全 文 ：JIANGXI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
陆英中三萜酸类成分提取工艺研究
★ 严建良* 吴安明 何杨虎（江西天施康中药股份有限公司 鹰潭 335000）
摘要：目的：研究从陆英中提取三萜酸类成分的工艺。方法：采用单因素考察了陆英三萜酸类成分的提取工艺，使用高效液相
色谱检测熊果酸和齐墩果酸的含量。结果：采用85%乙醇作提取溶媒、提取两次，每次2h，能较好的提取陆英三萜酸类成分；采
用三次水沉除杂和0.1%活性炭脱色处理后，陆英三萜酸类成分的含量能达到90%以上。结论：该方法能较好提高陆英三菇酸的
得率和纯度。
关键词：陆英；三萜酸类；熊果酸；齐墩果酸；提取工艺
中图分类号：R284.2 文献标识码：A
中药陆英为忍冬科接骨木属植物陆英（Sambu⁃
cus Chinensis Lind1．）的干燥全草，又称接骨草、臭
草。味甘、微苦，性平。早在《神农本草经》中就有
记载。是我国民间常用草药，产于全国各地，资源
丰富。有祛风利湿，活血散瘀，消炎止痛，镇痉消肿
之功效，主要用于黄疸型肝炎、跌打损伤、风湿、脚
气肿胀、肾性水肿、急性菌痢、肺炎等症[1]。茎、叶含
绿原酸、乌索酸、齐墩果酸、香树酯醇、谷甾醇，并显
黄酮甙、鞣质及还原糖反应，种子含氰甙类[2]。其中
三萜酸类成分有很强的药理活性。近年来的研究
发现三萜酸类成分具有抗炎[3]、降血糖[4]、抗病毒[5]等
活性，而其中三萜酸类化合物主要为熊果酸、齐墩
果酸。本实验采取水沉除杂和活性炭脱色处理对
陆英中三萜酸类成分进行了提取纯化研究。
1 实验仪器及材料
TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普
析通用仪器有限责任公司）；Agilent 1100高效液相
色谱仪；HypersilODS-2高效液相色谱柱（250mm*
4.6mm, 5μm）；HH-4数显恒温水浴锅（国华电器有
限公司），DZTW型调温电热套（北京市永光明医疗
仪器厂），1801D自动双蒸水蒸馏器（上海申生科技
有限公司），DZF-6020型真空干燥箱（上海一恒科
技有限公司），AB265-S电子秤（台湾 ELJINTEK）；
熊果酸（批号：110742-200516）；齐墩果酸（批号：
110709-200304），均购自中国药品生物制品检定
所；陆英药材购自江西樟树市药材市场，产地为江
西；甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。
2 提取工艺
2.1 不同浓度乙醇提取 取500g陆英药材，粉碎成
粗粉，置提取罐中，用 35%、80%和 95%的乙醇 1
000mL分别水浴回流提取两次，每次2小时，合并煎
煮液，滤过，取 50mL滤液水浴浓缩至干，乙醇溶解
残渣，定容至50mL，HPLC检测，即得。结果见表1。
表 1.提取溶媒选择试验结果
提取溶媒
30%乙醇
50%乙醇
80%乙醇
95%乙醇
熊果酸含量(mg/g)
31.62
43.90
50.46
55.22
齐墩果酸含量(mg/g)
11.08
15.69
18.78
23.13
从表1结果可知，随着乙醇浓度的增加，提取效
率增加，以 95%乙醇提取含量最高，但考虑到生产
安全实际情况，选择85%乙醇作为提取溶媒，提取2
次，每次2小时进行回流提取。
2.2 水沉除杂 取 500g陆英药材，粉碎成粗粉，置
提取罐中，用5 000mL 85%的乙醇回流提取两次，每
次 2小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩
至 100mL，得陆英流膏，加 3倍量的水依次沉降 3
次，每次均 4℃静置 48小时，滤过，滤液浓缩至 1.20
相对密度（50℃），减压真空干燥，即得陆英三萜酸
类粗提物，结果见表2。
表2.陆英三萜酸类水沉纯化结果
水沉次数
固形物含量(mg/g)
熊果酸含量(mg/g)
齐墩果酸含量(mg/g)
三萜酸类含量(%)
未水沉
104.8
52.34
17.46
66.60
第1次
85.53
46.65
16.29
73.59
第2次
77.65
44.85
15.51
77.73
第3次
68.24
43.18
14.77
84.92
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江西中医药2012年6月第6期总43卷第354期
从表 2.中数据可知，由于熊果酸和齐墩果酸难
溶于水，水沉纯化对其的损失不大，随着水沉次数
的增加，三萜酸类能达到 85%的含量，因此水沉可
将部分水溶性杂质去除。
2.3 活性炭脱色 参考有关文献[6]，将陆英三萜酸类
粗提物用 50倍量 50%乙醇溶解，分别加 0.1%，
0.3%，0.6%，1.0%的活性炭，60℃水浴 30分钟，静
置，滤过，回收乙醇，减压干燥，得陆英三萜酸类提
取物，HPLC含量检测，陆英三萜酸类含量达到90%
以上，并且随着活性炭用量的增加，三萜酸类的损
耗也在不断增加，为了减少损失，选择 0.1%活性炭
进行处理，结果见表3。
表3. 陆英三萜酸类活性炭脱色结果
活性炭用量(%)
熊果酸(mg/g)
齐墩果酸(mg/g)
三萜酸的损耗率(%)
三萜酸类含量(%)
溶液颜色
0
43.18
14.77
0.00
84.92
棕褐色
0.1
34.71
10.98
21.17
92.35
淡红色
0.3
30.51
9.351
31.22
92.37
淡红色
0.6
27.77
8.991
36.57
93.47
淡红色
1.0
22.03
7.493
49.06
94.71
淡红色
2.4 工艺验证 取三批陆英药材，各 1000g，粉碎成
粗粉，置提取罐中，用十倍药材量的 85%的乙醇回
流提取两次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液回
收乙醇并浓缩至 0.2倍药材量，得陆英流膏，加 3倍
量的水依次沉降 3次，每次均 4℃静置 48小时，滤
过，滤液浓缩至相对密度 1.20（50℃），减压真空干
燥，即得陆英三萜酸类粗提物，用 50倍量 50%乙醇
溶解，加 0.1%的活性炭，60℃水浴 30分钟，静置，滤
过，回收乙醇，减压真空干燥，即得陆英三萜酸类精
制提取物。精密称取适量，用甲醇溶解定容至
50mL容量瓶中，按HPLC色谱分析方法检测熊果酸
和齐墩果酸含量，结果见表4。
表4.陆英三萜酸类提取工艺验证
试验次数
提取物得率(%)
熊果酸(mg/g)
齐墩果酸(mg/g)
三萜酸类含量(%)
第1次
4.679
33.99
9.98
93.97
第2次
4.655
32.47
10.12
91.49
第3次
4.791
33.65
10.32
91.78
平均值
4.729
33.37
10.14
92.00
RSD(%)
1.535
2.391
1.685
1.476
2.5 高效液相色谱法
2.5.1 检测波长：取齐墩果酸、熊果酸对照品各
5.0mg，精密称定，分别置 100mL容量瓶中，加甲醇
适量使溶解并至刻度，摇匀，于紫外分光光度计
200-500nm波长下扫描，齐墩果酸溶液在 204nm波
长下有最大吸收，熊果酸溶液在205nm波长下有最
大吸收，考虑到流动相在短波长处有吸收，为了减
少干扰，又尽量不减少灵敏度，选择 210nm波长为
检测波长。
2.5.2 色谱条件：高效液相色谱仪为Agilent 1100
型；色谱柱为Hypersil ODS-2；流动相为甲醇-水-冰
醋酸（85：15：0.01）；检测波长为 210nm；流速为
1.0mL/分；柱温为室温；进样量为10μL。
2.5.3 标准曲线：取齐墩果酸、熊果酸对照品适量，
精密称定，加甲醇分别配制成500μg/mL的溶液，分
别精密量取，并用甲醇稀释成含齐墩果酸、熊果酸
对照品 5、10、25、50、100、250μg/mL的混合对照品
溶液，按【色谱条件】分别注入液相色谱仪 10μL，测
定峰面积，以对照品浓度C为横坐标，峰面积A为纵
坐标，得齐墩果酸、熊果酸的标准曲线方程分别为
A=5.584*C+3.541,R2=0.9999；A= 5.233*C + 3.068，
R2 = 0.9999；两者在5.0-250μg/mL浓度范围内呈线
性关系。
2.5.4 方法的精密度 取同一批陆英药材制得的陆
英三萜酸类精制提取物，5份，分别称取适量，精密
称定，加甲醇溶解定容至 50mL,得平行操作的 5份
供试品溶液。再取供试品溶液和齐墩果酸、熊果酸
对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，
熊果酸和齐墩果酸的相对标准偏差分别为1.563%、
1.820%，结果见表5。
表5.方法精密度试验结果
成分峰面积
熊果酸
齐墩果酸
样品1
269.9
59.91
样品2
266.4
58.60
样品3
263.5
61.12
样品4
265.7
62.90
样品5
278.0
60.75
平均值
268.7
60.67
RSD(%)
1.563
1.820
2.5.5 方法的准确度 精密称取齐墩果酸、熊果酸
适量，置于同一10mL量瓶，用甲醇溶解并稀释至刻
度，得混合对照品溶液（含齐墩果酸、熊果酸分别为
330μg/mL、1 600μg/mL）；另精密量取供试品溶液
15mL（已知齐墩果酸、熊果酸含量分别为 30.9μg/
mL、140.5μg/mL），再精密加入上述混合对照品溶液
1mL,按【色谱条件】项下方法测定，齐墩果酸和熊果
酸的平均加样回收率分别为 99.29%、97.63%，RSD
分别为0.8762%、0.7050%。结果见表6，表7。
表6.齐墩果酸准确度试验结果
取样量(mL)
15
15
15
15
15
15
样品含量
（mg）
0.4635
0.4635
0.4635
0.4635
0.4635
0.4635
加入量
（mg）
0.3300
0.3300
0.3300
0.3300
0.3300
0.3300
测得量
（mg）
0.7879
0.7892
0.7932
0.7945
0.7879
0.7945
准确度(%)
98.29
98.69
99.89
100.3
98.29
100.3
平均值(%)
99.29
RSD(%)
0.8762
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JIANGXI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
中药制剂分离与纯化新技术应用进展
★ 陈秦娥 1* 梁金龙 2**（1.江西省南昌市洪都中医院 南昌 330008；2.中国核工业过滤机械研究所 南昌
330101）
摘要：论述了深入研究中药制剂分离与纯化新技术应用进展的意义，概述了分离与纯化技术在中药制剂中的重要作用，首次
全面总结了14种中药制剂分离与纯化高新技术原理特性、应用实例和应用效果，首次研究阐明了现代中药制剂分离与纯化技
术主要呈现的新老技术复合化、高技术超常化和新技术多样化三大发展趋势。
关键词：中药制剂；分离纯化；新技术；应用进展
中图分类号：R943 文献标识码：B
中医是具有悠久历史的中华文化瑰宝，是对人
类繁衍昌盛的重大贡献。中药是大自然赐予人类
的治本良药和益寿膳食，中药综合治本的基础是利
用其有效的复合化学成分。大多数中药是以动植
物为药源，中药有效成分的质量关键取决于提取分
离与纯化技术的高低，我国分离技术正努力与世界
高新技术齐驱并进。在我党提出文化强国，我国制
定中医药全球化战略的大背景下，系统总结国内外
制药分离与纯化新技术进展，深入研究中药制剂分
离与纯化新技术发展趋势，促进中药制剂行业紧跟
*作者简介：陈秦娥（1960-）,女,国家注册执业药师、副主任药剂师，毕业于江西中医学院，现在南昌市洪都中医院药剂科工作，从事中药研制与
药剂质量检测，Tel：0791-83739188，E-mail:cn8888@163.com。
**通讯作者：梁金龙（1956-），男，研究员，现在中国核工业过滤机械研究所工作，从事过滤与分离机械研发，先后创办了《过滤机械研究与应用》
和《过滤与分离》期刊，主持完成了国家863计划项目和国家级重点新产品开发各一项,Tel：0791-83708888，13970980969。
表7.熊果酸准确度试验结果
取样量(mL)
15
15
15
15
15
15
样品含量
（mg）
2.108
2.108
2.108
2.108
2.108
2.108
加入量
（mg）
1.600
1.600
1.600
1.600
1.600
1.600
测得量
（mg）
3.653
3.688
3.681
3.663
3.660
3.673
准确度(%)
96.59
98.79
98.35
97.21
97.03
97.82
平均值(%)
97.63
RSD(%)
0.7050
注：准确度（%）=（测得量-样品含量）×100%/加入量
3 讨论
熊果酸和齐墩果酸为同分异构体，高效液相色
谱法分离困难，但本实验以甲醇-水-冰醋酸（85：
15：0.01）为流动相，熊果酸和齐墩果酸色谱峰的分
离度大于1.5。
熊果酸和齐墩果酸均难溶于水，本实验采用简
单易行的水沉纯化和活性炭脱色可以将陆英三萜
酸类提取物中水溶性杂质和色素成分大部分去除，
从而得到含熊果酸和齐墩果酸较纯的陆英三萜酸
类提取物。
参考文献
[1].国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科
技出版社，1999：6 573-6 576．
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[6].刘艳芳，安广杰. 枇杷叶提取物脱色条件研究[J].广西轻工业，
2007，9（9）:18-19.
（收稿日期：2012-04-05 责任编辑：曾文雪）
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􀦋 特约栏目 博士达药业
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