全 文 ：【中药与天然药物】
小叶榕树叶总黄酮水提醇沉工艺研究
叶荣科1　张德志2　周宏兵2　徐位良2　陈加林1　廖华卫2
(1.广州白云山制药总厂 ,广东 广州 510515;2.广东药学院药学系 ,广东 广州 510240)
摘　要　目的:为改进小叶榕黄酮提取工艺 , 降低生产成本 , 对不同比例醇沉结果进行比较。方法:用芦丁为对照 , 比色法 500 nm
处测定总黄酮含量。结果:50%～ 60%醇沉含量最高。结论:该结果对于生产工艺的改进有很好的参考价值。
关键词　小叶榕;比色法;总黄酮;含量测定
中图号　R 284.2　文章编号:1006-8783(2003)04-0330-02　文献标识码:A
作者简介:叶荣科 , 男 , 41岁 , 大学本科 ,总工程师。
研究方向:制药工艺。
　　小叶榕为桑科植物榕树 Ficus microcarpa L .f.的
叶 ,异名落地金线(《本草求原》)。主要分布在热带亚
热带地区 ,我国主要分布在福建 、广东 、广西 、海南 、台
湾和浙江等地 ,为当地的主要植物品种之一 。入药主
用其叶 Folium Fici Microcarpae ,有研究表明小叶榕
叶中主要含黄酮 、三萜类 、齐墩果酸 、脂肪族化合物 、和
甾体化合物等。其中药用成分对治疗心血管疾病 、抗
炎 、抑菌等方面都有显著的效果[ 1 、2] ,民间早有使用 ,
并且用其浸膏作为主成分的哮喘和慢性支气管炎治疗
药咳特灵胶囊已收载在部颁标准中 。但目前对小叶榕
成分理论研究还很少 。为改进小叶榕总黄酮提取工
艺 ,降低提取成本 ,提高和稳定提取效率 ,本文用比色
法对其水提醇沉工艺进行了较系统的研究 ,结果报告
如下 。
1　试剂 、材料
1.1　试剂 、样品 、仪器
小叶榕叶恒温干燥和自然干燥两种 ,乙醇(医用)、
无水乙醇(AR)、95%乙醇(AR),浸膏(干), 7501紫外
分光光度计 ,芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)。
1.2　对照溶液的制备
精密称取芦丁对照品 0.0069 g , φ=50%乙醇定
容至 25 mL ,制成 276 μg/mL 贮备液备用 。
2　样品制备
2.1　干叶样品液的制备
取鲜叶洗净 、凉干 ,置恒温干燥箱中 60 ℃12 h干
燥后 ,粉碎 ,称取干叶粉 100 g 7 份 ,分别加水 1 000
mL 煮沸 、回流提取 2 h ,过滤;滤渣再加水 800 mL ,回
流提取 2 h ,过滤 ,合并滤液 ,浓缩成 100 mL ,置烧杯
中 , 分别加无水乙醇使醇浓度为 0%、25%、35%、
50%、60%、70%、80%,至 500 mL ,使过夜 ,将沉淀过
滤 ,滤液浓缩至 100 mL ,置 250 mL 容量瓶中 , 并用
50%浓度的乙醇溶液定容备用 。
2.2　自然干燥叶样品液的制备
取新鲜叶洗净 、自然凉干 5 d 、剪碎 ,分别称取 100 g
7份 ,以下同“2.1”项下操作 ,定容至250 mL备用 。
3　标准曲线的绘制
取对照品贮备液 1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0 mL 分别
置 25 mL 量瓶中 ,加水至 6 mL ,加 5%亚硝酸钠 1.0
mL ,摇匀 6 min ,加 10%硝酸铝 1 mL ,摇匀 6 min ,加
氢氧化钠试液(1%)1.0 mL ,加水至刻度 ,摇匀 ,在 15
min内 500 nm 处测 A 值[ 3] ,以吸收度为纵坐标 ,质量
浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方程
A =0.012ρ-0.0105 , r=0.9999
结果表明线性范围为 11.04 ～ 55.2 μg/mL 。
图 1　标准曲线
Fig.1　Standard curve
4　样品测定
4.1　干叶
取 3批小叶榕叶 ,按“ 2.1”项下方法 ,分别取按不
同比例乙醇沉淀后制得的样品液 5 mL ,用 φ=50%乙
醇定容至 25 mL ,再从中取 3 mL ,以下同“标准曲线”
项下方法操作 ,结果见表 1。
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第 19 卷第 4期 广　东　药　学　院　学　报 Vol.19 No.4
2003 年 12 月 ACADEMIC JO URNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY Dec.2003
表 1　小叶榕干叶总黄酮含量测定结果(n=3)
Tab.1　Determination results of dried leaves of Ficus microcarpa
φ乙醇/ % C1 C2 C3 ρ(μg/m L) ω总黄酮/ %
25 29.99 29.16 28.58 29.24 0.30
35
50
32.01
36.96
31.98
37.15
31.56
37.31
31.83
37.31
0.33
0.39
60
70
37.16
31.24
36.28
31.07
37.24
30.66
36.89
30.66
0.38
0.32
80 15.85 15.85 15.46 25.46 0.16
0 29.74 28.74 28.66 28.66 0.30
4.2　自然凉干叶
取 3批鲜叶 ,按“2.2”项下醇沉后制成原液 ,各取
1 mL ,定容至 25 mL;取 5 mL 定容至 25 mL;再取 10
mL+1 mL 水 ,下面同“标准曲线”项下方法操作 ,结果
见表 2。
5　回收率 、精密度试验
5.1　回收率试验
取“2.1”项中加 φ=50%乙醇溶液定容后的原液
各3 mL , 5 份 ,加对照品贮备液 1 mL ,照“标准曲线”
项方法操作 ,比色法 500 nm 测A 值 ,结果见表 3。
5.2　精密度试验
取“2.1”项下 φ=50%乙醇沉淀后原液 1 mL 3
份 ,3 mL 3份 ,5 mL 3份 ,同“标准曲线”项方法操作 ,
结果见表 4。
表 2　小叶榕自然凉干叶测定结果(n=3)
Tab.2　Determination results of air-dry leaves
of Ficus microcarpa
φ乙醇/ % C1 C2 C3 ρ(μg/m L) ω总黄酮/ %
25 37.13 38.14 34.14 36.6 1.14
35 37.71 39.06 36.6 38.0 1.19
50 39.46 41.06 41.8 40.8 1.27
60 37.46 37.56 37.2 37.4 1.17
70 34.13 32.57 31.8 32.8 1.02
80 31.63 30.57 27.8 30.0 0.94
0 32.46 33.24 34.2 33.3 1.04
表 3　回收率测定结果
Tab.3　Test results of recovery rate
NO
加入量
ρ/(μg/ mL)
测得量
ρ/(μg/m L) 回收率/ %
1 11.04 10.73 97.2
2 11.04 10.40 94.2
3 11.04 11.39 103.2
4 11.04 10.65 96.5
5 11.04 10.40 94.2
平均回收率=97.06% RSD =3.8%
5.3　出膏率
将干小叶榕叶水煎煮物浓缩不同比例醇沉后 ,滤
液浓缩干燥至恒重 ,结果发现随乙醇比例增加 ,出膏率
降低 ,见图 2 。
表 4　精密度试验结果
Tab.4　Results of accuracy test
NO
ρ(原浓度)
/(μg/ mL) A
ρ(测得值)
/(μg/ mL)
ρ/
(μg/ mL) RSD/ %
1 11.04 0.123 11.10
2 11.04 0.122 11.02 11.13 1.3
3 11.04 0.125 11.27
4 33.12 0.385 32.90
5 33.12 0.383 32.74 32.82 0.2
6 33.12 0.384 32.82
7 55.20 0.646 54.62
8 55.20 0.649 54.87 55.13 1.0
9 55.20 0.659 55.70
平均 RSD =0.83%
图 2　出膏率测定结果
Fig.2　Determination results of extractum yield
6　结论
6.1　本文主要考察了水煮浓缩过程中 , 用 25%～
80%乙醇沉淀后上清液中总黄酮的含量 ,其中烘干叶
50%～ 60%乙醇沉淀后含量最高 ,自然干燥叶是 35%
～ 60醇沉最高。其沉淀效果与文献报道一致[ 3] 。虽
35%～ 60%醇沉结果有显著性差异(P <0.05),当醇
含量超过 60%以后 ,醇比例越高 ,黄酮含量越低。所
以当生产用自然干燥叶时 ,从生产实际和降低成本减
少环境污染的原则 ,以及安全的角度出发建议使用
35%～ 50%的乙醇沉淀 ,此范围内出膏率较高 、产率也
较稳定。
6.2　由本文结果可见 ,自然干燥叶总黄酮比烘箱干燥
叶提取率要高 ,原因有待进一步探讨。
6.3　小叶榕中的黄酮从紫外图谱看其最大吸收在
270 nm 左右 ,可能属于二氢黄酮或香豆素类物质 ,现
以芦丁为对照 ,用亚硝酸钠和硝酸铝碱性比色法测定 ,
样品和芦丁的图谱均在 500 nm 处有吸收 。因此测定
的结果是以芦丁为对照的总黄酮的量。
参考文献
[ 1] 江苏新医学院编.中药大辞典(下册)[ M] .上海:上海科技
出版社 , 1988.2529.
[ 2] 国家中医药局《中华本草》编委会编.中华本草(第二册)
[ Μ] .上海:上海科技出版社 , 1999.495 ～ 497.
[ 3] 夏杏洲 , 张辉 ,魏传晚.榕树叶中黄酮类化合物的提取条件
研究[ J] .食品研究与开发 , 2002 , 23(5):35.
(2003-07-31 收稿;2003-10-25 修回)
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第 4期　叶荣科 ,等:小叶榕树叶总黄酮提取工艺研究