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榴莲壳提取物止咳、镇痛及抗菌作用研究



全 文 :收稿日期:2009-11-15
基金项目:广州市粤港关键领域重点突破项目(2006Z1-E6021)
作者简介:吴敏芝(1979-),女,硕士,助理研究员,E-mail: wmzzs@163.
com
通讯作者:吴曙光(1953-),男,博士,博士生导师,教授,研究方向:免
疫肿瘤药理学,电话:020-61648530,E-mail: shuguang@fimmu.com;饶
进军(1963-),男,博士,副教授 ,研究方向 :抗炎免疫药理学 ,电话 :
020-61648535,E-mail: raojj@fimmu.com
榴莲壳提取物止咳、镇痛及抗菌作用研究
吴敏芝 1,2,谢 果 2,3,李泳贤 2,廖燕峰 2,朱 瑞 2,林仁岸 2,栗原博 3,吴曙光 1,饶进军 1(1南方医科大学药学院,广
东 广州 510515;2电子科技大学中山学院,广东 中山 528402;3暨南大学中药及天然药物研究所,广东 广州
510632)
摘要:目的 探讨榴莲壳提取物(DSE)止咳、镇痛及抗炎的作用。 方法 分别采用氨水及二氧化硫致小鼠咳嗽模型来评
价 DSE 的止咳作用;采用醋酸致小鼠扭体反应及热板法评价 DSE 的镇痛作用;采用最小抑菌浓度(MIC)和抑菌圈法
来评价 DSE 的抗菌作用。 结果 与空白对照组相比,300 及 900 mg·kg-1 DSE 对氨水和二氧化硫所致的小鼠咳嗽潜伏
期及咳嗽次数都有明显的抑制作用;DSE 明显抑制醋酸所致小鼠的扭体反应的潜伏期及扭体次数,但不影响热板法所
致的疼痛阀值;DSE 对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及大肠埃希杆菌等细菌无抑制作用,对绿脓假单胞菌有较弱的
抑制作用。 结论 DSE 有明显的止咳作用, 且对化学刺激所致的疼痛抑制作用优于物理性所致的疼痛抑制作用;DSE
对绿脓假单胞菌有一定抑菌作用。
关键词:榴莲;止咳;镇痛;抗菌
中图分类号:R282.71;R285.5;R96.5.1;R971.5 文献标识码:A 文章编号:1673-4254(2010)04-0793-04
Cough-relieving, analgesic and antibiotic effects of durian shell extracts: a study in mice
WUMin-zhi1, 2, XIE Guo2, 3, LI Yong-xian2, LIAO Yan-feng2, ZHU Rui2, LIN Ren-an2, SU Yuan-bo3, WU Shu-guang1, RAO Jin-jun1
1School of Pharmaceutical Sciences, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2Zhongshan Institutes of University of
Electronic Science and Technology, Zhongshan 528402, China; 3Institute of Traditional Chinese Medicine and Natural Products, Jinan
University, Guangzhou 510632, China
Abstract: Objective To investigate the cough-relieving, analgesic and antibiotic effects of durian shell extract (DSE) in
relieving cough and its analgesic and antibiotic effects. Methods The effect of DSE in relieving cough was assessed in mice
challenged with ammonia and SO2 to induce coughing. The analgesic and antibiotic effects of DSE in mice were evaluated by
hot plate test and twisting reaction induced by acetic acid, and by minimal inhibitory concentration (MIC) and disc-agar
diffusion tests, respectively. Results Compared with the control group, the mice treated with 300 and 900 mg/kg DSE showed
significantly prolonged latency with decreased number of coughing induced by ammonia and SO2, and the effect was
dose-dependent. DSE markedly prolonged the latency and decreased the twisting number of the mice induced by acetic acid
without affecting the pain threshold in hot plate test. DSE produced no significant inhibitory effects against Staphylococcus
aureus, Staphylococcus epidermidis, or E. coli, and showed a week inhibition against Bacillus aeruginosus. Conclusion DSE
shows obvious effect in relieving cough and produces better analgesic effect against chemical factor-induced pain than against
physical agent-induced pain sensation. DSE has a moderate inhibitory effect against Bacillus aeruginosus.
Key words: Durio zibethinus Murr; coughing; analgesia; antibiosis
榴莲(Durio zibethinus Murr)又名韶子 ,麝香猫
果,是木棉科榴莲属长绿乔木榴莲的果实,是风味奇
异的热带大型鲜果,有“热带果王”之美誉[1]。 目前国
内外对榴莲的研究集中在农业、食品等方面[2-3]。 近年
来,人们研究发现榴莲不同部位有特有的营养和化学
成分[4-5]。 榴莲味甘温、无毒,可入药,主治暴痢和心腹
冷气,现代研究也开始重视榴莲及榴莲壳的医药用途
[6-9]。 虽榴莲壳早己在民间广泛用于滋阴降火,但有关
榴莲壳提取物(DSE)止咳、镇痛和抗菌的实验研究还
未见任何报道, 故本文从止咳、 镇痛和抗菌角度对
DSE的功效进行研究,为其开发利用提供科学依据。
1 材料和方法
1.1 实验动物
SPF 级 Kungming 种老鼠,雄性,7 周龄,购自广
东省医学实验动物中心 , 许可证号 SCXK (粤 )
2003-0002,粤监证字 2006A018。 饲养温度(23±2)℃,
照明时间 12 h/d(7:00~19:00);饲养 1 周后进行药理
活性实验。
2010;30(4) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 793· ·
1.2 药品与菌种
榴莲壳为泰国金枕头榴莲的白瓤内皮; 可待因、
阿司匹林为 Sigma公司产品;其他试剂均为国产分析
纯。 菌株: 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus,
ATCC 29253), 表 皮 葡 萄 球 菌 (Staphylococcus
epidermidis,ATCC12228), 绿 脓 杆 菌 (Bacillus
aeruginosus,ATCC 27853), 大 肠 杆 菌 (E.coli,
ATCC25922),由暨南大学华侨医院提供。 培养基等
为由广东环凯微生物科技公司产品。
1.3 仪器与设备
PC262 专用秒表 (深圳市惠波工贸有限公司)、
MK3 型酶标仪(芬兰 Labsystem 公司)、绝对原点编
码型 Digimatic 卡尺(日本三丰公司)、BS210S电子分
析天平(德国 Sartorius公司)、MODULYOD-230 冷冻
干燥机(美国 Thermo Electron Corperation)、3-18K 型
台式高速冷冻离心机 (Sigma 公司)、N-1000 型旋转
蒸发器(日本东京理化公司)、YLS-6A 型智能热板仪
(山东省医学科学院)、 直流超净工作台 (新加坡
ESCO公司 )、SHA-C 型恒温振荡器 (江苏金坛市荣
华仪器制造公司)、WGZ-2 型细菌浊度仪 (深圳三诺
仪器公司)、AMA240 全自动高压灭菌锅(英国 Astell
Scientific 公司)。
1.4 DSE的制备
准确称量烘干至恒重的榴莲白瓤内皮 75 g,加
20 倍双蒸水,在 80 ℃恒温水浴下提取 2 h,过滤,滤
饼同样条件提取 2次,离心取上提取液上清。 提取液
用旋转蒸发器浓缩,用 95%乙醇沉淀多糖,离心取上
清再浓缩,用冷冻干燥机干燥,烘干提取物储存于 4
℃冰箱备用。
1.5 DSE镇咳作用的检测
1.5.1 对氨水致小鼠咳嗽反应的作用 实验动物 50
只随机分为 5 组,每组 10 只,即正常对照组(蒸馏水
20 mg·kg-1)、阳性药对照组(可待因 20 mg·kg-1)、DSE
低剂量组 (100 mg·kg-1)、DSE 中剂量组 (300 mg·
kg-1)、DSE 高剂量组(900 mg·kg-1)。 每天灌胃给药 1
次,连续给药 3 d,于末次给药 1 h 后,将小鼠逐只置
于 5 L 钟罩内,恒压喷雾浓氨水,观察小鼠咳嗽的潜
伏期(从开始喷雾到引起小鼠第 1次咳嗽的时间),并
记录 2 min 内小鼠咳嗽次数(典型咳嗽动作:腹肌收
缩或缩胸,同时张大口,有咳声)[10]。
1.5.2 DSE对二氧化硫致小鼠咳嗽反应的作用 实验
动物 50 只随机分为 5 组,每组 10 只,即正常对照组
(蒸馏水 20 mg·kg-1)、阳性药对照组(可待因 20 mg·
kg-1)、DSE 低剂量组 (100 mg·kg-1)、DSE 中剂量组
(300 mg·kg-1)、DSE 高剂量组(900 mg·kg-1)。 每天灌
胃给药 1 次, 连续给药 3 d, 于末次给药 1 h 后,把
50%硫酸 5 ml 滴加至盛有 0.5 g 无水亚硫酸钠的蒸
发皿上,并立即将 500 ml 玻璃烧杯倒扣在蒸发皿上,
使之充满恒定浓度(1∶50000)的 SO2 气体,然后迅速
将小鼠放入倒扣烧杯内,观察小鼠发生咳嗽反应的情
况,记录咳嗽潜伏期和开始咳嗽后 2 min 内的咳嗽次
数[11]。
1.6 DSE镇痛作用的检测
1.6.1 DSE对醋酸致小鼠扭体反应的作用 实验动物
50 只随机分为 5 组,每组 10 只,即正常对照组(蒸馏
水 20 mg·kg-1)、 阳性药对照组 (阿司匹林 200 mg·
kg-1)、DSE 低剂量组 (100 mg·kg-1)、DSE 中剂量组
(300 mg·kg-1)、DSE 高剂量组(900 mg·kg-1)。 每天灌
胃给药 1 次,连续给药 3 d,于末次给药 1 h 后,各鼠
分别腹腔注射 0.7%醋酸溶液 0.2 ml/ 只,观察小鼠扭
体的潜伏期(从开始注射到引起小鼠第 1次扭体的时
间),并记录 15 min 内小鼠扭体次数(腹部内凹,伸展
后肢,臀部抬高),并计算镇痛百分率[12]。
1.6.2 DSE对热板法致小鼠疼痛反应的作用 实验前
将雌性小鼠置于智能热板仪(55.0±0.5) ℃进行筛选,
以小鼠舔后足反应的潜伏期为痛阈指标,选取反应潜
伏期在 10~20 s 内的合格小鼠 50 只随机分为 5 组,
每组 10 只,即正常对照组(蒸馏水 20 mg·kg-1)、阳性
药对照组 (阿司匹林 200 mg·kg-1)、DSE 低剂量组
(100 mg·kg-1)、DSE 中剂量组(300 mg·kg-1)、DSE 高
剂量组(900 mg·kg-1)。 灌胃给药,1次 /d,连续 3 d,分
别测定给药前及末次给药后 30、60、90 min 小鼠的第
一次添后足的时间,此值为痛阈值。 如小鼠置于智能
热板仪 60 s 仍无反应,则将小鼠取出以免烫伤,其痛
阈值以 60 s 计算。 比较给药后不同时间平均痛阈与
基础痛阈的差异,判断是否有镇痛作用[13]。
1.7 DSE 对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃
希杆菌和绿脓假单胞菌的抑菌作用
1.7.1 最低抑菌浓度(MIC)测定(倍半稀释法) (1)
菌液制备:将保存的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、
大肠埃希杆菌和绿脓假单胞菌菌种接种于 M-H琼脂
板培养基,37 ℃培养 24 h,平板分离单个菌落接种于
含 M-H肉汤培养基内,37℃培养 6~8 h。 校正菌液浓
度,使其相当于 0.5 麦氏比浊度,再用 M-H 液体培养
基按 1∶20 稀释后备用,稀释后的菌液在 15 min 内接
种。 (2)MIC的测定 ①取无菌小试管 12支排于试管
架, 于第 1 管加入液体培养基 1.9 ml,2~12 管各加 1
ml。②将 0.1 ml DSE加入第 1管中,混合后吸出 1 ml
加入第 2管中,用同法依次 2倍稀释至第 12管,从第
12 管吸 1 ml 加入到第 13 管, 则各管的浓度依次为
128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125和 0.06 mg/ml。
③将 1~12 管中加入已校正浓度的菌液 0.1 ml,混匀,
南方医科大学学报(J South Med Univ) 第 30 卷794· ·
*P<0.05, **P<0.01 vs distilled water group;△P<0.05 vs codeine
group
表 1 DSE 对氨水致小鼠致咳反应的影响
Tab.1 Effects of DSE on coughing induced by
ammonia in mice (Mean±SD, n=10)
Group Dose (mg·kg-1) tlatency(s) Cough number (n)
Distilled water 20 55.7±10.6 13.4±2.9
Codeine 20 67.1±16.3* 9.6±3.7*
DSE
100 52.7±13.4△ 9.7±3.5*
300 68.9±14.5* 9.8±3.4*
900 83.1±22.1**△ 7.8±4.0**
*P<0.05, **P<0.01 vs distilled water group; △P<0.05, △△P<0.01
vs codeine group
表 2 DSE 对二氧化硫致小鼠致咳反应的影响
Tab.2 Effects of DSE on coughing induced by SO2 in
mice (Mean±SD, n=10)
Group Dose(mg·kg-1) tlatency(s) Cough number (n)
Distilled water 20 17.85±5.71 15.3±6.7
Codeine 20 48.57±16.66** 5.8±3.5***
DSE
100 18.35±5.46△△ 13.9±6.1△△
300 22.90±6.01*△△ 10.1±4.0*△△
900 29.65±10.09**△ 9.1±3.5*△
*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 vs distilled water group; △△
△P<0.001 vs aspirin group
表 3 DSE 对醋酸致小鼠扭体反应的影响
Tab.3 Effects of DSE on twisting reaction induced by
acetic acid in mice (Mean±SD, n=10)
Group Dose(mg·kg-1) tlatency (s)
Twisting
number (n)
Analgesia
rate (%)
Distilled
water 20 212.3±32.5 36.9±10.33 0.00
Aspirin 200 850.2±123.1*** 2.2±1.88*** 94.01***
DSE
100 220.5±36.6△△△ 38.0±12.9△△△ -3.02△△△
300 250.7±45.8*△△△ 30.9±10.8△△△ 16.81△△△
900 363.7±117.0**△△△ 24.1±8.5**△△△ 34.73**△△△
使各管中的菌液浓度约为 107 cfu/ml。 ④取一支试管
只加入液体培养基 1.0 ml,作为空白对照;取一支试
管加入液体培养基 1.0 ml 和菌液 0.1 ml,作为菌液对
照。 ⑤混匀后试管加硅胶塞塞好,恒温振荡器中放置
37 ℃恒温培养 18~20 h,观察结果,以无细菌生长的
最低浓度为 MIC[14]。
1.7.2 抑菌圈的测定 用打孔器将滤纸制成直径为 6
mm 的圆片,放入干燥洁净的试管内,经 121 ℃灭菌
30 min,浸入相应浓度的 DSE 溶液中,1 h 后取出,无
菌条件下晾干备用。 将上述 4种供试菌悬液各取 0.1
ml涂平板,制成含菌平板。用无菌镊子夹取已制备好
的滤纸片,放到上述含菌平皿上,每皿 3片,以乙醇溶
剂作为阴性对照,每皿 3片。每个滤纸间距离相等,每
种处理重复 3 次。 经 37℃、24 h 培养后,用十字交叉
法测量抑菌圈直径,重复测量 3次,取平均值[15]。
1.8 统计学处理
实验数据以 表示,采用重复测量方差分析,单因
素方差分析,组间多重比较方差齐时用 LSD法,不齐
时用 Games-Howell 法。 P<0.05 被认为有统计学意
义,所有数据均采用 SPSS 13.0软件进行处理。
2 结果
2.1 DSE对氨水致小鼠咳嗽反应的作用
2.1.1 DSE对氨雾致小鼠咳嗽反应的作用 与空白对
照组相比,DSE 在 300~900 mg·kg-1剂量范围内延长
氨水致小鼠咳嗽反应的潜伏期, 其中 900 mg·kg-1
DSE 组可明显延长氨水致小鼠咳嗽反应的潜伏期
(P<0.01),且延长作用明显强于 20 mg·kg-1可待因组
(P<0.05),见表 1。 DSE在 100~900 mg·kg-1剂量范围
内明显减少氨水所致的小鼠咳嗽数,并且呈明显的剂
量依赖性,见表 1。
2.1.2 DSE 对二氧化硫致小鼠咳嗽反应的作用 与空
白对照组比较,300 mg·kg-1 DSE 组 (P<0.05) 与 900
mg·kg-1 DSE组有统计学差异 (P<0.01),DSE 明显延
长二氧化硫所致小鼠咳嗽的潜伏期,并且呈明显的剂
量依赖性, 见表 2; 与空白对照组比较,300 mg·kg-1
DSE 组(P<0.05)与 900 mg·kg-1 DSE 组(P<0.01)有统
计学差异,DSE 明显减少二氧化硫所致小鼠咳嗽数,
并且呈明显的剂量依赖性,见表 2。
2.2 DSE镇痛作用
2.2.1 DSE对醋酸致小鼠扭体反应的作用 与空白对
照组相比,DSE 在 300~900 mg·kg-1剂量范围内明显
延长醋酸所致小鼠扭体反应的潜伏期,其中 900 mg·
kg-1 DSE 组能明显延长醋酸所致小鼠扭体反应的潜
伏期并明显减少小鼠扭体反应的次数(P<0.01),见表
3。
2.2.2 DSE 对热板法致小鼠疼痛反应的作用 与空白
对照组相比,900 mg·kg-1 DSE 给药 60、90 min 后明
显延长小鼠热板疼痛反应时间 (P<0.05), 见表 4;
300、900 mg·kg-1 DSE 给药 90 min 后明显延长小鼠
热板疼痛反应时间(P<0.05),见表 4。
2.3 DSE 对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃
希杆菌和绿脓假单胞菌的抑菌作用
2.3.1 DSE 对 4 种菌株的 MIC DSE 对大肠埃希杆
菌在实验的浓度范围内没有观察到抑制作用,对于金
黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌两种细菌有较弱的抑
制作用,其 MICs 值分别为 32 mg/L 和 64 mg/L;DSE
吴敏芝, 等.榴莲壳提取物止咳、镇痛及抗菌作用研究第 4 期 795· ·
*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 vs distilled water group; △P<0.05, △△P<0.01, △△△P<0.001 vs aspirin group
表 4 DSE 对小鼠热板法痛阈时间的影响
Tab.4 Effects of DSE on analgesia time in hot plate test (Mean±SD, n=10)
Group Dose (mg·kg-1) Normal analgesia time (s)
Analgesia time after administration (s)
30 min 60 min 90 min
Distilled water 20 16.06±1.67 16.02±2.42 16.13±2.53 16.62±2.31
Aspirin 200 15.78±1.97 20.49±3.97** 22.33±3.26*** 24.37±372***
DSE
100 15.73±2.17 16.52±3.08△ 16.82±2.89△△△ 17.46±2.12△△△
300 15.82±1.42 16.40±2.98△△ 17.93±2.28△△ 18.59±2.26*△△△
900 16.01±2.02 16.26±3.13△△ 18.82±3.15*△ 20.14±3.94*△
表 5 DSE 对抑菌圈的影响
Tab.5 Effects of DSE on disc-agar diffusion (Mean±
SD, n=9)
Strain Serial number Colony Diameter (mm) Result
Staphylococcus
aureus ATCC 29253 6.15±0.34 inferior
Staphylococcus
epidermidis ATCC 12228 6.88±0.31 inferior
Bacillus
aeruginosus ATCC 27853 8.12±0.37 intermediate
E. coli ATCC 25922 5.79±0.22 resistant
对绿脓假单胞菌有较强的抑制作用, 其 MIC 值分别
为 2 mg/L。
2.3.2 DSE 对 4 种菌株抑菌圈的影响 如表 5 所示,
DSE 对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌两种细菌低
度的敏感作用, 其抑菌圈直径分别只有 6.15 mm 和
6.88 mm;对绿脓假单胞菌中度敏感,其抑菌圈直径
为 8.12 mm;对大肠埃希杆菌不敏感,其抑菌圈直径
为 5.79 mm。
3 讨论
雾氨引起小鼠咳嗽的实验结果表明,DSE 不仅
能有效延长咳嗽的潜伏期,而且可以显著降低小鼠的
咳嗽量,具有良好的镇咳效果。 同时,300和 900 mg·
kg-1 DSE 对二氧化硫引起的小鼠咳嗽的潜伏期及咳
嗽次数也有显著的抑制作用, 这表明 DSE 对化学性
刺激物质引起的支气管黏膜感受器有较好的抑制作
用,但其作用的受体或分子生物学基础不详。
醋酸致小鼠扭体反应是间接的通过腹腔产生急
性炎症所致,腹腔液中 PG 水平升高、毛细血管通透
性增高、炎细胞浸润趋化与炎性介质的释放是炎症反
应的基本过程,是引起炎症部位肿胀、疼痛的主要原
因。 我们前期实验结果表明 DSE 对于各种急慢性炎
症都有较好的抑制作用, 效果可能是与 DSE 抑制花
生四烯酸的相关代谢产物和增强动物免疫细胞的活
性有关。 另外,氧自由基是刺激性化学物质注入小鼠
腹腔引起的深部的大面积炎性疼痛的分子机制之一
[16],这与谢果等 [9]研究 DSE 清除自由基和减少拘束
负荷小鼠氧化应激水平的结论一致。 DSE 能在一定
程度上延长醋酸所致小鼠扭体的潜伏期及扭体次数,
显示出其有抗炎症性疼痛的药理活性,且一定的剂量
依赖性。 同时,DSE能在一定程度上延长小鼠热板疼
痛反应时间,与生理盐水组比较差异有显著性,但是
与阿司匹林组比较作用较弱且起效稍慢 , 这表明
DSE 对温度等物理因素导致的疼痛有一定作用,但
比急性化学因素导致的疼痛的保护作用效果要弱。但
是其镇痛抗炎作用的活性成分及其作用机制有待进
一步研究。
对于 DSE 抑菌的研究方面, 本实验采用的二倍
稀释法对 4 种常见细菌的作用, 结果表明 DSE 没有
明显的抗菌活性; 抑菌圈的实验也显示相同的效果,
只是对绿脓假单胞菌有微弱的作用。 这可能因为
DSE 是多种成分构成的混合物, 使其抑菌的有效成
分含量急剧降低,影响其抗菌功效,或者是由于 DSE
的各种物质中本身就有不少组分(如维生素,糖分等)
是微生物赖以生长的必要成分所致。
综上所述,DSE 不仅能有效抑制化学因素所导
致的小鼠的疼痛并可在一定程度上提高热板致小鼠
疼痛的阀值, 其作用可能与 DSE 抑制炎症因子的产
生及释放有关,或者与其能清除自由基有关。 DSE也
能明显延长氨水及二氧化硫致小鼠咳嗽的潜伏期及
咳嗽次数。 DSE 对实验的 4 种细菌没有明显的抑制
作用。榴莲壳资源丰富,安全性高,虽然目前尚未作为
一种正规药材使用, 但在民间已有广泛而长期的应
用,这为榴莲壳作为药材或健康食品的综合开发利用
提供了坚实基础,本实验的研究为深入探索其作用机
制提供了实验依据。
参考文献:
[1] Subhadrabandhu S, Ketsa S, Daphne T, et al. Durian, king of tropical
fruit[M]. New Zealand: New Zealand publishing company, 2001:
178-8.
[2] Honshoa C, Yonemori C, Somsri S, et al. Marked improvement of
fruit set in Thai durian by artificial cross-pollination[J]. Sci Hortic,
2004, 101(4): 399-406.
[3] 叶琼兴, 钟广泉, 鲁玉侠, 等. 榴莲芒果风味果酒酿制[J]. 现代食
南方医科大学学报(J South Med Univ) 第 30 卷796· ·
品科技, 2006, 22(1): 68-9.
[4] Amin AM, Ahmad AS, YinYY, et al. Extraction, purification and
characterization of durian (Durio zibethinus) seed gum [J]. Food
Hydrocolloids, 2007, 21(2): 273-9.
[5] Weenen H, Koolhaas WE, Apriyantono A. Sulfur-containing
volatiles of Durian fruits (Durio zibethinus Murr)[J]. J Agric Food
Chem, 1996, 44(10): 3291-3.
[6] 陈纯馨, 陈 忻, 刘爱文, 等. 榴莲壳提取液抗亚硝化反应的研究
[J].食品科技, 2005, 21(2): 89-91.
[7] Hokputsa S, Gerddit W, Pongsamar S, et al. Water-soluble
polysaccharides with pharmaceutical importance from Durian rinds
(Durio zibethinus Murr.): isolation, fractionation, characterisation
and bioactivity[J]. Carbohydr Polym, 2004, 56(4): 471-81.
[8] Kawagishi H, Fukumoto Y, Hatakeyama M, et al. Liver injury
suppressing compounds from Avocado (Persea americana) [J]. J
Agric Food Chem, 2001, 49(5): 2215-21.
[9] 谢 果, 宝 丽, 何蓉蓉, 等. DSE 对拘束负荷诱发小鼠应激性肝损
伤的保护作用[J].中药新药与临床药理, 2008, 19(1): 22-5.
[10] 徐叔云, 卞如濂, 陈 修. 药理实验方法学[M]. 3 版. 北京: 人民卫
生出版社, 2003: 882-3.
[11] Srikanth K, Murugesan T, Kumar CA, et al. Effect of Trichodesma
indicum extract on cough reflex induced by sulphur dioxide in mice
[J]. Phytomedicine, 2002, 9(1): 75-7.
[12] Lallo UG. Capsazepine inhibits cough induced by capsaicin and
citric acid but by hypertonic salinic saline in guinea pig[J]. J Appl
Physiol, 1995, 79: 1082-7.
[13] Vafaei AA , Taherian AA , Rashidy-Pour A . Evaluation of
interactions between acute stress and Ca plus channels on pain in
Tail-flick and Hot-plate tests in mice[J]. Int J Psychophysiol, 2008,
69(3): 309-9.
[14] Wiegand I, Hilpert K, Hancock RE, et al. Agar and broth dilution
methods to determine the minimal inhibitory concentration (MIC)
of antimicrobial substances[J]. Nat Protoc, 2008, 2(3): 163-75.
[15] Vedel G . Simple method to determine β-lactam resistance
phenotypes in Pseudomonas aeruginosa using the disc agar diffusion
test[J]. J Antimicrob Chemother, 2005, 56(4): 657-64.
[16] van der Laan L, Oyen WJ, Verhofstad AA, et al. Soft tissue repair
capacity after oxygen-derived free radical-induced damage in one
hindlimb of the rat[J]. J Surg Res, 1997, 26(4): 363-72.
收稿日期:2009-12-04
作者简介 :陈雪峰 (1981-),男 ,硕士 ,住院医师 ,E-mail: cxfchen2010
@163.com
17α-羟化酶缺乏症 1例报道及文献回顾
陈雪峰,傅君芬,王春林,梁 黎(浙江大学医学院附属儿童医院,浙江 杭州 310003)
关键词:先天性肾上腺皮质增生症;17α-羟化酶缺乏症;病例报告
中图分类号:R586.2 文献标识码:B 文章编号:1673-4254(2010)04-0797-02
1 临床资料
患者女性,14 岁 3 月,主因“因双侧乳腺一直未
发育,月经未来潮”就诊,门诊初步查体:血压 165/96
mmHg,身高 152 cm。 体格发育较健壮,智力发育正
常,双乳未发育,乳晕色素稍偏黑,PH1 期,女性外生
殖器、皮肤粘膜无特别加深,无齿龈色素沉着。四肢无
畸形,肌力Ⅴ级,肌张力正常,双侧巴氏征阴性。
辅助检查:血、尿、便常规、肝肾功能均正常。血钾
2.8 mmol/L,钠 143 mmol/L,氯化物 107 mmol/L,超
声反复检查腹腔内未探及子宫、附件、未探及明显睾
丸样回声,阴阜、腹股沟未探及睾丸样回声。左手腕骨
骨龄:9/10颗。 性激素:睾酮 <20 ng/dl,促黄体生成素
24.3 mIU/ml(升高),雌二醇 <20 ng/dl,促卵泡生成素
83.3 mIU/ml (升高 ), 人绒毛膜促腺性激素 1.6
mIU/ml,皮质醇 <1.00 μg/dl,泌乳素 8.01 ng/dl,孕酮
6.0 ng/dl,促肾上腺皮质激素 74.0 pg/dl。染色体检查:
46,XY,性别基因检测阳性(男性)。
诊断治疗经过:患者外生殖器为女性,染色体核
型为 46XY,B 超未发现隐睾及女性内生殖器, 表明
患者为男性假两性畸形。患者存在高血压、低血钾,血
皮质醇降低,促肾上腺皮质激素升高,性激素水平减
低,考虑诊断为先天性肾上腺皮质增生症,17α- 羟化
酶缺乏症。 该患者染色体性别为男性,表现型和社会
性别为女性,选择女性性别对其今后的心理发育和社
会生活影响较小。 同时予醋酸可的松 10 mg(早)/20
mg(晚),安体舒通 20 mg、双克片 25 mg/d,补达秀口
服补钾。 门诊随访患者血压和血钾恢复正常。
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2010;30(4) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 797· ·