全 文 ：分光光度法测陆英中总黄酮含量时 NaOH的用量研究
涂剑平 ,汪 玢 ,何 京 ,曹 萍
(江西医学院药学系 ,江西 南昌 330006)
关键词:分光光度法;测定;NaOH用量
中图分类号:TQ460.7+2 文献标识码:B 文章编号:1000-2294(2005)04-0140-01
黄酮类化合物是中药陆英的活性成分之一 , 对陆英中的
总黄酮进行含量测定 ,可以将其作为检测陆英质量的一个标
准。通常对中药中总黄酮含量进行测定的方法是在供试晶
溶液中逐步加入 NaNO 2 , A1(NO 3)3 等显色剂后 , 再加入一
定量的 NaOH 试液 , 显色后以分光光度法测定总黄酮的含
量 ,溶液的碱浓度约在 c(NaOH)=0.3～ 1 mol/ L之间[ 1 ～ 5] 。
我们在对陆英进行总黄酮含量测定时 ,发现当溶液的碱浓度
适当降低后 ,对总黄酮的含量 , 显色的稳定性 ,重现性等均无
显著性影响。
1 仪器和试剂
TU-1900 型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责
任公司), 芦丁对照品(批号:0080-9705 , 中国药品生物制品
检定所), 陆英药材(购自江西省医药公司 , 江西省产), 所有
试剂均为分析纯。
2 分析测定
2.1 标准曲线的测定
1) 对照品溶液的制备:精密称取在 120 ℃减压干燥至
恒重的芦丁对照品 20.2 mg , 以适量 70%乙醇溶解后转入
100 mL 容量瓶中 , 用同溶剂稀释至刻度 , 摇匀 , 即得(每 1
mL 含芦丁 0.202 mg)。
2) 标准曲线的测定:精密量取对照品溶液 1.00 mL 、
2.00 m L、4.00 m L、6.00 mL、8.00 m L、10.00 m L分别置于
25 mL 容量瓶中 , 各加水至 10 m L , 加 5%亚硝酸钠溶液 1
mL , 混匀 ,放置 6 min ,加 10%硝酸铝溶液 1 m L , 摇匀 , 放置
6 min , 加 10%NaOH 试液 5 m L , 再加水至刻度 , 摇匀 , 放置
10 min;以相应的溶液为空白。 照分光光度法(中国药典
2000 年版一部附录 VB)于 500 nm 波长处测定吸收度 , 以吸
收度为纵坐标 ,浓度为横坐标 , 绘制标准曲线 ,求得回归方程
Y=0.10705X-0.00182 , r=0.9997 ,表明芦丁含量在 0.008
～ 0.065 mg/ mL 范围内呈现良好的线性关系。
2.2 陆英中总黄酮含量的测定
1) 供试品溶液的制备:取陆英粉末 5 g ,精密称定 , 置
烧瓶中 ,加入甲醇 50 m L , 回流 1 h , 过滤 , 收集滤液 ,如此操
作 3 次。合并滤液 , 蒸干 , 残渣加 70%乙醇适量使溶解 , 转
移至 25 mL 容量瓶中 ,并稀释至刻度 , 摇匀 ,得供试品溶液。
2) 供试品溶液中总黄酮含量的测定:精密量取 4.00
mL 供试品溶液 , 置 25 m L 容量瓶中 ,加水至刻度 , 摇匀 , 作
空白对照用。另精密量取上述溶液 4.00 m L , 置25 mL 容量
瓶中 ,照标准曲线的测定项下的方法 , 自“加水至 10 mL”起 ,
依法测定吸收度 , 从吸收曲线上读出供试品溶液中芦丁的含
量。
3) 不同 NaOH 用量时总黄酮含量的测定:按 2.2 中
第 2 点方法 ,只改变 NaOH 试液的加入量(分别加入 10 、8 、
6、4、2、1 m L), 然后测定供试品溶液中总黄酮的含量。
3 结果
1)加入不同量 NaOH 试液后的总黄酮含量(仅列出 1
mL 和 10 m L数据)见表 1 和表 2。
表 1 加 10 mL NaOH时总黄酮含量
测定序号 总黄酮含量(mg/ g)
平均值
(mg/ g)
RSD
%
1 2.82
2 2.89
3 2.91
4 2.85
5 2.94
6 2.87
2.88 1.5
表 2 加 1 mL NaOH时总黄酮含量
测定序号 总黄酮含量(mg/ g)
平均值
(mg/ g)
RSD
%
1 2.89
2 2.86
3 2.84
4 2.95
5 2.91
6 2.95
2.90 1.5
2) 显著性检验。 ① t 检验:按实验数据计算 , t =
0.796 , 查表得 t0.05 , 10 =2.228。 由于 t
047 , 查表得 F0.05 ,5 ,5 =5.05。由于 F
4 讨论
从两组测定的 RSD 值和 t检验 、F 检验的结果可看出 ,
对陆英进行总黄酮含量测定时 , 当溶液的碱浓度适当降低
后 ,对总黄酮的含量 ,显色的稳定性 , 重现性等均无显著性影
响。因此 ,用分光光度法测定陆英中的总黄酮含量时 ,
NaOH 的用量只需达到 c(NaOH)=0.1 mol/ L , 即溶液的
pH=13 即可。
(下转第 142页)
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4 讨论
上消化道异物在诊断上并不难 ,除仔细询问病
史 、了解吞入异物的大小 、形态 ,再结合胸腹平片 ,必
要时行消化道造影 、内镜检查一般都能确诊;但应注
意是在一般情况下只进行 x 线透视摄片 ,不应吞钡
造影检查 ,因为它可以遮盖异物 ,影响后续的内镜取
异物 ,也可能有误吸的危险;对可透 x 线的异物必要
时可以选用泛影葡胺造影。对病史陈述不清的患
者 ,若出现呼吸困难 、哮鸣 、血性唾液 、拒绝进食等病
症及体征时 ,应考虑食管异物的可能。
上消化道异物一旦确诊 ,又符合内镜取异物指
征 ,应积极行内镜处理。Wehb[ 1] 报道了 242例上消
化道异物的 98.8%可经胃镜取出 ,本组资料的成功
率与之相符。本组异物按其性质可分为二类:一类
是钝性异物 ,如钱币 、玻璃球 、戒指 、钮扣等;另一类
是尖锐异物 ,如铁钉 、缝针 、鱼刺等 。
根据钝性异物的形状特点及其所处的位置 ,采
取不同方法 ,一般都可将异物顺利取出 。如:细条
形 、薄片状异物如药匙 、牙签 、硬币 、钮扣等可用三爪
钳 、鳄嘴钳或鼠齿钳夹住拖出;长条形 、有棱角等不
易滑脱的异物 ,如电池 、打火机 、橡皮等可选用圈套
器;球形 、比较光滑的异物 ,如玻璃球等适合用网篮
取出 。对不易夹住 、固定的异物 ,笔者多采用将异物
设法送至胃窦部 ,然后再夹取固定。因此处视野开
阔 、固定方便。将异物固定后 ,有时取出却困难 ,此
时要注意使异物长轴的方向与镜身方向一致并将异
物紧帖在镜子前端 ,使异物成为镜子的一部分;向外
牵拉异物时 ,切忌粗暴 ,最好边牵拉 ,边加大充气 ,使
消化管扩张。这样既可避免异物被卡住 ,又可防止
消化管的损伤。
尖锐异物如鱼刺 、鸡骨 、义齿等尖锐异物嵌顿于
食管中时 ,应先将刺入管壁部分退出 ,使其尖端离开
黏膜组织 ,再行拉出 。也可根据实际情况将尖锐异
物推入胃内 ,再调整异物方向 、采取保护措施后取
出。刀片 、剪刀等边缘锋利的异物 ,取出时则危险性
较大;根据异物的大小 ,本类病例一般采用透明帽法
或套管法 。透明帽法是将透明的塑料帽套于胃镜前
端 ,将异物拉入透明帽中随内镜一起退出透明帽;套
管法是将胃镜外套管从口腔插至贲门 ,将异物外拉
入套管后与内镜一并拉出 ,此法可取出较大的异物 ,
安全性较高。尖锐角的异物进入消化道内可引起明
显炎症反应 ,甚至造成食管炎 、纵隔感染 、胃肠壁穿
孔等 ,临床应引起足够重视 。尖锐异物取出后 ,若局
部黏膜充血 、水肿及出血 ,应禁食 、抑酸 、止血;此类
病人若出现高热 、剧烈疼痛等病症 ,再应给足量广
谱抗生素及支持治疗 ,必要时进行外科手术治疗[ 2] ,
防止感染扩散 ,避免引起致命的并发症 。本组资料
3例患者 4件异物因异物尖锐端嵌顿严重等原因未
取出而手术治疗。对食管异物的治疗在食管镜取出
失败的情况下 ,应早期手术。异物在食管内停留时
间愈长 ,局部炎症反应愈明显 ,从而增加了手术的困
难。手术取出胃肠道异物的一个重要原则是 ,术前
当日再进行一次 x 线检查 ,确定异物的位置 ,否则异
物可能已移位 ,甚至已排出 ,使手术时寻找异物发生
困难 ,或手术已无必要 。
参考文献:
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(上接第 140页)
减少 NaOH 的用量 , 既能节约试剂 ,又能方便废液的处
理 ,减少对环境的影响 ,具有一定应用价值。该方法能否在
其它中药总黄酮含量的测定中应用 ,待试验验证。
参考文献:
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