子大学第一附属医院 ,
新疆 石河子 832002)
摘要:目的　测定刺山柑巴布剂中总酚酸的含量。 方法　以
原儿茶酸为对照品 , 采用三氯化铁-铁氰化钾比色法 , 在 710
nm 波长处对刺山柑巴布剂中总酚酸进行含量测定。结果　总
酚酸分析的线性范围为 0.43 ～ 2.57 μg ·mL-1(r =0.999 7),
平均回收率为 96.5%(n=9), RSD为 4.9%。结论　该方法
操作简便 , 准确灵敏 ,重复性好 , 可作为刺山柑巴布剂中总酚
酸的质量控制方法。
关键词:刺山柑巴布剂;比色法;总酚酸;含量测定
doi:10.3969/ j.issn.1004-2407.2011.02.018
中图分类号:R927.2　　　文献标志码:A　　　
文章编号:1004-2407(2011)02-0109-03
基金项目:兵团科技攻关计划课题(2008GG34), 石河子大学
科学技术研究发展计划课题(ZRKX2009YB21)
作者简介:张华 , 女 ,硕士 , 讲师
＊通信作者:陈文 ,男 , 教授
109西北药学杂志　2011 年 4 月　第 26 卷　第 2 期
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　　刺山柑(Cap paris spinosa L .),异名刺山柑 、瓜
儿菜 、伯格-塔乌孜等 ,俗称野西瓜 ,系白花菜科山柑
属植物 ,广泛分布于新疆境内 ,民间广泛用其治疗痛
风 、类风湿性关节炎以及各种疮疡肿毒 ,是一种传统
维药[ 1] 。《新疆药用植物志》中也有记载 ,其叶 、果 、根
均能入药 ,功能祛风除湿 、止痛消肿[ 2] 。国外该植物
主要分布在地中海周围 ,生长期为 5月 ～ 10 月。国
外报道该植物有治疗肝硬化[ 3] 、保护关节软骨细
胞[ 4] 、抗菌[ 5-7] 、抗炎[ 8-10] 、抗氧化作用[ 11-12] 。刺山柑
总酚酸的药效学实验结果表明 ,总酚酸具有一定抗炎
镇痛活性 ,可作为制剂质量控制的指标。因此 ,笔者
利用比色法测定了巴布剂中总酚酸含量 ,方法简便 、
快速 ,重复性好 ,可作为刺山柑巴布剂检测的方法 。
1　仪器与试药
1.1　仪器　UV-2401分光光度计(日本岛津公司);
S arto rius(BP211D)十万分之一电子天平(北京赛多
利斯仪器系统有限公司);R-201旋转蒸发仪(上海申
生科技有限公司);超声提取器(上海科导超声仪器有
限公司);恒温水浴锅(上海鑫培仪器设备有限公司);
涂布机(自制)。
1.2　试药　刺山柑巴布剂(自制);原儿茶酸对照品
(中国药品生物制品检定所 , 批号 110809-200604)、
十二烷基硫酸钠 、三氯化铁 、铁氰化钾等试剂均为分
析纯;水为重蒸水。
2　方法与结果
2.1　刺山柑巴布剂的制备　先将甘羟铝用甘油分
散 ,在室温条件下搅拌均匀;称取处方量的聚丙烯酸
钠(NP-700)加入研钵中搅拌均匀 ,室温条件下将刺
山柑浸膏加入酒石酸溶液 ,搅拌混匀后倒入上述乳钵
中继续搅拌使之混匀即得巴布剂基质 ,将基质均匀涂
布于无纺布上 ,室温放置 24 h ,覆盖上保护膜 ,剪裁 ,
密封即得刺山柑巴布剂。
2.2　比色法测定刺山柑巴布剂总酚酸含量
2.2.1　供试品溶液的制备　取本品一贴 ,剪碎 ,放入
250 mL 圆底烧瓶中 ,加体积分数 75%的乙醇 100
mL ,加热回流提取 2次 ,每次 0.5 h;浓缩 ,用体积分
数 75%的乙醇定容至 100 mL 量瓶中;吸取 5 mL 置
于 50 mL 量瓶中 ,用体积分数 75%乙醇定容至刻度 ,
作为供试品溶液 。
2.2.2　阴性对照溶液的制备　按处方组成 ,除刺山
柑浸膏外 ,按刺山柑巴布剂制备方法制成阴性样品 ,
按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。
2.2.3　标准曲线的制备[ 13] 　精密吸取原儿茶酸对
照品溶液(0.021 4 mg ·mL-1)0.5 ,1.0 ,1.5 ,2.0 ,2.5 ,
和3.0 mL ,分别置于 25 mL 量瓶中 ,加体积分数 75%
乙醇至 5.0 mL ,再加 3 g ·L-1十二烷基硫酸钠 2.0 mL
及 6 g ·L-1三氯化铁-9 g ·L-1铁氰化钾(1∶0.9)混合
液 1.0 mL ,混匀 ,在暗处放置 5 min;加0.1 mol·L-1盐
酸溶液至刻度 ,摇匀 ,在暗处放置 20 min ,以显色剂
为空白 ,在 710 nm 波长处测定吸光度。以原儿茶酸
的质量浓度为横坐标 ,吸光度为纵坐标 ,得回归方程:
Y =0.311 7X -0.012 , r =0.999 7。结果表明 ,原儿茶
酸在0.43 ～ 2.57 μg ·mL-1范围内呈良好线性关系。
2.2.4　供试品的含量测定　取同批号巴布剂 5贴 ,
分别制成供试品溶液 ,从供试品溶液中精密移取 2.0
mL ,置于 25 mL 量瓶中 ,按照 2.2.3 项下操作 ,测定
供试品溶液的吸光度 ,计算 ,得巴布剂中总酚酸平均
含量为 12.57 mg ·贴-1 , RSD为 1.31%。
2.2.5　精密度实验　精密吸取同一样品溶液 2.0
mL ,按照 2.2.3项下操作 ,连续 5次测定相同质量浓
度溶液的吸光度 ,RSD为 4.01%。
2.2.6　稳定性实验　精密吸取同一样品溶液 2.0
mL ,显色后分别于 10 ,20 , 30 , 40 , 50 和 60 min 测定
吸光度 ,计算以原儿茶酸计的总酚酸类成分含量。结
果表明 , 供试品溶液在 30 min 内稳定 , 30 min 内
RSD为 6.41%。
2.2.7　回收率实验　精密吸取同一样品溶液 2.0
mL ,分别加原儿茶酸对照品 1.0 ,1.25和 1.5 mL ,考
察加样回收率 ,测得平均回收率为 96.5%。见表 1。
表 1　回收率实验结果
实验号 理论总酚酸量/μg 实测总酚酸量/μg 回收率/ % 平均回收率/ % RSD/ %
1 21.40 22.32 104.3
2 21.40 21.84 102.0
3 21.40 21.60 100.9
4 26.75 25.05 93.6
5 26.75 24.65 92.1 96.5 4.9
6 26.75 24.81 92.7
7 32.10 29.54 92.0
8 32.10 30.27 94.3
9 32.10 31.07 96.8
2.2.8　重复性实验　分别取同批号样品 5 份 ,每份
2.0 mL ,按照 2.2.3 项下操作测定总酚酸含量 。测
得 RSD为 2.30%,结果表明本方法的重复性较好 。
3　讨论
①巴布剂的制备过程中采用交联剂先与保湿剂
混匀 ,再与交联调节剂和其他物质混匀 ,搅拌时间为
10 min ,炼合温度为 25℃, 否则不易混匀且形成颗
粒 ,同时搅拌速度应慢 ,接触面积应大 ,最好在乳钵中
制备 ,尽量避免气泡的出现 。
②酚酸类成分在高温下不稳定 ,因此在提取及减
压浓缩过程中应控制好温度 ,尽量使其保持在相对较
低温度下操作。
110 西北药学杂志　2011 年 4 月　第 26 卷　第 2 期
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③本实验采用铁氰化钾-三氯化铁等试剂显色后
测定 ,反应时间和放置时间对吸光度的影响较明显 ,故
应严格控制 。操作时应注意空白溶液 、对照品溶液 、供
试品溶液加入各种试剂的量及测定时间的一致性 。
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(收稿日期:2010-10-14)
HPLC法测定痘美乐颗粒中丹参酮
ⅡA的含量
寻　园1 ,庞来祥2＊ ,刘艳梅1 ,张　蒙1 ,郭　涛2
(1.陕西中医学院 ,陕西 咸阳 712046;2.解放军第 451 医院 ,
陕西 西安 710054)
摘要:目的　采用高效液相色谱法测定痘美乐颗粒中丹参酮
ⅡA 的含量。方法　以 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm , 5 μm)
为固定相;甲醇-水(71∶29)为流动相;检测波长为 270 nm 进
行测定。结果　丹参酮ⅡA 在 0.152 ～ 0.760 μg 内呈良好的
线性关系 , r =0.999 7 , 平均加样回收率为 101.0%(RSD 为
1.9%, n =5)。结论　该方法测定痘美乐颗粒中丹参酮ⅡA
的含量 , 结果准确 ,重复性好。
关键词:H PLC;痘美乐颗粒;丹参酮ⅡA;含量测定
doi:10.3969/ j.issn.1004-2407.2011.02.019
中图分类号:R927.2　　　文献标志码:A　　　
文章编号:1004-2407(2011)02-0111-02
作者简介:寻园 , 女 ,硕士研究生
＊通信作者:庞来祥 ,男 , 主任药师 ,硕士研究生导师
　　痘美乐颗粒是解放军第四五一医院院内制剂 ,为
纯中药制剂 ,由丹参等中药组成 ,具有清热燥湿 、解毒
功能 ,用于治疗青春痘 、粉刺 。笔者采用 HPLC 法对
其有效成分丹参酮ⅡA 进行含量测定[ 1-2] ,结果表明 ,
本方法简便 、准确 ,重复性好 ,可用于控制痘美乐颗粒
的内在质量 。
1　仪器与试药
1.1　仪器　SP8810高效液相色谱仪:美国物理光谱
公司 SP8010泵 , SP200 紫外检测器 , N2000 色谱工
作站;KQ-50DE型数控超声仪 (昆山市超声仪器有
限公司 );JA2003N 电子天平(上海精密科学仪器有
限公司)。
1.2　试药　痘美乐颗粒(自制);丹参酮 ⅡA 对照品
(中国药品生物制品检定所 ,批号 110766-200417);
甲醇为色谱纯;水为双蒸水 。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 　固定相为 Diamonsil C18色谱柱
(250 mm×4.6 mm , 5 μm);流动相为甲醇-水(71∶
29);检测波长为 270 nm ;流速为 1.0 mL·min-1 ;柱
温为室温。定量方法为外标峰面积法。
2.2　对照品溶液的配制　取丹参酮 ⅡA 对照品适量
加甲醇制成 0.038 mg ·mL-1的溶液。
2.3　供试品溶液的制备　取本品约 0.4 g ,精密称
定 ,置具塞锥形瓶中 , 精密加入甲醇 50 mL 称定质
量 ,加热回流 1 h ,放冷 ,用甲醇补足减失质量 ,摇匀 ,
滤过 ,取滤液 ,即得。
2.4　阴性对照溶液的制备　按处方比例取缺丹参的
其余药材 ,按制备工艺制成阴性样品 ,按供试品制备
111西北药学杂志　2011 年 4 月　第 26 卷　第 2 期