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基本培养基与生长调节剂组合对素心建兰根状茎增殖和芽分化的影响



全 文 : 收稿日期:2007-06-21
基金项目:湖北省科技攻关计划项目(2006AA205A04)资助
作者简介:高丽(1979-),女,河南南阳人,硕士,从事植物生物技术研究。
注:杨波为通讯作者。

基本培养基与生长调节剂组合对素心建兰根状茎
增殖和芽分化的影响
高 丽,李洪林,杨 波
(中国科学院 武汉植物园,湖北 武汉 430074)

摘 要:以素心建兰茎尖诱导产生的根状茎为材料,研究不同基本培养基和几种生长调节剂组合对其增殖与
芽分化的影响。结果表明,MS培养基为最佳增殖培养基,增殖的最适培养周期为 40d;NAA 0.2mg/L + 6-BA
2.0mg/L组合最适于根状茎分化,芽分化率达 445%。
关键词:建兰;根状茎;基本培养基;植物生长调节剂;增殖;分化
中图分类号:Q944.6 文献标识码:A 文章编号:1009-7791(2007)04-0013-03

Effects of Basic Medium and Plant Growth Regulator Combination on
Multiplication and Differentiation of Rhizome in Cymbidium ensifolium var. susin
GAO Li, LI Hong-lin, YANG Bo
(Wuhan Botanical Garden, the Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, Hubei China)

Abstract: Effects of basic medium and plant growth regulator combination on the multiplication
and differentiation of rhizomes of Cymbidium ensifolium var. susin induced from seed germination
were studied. The results showed that the optimum medium for multiplication and growth of
rhizomes was MS medium, and the best culturing period of multiplication was 40 days. The
optimum plant growth regulator combination for differentiation of rhizomes was NAA
0.2mg/L+6-BA 2.0mg/L, which regeneration rate of shoots reached 445%.
Key words: Cymbidium ensifolium; rhizome; basic medium;plant growth regulator;multiplication;
differentiation

建兰(Cymbidium ensifolium)又称秋兰、四季兰,为兰属地生兰类,素心建兰是其中一个珍贵品
种,有很高的观赏价值和经济价值。中国兰以往用传统的分株繁殖法,繁殖系数低,加之自然条件下
种子萌发率低,因此,现在多采用组织培养繁殖种苗[1]。建兰在组培过程中先形成根状茎,然后分化
成苗,故根状茎的增殖和分化是进行快速繁殖、提高繁殖系数的关键阶段[2]。本实验研究基本培养基
和生长调节剂组合对素心建兰根状茎增殖和分化的影响,以期为素心建兰遗传资源的保存与开发利用
提供基础资料。
1 材料与方法
1.1 材料
以素心建兰‘十八学士’茎尖诱导产生的根状茎为材料。
1.2 方法
1.2.1 基本培养基筛选 以MS、1/2MS、Hyponex、KC为基本培养基,分别附加 6-BA 1.0mg/L (单位

2007,36(4):13-15.
Subtropical Plant Science
第 36卷 ﹒14﹒
下同) + NAA 0.5,培养周期分别为 30d、40d、50d、60d。
1.2.2 生长调节剂组合筛选 以MS为基本培养基,分别附加 NAA 0.2 + 6-BA (0.5、2.0、5.0)、NAA 0.5
+ TDZ (0.05、0.2、0.5),共 6个处理,每处理重复 3次,每重复的外植体数为 40段 1cm长的根状茎。
以上培养基分别附加琼脂 6.0g/L、蔗糖 30g/L,pH 5.8,培养温度(24±2)℃,光照时间 12h/d,光
照强度 40µmol/m2·s。
1.2.3 观察与统计方法 用称重法称量根状茎鲜重,同时观察记录根状茎的生长情况。
净增殖倍数= (培养材料鲜重-接种材料鲜重) /接种材料鲜重
芽分化率=(分化出芽体数/接种根状茎数)×100%
2 结果与分析
2.1 基本培养基对根状茎增殖和生长的影响
在四种基本培养基中,根状茎的净增殖倍数均随培养周期的延长而增加,其中 MS 培养基中根状
茎的净增殖倍数明显高于其它三种培养基(图 1)。当培养 30d时,四种培养基中的根状茎都有不同程
度的生长;培养 40d时,根状茎生长最旺盛,颜色嫩
绿;而培养至 50d、60d时,根状茎的生长速率明显
减慢,且培养基出现不同程度的褐化。因此,培养周
期以 40d为好。
不同基本培养基中,根状茎的增殖和生长方式也
不同。在 Hyponex 培养基中,根状茎形成很多类似
桑果状的球状突起,称其为增殖型根状茎[3](图 2-1);
在 KC 培养基中,根状茎只有部分增粗生长而不伸
长,不利于增殖与生长;在 1/2MS 培养基中,根状
茎顺向生长伸长而不分生突起;MS 培养基中的根
状茎先分生突起,然后沿着突起的方向生长伸长(图
2-2),且根状茎粗壮,生长旺盛,其净增殖倍数最大。可见,MS培养基最适宜根状茎的增殖和生长。
2.2 生长调节剂组合对根状茎分化的影响
由表 1可以看出,采用MS含 NAA 0.2 + 6-BA 0.5和 NAA 0.5 + TDZ 0.05的培养基,根状茎不能
分化成芽,而其它组合中的根状茎都不同程度地分化出芽。在 NAA 0.5 + TDZ 0.5组合中,根状茎上分
化出大量的丛生状不定芽(图 2-3),芽体颜色淡黄泛白,芽分化率最高,但有些芽在培养过程中逐渐黄
化死亡,不能发育成苗。在 NAA 0.2 + 6-BA 5.0组合中,根状茎直接分化出花芽(图 2-4),仅有少量
叶芽。在 NAA 0.2 + 6-BA 2.0组合中,其芽分化率仅次于 NAA 0.5 + TDZ 0.5组合,根状茎分化芽的方
式是先在最先端分化出芽眼,随后在根状茎茎体不同部位独立萌发出芽(图 2-5 ),芽体嫩绿,生长旺盛,
且都能发育成苗,显然,该组合对根状茎分化芽最有利。
表 1 生长调节剂组合及浓度配比对根状茎芽分化的影响
培养基(mg/L) 接种根状茎数(个) 培养 20d出芽数(个) 培养 40d出芽数(个) 芽分化率(%) 成苗数(个)
MS+NAA 0.2+6-BA 0.5 120 0 0 0 0
MS+NAA 0.2+6-BA 2.0 120 428 534 445 534
MS+NAA 0.2+6-BA 5.0 120 48 61 51 61
MS+NAA 0.5+TDZ 0.05 120 0 0 0 0
MS+NAA 0.5+TDZ 0.2 120 317 435 363 431
MS+NAA 0.5+TDZ 0.5 120 430 552 460 489
图 1 不同基本培养基中根状茎净增殖的变化
0
1
2
3
4
5
6
30 40 50 60
培养周期(d)
MS
1/2MS
Hyponex
KC






第 4期 高丽,等:基本培养基与生长调节剂组合对素心建兰根状茎增殖和芽分化的影响 ﹒15﹒
3 讨 论
MS基本培养基的无机盐(硝酸盐、钾盐、铵盐)含量高,属于高盐低水势的培养基,可保证组织
生长所需的矿质营养[4]。本试验表明,供试的几种培养基中,MS培养基对素心建兰根状茎的增殖和生
长最有利,这与墨兰原球茎增殖条件的研究结果一致[4]。而石乐娟等[3]对线艺春兰的研究表明,1/2MS
培养基有利于春兰根状茎的增殖和生长。这可能与不同种中国兰的基因型差异有关,因而,最适培养
基也不同。
生长调节剂种类组合及浓度对根状茎的分化有显著影响,只有适当的种类组合及浓度配比才能有
效地促进根状茎分化。本研究结果表明,过低的生长调节剂浓度不能使根状茎分化出芽,而过高的生
长调节剂浓度又会使根状茎上直接分化出花芽,这些花芽在试管内能正常开花。这为建兰的发育生理
和转基因研究提供了有益参考。另外,本研究采用 NAA 0.2 + 6-BA 2.0组合能有效地促进素心建兰根
状茎分化芽,而孙安慈等[2]研究认为,NAA 0.5 + 6-BA 3.0的组合对彩心建兰根状茎分化芽有利。由此
表明,不同建兰品种的生长调节剂最适配比也不尽相同。因此,在兰花的工厂化生产过程中,应针对
不同品种找出各自最适培养基和培养条件,才能实现高效快速繁殖。
参考文献:
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[3] 石乐娟,等. 植物生长调节剂对线艺春兰根状茎增殖和分化的影响[J]. 园艺学报, 2006,33(3): 887-890.
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(上接第 12页)
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图 2 根状茎增殖生长情况
1.增殖型根状茎;2.伸长型根状茎;3.丛生芽;4.花芽;5.独立萌发的芽