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茶树根抗痛风作用的实验研究



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茶树根抗痛风作用的实验研究
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★ 余雄英1,2** 周军1 曹树稳2 刘升长1 (1.江西中医药大学 江西 南昌 330004 ;2.南昌大学食品科
学与技术国家重点实验室 江西 南昌 330047)
摘要:目的:通过对茶树根抗痛风实验研究,探讨该药抗痛风的药效学作用。方法:采用尿酸钠结晶植入法观察茶树根水煎剂
的抗急性痛风性关节作用;采用腹腔注射尿酸酶抑制剂和尿酸法观察茶树根水煎剂对高尿酸血症的作用.结果:茶树根水煎
剂对痛风性关节炎小鼠有明显的抑制作用;对高尿酸血症模型小鼠的血尿酸和血黄嘌呤氧化酶的活性都有明显的降低作用,
能促进高尿酸血症模型小鼠的尿尿酸的排泄.结论:茶树根具有良好的抗痛风作用。
关键词:茶树根;抗痛风;高尿酸血症;药效学
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A
随着人民生活水平的提高和饮食结构的改变,
各国痛风发病率均与日俱增,痛风患者还出现了年
轻化的趋势。因此研究痛风,开发防治痛风、高尿酸
血症的药物已成为当前医药界研究的一个热点。黄
嘌呤氧化酶 (Xanthine Oxidase ),简称 XOD ,是尿
酸生成的关键酶,同时 XOD也是治疗高尿酸血症的
药物作用靶点[1]。茶树根为山茶科山茶属植物茶的
根,味苦,性平,具有强心利尿、抗菌消炎、收敛止泻
的功效。临床上用于风湿性、高血压性及肺原性心
脏病、冠心病、心律不齐等疾病[2]。目前茶树根化
学成分研究表明新鲜根含水苏糖、棉子糖、蔗糖、葡
萄糖、果糖等糖类,并含少量多酚化合物(黄烷醇
等)、萜类皂苷类成分[3]。江西民间常用茶树根来
治疗痛风[4]。本实验就其抗痛风作用的药理作用
进行了研究。
1 材料
1. 1 动物 昆明种小鼠,雄性,体重(30 ± 2 )g,许
可证号:Scxk(赣)2011 - 0001,江西中医学院实验动
物研究室提供。使用前在实验室 1 周以适应环境。
1. 2 仪器和试剂 7200 型可见分光光度计(尤尼
柯(上海)仪器有限公司)。游标卡尺(桂林广陆数
字测控股份公司);尿酸(Sigma) ,氧嗪酸钾盐(po-
tassium oxonate,Aldrich Chemical Company) ,尿酸测
定试剂盒(南京建成生物工程研究所,生产批号
20110527) ,XOD测定试剂盒(南京建成生物工程研
究所,生产批号 20110628),别嘌呤醇片(上海信谊
万象药业股份有限公司) ,吲哚美辛片(江苏亚邦药
业集团股份有限制造分公司生产)。
茶树根采自茶园,经江西中医学院吴志瑰讲师
鉴定为山茶科山茶属植物茶 Camellia sinensis(L.)
O. Kuntze[Thea sinensis L.]的干燥根。
2 方法
2. 1 试剂配制
2. 1. 1 尿酸、氧嗪酸钾盐混悬液的制备 精密称取
尿酸、氧嗪酸钾盐,分别用 0. 9% CMC - Na 配制混
悬液,其浓度分别为 15 g·L -1和 45 g·L -1。
2. 1. 2 别嘌呤醇液制备 取别嘌呤醇片 10 片,加
蒸馏水溶解配成 1. 5 g·L -1。
2. 1. 3 茶树根水煎剂的制备 按水煎煮工艺自制,
配制成含生药 2 g·mL -1。
2. 1. 4 尿酸钠结晶及尿酸钠溶液的制备 参照文
献[5]略作改进,取 194mL 蒸馏水加 6 mL NaOH (1
M),煮沸后加 1. 0 g尿酸,用 1NHCl ,调 pH 至 7. 2
,搅拌冷却 ,贮存于 4 ℃冰箱中 24 h抽滤,干燥得尿
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JIANGXI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE

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基金项目:江西中医药大学重点学科青年教师培养计划项目(2012jzzdxk018)。
通信作者:余雄英,在读博士,讲师。研究方向:生物制药技术。Tel:(0791)87118921,E - mail:yxy197637@ sina. com。






酸钠结晶。取 1250mg 尿酸钠结 晶 ,加入 45mL 生
理盐水,同时加入 5mL 吐温 80 ,加热搅拌 ,配成
50mL尿酸钠混悬溶液备用 (25mg /mL)。
2. 2 痛风性关节炎小鼠模型的建立 参照文献[6]
等的经典方法略作改进。用 6 号注射针在受试小鼠
右足垫部注射尿酸钠溶液 0. 05mL,诱导痛风性关节
炎发生。
2. 3 痛风性关节炎小鼠模型分组与给药和测量
取 50 只小鼠随机分为 5 组 ,造模前 3 天开始灌胃
给药 ,每日 1 次 。生理盐水组以同体积生理盐水灌
胃。于末次给药后 30min,除生理盐水组小鼠在右
足垫部注射生理盐水 0. 05mL 外,其余各组小鼠在
右足垫部注射尿酸钠混悬溶液 0. 05mL,诱导诱导痛
风性关节炎发生。分别用游标卡尺测量各组小鼠在
致炎前和致炎后 1、3、5 h 小鼠右足垫部的宽度,以
致炎前后的差值作为痛风性关节炎的肿胀度。
观察造模大鼠治疗前后各组关节肿胀的变化,
进行组间差异性比较。
2. 4 高尿酸血症模型的建立 参照文献[7,8]并略
作改进,选用氧嗪酸钾(0. 3 g·kg -1)和尿酸(0. 25
g·kg -1)ip小鼠每天 1 次,连续 3 d 进行造模,增加
血清尿酸水平,造成小鼠高尿酸血症模型。
2. 5 高尿酸血症模型分组与给药 生理盐水组和
高尿酸模型组每天均按 20 mL /kg 剂量 ig 生理盐
水,连续 6d,别嘌呤醇组(10 mg /kg)每天 ig 给药 1
次,持续 6 d,茶树根高剂量组(34. 3 g /kg)、茶树根
低剂量组(17. 15 g /kg)每天 ig 给药 1 次,灌喂 6d,
从给药第 4 天开始,除生理盐水组外,其他各组每天
ig给药前 1h 均要 ip 氧嗪酸钾和尿酸,氧嗪酸钾和
尿酸的剂量分别为 0. 3g /kg和 0. 25g /kg,每天 1 次,
连续 3 天进行造模。在第 5 天 ig 给药后将小鼠放
置代谢笼内,每 5 只一笼,只给自由饮水,不给饲料,
收集尿液 5h,新鲜尿样以 3 000 r /min 离心 15 min
,取上清液进行尿液尿酸测定。在最后一次 ig 给药
1h后从小鼠股动脉进行采血,血样分别置于 1. 5mL
离心管中,在 4℃下凝固 2h,在 3 000 r /min 离心 5
min。每份血样血清取 200μL 用于血清尿酸的测定
与 XOD活力的测定。
2. 6 生化指标检测 分别测定小鼠血尿酸、尿尿酸
水平和血黄嘌呤氧化酶活性。采用磷钨酸法分别检
测各组小鼠尿酸,酶比色法检测黄嘌呤氧化酶。具
体操作按试剂盒说明书进行。
2. 7 统计与处理 采用 SPSS19. 0(for windows)进
行统计学处理,对所有计量资料数据,小鼠体内试验
进行单因素方差分析及显著性、相关性检验。结果
以 珋x ± s表示,组间比较,P < 0. 05 为有统计学意义。
表 1 茶树根水煎剂对痛风性关节炎
小鼠模型的影响(珋x ± s,n = 10)
组别
剂量 /
(g /kg)
致炎前足垫
宽度 /mm
致炎后不同时间足肿胀度 mm
1h 3h 5h
生理盐水 4. 39 ± 0. 13 0. 01 ± 0. 10 0. 03 ± 0. 15 0. 02 ± 0. 17
模型组 4. 65 ± 0. 15 1. 01 ± 0. 07△△ 1. 82 ± 0. 11△△ 2. 20 ± 0. 12△△
吲哚美辛组 0. 00005 4. 41 ± 0. 10 0. 69 ± 0. 18** 0. 99 ± 0. 14*** 0. 105 ± 0. 10***
茶树根高剂量 34. 3 4. 67 ± 0. 14 1. 06 ± 0. 16 1. 21 ± 0. 18** 1. 25 ± 0. 22**
茶树根低剂量 17. 15 4. . 63 ± 0. 22 1. 03 ± 0. 14 1. 51 ± 0. 12* 1. 77 ± 0. 19*
注:与生理盐水组比较:△△ P < 0. 01,与模型组比较* P < 0.
05,**P < 0. 01,***P < 0. 001。
表 2 茶树根水煎剂
对高尿酸血症小鼠尿酸水平的影响(珋x ± s,n = 10)
组别 剂量g /kg
血清尿酸水平
mg /L
尿液尿酸
mg /L
生理盐水组 54. 8 ± 10. 87 124. 2 ± 15. 11
模型组 147. 32 ± 15. 87△△ 148. 7 ± 25. 30△△
茶树根低剂量 17. 15 111. 87 ± 28. 28. 44* 172. 0 ± 34. 24*
茶树根高剂量 34. 3 86. 77 ± 17. 90** 205. 6 ± 18. 56**
别嘌呤醇组 0. 01 34. 79 ± 11. 33*** 146. 32 ± 26. 13
注:与生理盐水组比较:△△P < 0. 01;与模型组比较* P < 0. 05
,**P < 0. 01,***P < 0. 001。
表 3 茶树根水煎剂对高尿酸血症
小鼠血清 XOD活力水平的影响(珋x ± s,n = 10)
组别 剂量 g /kg 血清 XOD活力水平 U /L
生理盐水组 27. 66 ± 2. 41
模型组 43. 13 ± 2. 74△△
茶树根低剂量 17. 15 38. 31 ± 3. 17*
茶树根高剂量 34. 3 30. 73 ± 2. 38**
别嘌呤醇组 0. 01 25. 46 ± 4. 31***
注:与生理盐水组比较:△△ P < 0. 01;与模型组比较* P <
0. 05,**P < 0. 01,***P < 0. 001。
3 结果
3 . 1 茶树根对痛风性关节炎小鼠的影响 小鼠右
足垫部注射微晶尿酸钠后,模型组与生理盐水对照
组比较有显著差异(P < 0. 01) ,说明尿酸盐诱导的
小鼠痛风性关节炎模型成功。茶树根水煎剂高低剂
量组在不同时间点(3、5 h)对尿酸盐诱导的小鼠足
肿胀均有显著抑制作用(P < 0. 01) ,且剂量与抑制
肿胀呈良好的量效关系(P < 0. 05),说明茶树根对
小鼠痛风性关节炎有显著拮抗作用。结果见表 1。
3. 2 茶树根水煎剂对高尿酸血症模型小鼠血尿酸
的影响 与生理盐水组比较,模型组中血清尿酸显
著升高(P < 0. 01) ,说明造模成功,与模型组比较,
茶树根高低剂量组均能显著降低血清尿酸水平[P
< 0. 01(高剂量) ,P < 0. 05(低剂量)]。茶树根高
低剂量组之间有显著差异(P < 0. 05)。而别嘌呤醇
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江西中医药 2014 年 10 月第 10 期总 45 卷第 382 期






组极显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P <
0. 001) ,能降至正常值以下。结果见表 2。
3. 3 茶树根水煎剂对高尿酸血症小鼠尿液尿酸水
平的影响 与生理盐水组比较,模型组中尿尿酸显
著升高(P < 0. 01)。与模型组比较,茶树根高低剂
量组均能显著增加尿尿酸水平[P < 0. 01(高剂量),
P < 0. 05(低剂量)]。茶树根高低剂量组之间有显
著差异(P < 0. 05) ,别嘌呤醇组几乎不能增加高尿
酸血症小鼠尿尿酸水平。结果见表 2。
3. 4 茶树根水煎剂对高尿酸血症小鼠血清 XOD活
力水平的影响 与生理盐水组比较,模型组中血清
XOD活性显著升高(P < 0. 01)。与模型组比较,茶
树根高低剂量组均能显著增加尿尿酸水平[P <
0. 01(高剂量),P < 0. 05(低剂量)]。茶树根高低剂
量组之间有显著差异(P < 0. 05) ,别嘌呤醇组可极
显著降低高尿酸血症小鼠血清 XOD 活性水平(P <
0. 001),能降至正常值以下。结果见表 3。
4 讨论
痛风是一种代谢性疾病,难以根治,其反复发作
可产生痛风石(尿酸盐)沉积,导致关节畸形和肾结
石,有较大的危害性。目前西药治疗痛风有效,但长
期服用,毒副作用大,而使其临床应用受到较大限
制。而茶树根源自食物茶的根,一种中草药,毒副作
用小,安全指数高,江西民间常用它来治疗痛风。
本实验结果表明:茶树根水煎剂对痛风性关节
炎小鼠有明显的抑制作用;对高尿酸血症模型小鼠
的血尿酸和血黄嘌呤氧化酶的活性都有明显的降低
作用,能促进高尿酸血症模型小鼠的尿尿酸的排泄。
上述研究结果为茶树根临床治疗痛风提供了药效学
实验依据 。
参考文献
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(收稿日期:2014-07-30)编辑:
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王河宝
(上接第 19 页)
案例 2:孙蕊,女,27 岁。2013 年 4 月 28 日初
诊。患者未婚,月经量少已 8 个月,月经量为原来的
1 /3。15 岁初潮。末次月经为 2013 年 4 年 20 日,行
经 2 天后经血量明显减少,至第 5 天经净。饮食、睡
眠、二便可。性情急躁易怒,胸闷不舒,常独自呼喊
几声。脐左压痛。给予四逆散原方:柴胡 10g,白芍
10g,枳实 6g,炙甘草 6g。2013 年 5 月 26 日复诊,诉
5 月 21 来经,3 天净,经量已转正常。除行经第一天
晚上腰痛外,现已无任何不适。再予原方 14 剂服
用,至今月经一直正常。
分析:患者同样喜欢喊几声,提示为肝气病,同
时患者有脐左压痛的主症,故予四逆散而取效。
案例 3:申某,男,22 岁,河北中医学院中医系学
生,2007 年 9 月 6 日初诊。患者入睡难,常躺下历 2
- 3 小时亦不入睡,但睡后即不再早醒,就诊时已 1
月余。白天出现头部巅顶及太阳穴处发胀,诉有
“血下不去”的感觉,并且头昏蒙,诉“看书似有不过
脑子”的感觉,尤其下午及晚上头胀甚。并伴手足
冷,大便干。平时两腿烦扰不宁,喜捶打,已两年余。
查有脐左压痛,苔薄白,脉沉弦细,符合四逆散的腹
诊主症及舌脉特点,给予四逆散合二陈汤(陈皮、半
夏、茯苓各 10g),7 剂后复诊,头昏蒙及血不下行之
感已除,两腿烦扰及入睡难已减十分之六七。药后
诉口渴欲饮,夜间觉烦热,上方加丹皮、山栀、知母各
10g,再予 7 剂后诸症均除。
分析:此案例,患者巅顶及太阳穴处发胀,有
“血下不去”的感觉,属于肝气上逆于头所致,手足
冷,时两腿烦扰不宁,喜捶打,是原气不能通达于四
肢的缘故,符合四逆散的病机病位,且同时有刘老师
所说的主症及舌脉:脐左压痛,苔薄白,脉沉弦细,故
给予四逆散,患者头昏蒙是痰浊上蒙的表现,故合二
陈汤治疗,再据药后症状加减而痊愈。
(收稿日期:2014-05-28)编辑:薛铁瑛
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