全 文 ：山竹果壳中 α －倒捻子素和水溶性多糖的含量测定
张成中1，2，卜其涛1，刘发贵1，郑毅男1
*
(1．吉林农业大学中药材学院，长春 130118;2．阜阳市食品药品检验所，阜阳 236015)
摘要 目的:测定山竹果壳中 α －倒捻子素(α － mangostin)和水溶性多糖的含量。方法:采用闪式提取技术结合高效液相色谱
法测定山竹果壳中 α －倒捻子素的含量;蒽酮浓硫酸法测定水溶性多糖的含量，紫外吸收光度法测定水溶性多糖与纳米二氧
化钛(TiO2)及芦丁的抗紫外线作用。结果:闪式提取技术最佳提取工艺条件下测得山竹果壳中 α －倒捻子素的质量分数为
6. 72%;水溶性多糖的含量为 6. 19%。结论:闪式提取技术结合高效液相色谱法测定山竹果壳中 α －倒捻子素方法简单、准
确。水溶性多糖具有较好的抗紫外线辐射作用。
关键词:α －倒捻子素;水溶性多糖;山竹;抗紫外线辐射;闪式提取技术;高效液相色谱
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:0254 － 1793(2012)02 － 0245 － 04
Determination of α － mangostin and aqueous
polysaccharides in mangosteen pericarp
ZHANG Cheng － zhong1，2，BU Qi － tao1，LIU Fa － gui1，ZHENG Yi － nan1*
(1． College of Chinese Medicinal Materials，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，China;
2． Fuyang Institute for Food and Drug Control，Fuyang 236015，China)
Abstract Objective:To determine the content of α － mangostin and polysaccharides in mangosteen pericarp．
Methods:α － Mangostin in mangosteen pericarp was extracted by Smashing Tissue Extraction(STE)and was quan-
tified by HPLC． The content of polysaccharides was determined by anthrone － H2SO4 methodology． The ultraviolet /
visible spectrophotometry was applied for evaluating the ultraviolet － screening activity of polysaccharides，microcrys-
talline titanium dioxide (TiO2)and rutin． Results:Determined by the optimum extractive technological condition，
the content of α － mangostin was 6. 72% ． The content of polysaccharides in mangosteen pericarp was 6. 19% ． Con-
clusion:STE combined with HPLC method newly developed were simple and accurate for extraction and determina-
tion of α － mangostin in mangosteen pericarp． In addition，polysaccharides from mangosteen pericarp exerted higher
inhibitory in ultraviolet － screening．
Key words:α － mangostin;polysaccharides;Garcinia mangostana Linn．;ultraviolet － screening;flash type extrac-
tion technology;HPLC
山竹(Garcinia mangostana Linn．)为藤黄科藤
黄属植物，主要分布于泰国、越南、马来西亚、印度尼
西亚、菲律宾等东南亚国家。其果皮一直作为东南
亚国家的传统药物用于腹痛、腹泻、痢疾、霍乱、感染
性创伤、化脓、慢性溃疡等疾病的治疗，现代科学研
究发现，山竹中含有多种活性成分，包括双苯吡酮、
酚酸、多糖、色素等，具有抗炎、抗菌、截疟、降血脂、
抗氧化、抗 HIV、免疫调节等多方面的药理活性［1］。
双苯吡酮类化合物是山竹果壳中的主要活性物质，
其中 α －倒捻子素(α － mangostin)是最主要的双苯
吡酮衍生物之一，具有抗氧化［2］、抗炎［3］等多种药
理活性。山竹果壳中的水溶性多糖研究较少，目前
仅有少数文献［4］报道了其抗氧化的作用。
本文采用闪式提取技术结合高效液相色谱
(HPLC)法测定了山竹果壳中 α －倒捻子素的含量，
并评价了不同条件下闪式提取技术对 α －倒捻子素
含量的影响。采用传统的蒽酮硫酸法测定山竹果壳
中水溶性多糖的含量，采用紫外吸收光度法［5］测定
—542—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2012，32(2)
* 通讯作者 Tel:(0431)84533304，E － mail:zhenyinan@ tom． com
了山竹果壳水溶性多糖的抗紫外线辐射作用。
1 仪器与试剂
JHBE －50S闪式提取器(河南金鼐科技有限公
司) ;UV － 2450 紫外可见分光光度计(日本 SHI-
MADZU公司) ;BP211D 电子天平(德国 sartorius 公
司)。WatersTM600 分析 －半制备型高效液相色谱仪
(美国 Waters公司) ，Zorbax Eclipse XDB － C18柱(25
cm × 9. 4 mm，PN990967. 202)。CHRiST 真空冷冻
干燥机(德国 CHRiST公司)。
山竹购于长春市新天地购物中心家乐福超市，
经吉林农业大学中药材学院郑毅男教授鉴定为藤黄
科藤黄属山竹(G． mangostana) ，取山竹果壳，50 ℃
干燥，粉碎，过筛(80 目) ;乙腈色谱纯(美国 Fisher
公司) ;纯水(杭州娃哈哈有限公司) ;葡萄糖，上海
三浦化工有限公司;化妆品用纳米级二氧化钛
(TiO2) ，上海江沪集团;芦丁，含量≥98%(HPLC) ，
实验室自制;乙醇、氯仿、蒽酮、浓硫酸等均为分析
纯;柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂分厂)。
2 方法与结果
2. 1 α －倒捻子素的分离制备与结构鉴定 称取
山竹果壳粉末 50 g，加入 80%乙醇水溶液 2500 mL，
闪式提取 2 次，过滤，减压回收溶剂，得粗提物。粗
提物经硅胶柱色谱，三氯甲烷洗脱，反复分离、纯化，
得黄色粉末。称取一定量的此粉末，乙腈 －水(85
∶ 15)溶解，HPLC 制备，乙腈 － 水(85 ∶ 15)为流动
相，，减压回收溶剂，冷冻干燥得制备品，经 HPLC 法
鉴定，w≥98%。所得制备品采用质谱、核磁共振波
谱鉴定:EI － MS 显示分子离子峰 m/z 410. 2，推测
其相对分子质量为 410. 2，1H － NMR(CDC13，400
MHz)δ 1. 69，1. 77(各 3H，s，H － 5 〞和 H － 5) ，
1. 83，1. 84(各 3H，s，H － 4 〞和 H － 4) ，3. 45，3. 46
(各 2H，d，H － 1 〞和 H － 1) ，3. 81(3H，s，－
OCH3) ，4. 09，4. 10(2H，s，H － 2 〞和 H － 2) ，6. 30
(1H，s，H －8) ，7. 26(1H，s，H － 1) ，13. 77(1H，s，C5
－ OH)。13C － NMR(CDC13，100 MHz)δ 17. 9(C － 4
〞) ，18. 2(C － 4) ，21. 4(C － 1 〞) ，25. 8(C － 5) ，
26. 6(C － 5 〞) ，26. 8(C － 1) ，62. 0(－ OCH3) ，
93. 3(C － 8) ，101. 6(C － 1) ，103. 6(C － 5a) ，108. 5
( (C －6) ，112. 2(C － 4a) ，121. 5(C － 2 〞) ，123. 2
( (C －2) ，132. 1(C － 3) ，135. 6(C － 3 〞) ，137. 0
(C －4) ，142. 6(C － 3) ，154. 6(C － 7) ，155. 0(C －
2) ，155. 7(C － 1a) ，160. 6(C － 5) ，161. 6(C － 8a) ，
182. 0 (C － 10)。对比文献［6］已知化合物图谱数
据，制备品与 α －倒捻子素基本一致，因此确定制备
品化合物为 α －倒捻子素，结构式如图 1 所示。
图 1 α －倒捻子素的结构式
Fig 1 The structure formula of α － mangostin
2. 2 HPLC法测定山竹果壳中 α －倒捻子素的含量
2. 2. 1 供试品溶液和对照品溶液的制备 称取山
竹果壳粉末 5 g，加入 80%乙醇水溶液 250 mL，闪式
提取 2 次，过滤，减压回收溶剂，用乙腈 －水(85 ∶
15)定容至 100 mL，0. 23 μm 微孔滤膜过滤，滤液即
为供试品溶液。取“2. 1”项下制备所得 α －倒捻子
素 25 mg，用乙腈 －水(85 ∶ 15)定容至 25 mL，0. 23
μm微孔滤膜过滤，制得对照品溶液。
2. 2. 2 方法学考察 分别取“2. 2. 1”项下制备的
对照品溶液 2. 0，4. 0，6. 0，8. 0，10. 0 μL，采用 YMC
－ Pack ODS － A色谱柱(150 mm × 6. 0 mm，5 μm) ，
以乙腈 －水(85 ∶ 15)为流动相，检测波长经 200 ～
400 nm全波长扫描选取最大吸收波长 246 nm，流速
1 mL·min －1，柱温 25 ℃，以进样量(μL)为横坐标，
峰面积为纵坐标，建立标准曲线，回归方程为:
Y = 3. 232 × 106X + 1. 289 × 107 R2 = 0. 9957(n = 5)
精密度、稳定性及重复性考察 RSD(n = 5)均小于
3%，符合相关实验要求。
2. 2. 3 样品中 α － 倒捻子素的含量测定 取按
“2. 2. 1”项下方法制备的供试品溶液，采用“2. 2. 2”
项下色谱条件进样测定，进样量为 5 μL，平行 3 次
测定(图 2)。结果表明:山竹果壳中 α －倒捻子素
的质量分数(n = 3)为 6. 72%，RSD为 1. 1%。
2. 3 水溶性多糖的含量测定
2. 3. 1 供试品溶液和葡萄糖标准溶液的制备 称
取山竹果壳粉末 5 g 置闪式提取器中，再加入 80%
乙醇水溶液 50 mL，闪式提取 3 次，过滤;药渣加 100
mL纯水超声提取 2 次，每次 30 min，过滤;合并 2 次
超声(250 W，40 kHz)提取，滤液用纯水定容至 500
mL，得山竹果壳水溶性多糖溶液。取上述溶液 1. 0
mL，置 10 mL量瓶中用纯水定容，得山竹果壳水溶
—642— 药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2012，32(2)
图 2 对照品(A)与样品(B)HPLC色谱图
Fig 2 HPLC chromatograms of reference substance(A)and sample(B)
1． α －倒捻子素(α － mangostin)
性多糖供试品溶液。准确称量蒽酮 0. 2 g，溶于 100
mL 80%的浓硫酸中，混匀，即为质量分数为 0. 2%
的蒽酮浓硫酸溶液，此溶液临用前配制。精确称取
葡萄糖(105 ℃干燥至恒重)25 mg，加适量纯水溶于
25 mL量瓶中，定容，配制成质量浓度为 1. 00 mg·
mL －1的葡萄糖溶液。取一定量的上述葡萄糖溶液，
配制质量浓度分别为 0. 00，0. 02，0. 04，0. 06，0. 08，
0. 10 mg·mL －1的葡萄糖标准溶液。
2. 3. 2 葡萄糖标准曲线的建立 分别取“2. 3. 1”
项下葡萄糖标准溶液各 2. 0 mL 置于 10 mL 具塞试
管中，放置在冰水浴，再加入 0. 2%的蒽酮浓硫酸溶
液 4. 0 mL于此系列试管中，摇匀，各试管加入溶剂
后，同时置于沸水浴中反应 10 min，流水冷却至室
温，620 nm测定吸光度，以葡萄糖含量 X 为横坐标，
吸光度 Y为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程:
Y = 6. 13X + 0. 6643 R2 = 0. 9731
2. 3. 3 山竹果壳中水溶性多糖含量的测定
取“2. 3. 1”项下山竹果壳水溶性多糖供试品溶
液 2. 0 mL置 10 mL 具塞试管中，放置在冰水浴，加
入质量分数为 0. 2%蒽酮浓硫酸溶液 4. 0 mL，沸水
浴 10 min，流水冷却，测定吸光度，根据葡萄糖标准
曲线计算多糖含量，山竹果壳水溶性多糖的质量分
数为 6. 19%。
加样回收率试验:取山竹果壳水溶性多糖供试
品溶液 2. 0 mL，加入葡萄糖 0. 1 mg，按本节前述方
法测量吸光度，平行测量 3 组(n = 3) ，计算多糖回
收率和 RSD，回收率 95. 1%，RSD为 4. 6%。符合加
样回收率实验要求。精密度试验和稳定性试验
RSD分别为 3. 9%和 5. 1%，符合相关试验要求。
2. 4 山竹果壳水溶性多糖抗紫外线辐射作用的研
究
2. 4. 1 供试溶液的制备 取“2. 3. 1”项下的山竹
果壳水溶性多糖溶液，蒸干溶剂，得水溶性多糖，取
一定量的水溶性多糖分别用纯水配制成质量浓度分
别为 0. 10，0. 20，0. 40，0. 60，0. 80，1. 00 mg·mL －1
的溶液。另取一定质量的纳米 TiO2 和芦丁，分别用
纯水配制成质量浓度分别为 0. 10，0. 20，0. 40，
0. 60，0. 80，1. 00 mg·mL －1的对照品溶液。
2. 4. 2 抗紫外线辐射作用的测定 分别取
“2. 4. 1”项下山竹水溶性多糖溶液和对照品溶液，
UV －2450 紫外 /可见分光光度计 200 ～ 400 nm全波
长扫描测定各浓度条件下的透光率。计算紫外线吸
收率:吸收率(%)= S1 /S2 × 100%(S1 表示紫外线
吸收曲线下面积;S2 表示 200 ～ 400 nm 区域间总面
积) ，图 3 所示，根据实验所得紫外线吸收率值采用
EC50计算软件计算，得山竹果壳水溶性多糖和芦丁
的抗紫外线辐射 EC50值均为 0. 16 mg·mL
－1，随着
浓度的增加山竹果壳水溶性多糖和芦丁的抗紫外线
作用均呈增加趋势，说明在实验测定的范围内山竹
果壳多糖和芦丁抗紫外线作用均呈剂量依赖性关
系。当山竹果壳多糖质量浓度不小于 0. 60 mg·
mL －1时，紫外线吸收率大于 80%，具有很好的抗紫
外线作用。在所测量的浓度范围内纳米 TiO2 的紫
外线吸收率均接近 100%，说明纳米 TiO2 具有非常
强的抗紫外线作用。
3 讨论
3. 1 提取条件的选择 本文首次将闪式提取技术
用于山竹果壳活性物质的提取，考察了不同浓度的
乙醇(50%，60%，70%，80%，90%)、不同的料液比
—742—药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2012，32(2)
图 3 紫外线吸收率
Fig 3 Absorption rate of ultraviolet
(1∶ 50;1∶ 40;1∶ 20;1∶ 10;1∶ 5)、不同提取次数(1 次、
2 次、3 次)等对 α －倒捻子素含量的影响，结果发现
当乙醇浓度为 80%，料液比为 1∶ 50，提取 2 次时为
最佳提取工艺。提取率高于文献［7，8］中的报道。
3. 2 水溶性多糖的测定及活性 多糖是一类天然
高分子化合物，具有多种药理活性。本文采用传统
而经典的蒽酮浓硫酸法测定了山竹果壳中水溶性多
糖的含量，较文献［4］中采用的水醇法更精确，山竹
果壳水溶性多糖的活性研究较少，现有的文献［4］报
道仅证明了其抗氧化作用，本文比较了山竹果壳水
溶性多糖与市场上防晒产品主要的活性物质纳米
TiO2 和芦丁的抗紫外线辐射作用，结果发现山竹果
壳水溶性多糖抗紫外线辐射作用稍次于纳米 TiO2，
与芦丁的作用相当，但是纳米 TiO2 是一种无机纳米
级微粒，具有一定的副作用［9，10］，而天然来源的芦丁
较之山竹果壳多糖具有提取分离与纯化技术要求较
高，溶剂消耗较多等不足之处，因此山竹果壳水溶性
多糖具有开发成天然抗紫外线产品的潜力。
4 结论
本文采用闪式提取技术结合 HPLC 法测定山竹
果壳中α －倒捻子素的含量，在最佳提取工艺条件
下，测得的 α －倒捻子素质量分数为 6. 72%。蒽酮
浓硫酸法测得的水溶性多糖的质量分数为 6. 19%。
同时，本文测定发现山竹果壳水溶性多糖具有较好
的抗紫外线辐射作用。
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