全 文 ：冬菇菌种分离与培养特性研究
陈今朝 ,王慧超 ,阳 晖　(长江师范学院生命科学系 ,重庆 408100)
摘要　[目的 ]研究一株野生高产冬菇菌种的培养特性。 [方法]以新鲜野生冬菇子实体为材料 , 采用组织分离法获得冬菇菌种 ,研究其
培养特性。 [结果]冬菇在加富PDA培养基上菌丝生长良好 ,菌丝白色、呈细棉绒状或绒毡状 ,稍有爬壁现象。在显微镜下 ,菌丝粗细均
匀 ,有锁状联合。菌丝在pH值 5.5～ 7.5范围内均能生长 , pH值 6.0时生长最快 ,长势最好。菌丝在 21 ～ 29℃范围内均能生长 , 25℃
时生长最快。冬菇菌丝在棉籽壳、木屑培养基中的满袋时间分别为 40、44d,冬菇产量分别为 1.47、1.15kg,生物学效率分别为 49.06%、
38.33%。 [结论]冬菇菌丝生长的最适pH值为 6.0,最适温度为 25℃,人工栽培的最适培养基是棉籽壳培养基。
关键词　冬菇;菌种分离;培养特性
中图分类号　S646.1+5　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2008)26-11319-02
StudyonIsolationandCultivationCharacteristicsofStrainfromFlammulinavelutipes
CHENJin-zhaoetal　(DepartmentofLifeScience, YangtzeNormalUniversity, Chongqing408100)
Abstract　[ Objective] TheaimwastostudythecultivationcharacteristicsofawildstrainofFlammulinavelutipeswithhighyield.[ Method]
WiththefreshfruitbodyofwildF.velutipesastestedmaterial, F.velutipesstrainwasobtainedthroughtissueisolationanditscultivationchar-
acteristicswereinvestigated.[ Result] ThemyceliaofF.velutipescouldgrowwelinenrichmentPDAmedium, anditwaswhite, smalvel-
veteen-like, andhadthephenomenonofclimbingwall.Undermicroscope, themyceliawereuniformthicknessandhadclampconnection.The
myceliacouldgrowfrompH5.5to7.5, anditgrewmostrapidlyanditsgrowthvigorwasbestatpH6.0.Itcouldalsogrowfrom21to29℃
andgrowfastestat25℃.ThetimeofthebagfiledwithmyceliaofF.velutipeswas40and44dresp., theiryieldwere1.47and1.15kgre-
sp., andthebiologicaleficiencywas49.06%and38.33%resp.[ Conclusion] TheoptimalpHvalueandtemperatureforthegrowthofmy-
celiawas25℃and6.0resp.andtheoptimumculturemediumforartificialcultivationwascotonseedhulmedium.
Keywords　F.velutipes;Strainisolation;Cultivationcharacteristic
基金项目　重庆市科委科技攻关项目(2006AC1045);重庆市教委科研
项目(KJ07130)。
作者简介　陈今朝(1964-),男 ,重庆涪陵人 , 硕士 ,副教授 ,从事食用
菌的教学与研究工作。
收稿日期　 2008-06-30
　　冬菇 [ Flammulinavelutipes(Fr.)Sing.] 又称金针菇 、朴
菇和构菌等 [ 1] ,是秋末春初寒冷季节发生的一种伞菌 ,子实
体一般比较小 ,多数成束生长 ,肉质柔软有弹性;菌盖直径为
2 ～ 8cm,淡黄色至黄褐色 [ 2] 。 2007年 2月笔者在涪陵区调
查野生菌时 ,采集到一些冬菇野生菌标本 ,通过分离得到 1
株野生高产冬菇菌种 ,对其培养特性进行了研究。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　冬菇。冬菇子实体采自重庆市涪陵武陵山国家森林
公园 ,海拔约 1 200 m的阔叶树林地。选七成熟 、无破损的 ,
用纸包好备用 。
1.1.2　分离培养基 (加富 PDA)。马铃薯 20%,葡萄糖
2.0%,蛋白胨 3.0%,琼脂 2.0%, K2HPO4 0.10%, MgSO4·
7H2 O0.05%,维生素 B1 0.01%,琼脂 2.0%, pH自然 。
1.1.3　栽培培养基。棉籽壳培养基(棉籽壳 75%)、木屑培
养基(杂木屑 75%),辅料均为麸皮 23%、蔗糖 1%、石膏粉
1%,含水量 65%。
1.2　方法
1.2.1　冬菇子实体处理。取新鲜冬菇子实体 ,除去表面杂
质 ,用 75%酒精擦洗表面 3次 ,置于无菌平皿中。
1.2.2　冬菇组织分离法。将已消毒的子实体在超净工作台
上用无菌解剖刀切取菌盖附近米粒大小组织块 1块 ,接入加
富 PDA平皿中 ,倒置于 25℃培养箱中。待长出菌丝后 ,取生
长快 、无杂菌污染的菌丝块 1块 ,移入斜面培养基上培养 ,待
菌丝长满斜面 ,即为冬菇母种 [ 3] 。
1.2.3　pH试验。用 0.10mol/LHCl和 0.10mol/LNaOH调
节加富 PDA培养基pH分别为 5.0、5.5、6.0、6.5和 7.0,倒平
皿。接种 0.20 cm2冬菇母种 1块于平皿中央 , 25 ℃培养 ,测
定菌丝长满平皿的时间 ,以平皿半径除以培养时间计算生长
速度。每个处理重复 3次。试验数据用 DPS数据处理软件
处理 ,下同。
1.2.4　温度试验 。将 0.20 cm2 母种 1块接种于加富 PDA
平皿中央 ,分别置于 21、23、25、27和 29 ℃下培养 ,每个处理
重复 3次 。
1.2.5　栽培试验。将棉籽壳和木屑 2种培养基分别拌和均
匀后分装于 17cm×33 cm的聚丙烯塑料袋内 ,每袋装干料
0.30kg,各 10袋。 0.15 MPa、126℃灭菌 1.5h。冷却 、接种 ,
25 ℃培养 ,待菌丝长满后 ,移至菇房 12 ～20℃出菇 [ 3] 。测定
菌丝生长及出菇状况。
2　结果与分析
2.1　菌丝的生长特征　冬菇菌丝生长速度中等 , 12 d长满
平皿。菌丝白色呈细棉绒状或绒毡状 ,稍有爬壁现象。菌丝
老化时 ,菌苔表面呈淡黄褐色(图 1)。在显微镜下 ,菌丝粗
图 1　冬菇菌丝生长状况
Fig.1　SituationofthemycelialgrowthofF.velutipes
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2008, 36(26):11319-11320 责任编辑　罗芸　责任校对　李洪
细均匀 ,有锁状联合 。
2.2　pH值对菌丝生长的影响　菌丝在 pH值 5.5 ～ 7.5范
围内均能生长 ,但以 pH值 6.0时生长最快 ,长势最好(表
1)。由表 1可知 ,在 0.01水平上 ,菌丝在 pH值为 6.0时的
生长速度与其他 pH值培养时的生长速度呈极显著差异。因
此 ,菌丝生长的最适 pH值为 6.0。
表 1　pH值对冬菇菌丝生长的影响
Table1　EffectsofpHvalueonthemycelialgrowthofF.velutipes
pH值
pHvalue
菌丝生长速度∥mm/d
Growthrateofthemycelia
1 2 3 x
菌丝生长势
Mycelial
growthvigor
6.0 4.22 4.09 4.17 4.16aA +++
6.5 3.77 3.95 3.80 3.84bB +++
7.0 3.58 3.46 3.55 3.53cC ++
5.5 3.36 3.47 3.40 3.41cC ++
5.0 2.92 2.90 2.73 2.85dD +
　注:+++表示菌丝白色、浓密;++表示菌丝白色、较浓密;+表示菌
丝白色、稀疏。同列不同大、小写字母分别表示在 0.01和 0.05水
平的差异显著。下表同。
　Note:+++standsforwhiteanddensemycelia, ++standsforwhite
andrelativelydensemycelia;+standsforwhiteandloosemycelia.
Diferentcapitalletersandlowercasesinarowmeansignificant
diferencesat0.01and0.05levels.Thesameasfollows.
2.3　温度对菌丝生长的影响　菌丝在 21 ～ 29 ℃范围内均
能生长 。但在 21 ～ 25 ℃时 ,菌丝生长的速度随温度升高而
加快 , 25 ℃时生长最快;之后菌丝生长的速度逐渐降低(表
2)。在 0.01水平上 ,菌丝在 25 ℃培养时的生长速度较其他
温度处理差异极显著。因此 ,菌丝生长的最适温度为 25℃。
表 2　温度对冬菇菌丝生长的影响
　　Table2　EffectsoftemperatureonthemycelialgrowthofF.velu-
tipes
温度∥℃
Temperature
菌丝生长速度∥mm/d
Growthrateofthemycelia
1 2 3 x
菌丝生长势
Mycelialgrowth
vigor
25 4.20 4.11 4.14 4.15aA +++
27 3.96 3.83 3.82 3.87bB ++
23 3.67 3.80 3.86 3.61bB ++
29 3.11 2.89 3.03 3.01cC ++
21 2.79 2.94 2.85 2.86cd +
2.4　棉籽壳 、木屑对冬菇菌丝生长及产量的影响　冬菇菌
丝在棉籽壳 、木屑培养基中的满袋时间分别为 40和 44 d(表
3)。菌种在棉籽壳中的产量为 1.47 kg,生物学效率为
49.06%;而在木屑中的产量为 1.15kg,产菇量仅为在棉籽壳
中产量的 78.23%。可见 ,棉籽壳培养基是人工栽培冬菇的
适宜培养基。
表 3　培养基对冬菇菌丝生长及产量的影响
Table3　EfectsofculturemediumonthemycelialgrowthandyieldofF.velutipes
培养基
Culturemedium
萌发时间∥d
Germinationtime
菌丝满袋时间∥d
Fulmyceliatime
冬菇产量∥kg
YieldofF.velutipes
生物学效率∥%
Biologicaleficiency
棉籽壳 Cottonseedhul 2 40 1.47 49.06
木屑 Woodsawdust 4 44 1.15 38.33
3　小结
(1)冬菇菌丝在加富 PDA培养基上生长良好 ,菌丝白
色 、细棉绒状 ,稍有爬壁现象;菌丝粗细均匀 ,有锁状联合 。
菌丝生长的最适温度为 25℃,最适 pH为 6.0,最适栽培培养
基为棉籽壳培养基。
(2)用棉籽壳和木屑作培养料模拟野生生态条件栽培冬
菇菌时 ,菌丝在培养料中生长健壮 ,产菇能力强 ,生物学效率
分别为 49.06%和 38.33%。如果将此菌株作为育种的出发
菌株进行菌种选育 ,同时进一步研究其培养基配方和培养条
件 ,则该菌株将具有巨大的生产潜力。
参考文献
[ 1] 黄晨阳 ,张金霞 ,左雪梅.金针菇栽培技术要点 [ J].土壤肥料, 2003(1):
45-47.
[ 2] 薛春梅 ,付春波 ,华晓燕.六种培养基对金针菇(F19)母种分离对比试
验[ J] .佳木斯大学学报, 2005, 23(4):59-60.
[ 3] 刘程华 ,贾应宙 ,周彩雯,等.野生金针菇的驯化与栽培 [ J].内蒙古农
业科技 , 2002(5):35-36.
(上接第 11296页)
[ 7] 李俐俐,刘天学.平菇菌糠提取液对 5种食用菌菌丝的生长影响 [ J] .
安徽农业科学 , 2007, 35(2):430-432.
[ 8] 强承魁, 杨兆芬,杜予洲 ,等.黄粉虫防御性分泌物抑菌活性的研究
[ J].生物技术, 2006(1):22-23.
[ 9] 强承魁 ,杨兆芬 ,崔亚东.黄粉虫的生理生化研究进展 [ J].海南师范学
院学报:自然科学版 , 2005(3):269-272.
11320 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2008年