全 文 ：生防细菌产生的拮抗物质及其在生物防治中的作用*
王光华1* * Jos M. Raaijmakers2
( 1 中国科学院东北地理与农业生态研究所, 哈尔滨 150040; 2 荷兰Wageningen 大学植物科学系, Binnenhaven 8025)
=摘要> 利用生防细菌防治植物病害是生物防治的一个主要内容.生防细菌防治植物病害发生发展的一
个重要机制是产生拮抗物质. 生防细菌的拮抗物质种类多,作用范围广谱. 同一种拮抗物质可以由多种细
菌菌株产生, 而同一细菌也可以产生多种不同结构的拮抗物质. 运用现代分子生物学技术和先进的分析测
试手段可以加快对产生拮抗物质生防细菌的研究 ,了解生防细菌在寄主植物根围和叶围的定植效果, 明确
拮抗物质在生物防治中的作用. 拮抗物质的产生除与细菌基因型有关外, 一些外在的生物和非生物因素如
病原菌存在与否、温度、pH 和 C、N营养等也影响拮抗物质产生.文中论述了生防细菌应用中存在的问题,
指出混合菌剂的研制对防止病原菌抗性产生具有重要作用,应是今后生防菌剂研制中的重点 .
关键词 细菌 拮抗物质 生物防治
文章编号 1001- 9332(2004) 06- 1100- 05 中图分类号 S336 文献标识码 A
Antibiotics production by bacter ial agents and its role in biological control. WANG Guanghua1, Jos M. Raaij2
makers2 ( 1 I nstitute of Nor theast Geography and Agr icultur al Ecology, Chinese Academy of Sciences, Harbin
150040, China ; 2Laboratory of Phytopathology , Depa r tment of Plant Sciences, Wageningen Univer sity, Bin2
nenhaven 8025, T he Nether lands) . 2Chin. J . Appl . Ecol. , 2004, 15( 6) : 1100~ 1104.
Using bacter ia to control plant diseases is one of the main strategies in plant protection, and its mechanism is
commonly thought to be the product ion of antibiotics by bacteria. The produced antibiotics not only have struc2
tural diversit y, but also have broad2spectrum activity against many pathogens. Experimental results showed that
one kind of antibiotics could be produced by several bacterial str ains, and one bacterial strain could also produced
more than one kind of antibiot ics. Recent development in molecular and bio2analyt ical techniques greatly promot2
ed the resear ch of bacterial bio2control, and the colonizat ion survey of introducing bacterial strain to the rhizo2
sphere and spermosphere of host plants. Besides bacter ial genotypes, several biotic and abiotic factors including
whether the pathogens existing or not , temperature, pH, carbon and nitrogen sources are also ident ified to affect
the antibiotics production by bacteria. T he authors illustrated some of the impeding problems in bacterial bio2con2
trol agents. application, and suggested that in the futur e resear ch, more attention should be paid on developing
mixed bio2control agent to avoid the ant i2antibiotic activity of pathogens.
Key words Bacteria, Antibiotics, Biological control.
* 中国科学院知识创新工程重大项目 ( KZCX12SW21924203) 和哈尔
滨市青年科学基金资助项目( 2003AFQYJ002) .
* * 通讯联系人.
2003- 02- 02收稿, 2003- 06- 16接受.
1 引 言
人们在很早以前就开始利用各种有益的微生物资源处
理植物的种子、块茎或根系等来达到促进植物生长, 保护植
物免受病虫害危害的目的.生物防治的研究是近年来随着化
学农药的普及应用,对环境安全和人类健康日益构成威胁从
而得以重视 .在研究开发的各种生防菌中, 利用生防细菌来
防治植物病害成为国内外在生物防治研究中的一个热点. 大
量的研究表明,生防细菌不仅在其生长发育过程中产生多种
拮抗性或竞争性的代谢产物, 通过直接或间接作用, 达到阻
碍或杀死病原菌的效果,而且这些细菌大多是从植物的根围
和叶围等处分离得到的, 对植物具有较好的亲合性, 接种后
易于在植物上定植,生防效果持久稳定.
2 生防细菌产生拮抗物质的种类多样性
许多研究表明,生防细菌在离体条件下产生各种各样的
次生代谢产物 .早期对 Pseudomonas spp. 研究证明, 该菌的
某些菌株产生嗜铁素( siderophores) . 它可以与环境中的铁离
子高度结合, 而使植物病原菌缺乏铁营养不能够生长繁
殖[ 27] ,这是典型的营养竞争防治植物病害的例子. 随着研究
的不断深入, 发现细菌在生长过程中还产生许多种具有拮抗
活性的物质.这些物质包括多种抗生素类、酶类和挥发性等
成分, 在植物病害生物防治中起到关键性的作用[ 6, 46] .
生防细菌产生的拮抗物质多是一些低分子量的化学物
质.这些物质在很低浓度下就可阻碍病原微生物的生长发
育[ 12] .表 1 归纳了一些生防细菌产生的主要拮抗物质及其
防治的主要病原菌. 由表 1 可以看出,能够产生拮抗物质的
细菌种类很多, 且产生的拮抗物质也是多种多样,不仅同一
种细菌可以产生多种拮抗物质, 而且一种拮抗物质也可以从
多种细菌的代谢产物中检测到, 如 Bacillus cer eus 菌株
UW85[ 19]和 Pseudomonas f luorescens菌株 CHA0 和 Pf25[ 2, 25]
可以产生多种拮抗物质.
应 用 生 态 学 报 2004 年 6 月 第 15 卷 第 6 期
CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY, Jun. 2004, 15( 6)B1100~ 1104
表 1 生防细菌菌株及其产生的主要拮抗物质
Table 1 Selected examples of ant ibiotics pr oduced by bacterial biocontrol agents
拮抗物质
Ant ibiot ic
细菌菌株
Species/ st rain
目标病原菌*
Target pathogen
寄主/地点
Host / Origin
文献
Reference
DAPG Pseudomonas spp.
Q2287 Ggt 小麦/美国 Wheat/ USA 47
CHAO Ggt ,T b, Pu 烟草/瑞士 Tobacco/ Switzerland 24
F113 Pu 甜菜/爱尔兰 Sugar beet/ Ireland 43
PFM2 St 小麦/美国 Wheat/ USA 28
Pf25 Pu, Rs 棉花/美国 Cot ton/ USA 21
Q8r1296 Ggt 小麦/美国 Wheat/ USA 39
Phenazines Pseudomonas spp.
2279RN10 Ggt 小麦/美国 Wheat/ USA 49
30284 Ggt 小麦/美国 Wheat/ USA 36
PGS12 Fo 玉米/比利时 Corn/ Belgium 16
In2b2109 Rs, Gg 水稻/菲律宾 Rice/ Philippines 40
PCL1391 Fo 番茄/西班牙 Tomato/ Spain 8
PNA1 Fo, Rs 鹰嘴豆/印度 Chickpea/ India 1
Oomycin A P. f luorescens H v37a Pu 大麦/美国 Barley/U SA 18
Pyolu teorin P. f luorescens
Pf25 Pu, Rs 棉花/美国 Cot ton/ USA 21
CHAO Tb, Pu 烟草/瑞士 Tobacco/ Switzerland 24
Pyr rolni trin P. f luorescens BL915 Rs 棉花/美国 Cot ton/ USA 29
B. cepacia B37w Fs 马铃薯 Potato 5
Enterobacter agglomera ns Bc,Rs 葡萄/乌兹别克斯坦 Grape/ Uzbekistan 7
Ser ratia spp. Vd, Rs, Ss 油菜 Oilseed rape 22
DDR P. borealis MA342 Pt , Tc 小麦/大麦 Wheat/ Barley 20
Viscosinamide P. f luorescens DR54 Rs, Pu 甜菜/丹麦 Sugar beet/ Denmark 34
Butyrolactones P. aureof aciens 63228 Pu, Pc 小麦/加拿大 Wheat/ Canada 14
N2BBS Pseudomonas sp. AB2 Pu, Rs, Bc 土壤/韩国 Soil/ Korea 26
AFA S. violaceusniger YCED29 Pu 莴苣 Let tuce 49
Pantocin A 和B P. agg lomer ans EH 318 Eh 苹果/美国 Apple/ USA 52
Xan thobaccins Stenot rop homonas SB2K88 Pu 甜菜/日本 Sugar beet/ Japan 33
AFC2BC11 B. cepacia BC11 Rs 土壤/棉花 Soil, Cotton 23
Kanosamine B. cereus UW85 Pm 苜蓿 Alfalfa 32
Zwit ter mycin A B. cereus UW85 Pm 苜蓿 Alfalfa 44
Pep tide B. amyloliquef aciens RC22 Pu 黄瓜/日本 Cucumber/ Japan 53
* At: Agr obacterium tumf aciens ; Ggt : Gaeumannomyces gra minis var. tr it ici ; Tb: T hielaviopsi s basicola ; Pu: Pythium ul timum ; St: Sep tora tri ti2
ci ;Rs: Rhizoctonia solani ; Fo: Fusarium oxysporum; Gg: G . g raminis; Ps: Pythium splendens ; Fs: Fusarium sambucinum ; Pt : Pyrenophora teres ;
T c: T il let ia car ies; Pc: Phytop hthora crypyogea; Bc: Botryt is cinerea; Eh: Erwinia her bicola ; Pm: Phytophthora medicaginis; Vd: Ver ticil lium dahli2
ae; Ss: Sclerotinia sclerot ior um .
3 生防细菌产生拮抗物质的作用范围广谱性
许多生防细菌产生拮抗物质的作用范围是广谱性的.
1960 年, Nishida[ 35]发现, 由 Pseudomonas和 Burkholder ia 产
生的 Pyrrolnitrin 对许多人类细菌性和真菌性疾病都具有一
定的防治效果. 进一步研究发现, Pyr rolnitrin 对多种植物真
菌性病原菌如: Rhizoctonia solani、Botrytis ciner ea、Ver ticil2
lium dahliae和 Sclerotinia sclerotiorum 及一些革兰氏阳性细
菌,特别是对 Str eptomyces 具有很好的防治效果[ 29] .同样由
多种 Pseudomonas f luorescens 菌株产生的拮抗物质 DAPG,
不仅可以防治多种植物真菌和细菌性病害,还可以防治植物
线虫病害. Cronin [ 9]用提纯的 DAPG 处理线虫提高了线虫
Globodera rostochiensis胞囊的孵化率,降低幼虫的活动. 芽孢
杆菌( Bacillus)是除 Pseudomonas之外的另一类重要的生防
细菌,由 Bacillus spp.产生的多肽类物质对多种植物真菌和
细菌病害在活体和离体条件下都表现出很强的拮抗活
性[ 53] .王光华等[ 48]对芽孢杆菌 BRF21 菌株平板对峙培养实
验结果证明,该菌的代谢产物对多种植物病原真菌具有很强
的拮抗活性;而由 Bacillus cer eus和B. thur inginensis 产生的
拮抗物质 Zwittermycin A对多种植物真菌性病害,特别是由
Phytophthora 和 Pythium 引起的病害有很好的防治效
果[ 44] .值得注意的是, Zwittermycin A 与 Bt 毒素蛋白具有协
同作用效果, 可以提高 Bt 毒素蛋白杀虫活性[ 4] .
生物表面活性剂 ( biosur factant)是最近发现的一类具有
生防作用的拮抗物质. 荧光假单胞杆菌 ( Pseudomonas f luo2
rescens)的某些菌株产生的生物表面活性剂,降低了病原菌孢
子的表面张力, 在细胞膜内外膨压的作用下, 使孢子细胞破
裂而死亡. Souza[ 45]对 P . f luor escens SS101 的研究表明, 将浓
度为 25~ 50 Lg#ml- 1的提纯生物表面活性剂在离体条件下,
观察对腐霉病菌游动孢子的作用.结果表明, 游动孢子在 30
sec内活动受到明显抑制, 60 sec后孢子细胞膜破例, 孢子消
失. 盆栽生物测试也证明, SS101 菌株对由 Phytophthora 和
Pythium 引起的花卉和蔬菜病害有很好的防治效果.
4 拮抗物质在生物防治中作用效果的验证
细菌产生的拮抗物质对植物病原菌的拮抗作用大多是
基于在离体条件下与病原菌的对峙培养或抑制病原孢子萌
发实验而获得的. 而在原位条件下拮抗物质的作用效果可用
以下实验得到间接的佐证: 1)应用细菌的培养滤液或提纯的
拮抗物质获得了与直接应用野生型菌株同样的防治效果, 如
B916 无细胞培养液对水稻纹枯病防效可达 5811% , 而孢子
发酵液为 77% [ 6] ; 2)应用紫外诱变等技术, 获得不产生拮抗
11016 期 王光华等:生防细菌产生的拮抗物质及其在生物防治中的作用
物质的突变体,应用该突变体处理植物降低生防细菌的防治
效果; 3)通过基因工程技术, 调控拮抗物质生物合成途径, 提
高野生型菌株拮抗物质合成效率, 从而提高了生防效果. 如
Ligon[ 29]将多拷贝的调节基因 gacA 转入P . f luor escens菌株
BL915 中,提高了 Pyrrolnitrin 产率 215 倍, 显著地提高了对
Rhizoctonia solani 的防治效果; 4)将编码合成拮抗物质基因
导入异源的、不产生拮抗物质的菌株中,然后对转座子的生
防效果进行评价, 如 Fenton [ 11] 将 P . f luor escens 菌株中
DAPG生物合成基因片段 (大约 6 kb)转入非产菌株 M114
中,获得转座子的 DAPG 产量高于亲本, 提高了对由 Pythi2
um ultimum 引起的甜菜根腐病的防治效果.
随着研究手段的不断进步,对细菌产生拮抗物质种类和
数量也可以在原位进行定性和定量研究.一种广泛采用的方
法是应用诸如 gus、gfp 和 la cZ 等报告基因进行标记, 利用
报告基因进行标记虽然在微生物生态学研究中被广泛的应
用,但该方法只能进行定性研究, 不能进行定量分析, 在实际
应用中存在一定的局限性. 另一种方法是采用薄层层析
( TLC)和高效液相色谱(HPLC)对原位接种生防菌产生的拮
抗物质进行定性和定量测试. 特别是 HPLC 法,由于其精确
性好、灵敏度高等优点, 在生防菌产生拮抗物质的原位研究
中被广泛应用. 如 Raaijmakers[ 38]采用 HPLC 对生长在小麦
全蚀病抑病土中的小麦根系上由 Pseudomonas spp. 产生的
DAPG测定表明 ,小麦每克根鲜土中含有 20 ng的 DAPG, 进
一步证明了 Pseudomonas spp. 产生的 DAPG 是防治小麦全
蚀病发生的主要原因.
5 影响拮抗物质产生的因素
大量的室内实验结果表明, 很多细菌产生拮抗物质, 可
以作为生防菌应用.但田间应用证明, 多数菌株的效果很不
稳定, 导致菌株商品化率很低. 生防菌剂的效果不稳定与很
多因素有关,一方面从内因上分析与合成拮抗物质的基因表
达调控产生变异有关. 对 Pseudomonas 研究发现, 拮抗物质
的产生受一系列内在因子调控, 这些因子包括 GacA/ GacS
调节系统、依赖通过 N2酰基高丝氨酸内酯调节的细胞密度
和D因子等[ 13, 41] . 另一方面,很多外在的因素也影响拮抗物
质的产生. Bonsall[ 3]研究表明在离体条件下 , Pseudomonas菌
株 Q2287、Q2287( pPHL5122)和 Q69c280( pPHL5122) 在 YM
琼脂培养基上产生 DAPG 的量要远高于在 YM 液体培养
基,其中 Q2 87在 YM琼脂培养基上产生 DAPG 是YM液体
培养基的 60 倍. 3 种供试菌株在 27 e 条件下产生的 DAPG
要高于在室温( 22~ 24 e )条件下的处理.
在自然条件下,定植于植物根面的 Pseudomonas spp. 产
生DAPG的能力也与菌株特征、土壤物理化学性状及是否存
在致病菌有关. Keel[ 24]从未感病土壤和感染小麦全蚀病致
病菌( G. graminis var. tr itici )的感病土中生长的小麦根土
分别提取到 01 04 LgDAPG# g- 1根土和 0110 LgDAPG# g- 1根
土,表明在致病菌存在的条件下促进荧光假单胞杆菌合成更
多的 DAPG. 而Maurhofer[ 30]用同样的方法从感染 Pythium
ultimus和未感染的每克根土中只提取得到 0125 Lg 和 01 23
Lg的 DAPG.可见 Pseudomonas spp. 产生 DAPG 数量受不同
致病菌诱导表现出较大的差异. Bonsall[ 3]用 Q2 87 和遗传改
良后的高产菌株 Q2 87( pPHL5122)分别接种小麦, 然后播种
在 RSL 和 SSL 两种土壤上, 结果表明, 两种菌株在 RSL 土
壤中产生的 DAPG量高于在 SSL 土壤中的 2~ 5 倍, 且不论
在何种土壤上 Q2 87( pPHL5122)产生 DAPG 量都高于原菌
株 Q2 87, 表明在离体条件下合成 DAPG 能力强的菌株在自
然条件下合成能力也强.
植物在生长过程中向外界释放或分泌很多有机物质提
供给微生物生长. 植物种类不同, 在分泌有机物种类和数量
上存在差异, 导致细菌在利用这些营养产生拮抗物质上也存
在较大的不同. Milner[ 3 2]发现, 向 Bacillus cereus培养介质中
添加苜蓿幼苗分泌物, 该菌产生 Kanosamine的量提高了 3
倍. Duffy 和 Defago [ 10]对产生 DAPG 的 P . f luorescens 菌株
CHA0 和其它 41 株 Pseudomonas菌株在利用碳源、无机磷源
和矿质营养元素效率上的试验结果也表明, 菌株之间在利用
不同营养物质产生 DAPG 上存在较大的差异, 供给葡萄糖提
高了大多数菌株产生 DAPG 的能力, Zn 在提高菌株产生
DAPG 能力上存在菌株特异性, 而供给 P抑制了大多数菌株
DAPG 的产生.
环境因素不仅影响细菌拮抗物质的产生, 而且也影响拮
抗物质活性. Chin2A2Woeng [ 8]报道, 在 pH51 7 离体条件下,
拮抗物质 phenazine212carboxamide的抗真菌活性是拮抗物质
phenazine212carboxylic acid( PCA)的 10 倍, 表明在酸性条件
下降低了 PCA 的抗菌活性. 与 PCA 相反, 拮抗物质 DAPG
的抗菌活性在酸性条件下明显地大于在中性和碱性环境, 对
Pythium spp.引起的病害防治效果也相对较高[ 45] . 向土壤
施用 NH+4 2N 比 NO-32N 更能提高荧光假单胞杆菌防治小麦
全蚀病的效果[ 42] .
6 分子生物学技术在产生拮抗物质生防细菌研究中的应用
由表 1 可以看出, 能够产生拮抗物质的细菌种类很多,
在自然界中分布很广, 但这些细菌主要生存在植物的根围或
叶围上, 从植物根围或叶围中分离获得的菌株接种植物后生
防效果更好、更稳定,这就要求在植物病害生物防治研究中,
首先要从植物的根围或叶围中分离, 筛选具有生防潜力的菌
株.过去对生防菌的筛选都是基于大量的室内工作, 非常耗
时耗力.随着现代分子生物学技术的进展, 许多细菌合成拮
抗物质的基因都已克隆测序, 基于对不同拮抗物质产生基因
的序列分析,可以用这些基因的某些片段为模板,设计特殊
的引物和探针, 直接对分离获得的菌株进行分子水平的检
测, 大大地提高了工作效率,减轻了劳动强度.
荧光假单胞杆菌可产生多种拮抗物质, 包括 Pyoluteorin
(P lt)、Pyr rolnitrin( Prn)、Phenazine212Carboxylic acid( PCA)和
2, 42Diacetylphloroglucinol( Phl或 DAPG)等, 在目前植物病害
生物防治研究中占有重要的地位. Raaijmakers[ 37]和 Souza[ 45]
等根据合成 P lt、Prn、PCA 和 Phl的基因序列,设计了 4 对
1102 应 用 生 态 学 报 15卷
表 2 用于 PCR检测产生 4种不同拮抗物质的引物特征
Table 2 Characterist ics of the primer set s for ident ificat ion 4 antibiot ics by PCR analysis
引 物
Primer
序列*
Sequence
G+ C
(% )
T m
( e )
位置
Posit ion
产物长度
Product length( bp)
拮抗物质
Antibiot ics
参考文献
Reference
PRND1 GGGGCGGCCGTGGTGATGGA 7612 8214 5269 786 Prn 45
PRND2 YCCCGCSGCCTGYCTGGTCTG 6616 7412 6055
PLTC1 AACAGATCGCCCCGGTACAGAACG 5813 7412 12282 438 Plt 45
PLTC2 AGGCCCGGACACTCAAGAAACTCG 5813 7318 12720
Phl2a GAGGACGTCGAAGACCACCA 60 73 1915 745 DAPG 37
Phl2b ACCGCAGCATCGTGTATGAG 50 72 2660
PHZ1 GGCGACATGGTCAACGG 6417 5214 3428 1408 PCA 45
PHZ2 CGGCTGGCGGCGTATTC 7016 5713 4836
* 序列顺序从 5. 到 3. Sequence from 5. to 3. .
引物对分离得到的细菌 DNA 进行 PCR检测, 取得了非常好
的筛选结果 (表 2) . 同样对 Bacillus 研究中, Giacomodona2
to[ 17]也设计了一对引物, 采用 PCR方法直接检测分离到大
豆根圈产生多肽类(Pept ide)拮抗物质的芽孢杆菌 .
利用不同的引物对分离细菌的 DNA 进行 PCR扩增,并
结合 Southern 杂交技术可从植物根围和叶围区分产生不同拮
抗物质细菌的分离比率, 有助于直观地了解不同生防菌株在
植物表面的定植生存情况. Raaijmakers [37]将 Phl+ Pseudomonas
spp.和 PCA+ Pseudomonas spp. 分别接种在小麦种子上, 然后
播种在 6 种不同土壤( 4 种感病土, 2 种抑病土) ,连续种植 4
茬,调查这两种菌株在根际的定植效果, 结果表明, 在 2 种抑
病土中 Phl + Pseudomonas spp. 的检出数在 51 1@105~ 210@
106CFU#g- 1根土, 而在感病土中的 Phl+ Pseudomonas spp. 没
有被检出, 或者其数量比抑病土中低 40 倍, 而 PCA+ Pseu2
domonas spp.无论在抑病土或是感病土中基本上没有检测出
来. 荧光假单胞杆菌在供试的 6 种土壤中分离总数变化不大,
介于 510@106~ 110@107CFU# g- 1根土之间,但在抑病土中
Phl + Pseudomonas spp. 占荧光假单胞杆菌的分离比率( Phl/
F lu)在 310% ~ 12%之间, 而感病土中的 Phl/ Flu 小于 01 1% .
该试验结果进一步验证了产生 DAPG 的 Phl+ Pseudomonas
spp.数量上升是导致小麦全蚀病抑病土产生的主要原因.
产生同一种拮抗物质的细菌菌株之间存在着表现型和基
因型的多样性. Gardener[ 15]从美国和荷兰小麦根际土中分离
出138 株产生 DAPG 的 Pseudomonas spp. , 对这些菌株采用
BOX2PCR、ERIC2PCR和 ARDRA 分析证明, Phl + Pseudomonas
具有基因多态性. 采用BOX2PCR 将所有菌株划分为 13 个型,
ERIC2PCR 划分为 15 个型,而利用 ARDRA 将所有菌株划分
为3 个型,其中一种多态型包括了 87%的供试菌株. 另外,供
试菌株在表现型方面也存在差异, 用 Biolog SF2N 平板测试菌
株利用底物碳源表明,培养 3 d有 7 种表现型出现,而培养7 d
有 4种表现型出现. Mavrodi[ 31]对从 6 处美国土壤和 6 处世界
其它地区土壤中获得的 123 株 Phl+ Pseudomonas spp.基因型
研究也表明,不论采用RAPD还是 PCR2RFLP分析方法,上述
菌株均表现出基因多态型. 生防菌基因型的差异与环境因素
变化及土壤微生物演替有着密切的关系.即使同一块土壤,由
于前茬不同,也影响到后茬土壤中的生防菌的基因型,了解产
生拮抗物质的生防菌基因多样性,对我们分离出具有特殊生
态特点的生防菌株, 提高菌株的生防效果具有重要的意义.
7 结 语
研究表明, 生防细菌从实验室走向田间是一个复杂的过
程.首先是菌剂的研制. 阻碍许多生防菌田间应用的一个重
要问题是菌剂的货架储藏期短, 特别是由 Pseudomonas制成
的生防菌剂,这一问题表现的更为突出. 对于此类菌剂的研
制, 可以将它制成干粉剂型, 以延长菌剂的储藏期, 而由
Bacillus制成的菌剂明显地优于Pseudomonas, 因为它能够产
生耐热抗逆的芽孢, 便于菌剂的研制和剂型的加工, 这也是
市场上由 Bacillus开发的菌剂较多的一个主要原因;其次是
生防菌生态学的研究. 要运用分子生物学技术, 了解生防菌
株在植物根围或叶围的定植情况, 运用先进的分析测试手
段,检测生防细菌产生的拮抗物质防治病害发生发展的作用
阈值, 生防菌的应用效果才更具有说服力;第三, 避免植物病
原菌对生防细菌的拮抗物质产生抗性.在自然界,病原菌的
抗药性广泛存在, 要避免病原菌抗性产生, 最好采用混合菌
株研制生防菌剂, 如我国大面积推广应用的增产菌系列产品
就是由多种芽孢杆菌组成的混合菌剂, 在全国推广应用多
年,累计应用面积超过 161675@106 hm2, 取得良好的抗菌防
病效果[ 6] . 因此,今后在利用生防细菌防治植物病害的研究
中应重视对混合菌剂的研制.
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作者简介 王光华,男, 1966 年生, 在职博士生, 副研究员, 主要从事作物生理生态、环境微生物生态学研究, 发表论文 30多篇. Tel: 045126602745; E2mail: guanghuawang@hotmail. com
1104 应 用 生 态 学 报 15卷